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PUBLICACIONFINANCIADAPORINSTITUTOTECNOLGICODECD.ALTAMIRANO.
2011ITCA.
CopyrightInstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano,Cd.Altamirano,Gro.,Mxico.

AUTORESDELVOLUMEN:
GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez,
HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez.

DIRECCINDELAOBRA:
GustavoAdolfoBallesterosPatrnyLuisAlfonsoRodrguezPez

REDACTORES:
GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez,
HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez.

DISEOINTERIOR,CUBIERTASYCARTOGRAFA:
LuisAlfonsoRodrguezPez

IMPRESIN:
InstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano.

PRIMERAEDICIN:ABRILDE2011
MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL

GARABATOEDITORIAL,CD.ALTAMIRANO,GRO.,MXICO,108P.
ISBN:9786077814085

Estapublicacinpuedesereproducida,archivadaenunsistemaderecuperacinotrasmitidaencualquier
formato o por medio corpreo o incorpreo, electrnico, mecnico, por fotocopia o grabacin o de
cualquierotramanerasiempreycuandosecitealosautoresydueosdelCopyright.

MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL

1. INTRODUCCIN

Granpartedelaslimitantesparaelavancedelaaplicacindeconocimientoseslafaltade
experiencias prcticas, que le permitan al estudiante fortalecer los postulados tericos
mediante la evidencia experimental. En el Sistema Nacional de Educacin Superior
Tecnolgicaseinsisteenelparadigmadeaprenderhaciendoatalpuntoqueiniciamosen
elao2010elsistemaeducativoporcompetencias,lamentablementeestonosehacey
loscursossedesarrollantericaymemorsticamente.

EnelInstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano.Sehatomadoladecisindefortalecerlas
reasbsicas,entrelascualessedestacalaFisiologaVegetal.Estoimplicalaadecuacin
ydotacindeunlaboratorio,suequipamientoylapreparacinderecursoshumanosen
estarea.

ElpresenteproyectohacepartedelospropsitosdeorganizacindelreadeFisiologa
Vegetal, mediante la elaboracin de un manual de prcticas para los estudiantes de
BiologayAgronomadelInstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano.Cuyaimplementacin
serbenficapuesmejoraremoslaaprehensindeconocimientosyhabilidadesporparte
delosalumnos,loscualessernbeneficiados,puesrealizarntalleressobrelosdiferentes
aspectosdelafisiologavegetal.

Para realizacin de presente libro se revisaron manuales de Fisiologa Vegetal de otras


institucionesyseseleccionaron50prcticasdelascualesfueronejecutadasenelInstituto
TecnolgicodeCd.Altamirano.Adems,setuvounaestanciadedosmesesenelreade
Fisiologa Vegetal del Colegio de Postgraduados de Texcoco. Con base en estas
experienciasrealizadasseelaborelpresenteManualdeFisiologaVegetal.

INDICE

INTRODUCCIN
PRACTICANo.1
PRACTICANo.2
PRACTICANo.3
PRACTICANo.4
PRACTICANo.5
PRACTICANo.6
PRACTICANo.7
PRACTICANo.8
PRACTICANo.9
PRACTICANo.10
PRACTICANo.11
PRACTICANo.12
PRACTICANo.13
PRACTICANo.14
PRACTICANo.15
PRACTICANo.16
PRACTICANo.17
PRACTICANo.18
PRACTICANo.19
PRACTICANo.20
PRACTICANo.21
PRACTICANo.22
PRACTICANo.23
PRACTICANo.24
PRACTICANo.25
PRACTICANo.26
PRACTICANo.27
PRACTICANo.28
PRACTICANo.29
PRACTICANo.30
PRACTICANo.31
PRACTICANo.32
PRACTICANo.33
PRACTICANo.34
PRACTICANo.35
PRACTICANo.36
PRACTICANo.37
PRACTICANo.38
PRACTICANo.39
PRACTICANo.40

LATENCIADESEMILLAS
ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL
GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS
INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN
IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN.
CRECIMIENTOYDESARROLLOPRUEBADELTETRAZOLIOPARA
DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS.
CLULASYTEJIDOSVEGETALES
ESTRUCTURASANATMICASQUEINTERVIENENENELTRANSPORTEDE
AGUA
MADURACINDEFRUTOS
REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS
REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS
REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO
OTROSREGULADORESDELCRECIMIENTOEFECTODEEXTRACTOSDE
VARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO
DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA
REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS
INDUCCINDEENRAIZAMIENTODEESQUEJESPORMEDIODE
HORMONAS
REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS
METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR
DETERMINACINDELREAFOLIAR
ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES
VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR
INFLUENCIADELAHUMEDADATMOSFRICASOBRELAABSORCINDE
AGUAPORSEMILLASALMACENADAS.
MECANISMOSDEABSORCIONYTRANSPORTEDEAGUAENLASPLANTAS
ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN
REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA
ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS
MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN
TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD
FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION
RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS
RESPIRACIONLAPRUEBADELTETRAZOLIOPARADETECTARLA
ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS.
RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDEAERENQUIMAEN
ARROZ
TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS
DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL
FERTILIZACINFOLIAR
MADURACINDEFRUTOS
POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES
CMOCONSTRUIRUNPORMETRO
DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPORELMETODO
DEMORGAN.
SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL
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PRACTICANo.41
PRACTICANo.42
PRACTICANo.43
PRACTICANo.44
PRACTICANo.45
PRACTICANo.46
PRACTICANo.47
PRACTICANo.48
PRACTICANo.49
PRACTICANo.50
BIBLIOGRAFIA

EFECTODESOLUCIONESNOBALANCEADASSOBREELCRECIMIENTODE
PLNTULAS
CULTIVOSHIDROPNICOS
NUTRICIONMINERAL
FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELASPLNTULASY
LALIGNIFICACIONDELOSTALLOS
EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA
ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS
PIGMENTOSNOFOTOSINTETICOS:CAMBIOSDECOLORDELOS
PIGMENTOSFLAVONOIDES
EFECTODELAINTENSIDADDELALUZYDELACONCENTRACINDELCO2
ENLAFOTOSNTESIS
PIGMENTOSFOTOSINTETICOSSEPARACIN,ESPECTRODEABSORCIONY
FLUORESCENCIA
IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4

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PRACTICANo.1
TITULO:LATENCIADESEMILLAS

INTRODUCCIN
Auncuandolascondicionesambientalesseanadecuadasparalagerminacindesemillas,
muchasdeellasnolohacenaunqueestnviables.Lanogerminacindelassemillas,se
conocecomolatenciaoletargo,yestligadaacausasintrnsecasdelassemillasofrutos,
perotambinaefectosambientales.Lailama(Annonadiversifolia)esunfrutalregional
proceso de domesticacin que tiene caractersticas silvestres tales como dehiscencia de
frutos y latencia de semillas, las cuales solo germinan despus de cuatro meses de
almacenamientodebidoalaexistenciadeembrionesinmaduros

OBJETIVO
Demostrarlaexistenciadeletargoolatenciaensemillasdeilamaderecoleccinreciente.

MATERIAL
200 semillas de ilama, (100 de este ao y 100 del ao pasado), bolsas de polietileno,
tierra,lijas,agua,solucindegiberelinas.

PROCEDIMIENTO
Consigadoslotesde100semillasdeilama,cadauno.Elprimeroconsemillasdefrutosde
este ao (octnov) y el segundo de frutos de la cosecha del ao pasado. Para tratar de
romperelletargoseminaldellotedesemillasdeilamareciente,divdaloencincogrupos
de20semillascadauno.

Elprimergrupode20semillassereltestigo(noseharningntratamiento).

El segundo grupo de semillas ser escarificado raspando la cubierta seminal con lija o
rozndolassobreunpisodecementonopulido.Elobjetivoesromperlacubiertaseminal
paraquepenetreelagua.

Eltercergrupodesemillasserncolocadasenunasolucindegiberelinasa100ppm.De
concentracindurante3horas.

Elcuartogrupodesemillasserncolocadasenaguahirviendodurante2minutos.

Yelquintogrupodesemillassecolocarandurante3horasenaguaconhielolassemillas
sernsembradasenbolsasdepolietilenocontierra,aracindeunasemillaporbolsa.
Cada uno de los tratamientos ser marcado en la respectiva bolsa. Cada tres das se
inspeccionaran las bolsas para anotar la fecha de emergencia de las plntulas. A los 2
mesessesuspenderelexperimentoysediscutirnlosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London.
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Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,RinehartyWinston,New
York.

PRACTICANo.2
TITULO:ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL

INTRODUCCIN
Lagerminacinabrecaminoalaemergenciaydesarrollodelaplntulahastaunestado,
dondeelaspectodesusestructurasesencialesmanifiestasiesonocapazdedesarrollarse
hastaunaplantanormalbajocondicionesfavorablesdesuelo.

OBJETIVO
Observarlamorfologadeplntulas.

MATERIAL
Bolsasplsticas,tierraysemillas(maz,frjol)

PROCEDIMIENTO
Coloquedosbloquesde20bolsascontierra,enunbloquesiembresemillasdefrjolyel
otro semillas de maz. A continuacin observe las diferencias morfolgicas entre las
plntulasdemazylasdefrjol.
Laradculadelembrinseconvierteenrazprimariadelaplanta,searraigalaextensin
delaclulaepidrmicasuperficialdelarazimplicadaenlaabsorcindeaguayalimento.
Sepresentalarazsecundariaatravsdelaprimaria.
Maz; las races adventicias que se originan en los vstagos se van de otras races. La
envolturafotosensibledelcoleoptilosobrelaplmula.Larazembrionariaseconvierteen
elsistemainicialdelarazdelasemilla

Dibuje una plntula de maz y escribe en ella las siguientes estructuras: coleoptilo,
mesfilo,racesfibrosas.

Dibujeunaplntuladefrjolysealelassiguientespartes:cotiledones,cuellodelaraz,
hipotilo,epictilo,hojasembrionales,plmula.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)PlantPhyslology.ASE
Lab.Books.London.

PRACTICANo.3
TITULO:GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS

INTRODUCCIN
Demanerageneral,lagerminacinsepuededividirentresfases.Enlaprimera,lasemilla
tomaaguamedianteelprocesodeimbibicinyosmosis;enlasegundafase,laabsorcin
deaguacontinua,peroseinicianeincrementanprocesosmetablicoscomolarespiracin
ylatransformacinenzimticadelasreservas,enlatercerafase,aparecelaradculayse
incrementaelcrecimiento.

OBJETIVO
Pruebasdegerminacinendiferentessuelos

MATERIAL
Bolsasplsticas,tierra,agua,50semillas(frjol)

PROCEDIMIENTO
Instale5lotesde10bolsasconsuelo,elprimerloteriguelodiariamenteconunasolucin
salina preparada con agua y sal decocina, el segundo lote se mantendr el suelo seco,
tercerlote,suelosubregado;conunriegosemanal,cuartolotesueloencharcado;quese
mantendrsaturadodeagua,yelquintoloteeseltestigoqueseregaratodoslosdas.
Discutalosresultados.

BIBLIOGRAFIA

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth.

SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
delsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacinTcnicaalusuario,hojade
Divulgacin.No.21,Mxico.

PRACTICANo.4
TITULO:INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN

INTRODUCCION
Despusdelhumedecimientoinicialdelmediodondesevanasembrarlassemillas,nose
requierederiegoadicionalhastaquelagerminacinhayaocurrido.Estoaseguraqueuna
adecuadacantidaddeoxgenosearetenidaporelmediodegerminacin.Essabidoque
un excesivo riego a las semillas retarda la germinacin. Un riego abundante
frecuentemente previene la germinacin, debido a que el oxgeno es relativamente
insolubleenelagua.Muchaaguatambincausadaoensemilladepobrecalidad,debido
aquelasclulasdeshidratadasnopuedencompetirconelrpidoflujodehumedad.

OBJETIVO
Comprobarlaimportanciadeloxgenoenlagerminacin

MATERIAL
Semillasderbano
Frascosdebocaancha:3
Crisolesdeporcelanaobeakersde50ml:3
Papeldefiltro
SolucindeKOHal15%
Solucindecidopiroglicoal7%
Aguadestilada
Bandasdecaucho
Papeldealuminio
Pinzasdelaboratorio
Algodn

PROCEDIMIENTO
Utilizandoloscrisolesyelpapeldefiltrohagatresgerminadoresycoloqueencadauno10
semillasderbano.
Tome tres frascos de boca ancha (tipo envase de mermelada) y proceda en la forma
siguiente:
Frasco 1. Vierta 15 ml de KOH al 25% y 8 ml de cido piroglico al 7%, luego coloque
dentro un crisol (germinador) teniendo el cuidado que no le entre solucin y tpelo
hermticamenteconpapeldealuminiodoble,ajustandoconunasbandasdecaucho.
Frasco2.Vierta15mldeaguadestilada,coloquedentrootrocrisol(Germinador)ytpelo
hermticamenteconpapeldealuminio.
Frasco 3. Vierta 15 ml de agua, coloque dentro un germinador y tape el frasco con
algodn.
Dejelosfrascosenelambientedellaboratorio.
Luegode3dasobservelagerminacindelassemillasencadafrasco.
Expliquelarazndelosresultados.
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BIBLIOGRAFIA
Salisbury, F.B. Y W.C. Ross. 1978. Plant Physiology. 2a. Ed. Wadsworth. California
Iberoamrica,Mxico,D.F.

Salisbury.F.B.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.D.F.

.
SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
delsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacinTcnicaalusuario,hojade
Divulgacin.No.21,Mxico.

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PRACTICANo.5
TITULO:IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN.

INTRODUCCION
Ademsdelahumedadytemperaturafavorables,algunassemillasrequierenluzparasu
germinacin.Ellepidio(Lepidiumvirginicum)nogerminaenlaoscuridad.Lavariedadde
lechuga"GrandRapidez",germinacercadel25%encompletaoscuridad;sinembargo,con
unacortaexposicinalaluzdelda,cuandoestgerminando,llegaaun100%.Laluzroja
de660nanmetrosylarojalejana"farred"de730nanmetrossonfrecuentementelas
masefectivasenlaregulacindelasreaccionesdelaplantaalaluz;reaccionesquevan
desde germinacin, coloracin de frutos, formacin de tubrculos y bulbos hasta la
floracin de plantas, de da largo y de da corto, es decir todo lo relacionado con el
fotoperodo.

Laluzfluorescentecomnemiteconsiderableluzrojaperopocarojalejana,mientrasque
laluzincandescente(bombilloscomunes)emiteconsiderableluzrojalejana.Otroaspecto
interesanteesqueunadoblecapadepapeldecelofnrojodetienecasitodalaluzroja
lejanadejandopasarsololarojade560nm,asmismosisecombinancapasdecelofn
rojo y azul se puede detener casi toda la luz roja dejando pasar solo la roja lejana de
730nm.
Debetenerseencuentaademsquelafotoreaccinquepermitequelagerminacindela
semillaseinicieesdetiporeversiblela,energaradiantedelaluzrojaladirigehaciauna
direccinyladelaluzrojalejanahaciaotradireccinopuesta.Elpigmentoresponsable
deestasreaccionesreversibleseselfitocromo.

OBJETIVO
Comprobar que luz de cierta longitud de onda favorece la germinacin de semillas que
requierenluz.

MATERIAL
Semillassensitivasalaluzcomolechuga"GrandRapids",Lepidio,pastoazul,pastobromo,
pastobermuda,tabaco,etc.

Trescajasdepetri
Papelfiltroodegerminacin
Tres cajas cerradas hermticamente contra luz de aproximadamente 20 x 30 cm. de
anchoyde12a15cmdealtocontapasmviles.Hacerunaaberturade10x20cm.enla
partesuperiordedosdelastapas.Sobrelaaberturacolocardoscapasdepapelcelofn
rojopegndolosconcintatransparente.Sobrelaaberturadelasegundatapacolocardos
capas cada una de celofn rojo y azul pegndolas con cinta. La otra caja se deja
totalmentecerradacontralaluz.Unafuentedeluzfluorescentede40W.yunbombillo
incandescentede100a150w.

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PROCEDIMIENTO
Prepare tres platos de petri colocndoles dos capas de papel de filtro en el fondo y
humedecindolos perfectamente; coloque en cada uno 100 semillas de lechuga "Grand
Rapids"tpelaseidentifquelasentalformaquesepuedadeterminaraltactocualesel
platounoeldosoeltres.Coloquelosplatosenlacajacompletamenteoscuraydejelas
semillasqueembebanaguaporunperodode16a24horas,aunatemperaturade20a
25C.Alcabodelperiodoindicadoefectelostratamientossiguientes,teniendocuidado
detrabajarenlaoscuridad.

1.Expongaelplato1aunaluzfluorescentepor15minutosyconfiltrorojo,paralocual
elplatosecolocaenlacajacontapaquetieneelpapelrojo.Laluzdebeestara30cmde
distancia.
2.Expongaelplato2,bajoluzfluorescentepor15minutosdentrodelacajaconfiltrorojo
yluego15minutosbajoluzincandescenteydentrodelacajaconfiltroazulrojo.Laluz
debeestara30cmdedistancia.
3.Elplato3debequedarportodoeltiempodegerminacinencompletaoscuridad,para
locualsedebeenvolverenpapeldealuminio.

Deje transcurrir cuatro das y remueva las tapas de los platos y observe y cuente el
nmerodesemillasgerminadasencadauno.

Coloquelosresultadosenlatabla

Tratamiento

Porcentajedegerminacin

1.luzrojade660nm

2.luzrojayluegoluzrojalejanade730nm

3.testigoenlaobscuridad

Cuadro1.Importanciadelacalidaddelaluzparalagerminacin

Discutalosresultados

BIBLIOGRAFIA
Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y


Winston,NewYork

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PRACTICANo.6
TITULO: CRECIMIENTO Y DESARROLLO PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA
DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS.

INTRODUCCION
Cuandosetratadenutrirlasplantas,esimportantesaberqueellaselaboranlamayorade
sustejidosprincipalmenteapartirdeunacombinacindedixidodecarbonoambientaly
aguaobtenidadelsuelo.
Duranteelcrecimiento,laformacindelostejidosdelasplantassiguebsicamentetres
pasos: la divisin (o mitosis) de las clulas embrionarias para formar nuevas clulas, el
agrandamientoy/oalargamientodeestasclulasysudiferenciacin

OBJETIVO
Conocerypracticarunapruebarpidadelaboratorioparadeterminarsilassemillasestn
vivas(viables).

MATERIAL
Clorurode2,3,5trifeniltetrazolio
PapelindicadordepH
KH2PO4
Na2HPO4.2H20
Semillasdemazysoya.

PROCEDIMIENTO
Preparacindelasolucinestndardetetrazolioal1%:Sepreparadisolviendo5gdela
salcon500ccdeaguadestilada.ElpHdelasolucindebeestarentre6a8paralograr
unaactividadptima.
CuandoelpHfinaldelasolucinesde4omenossedebeagregar1.82gdeKHP04y3.56g
deNa2HP04.2H20.

REPARACIONDELASSEMILLASAEVALUAR
l.Lassemillasdemaz,arroz,sorgodebenserremojadas(embebidas)enaguaporunas12
horasparaquesuembrinseactiveyademssepuedahacerfcilmenteelcorte.
2.Paraelcasodelmazhagauncortelimpioen100semillas(sinmagullaroestropearel
embrin)alolargodelejelongitudinaldelgrano.Descartelamitaddecadagrano.
3. Coloque las 100 mitades en cajas de petri y cbralas con la solucin de tetrazo1io al
0.5%.
4.Coloquelascajasdepetrienunencubadora40Cporuntiempode30a60minutos
hastaqueelembrincoloreederojo.
5. Analice las semillas coloreadas comparando con figuras patrn que hay en el
laboratorioyobtengaelporcentajedesemillasviables.

NOTAS:a)Elembrineselnicoquecoloreaentodassuspartessiestnvivas.
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b) En semillas de soya luego de remojarlas se les quita la cubierta y se colocan en la


solucin)1%yatemperaturade40Cpor2a4horashastaobtenerunacoloracinroja
brillante.Silasemillaestvivadebecolorear:loscotiledonesyelejeplmularadcula.

BIBLIOGRAFIA
Ross.W.C.1974.PlantPhyslologyLaboratoryManual.Wadsworth.Belmont,California.

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PRACTICANo.7
TITULO:CLULASYTEJIDOSVEGETALES

INTRODUCCIN
Laclulaestaformadadeunprotoplasmaounidadvivaenlaquesedistingueunsistema
de membranas, el citoplasma y el ncleo. Las clulas vegetales presentan una gran
diversidadensutamao,forma,estructurayfuncindependiendodelvegetalydeltejido
delqueformeparte.

OBJETIVO
Observacindeclulasytejidosvegetales

MATERIAL
Safranina,porteobjetos,tallo,raz,bistur.

PROCEDIMIENTO
Obtengaunaporcinpequeaydelgadaporcortetransversaldetalloyraz,tialamisma
conSafraninaycolquelaenunportaobjetoyobservealmicroscopio.
Observelossiguientestejidosdelarazyeltallodeplantasdepapaya:epidermis,corteza,
endodermis,cilindrocentral,hacesvascularesdexilemayfloema.
Dibujeloobservadoydiscutasusresultados.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a. de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant.

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PRACTICANo.8
TITULO: ESTRUCTURAS ANATMICAS QUE INTERVIENEN EN EL
TRANSPORTEDEAGUA

INTRODUCCIN
Lasplantasestnconstituidasbsicamenteporcuatrosistemasdetejido:meristemtico,
epidrmico, fundamental y vascular. Cada una de las clulas que forman estos tejidos
estninmersasenaguayconstituidasporella.Estaaguaestdistribuidaendosregiones
biendefinidasdelcuerpodelasplantas:1)Elapoplasto,queconstadetodaslasparedes
celularesylosespaciosintercelulares(consideradounsistemamuerto);y2)elsimplasto,
que est formado por todos los protoplastos de las clulas, los cuales estn unidos por
plasmodesmosformandouncontinuo(considerandounsistemavivo).
Eltransportedeaguadesdelarazatodaslaspartesdelasplantassellevaacaboatravs
del tejido vascular. Este tejido est formado por xilema y floema. El xilema est
consideradoenelapoplastoyeselencargadodeltransporte(encantidad)deagua;est
formadoporunsistemadetuboscapilaresquerecorrenlaplanta(traqueidasyelementos
delvaso).Elfloemaestconsideradodentrodelsimplastoyestformadotambinporun
sistemadetuboscapilares(elementoscribosos)atravsdeloscualestambinsellevaa
cabotransportedeagua,peroenmenorcantidad.

OBJETIVO
Observar el tejido vascular (xilema y floema) en diferentes rganos de las plantas (raz,
talloyhoja).

MATERIAL
Raz,talloyhojadelasplantasqueseelijan
Navaja
Portaycubreobjetos
Microscopio
Fluoroglucinaal2%enalcohol,etanolal95%ycidoclorhdricoconcentrado.

PROCEDIMIENTO
Hagauncortetransversallomsdelgadoqueseaposible,deraz,tallouhojaycolquelo
enelportaobjetos,aadaunagotadefluoroglucinaal2%yagregueunaodosgotasde
cido clorhdrico concentrado y deje reposar durante dos minutos aproximadamente.
Transcurridoestetiempocoloqueelcubreobjetosyobserveenelmicroscopiolostejidos
quesetienderojo.
Dibujeloobservado
Discutalasdiferenciasentrexilemayfloema

BIBLIOGRAFIA
Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de
FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.
17


Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde
laOEA.CECSA,Mxico,D.F.

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PRACTICANo.9
TITULO:MADURACINDEFRUTOS

INTRODUCCIN
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,B)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la
floracin. C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas
desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica.

OBJETIVO
Evaluarelefectodeletilenoenlamaduracindefrutos.

MATERIAL
Campanaybasedevidrio
Mangosmadurosyverdes

PROCEDIMIENTO
Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la
campanacongrasa.
Observecomosevadandolamaduracindelosfrutos.

BIBLIOGRAFIA
Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall,
EnglewoodCliffs,NewYersey.

HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.

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PRACTICANo.10
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS.

INTRODUCCION
Las giberelinas son hormonas vegetales cuya estructura bsica es el grupo gibano
(Figura1).Unadelasgiberelinasmsconocidaseselcidogiberlico(GA3).Lasgiberelinas
se identifican por un subndice que indica aproximadamente el orden en que fueron
descubiertasenlasplantas(Hill,1977).Enlasplantassuperioreslarutadesntesisdelas
giberelinas Incluye como precursores compuestos como el mevalonato primero y
posteriormenteotroscomoel()kaurenoyelestaviol(Figura1).

Figura1.Estructurabsicaysntesisdegiberelinas

En los esfuerzos dentro de la sntesis de las giberelinas se han generalizado substancias


que pueden bloquear las reacciones que conducen a su produccin; a este grupo de
substanciasselesdenominaretardadoresdelcrecimiento.EnelCuadro1semuestrauna
listadevariosretardadoresdelcrecimientoycomoseobserva,unmismoretardadortiene
diferentesnombres.
____________________________________________________________
AMO1618CARDAVANACPCCLOROMEQUATCCCCICOCEL.DAMINOZIDEoBo
ALARSADHB995.PHOSPHONCBBP(Luckwill1981).
Retardadoresdelcrecimiento.

Tanto las giberelinas como los retardadores del crecimiento tienen muchas aplicaciones
enlaagricultura.Comoesdeesperarse,laaccindelosretardadoresdelcrecimientoes
casisiemprecontrariaaladelasgiberelinas.
Algunosejemplosdeusoson:

Giberelinas:
.Estimulanelcrecimiento(alargamientodeltalloyentrenudos).
.Estimulanladivisincelular.
.Provocanenciertasespeciesyenciertascondicioneslafloracin.
.ControlanlaexpresinsexualhaciamasculinidadProvocanpartenocarpia.
.Controlanlamovilizacindenutrientes.
20

.Puedenayudaraestimularlagerminacin.

Retardadoresdecrecimiento:
.Inhibenelalargamientodeltallo(sepuedenusarparaevitarelacame).
.Inhibenladivisincelular.
.Puedenprovocarlafloracinenfrutales.
.Controlanlaexpresinsexualhaciafemeneidad.
.Permitenllevaracabounadesviacindelosnutrientes.
.Aumentantoleranciaasequa.

Para una discusin ms detallada de stas y muchas otras aplicaciones de estas


substanciasconsultenaLuckwill(1981)yWeaver(1980).

OBJETIVOS
.DemostrarlaestimulacindelcrecimientoylaInhibicindelmismoconcido
GiberlicoyCicocelrespectivamente.

MATERIAL
Alargamientoyreduccindeentrenudos
6plntulasdefrjolde15a20dasdegerminadas
Acidogiberlico50ppm
Cicocel5000ppm
3aspersores

PROCEDIMIENTO
Asperjecadatercerda,tresveces,lotesde2plantasconcidogiberlico,cicocelyagua
destilada.
Al cabo de 12 das despus de los tratamientos mida la longitud de los entrenudos y
cuenteelnmerodeestosparacadatratamiento.
Al asperjar procure cubrir con la solucin el follaje y que el roco de un tratamiento no
alcancealasplantasdeotro.

BIBLIOGRAFA
HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.

Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain.
Primo.Y.E.yR.Cuat.1968.HerbicidasyFitoreguladores.Edit.Aguilar.Espaa.

Rojas, G. M. 1976. Manual Terico Prctico deHerbicidas y Fitoreguladores. Ed. Limusa.


Mxico.

Weaver,R.J.1980.ReguladoresdelCrecimientodelasPlantasenlaAgricultura.
Trillas,Mxico.

21

PRACTICANo.11
TITTULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS

INTRODUCCIN.
Las Citocininas forman el grupo de fitohormonas descubiertas ms recientemente. Se
llegaconocerestaclasedehormonasporestudiosdelcrecimientodeclulasvegetales
comolasdeltallodeltabacoencondicionesestrilessobremediosnutritivossintticos,
donde se induce la divisin celular aadiendo al medio de cultivo extracto de malta o
lechedecoco.

Apesardequeprontosehallaronmuchosextractosvegetalesquecontenansustancias
condichaactividad,nofuehasta1964queporfinsepudodeterminarqumicamentela
primeracitocininanaturaldenominadazeatina.
Actualmente se conocen varios compuestos vegetales naturales, pertenecientes a este
grupodehormonas,talescomolaisopenteniladeninayladihizeatinaapartedelacinotina
ylabenciladeninasintticas(SalisburyyRoss,1994).Losefectosdeestassustanciasenlas
plantassonvariados,siendoalgunosejemploslossiguientes:

Retrasodelasenescenciadelashojas.
Senescencia o envejecimiento es la fase de crecimiento vegetal que comprende de la
plenamadurezalamuerteysecaracterizaporlaacumulacindeproductosmetablicosy
prdidadepesosobretododehojasyfrutos.
Enlashojaslasenescenciaseponedemanifiestoporelamarillamiento,construccinde
RNA,protenasyclorofila.

La benciladenina es el regulador que mas frecuentemente se aplica para retrasar la


senescenciavegetal.Suaccinconsisteenmantenerunaltoniveldesntesisdeprotena
retrasandoladegradacindelaclorofilaylasprotenas,educiendoelritmoderespiracin
yengeneralmanteniendoelvigordelasclulas.

Porlocomnlashojasseparadasdelaplantaolasqueseencuentranentallos:portados
envejecenconrapidez.Confrecuenciaenlasnervadurasunodelosresultadoscomunes
delasenescenciaeslapodredumbreenalmacenamientodebidodesarrollodebacteriay
hongos en aminocidos y otras sustancias nutritivas, que se pierden de las clulas que
estnenvejeciendo.

Rupturadeladominanciaapical.
LadominaciaapicaleslaInhibicindelcrecimientodelasyemaslateralesporelpicede
unaplanta.Siseeliminaestepicelasyemaslateralescomienzanacrecer,ramificndose
la planta. Este efecto es bien conocido en la poda de frutales y en la jardinera. Se ha
demostrado que la dominancia apical est controlada por las auxinas producidas por el
pice.Enelcasodelascitocininassehademostradoquesiseagreganaunayemalateral
que no se encuentra en crecimiento y que est dominado por el pice del tallo, con
frecuencialayemalateralcomienzaacrecer(SalisburyyRoss,1994).Esteefectohasido
22

utilizado en la horticultura ornamental para aumentar el nmero de hijuelos. En el


aspecto patolgico las citocininas producidas por la bacteria Corynebacterium fascians
producelaramificacinexcesivaenlaenfermedadllamadaescobadebrujaencrisantemo
ychcharo(SalisburyyRoss.1994).

OBJETIVOS.
1. Observar el efecto de la benciladenina (BA) sobre el envejecimiento de hojas de apio
mediantelacuantificacindeclorofilas.
2.ObservarelefectodelasaspersionesdeBAsobrelarupturadeladominanciaapical.

MATERIAL
A)Retrasodelasenescenciaenhojasdeapio.
El trabajo se dividir en dos partes, en la primera se aplicar el regulador (BA) y en la
segundasecuantificarlaclorofila.

Cuantificacindeclorofila
AplicacionesdeBA
50mldeacetona80%
2vasosdeprecipitado250mI
1Embudodevidrio
SosolucinBA
10mg/l
2Tubosdeensaye
1Probeta50ml
Bandejasdeplstico
1MorteroyPistilo
Plantasdeapiodebuenaspecto.
Espectrofotmetro

PROCEDIMIENTO
AplicacionesdeBA
a)Deunaplantadeapioseleccione4hojasdelmismotamaoyapariencia,lveloscon
aguadestiladayescrralos.
b)Sumerja2hojasenlasolucindeBA(10mg/l)durante5minutos.Squelasysacudael
excesodesolucin.Sumerjaotras2hojasenaguadestilada.stasservirncomotestigos.

c)Coloquelashoja1tratadasconBAenunvasodeprecipitadoconaguayenotrovaso
lashojastestigo.
d) Repita este tratamiento 2 veces ms cada tercer da lo que har un total de 3
aplicaciones.
e) Despus de 15 das o cuando note diferencias marcadas realice sus mediciones de
clorofila.

Cuantificacindeclorofilasa,bytotal.
a)Pese0.2gdetejidos(hoja)deunodelostratamientos.
b) Muela en el mortero adicionando 20 ml de acetona 80%. Procure extraer todo el
pigmentodeformaquelosrestosdetejidoquedenblanquecinos.
c)Filtreenelembudoconunagasa.Recibaelextractoenlaprobetade50ml
d)Completeconelrestodeacetona80%elvolumendelextractoa20mI

23

e) Haga lecturas de absorbancia en el espectrofotmetro a 645 y 663 nm. Use acetona


80%comoblanco.
f)Repitaelanteriorprocedimientoparacadatratamiento.

Paracalcularlacantidaddeclorofilassubstituyeenlassiguientesfrmulas:
.mgclorofilaa/ghoja=12.7(A663)2.69(A645)XV

1000XW

.mgclorofilab/g=22.9(A645)4.68(A663)XV

1000XW

.mgclorofilastotales/ghoja20.2(A645)+8.02(A663)XV
1000XW
Donde:
.A663=Absorbanciaa663
.A645=Absorbanciaa645
.V=Volumenfinaldelextracto(20mL)
.W=Pesofrescoengramosdeltejido(0.2g)
Consusresultadoslleneelsiguientecuadro:

TRATAMIENTO

CLOROFILAa

CLOROFILAb

Testigo

BA10mg/L

CLOROFILASTOTALES

Cuadro2.Cantidaddeclorofilaa,bytotalenlashojasdeapiotratadasconBA,alcabodedas.

BRupturadelaDominanciaApical.

Realizaraatravsdelasaspersionesdecitocininas.

MaterialesyMtodos.
3Plntulasdefrjolde2semanas.
SolucindeBA200ppm
+GA50ppm+Tween0.5%(Agentehumectante)

ACadaunadelasplantasapliquelosiguiente:
a)AspersinconBA200ppm+Ga350ppm+Tween0.5%.
b)Aspersinconagua+Tween0.5%.

c)Plantasinpice,elcualsecorta.

BIBLIOGRAFA.
Gaiston, A.W. y P.J. Davies. 1970. Control Mechanims In Plant Development: Prenatice
Hall,EnglewoodCliff.NewJersey.

Leopold,A.C.yM.Kawase,1964.Bensyladenineeffeetsonbeanleafgrowthand
senescenee,AmerJ.Bol.5(3):294298.
24


Salisbury,F.S.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edil.Iberoamrica,
Mxico,D.F.

Withan,F.M.,Blaydes,D.E.YDevlin,R.M.1971.ExperimentsinPlantPhyslology,
vanMostrandReinHoldCo.,NewYork,Toronto,Melbourne.

25

PRACTICANo.12
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO.

INTRODUCCIN.
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
comounahormonavegetal:a)lasantiguasobservacionesdequelosfrutosmaduranms
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,b)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo Inicie y
sincronicelafloracinyc)laInduccindelacadadelashojasdelosrbolesapartirdel
gasdesprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpblicaamediadosde1864
(SalisburyyRoss,1979).
No se acept al etileno como hormona sino hasta la dcada de los sesentas en que se
aclarqueeletilenoesunmetabolitonormalproducidoporclulassanasyqueejerceun
control regulador sobre fenmenos morfognicos de las mismas, a pesar de las dudas
respectoasucapacidaddetransporte(Weaver,1980).
En la actualidad se conocen muchas respuestas de las plantas controladas directamente
por etileno aparte de aquellos casos en los que posiblemente otros reguladores del
crecimientoejercensusefectosteniendoaletilenocomointermediario(talcomoocurre
enciertascondicionesconlasauxinas).Algunasdelasrespuestasdelasplantasaletileno
sonlassiguientes:

Senescenciadeflorcortada.
Respecto al envejecimiento de las flores se ha observado que el clavel est controlado
principalmente por el etileno producido por la flor misma o por el smog de la
contaminacinatmosfricayquesteaceleraelmarchitamientodelosptalos,loquea
su vez causa prdidas durante el manejo en el mercado y disminucin de su vida en el
florero. Dado lo anterior se han Investigado centenares de substancias que puedan
prolongarlavidadelasflorescortadas.
Recientemente se ha encontrado que los iones de plata han producido los mejores
resultados en la conservacin de flores cuando han sido asperjados o absorbidos por el
tallo.Deestamanera,tenemosqueRedyCol.(1980)lograronqueeltiosulfatodeplata
absorbidoporeltalloprolongarhasta66.9dasmslavidaenelflorerodeclavelesde
la variedad Orchird Royalette. Descubrimientos como este han desencadenado estudios
que nos Indican el tiempo de aplicacin, concentracin, variedades, temperaturas que
produzcanlosmejoresresultados,ascomoelmecanismodeaccin.
En lo que se refiere al mecanismo de accin se piensa que la plata es un agente anti
etileno que Impide que ste desencadene el proceso de envejecimiento. Entre las
evidencias a favor de este tenemos el trabajo de Halavy y Kofranek (1977) que nos
demuestra que la plata contrarresta los efectos del etefn (una substancia que libera
etilenoalserabsorbidaporlasplantasyqueporlotanto,aceleraelenvejecimientodelas
flores.

26

Formacindezonadeabscisin.
La cada de las hojas y de los frutos ocurre porque se presenta la formacin de una(s)
capa(s) de clulas especializadas llamada zona de abscisin. Dependiendo de la especie
estazonadeabscisinpuedeformarsemuytempranoduranteeldesarrolloosolamente
cuandosealcanzalamadurez.Antesdequesecaigaelrganoseproducencambiosenla
zona de abscisin tales como; a) divisiones celulares que forman una capa de clulas
pequeas y apretadas a lo largo de la base del pecolo, b) disolucin enzimtica de la
paredcelularodelalminamedia.c)taponamientodelosvasosdexilemayd)formacin
decorchoenlazonadeseparacin;entreotros.Estoscambiosdebilitanelpuntodeunin
yprovocandespuslaseparacinylacadadelrgano(GaistonyDavies,1970).
El etileno puede utilizarse para acelerar la formacin de la zona de abscisin y esto ha
resultadotilenaquellospasesenlosquesellevaacabolacosechamecnicadefrutales
comomanzana,cerezo,ctricos,olivo,pera,ciruelaynogal.Enestecasolascosechadoras
agitanelrbolyrecibenenlonasextendidaslosfrutos.Sistosestndbilmenteunidos
serequerirmenorfuerzaparaagitarelrbolyseproducirmenosdaoaste,adems
dehacermasuniformelacosecha(Weaver,1976)..
Sinembargo,eletilenocomogasesdifcildemanejarenespaciosabiertos,porloquese
ha preferido usar substancias que liberen etileno, siendo una de ellas el etefn o ethrel
(cido cloroetilfosfnico). Este compuesto es estable en pH cido y se descompone
liberandoetilenoenpHbsico,producindoseentonceslaaccinde1etileno,yaquelas
plantastienenensustejidosunpHmsaltoqueeldeletefn.

CICH2CH2PO'+OH. CICH2CH2PO___

/
/
O'
O'
EtefnH
CL+CH2=CH2+HP02'

Etileno
3

Cuadro3.Liberacindeetilenoporeletefn(Abeles,1973).

OBJETIVO
Controldesenescenciadeflorcortada.
a)Medirelaumentodelavidaenelflorerodeplantasdeclaveltratadascontiosulfatode
plata. .
b) Medir la disminucin de la vida en el florero causada por un aumento da la
concentracindeetileno.
e)Inducirlaformacindelazonadeabscisinenexplantesdefrjol.

MATERIAL
Senescenciadeflorcortada.
Induccindelazonadeabscisin
12Clavelescortados
5Frascosdevidrio
27

Etiquetas
Sol.deetefna50ppmSol.detiosulftodeplata
(Verapndice)

Plantasdefrjolde20a24das
degerminadas(20)
Etefn0.25%enlalonina
Lanolinasola
Cajasdepetri(1)
Agrolita
Aplicadoresdevidrio
(varilladevidrio)

A)Controldelasenescenciaenflorcortada.
Aumentodelavidaenelflorero
En este caso el tiosulfato de plata, debe ser absorbido por el tallo de la planta por
determinadotiempo.Solodebenintroducirse3plantasenlasoluci6npor20minutosy3
plantas ms por 40 minutos. Despus de este tiempo squelas de la solucin y
enjuguelas con agua corriente y col6quelas en los frascos de vidrio con agua. Ponga 3
plantassintiosulfatodeplataenotrofrascocomotestigo.
Disminucindelavidaenelflorero.
Coloqueunpocodelasolucindeetefnenunfrascoypongaah3claveles.
Para cuantificar la vida de las flores se tomar como dato para cada tratamiento el
nmero de das necesarios para que se marchite la primera flor. En general verifique la
aparienciadesusplantasapartirdeltercerda:Describasuapariencia.

B)Induccindelazonadeabscisin.
UnodelosmtodosInicialesenlosquesepruebansubstanciasquetengancapacidadde
Inducir la abscisin es el bioensayo de los explantes de frjol en los que se utilizan las
porcionesdelaplantaquesesealanenlaFigura2.

Figura2.Mtododelexplantedefrjolparabioensayodeabscisin.

28

En este caso se va a utilizar el etefn agregado a la lanolina aun cuando en forma


comercialsteseutilizaenformadesolucionesliquidasasperjndose.
Procederemosdelasiguienteforma:
a)Cortelosexplantes(20)delasplantasdefrjolydivdalosendosgruposde

10.
b) Coloque la vermiculita en las cajas de petri y entierre all la base de los explantes tal
comosevenenlaFigura3.Agregueunpocodeaguaaestavermiculita.

Figura3.Cajadepetriconlosexplantesdefrjol

c)Coloqueconlasvarillasdevidriounpocodelanolinaodelanolinaconetefnacada
lote. Mantenga en la obscuridad. Para verificar si ha habido abscisin despus de cierto
tiempopresionesuavementeconunlpizlospecolos.
Reporteelporcientodeabscisinalos4,7,10Y12dasdeiniciadoelensayo,paracada
tratamiento.

BIBLIOGRAFA.

Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London

Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall,
EnglewoodCliffs,NewYersey.

Halevy, A.H. y Kofranetz, A.M. 1977. Silver treatment of carnation flowers for reducing
ethylenedamageandextendinglongevity.J.Amer.Soc.Hort.Sci.102(1):7677.

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Reid, M.S., D.S. Farnham y E.P. McEnrva. 1980. Effecto of silverthiosulfata and
preservativa solutions on the vase lIte of miniature carnations. Hort Science 15(6):807
808.

Weaver, R.J. 1980. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura.Trillas,


Mxico.

Apndice
SolucindeTiosulfatodePlata.
Semezclanenunaproporcinde1:1unasolucindeAgN03mMyNa2S20.Mm:0.67969
AgNO.para0.51.2.52969Na2S20.
para0.5l.teirlosyformar1I.

29

PRACTICANo.13
TITULO: OTROS REGULADORES DEL CRECIMIENTO EFECTO DE EXTRACTOS
DEVARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO.

INTRODUCCIN.
ElestadodeVeracruzeselmayorproductordepapayadelarepblicaylosagricultores
obtienenporlogeneralsupropiasemillaponindolaasecarsinanteshaberremovidola
sarcotesta(capagelatinosaquecubrelassemillas).
Enestascondiciones,porlogenerallagerminaci6neslenta,yaquecomienzaalos15das
6msdespusdelasiembrayseextiendeporunperodoaproximadode15das6ms,
provocandoasundesarrolloheterogneodelasplantasenlosalmcigosloqueobligaa
extremarcuidadospueslasplantasquemstardanenbrotarestnmsexpuestasaser
daadas por plagas debido a su menor rea foliar. Lange (1961), citado en Mosqueda,
1969), menciona que obtuvo germinacin ms temprana y en mayor porcentaje en
semillassinsarcotestaprobablementeporquelasarcotestaimpidequeselavenalgunos
Inhibidoresdelagerminacin;GherardiyVallo(1976)determinaronquelosextractosde
lassemillasdepapayacontenaninhibidorescidosyneutros,posiblementedenaturaleza
fenolca.
Con estos antecedentes se plantea que si bien en el caso de la papaya la sarcotesta
aparentemente inhibe la germinacin de la semilla es probable que para otros frutos
carnosos donde sus semillas estn "embebidas" en la solucin acuosa circundante, esta
mismaseainhibitoriaparalagerminacindesupropiasemillaodeotras.

OBJETIVO
Enlapresenteprcticaseproponeverelefectodeextractosdejitomate,melnypapaya
(sarcotesta)sobrelagerminacindesemillasderbano.

MATERIAL
4CajasdePetriPapaya
AlgodnMeln
3VasosdeprecipitadoJitomate
1Probetade100mlAguadestilada
Gasa

Extraccin.
PAPAYA
a) Elimine la sarcotesta a semillas frescas en nmero suficiente para obtener
aproximadamente20mldeextractofiltradoendoblecapadegasa.
b)Aforeelextractoobtenidoa50mlconaguadestilada.

MELON
a)PartaelmelnyextraigalassemillasconsuJugo.

30

b) Colquelas directamente sobre tres capas de gasa y exprima sobre un vaso de


precipitado.
c)TomealIgualqueenelcasodepapaya20mlyaforea50mlconaguadestilada.

JITOMATE
a)Sigaelmismoprocedimientoqueparameln.
SIEMBRA
a) Separecuatro lotes de 100 semillas de rbano y distribyalas sobre una cajade Petri
con algodn. Humedezca adecuadamente el algodn con el extracto respectivo cada
tratamiento.
b) Mantenga a temperatura ambiente durante un da. El cuarto lote de 100 semillas
utilcelocomocontrol.
c)Cuenteel%degerminacinalcabode24y48horas.Comparelostratamientos.nota:
Encasodequeseanecesariohumedecernuevamentealgunodelostratamientos,hgalo
conaguadestilada.

BIBLIOGRAFA.
Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Gherardi,E.yI.F.M.Valio.1976.Ocurrenceofpromotinginhibitorysubstancesintheseed
arilsofCaricapapayaL.J.Hort.Science.51:114.

Hartman,H.T.yD.F.Kester.1971.PropagacindePlantas.TraduccindeAntonioMirano
Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Machlis,L.yJ.G.Torrey.1956.PlantsinAction.ALaboratoryManualofPlantPhysiology.
W.H.Freeman,SanFrancisco.

MontesMeneses,J.1969.Correlacindelalongevidaddelassemillasdemazyfrjolcon
laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,uach

Mosqueda,V.R.1969.Efectodediversostratamientosaplicadosalasemillade
papayasobresupodergerminativo.AgriculturaTcnica.2(11):487491.

31

PRACTICANo.14
TITULO:DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA

INTRODUCCION
Enmayoradelasplantas,tantoherbceascomoleosas,layemaapicalesresponsable
delcrecimientodeltalloprincipal.Aunqueenlasaxilasdecadahojahayunayema,por
reglageneralstapermaneceenrepososporlomenosdurantealgntiempo,1oqueda
porresultadolaramificacinempieceaciertadistanciadelpice.Siporalgunaraznla
yema apical se muere, muy pronto empiezan a brotar las yemas axi1ares cercanas al
pice. Efecto similar puede producirse con la aplicacin de ciertas sustancias orgnicas
quee1iminanladominanciaapical;enunexperimentoanteriorseestudielusodela
tiourea para tal fin. En el caso de muchas conferas cuando la yema apical muere, las
ramas laterales p1agitropas ms cercanas al apice se orientan en posicin vertical,
originndoseunrbolconm1tiplesejesorttropos.

Se supone que la dominancia de la yema apica1 se debe a la alta concentracin de las


hormonasproducidasenella,lascualessetrasladanhaciaabajo.Laaltaconcentracinde
hormonas en la zona del tallo cercana al pice inhibe el crecimiento de las yemas
laterales,lacualessinembargo,parecenserestimuladasporconcentracionesmsbajas.
Siseeliminalayemaapica1disminuyelaconcentracindehormonaseneltallo,bajando
a un nivel ptimo para la brotacin de las yemas laterales. Tal cosa sucede tambin a
cierta distancia del pice, ya que durante el traslado la concentracin de hormonas se
reducegradualmente.

Ademsdelasyemas,lashormonassonproducidasenlashojas,especialmenteenlasque
estn en desarrollo. Estas hormonas tambin se trasladan hacia abajo, a travs del
pecolo. Cuando las hojas alcanzan la madurez, la produccin de hormonas disminuye
considerablementeenellas.

En la base de cada pecolo (tambin en el pednculo de las flores) desde muy


tempranamenteempiezaaformarseuntejidoqueatraviesatodoelpecoloyqueconsiste
de clulas rectangulares con paredes muy delgadas. Mientras la concentracin de
hormonas se mantenga alta, el desarrollo de este tejido, llamado tejido de abscisin no
avanza. Tan pronto como la concentracin baja como ocurre en las hojas muy viejas, el
pecoloseseparadeltallocomoconsecuenciadeldesarrollodeltejidodeabscisinydela
disolucin de las lminas medias de sus paredes. En regiones con una estacin
desfavorableparaelcrecimiento,lacadadehojasesmuypronunciadaenmuchasplantas
leosas (plantas de hojas caducas), mientras que en algunas plantas herbceas del todo
nohaydesfo1iacin.

Existen varios factores fisiolgicos que aceleran o retardan la cada natural de las hojas.
Adems de la sequa deben citarse ciertas enfermedades o acciones parasticas, alta
humedadenelespacioradical,faltadecarbohidratosodeciertoselementosminerales,
etc.

32

OBJETIVO
En este experimento se demostrar primeramente la dominancia de la yema apical. Al
eliminarsta,seprovocalabrotacinyeldesarrollodelasyemaslaterales,loqueresulta
en una ramificacin abundante de la planta decapitada. En la segunda parte se
comprobar la importancia de la concentracin de hormonas producidas en las hojas
sobrelaabscisin,removiendolalminafoliar.

PROCEDIMIENTO
a)Dominanciaapical
ObtengatresplantasdetomateodeColeus,deunos20a25cmdealtura,conlayema
apicalencrecimientoactivo.Dejeunaplantacomotestigo.Eliminelayemadelasotras
dos por medio de un corte con una hoja de afeitar ms o menos 1cm ms abajo de la
yemaapical.Dejeunadeestasplantassinningnotrotratamientoyalaotraaplquele
pastadelanolinaconhormonassobreelcorte.Repitaestaaplicacindespusdeunasdos
semanas.Estudielaaparienciadelastresplantasdespusdedos,cuatroyseissemanas.

Anotacindeobservaciones:

BIBLIOGRAFIA
Burd,D.YLomas,J.1976.Mtodosdemedicindelreafoliar:unestudiodeprecisiny
rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. lowa Slala
University,Amea,lowa.TraduccindeE.,SolrzanoV.

Bould,C.1968.LeafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincropNutrition.Exp.
Agriculture.4:1727.

Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

33

PRACTICANo.15
TITULO:REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS

OBJETIVO
Observelacadadelospecolos,delosdiferentestratamientos.Hagaunadiscusindelos
resultados.

PROCEDIMIENTO
Obtenga cinco plantas de Co1eus sembradas en macetas o en una caja de madera.
Apliquelostratamientossiguientes:Dejeunaplantaintactaparaquesirvacomotestigo.
Enlasegundaplantarecorteconunahojadeafeitarlasdosterceraspartesdelalmina
detodaslashojasmenosdelasmsjvenes,muypocodesarrolladasdejandoelrestode
lalminapegadoalpecolo.Enlasdemsplantas,recortecompletamentelaslminasde
todaslashojastambinconexcepcindelasmsjvenesensubase,oseaenlaunin
conelpecolo.Enunadeestasplantasapliquesobretodosloscortesdelospecolospasta
dehormonaenlanolina.Enlospecolosdeotraplantaapliquelanolinapura,sinhormona.
Dejelaltimaplantasintratar

Testigocon
lamina

Plantasin Plantacon11/3
lmina
delamina

Plantasinlmina
hormona

Testigosinlamina
lanolina

Cadadepecolos

Despusdedas...

Cuadro3.Reguladoresdelaabscisinpormediodehormonas

BIBLIOGRAFIA
Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas,
Mxico.

34

PRACTICANo.16
TITULO: INDUCCIN DE ENRAIZAMIENTO DE ESQUEJES POR MEDIO DE
HORMONAS

INTRODUCCION
Lamayoradelasplantas"superiores"sepropaganpormediodesemillas.Sinembargo.
En algunas especies la propagacin vegetativa por medio de bulbillos, estolones,
tubrculos. etc., sustituye a la propagacin sexual. Si se mantienen partes de muchas
plantas. Inclusive de especies que se propagan exclusivamente por semillas, en
condiciones apropiadas estas partes se muestran capaces de producir una nueva planta
esta particularidad es aprovechada por el hombre en la multiplicacin de plantas por
mediodeestacas,dehojasyandepedazosderaces;enestaformasepuedeobtener
rpidamente un nmero grande de plantas de constitucin gentica uniforme
(propagacinclonal).
Desdehacemuchotiemposesabequeelenraizamientodeestacasesmsrpidocuando
stastienenhojasyespecialmenteyemas.Comoloscentrosprincipalesdelaproduccin
de hormonas son las yemas activas y las hojas jvenes. Puede presumirse que las
hormonasproducidasenestaspartes(tambinenmenorcantidadenhojasmaduras)son
trasladadas hacia la base de la estaca y provocan all la iniciacin de las races. La
aplicacindereguladoresartificialesdecrecimientoalabasedeestacasestimulatambin
la iniciacin de races. Especialmente en plantas en que la concentracin de hormonas
naturalesnoeslosuficientementealtaparainiciarlas;sinembargonopuedeninducirse
racesartificialmenteenpartesdondenormalmentenoseproducen.
Puestoquelaconcentracinnecesariadelahormonaparalainiciacinderacesesmayor
quelaquesenecesitaparaestimularsucrecimientoposterior,debetenersecuidadode
que despus de la fase de iniciacin de las races la concentracin hormonal se reduzca
puesdelocontrariopuedeocurrirmsbienunainhibicineneldesarrollodelasracesya
formadas.
Debe mencionarse tambin que la concentracin ptima de la hormona para la fase de
iniciacinderacesvarasegnlaespeciedelaplanta.
Aunque las hormonas constituyen un factor sumamente importante en la formacin de
racesstasdependenenaltogradodelascondicionesfisiolgicasenqueseencuentrala
planta de la cual se toman las partes para la propagacin vegetativa. Adems de las
hormonas existen otras sustancias tambin esenciales para la iniciacin de races cuya
ausencia impide una accin positiva de las hormonas; entre las que se conocen deben
mencionarse algunas vitaminas del grupo B, como la tiamina y la piridoxina. La falta de
clorofila y de reservas de carbohidratos, lo mismo que de ciertos elementos esenciales
tambinpuedelimitarlaformacinderaces.

OBJETIVO
Conocer el efecto de dos sustancias hormonales del grupo de las auxinas sobre 1a
induccinderacesenesquejes.

35

MATERIAL
Acidoindolactico:AIA
acidonaftalenactico:ANA
EsquejesdeColeussp.Yuca,balsaminaosauce.
Cascarilladearroz
Nateraspequeas
Telaplsticoobolsasdeplsticotransparentes
Bandasdecaucho
Hipocloritodesodio

PROCEDIMIENTO
ApartirdesolucionesmadresdeAlAyANAde1000ppmprepare100mldecadaunade
lassolucionesquesernlosrespectivostratamientos:

Tratamiento

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Regulador

Concentracion

AlA:
AlA:
AlA:
ANA:
ANA:
ANA:
Testigo

10ppm
100ppm
1000ppm
10ppm
100ppm
1000ppm
H20

Prepare 21 esquejes (Estacas) de Coleus u otra planta de fcil enraizamiento, lo ms


uniformesposiblesentamaoygrosor.Desinfctelosconunasolucindehipocloritode
sodio al 0.5%. Utilice 3 esquejes por tratamiento y sumerja las bases en las respectivas
soluciones dejndolos en contacto con las soluciones por 20 horas aproximadamente.
Luego colquelos en materos con cascarilla de arroz hmeda y cbralos con plstico
transparenteparaevitarexcesodehumedadatmosfricahgaleperforacionesalplstico.
Luegode15dastomelosresultadosdelaproduccinderaces.
Tomeelpromediodelnmeroylargoderacesporesqueje.

Tratamiento
Nmeroxderacespor
Largoxderacespor
esqueje
esqueje.mm.
AlA:
10ppm
1

AlA: 1000ppm

ANA:

10ppm

ANA:

100ppm

ANA:

1000ppm

Testigo

AlA:

100ppm

Cuadro4.Induccindelenraizamientodeesquejespormediodehormonas

36

Hagaunadiscusindelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Hartman,H.T.yD.F.Kester.1971.PropagacindePlantas.TraduccindeAntonioMirano
Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of


Methods.W.JunhN.V.theHague.

37

PRACTICANo.17
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS.

INTRODUCCIN.
Unodelosimportantessistemasdecontroldelcrecimientoenlasplantasloproporcionan
losllamadosreguladoresdelcrecimientovegetalofitohormonas.
Una hormona vegetal es una sustancia orgnica que es sintetizada en el interior de la
plantayque,abajasconcentraciones,puedeactivar,Inhibiromodificarcualitativamente
elcrecimientoejerciendonormalmentestaaccinenunlugardistintoaldeorigen.
Dentrodelosgruposimportantesdelashormonasvegetalesestnlasauxinas.
UnaspectoprcticodeestashormonasvegetalesenlaestimulacindelaIniciacindelas
races. La capacidad de muchas plantas para formar races en estaca colocados en
condiciones favorables de crecimiento tiene un gran valor en la propagacin de las
plantas.
Otra de las aplicaciones prcticas mas difundida de los compuestos sintticos de tipo
auxinicoeselcontroldelasmalashierbas.Lasmalezasquecompitenconloscultivospor
la luz, nutrientes y agua principalmente, son eliminados desde hace miles de aos en
forma manual, las tcnicas y las sustancias qumicas han desplazado paulatinamente el
deshierbe manual. Algunos herbicidas selectivos son molculas similares a los
fitoreguladores naturales, por ejemplo el 2.4D el cual dependiendo de las
concentraciones que se usen, puede tener efecto inhibitorio o de promotor del
crecimiento.
Tambinsehavistoquelasauxinasparticipanenelcontroldeladominanciaapical,ya
que la sustitucin del pice por una pasta de lanolina mantiene las yemas laterales sin
crecer(RobertsyWhitehouse,1976).SalisburyyRoss(1994)hacenunarevisindelpapel
delasauxinasenladominanciaapicalysobrelamedicindeestereguladorenlasyemas
lateralesdeplantasconysinpice.

OBJETIVO
. Determinar cul de las concentraciones de ANA acelera la formacin de races en
estacasdefrjol.
.Conocerelefectodel2,4D(2,4Diclorofenoxiactico)comoreguladordelcrecimientoy
comoherbicida.

MATERIAL
Enraizamientodeestacasactividadherbicida
Solucionesdiluidoes:6macetas
ANA5.10.2030mg/lplantasdemaz,frjolyvariasmalezas
Estacasdefrjol50,500y1000
Vasosdeprecipitadoapersonesmanuales

Dominanciaapical
Plntulasdechicharo.Frjol
AlA1g/lenlanolina
38


PROCEDIMIENTO
Enraizamientodeestacas
a) Se proporcionarn las plntulas de frjol para hacer estacas de 10 cm de longitud. su
profesordeprcticaleIndicarcmo.
b)Seusarn5estacasporconcentracindeANAyuntestigo.
c)Inmediatamentedespusseponenencontactoconlasdiferentesconcentraciones.En
10mldesolucin.
d)Eltiempodeinmersinvaadependerdelacapacidaddeabsorcindelasestacas.
e) Una vez absorbidos los 10 ml de solucin se le debe agregar agua suficiente para
mantenervivaslasestacasporunperodode10a15das.
La observacin del nmero y longitud de las races se har a los 15 das despus de
iniciadalaprctica.

TRATAMIENTO

NUMEROPROMEDIO

LONGITUDPROMEDIO
DELASRAICES(A
LOS___DIAS)

OBSERVACIONES
GENERALES

TESTIGO

5mg/l

10mg/l

20mg/l

30mg/l

Cuadro5.Reguladoresdelcrecimientoauxinas

Elaboraruncuadroconlosdatossiguientesparalasconcentracionesqueseaplicaron.
Actividaddeherbicidas.

a)Rotulecadaespecialidad.

1)Testigo3)500ppm
2)50ppm4)1000ppm

b)Cuandolasplantasalcancende15a30cmdealtura,apliqueporaspersinlasolucin
de2,4Dacadatratamiento.

c)Deberestaralpendientedesumaterialyregarsegnseanecesario.

Hagaobservacionessobrequemaduras,marchitamiento,deformacionesdespusde6,12,
24horasyalcabode2y5das.

DominanciaApical
39

Serequierenplntulasdefrjolconlaprimerahojatrifoliadatotalmenteexpandidaocon
undesarrollosimilarenchcharo.Retireelpicededosplantasyapliquelanolinacono
sin AIA. Deje una tercera planta como testigo, sin cortar el pice. Permita que se
desarrollenlasplantasyalcabodeuntiempoverifiqueeltamaodelasyemaslaterales.

BIBLIOGRAFIA
Hill, T.A., .1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.
Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain.

40

PRACTICANo.18
TITULO:METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR

INTRODUCCIN.
ElreatotaldelashojassedescribemedianteelllamadondicedereaFoliar
(IAF).EstevalorIndicaelnmerodeunidadesdereaporunidaddereadeterrenoes
decir: IAF=readelashojas/readelsuelo
EI IAF sirve como un Indicador de la superficie disponible para la absorcin de luz y
suministra un denominador comn para discutir el potencial fotosinttico de un cultivo
determinado. El IAF puede variar drsticamente mediante la densidad de poblacin, la
distribucindelasplantasoporuncambiodevariedad.Nichiporovichen1960(Citadoen
Mitchell1970)hacenotarquelossiguientespuntossontilescomounabasedediscusin
cuandosetrabajeconelIAF.
a)ElIAFdebesersuficienteparainterceptartantaradiacincomoseaposible.
b)ElIAFdebedetenerunamagnitudtalqueprevengaelparasitismo,stoes,lacondicin
enlacuallashojasInferioresusenloscarbohidratosaunavelocidadms,altadelaque
losfotosintetizan.
c)ElIAFdebereunirlascondicionesypropsitosparaloscualeselcultivoestdestinado.
Un IAF mximo no siempre conduce a una mxima produccin de grano ni produce
siemprelosmximosdemateriaseca.
El IAF se registra en un estado especfico del crecimiento (por ejemplo a los 30das del
brotedelasplntulas,durantelaantesis,etc.),ylascomparacionesentrevariedadesse
hacenenunmismoestadodedesarrollo.
ElIAFproporcionaademslabaseparaobtenerotrosparmetrostilesenladescripcin
de la fotosntesis de un cultivo. Por ejemplo un valor relacionado con el IAF es el de
duracin del rea foliar (DAF) y es utilizado, para describir el tiempo durante e1 cual el
reafoliaresfuncional.PorejemplouncampodemazpuedetenerunIAFde4.5enel
momentodelapolinizacinperoseriatilconocercuntotiempoesmantenidoesteIAF.
Puede Incluso hacerse una comparacin usando la DAF para dos variedades, una de las
cuales mantiene un IAF de 4.5 durante 40 das y otra un IAF de 5.3 por 30 das. Estos
valores nos proporcionarn informacin acerca de cmo, usar estas variedades para un
medio ambiente con determinadas condiciones de radiacin, fertilidad o periodos de
sequa(Mitchell.1970).

Volviendo al IAF debemos hacer notar que en la medicin del rea de las hojas se
considera solamente un lado de stas. Ahora bien; en la determinacin del IAF el
problemabsicoeslamedicindelreadelashojas.Qumtodosexistenparamedirel
readelashojas?Mencionaremosenestecasocuatrodeellos:

1)Mtodogravimetrico
Consisteentrazarelcontornodelahojasobreunpapel,recortarlaypesarla.Elreadela
hojaescalculadamedianteelpesadodehojasdepapeldereaconocida,esdecir:
Pesodelpapelconreaconocida__________________reaconocida
Pesodelaimpresindelahoja_____________X(readelahoja)
41


2)Relacinentrelasmedidaslinealesyelreadelahoja.
Laformageneraldeestemtododeclculodelreadeunahojaes:
AF=bxAxL+a

Donde:
AF=readelahoja
A=Anchomximodelahoja
L=Largomximodelahoja
ayb=Coeficientes(dependendelahoja)
Deacuerdoasto,soloesnecesarioobtenerlasmediasnecesariasyconocerelvalordel
coeficienteaybparaobtenerelrea(AF)delahoja.EnelCuadro1seencuentranvarios
valoresdeaybparadiferentescultivos.

ESPECIE

ECUACION

CACAO

AF=156.188xL+9.178

TOMATE

AF=0.1551Xl2

PEPINO

AF=0.8663xL6.3985cv.Local

AF=0.8132x.LxA6.3985cv.Marketer
MAIZYSORGO

AF=0.75xLxA

GIRASOL

AF=0.6798xLxA

ALGODN

AF=0.77xLxA

MANZANA

AF0.708xLxA

TRIGO

F=0.836xLxA(Fernndezyarias,1989)
VALORDEb,a=0

CEBADA

0.64

TRIGO

0.65

ARROZ

0.66

MAIZ

0.710.81

GRAMINEASENGENERAL

0.66

GIRASOL

0.610.76

TABACO

0.610.76

ALGODN

0.69

(TomadodeGestak,elal.1971)
(TomadodeGestak,elal.1971)

Cuadro 6. Ejemplos de coeficientes a y b utilizados para calcularel rea foliar devarias


especies.

En el apndice 1 se presenta un resumen de la metodologa para que se calculen los


modelosdecualquierotraespecie.

42

3)Mtododelconteodeintersecciones.
Estemtodoutilizaunaplacadevidrio,plsticouotromaterialsobrelacualsetrazauna
red con lineas horizontales y verticales de tal manera que aparecen cierto nmero de
Interseccionesocrucesentrelaslineas.
Para estimar la superficie de una o varias hojas necesitamos contar el nmero total de
Interseccionesquetocanlaslminasdelashojasysustituirenlasiguienterelacin(Hart,
1965):A=nxS/N
Donde:
A=readelashojas
n=NmerodeInterseccionesquetocanlaslminasdelashojas.
S=Superficietotaldelaplaca
N=numerototaldeInterseccionesdelaplaca
Sehanllevadoacaboalgunostrabajosquetratandedeterminarculesladensidadde
Interacciones ms adecuadas para obtener una medida ms confiable de la superficie
foliaryBurdyLomas(1976)sugierenqueunadensidadde100interseccionesen100cm2
eslamejor.Otraventajadeusarunarejilladeestasproporcionesquelarelacinanterior
seconvierteen:A=n

Esconvenientecontarvariasveceselnmerodeinterseccionesquetocanlalminadela
hoja y sacar un promedio. As mismo es importante saber qu intersecciones contar y
cules no. Para lograr formarse un criterio acerca de sto es conveniente practicar un
pocomidiendoelreadeunasuperficieconocida.
Porotraparte,deberecordarsequeelreaobtenidahastaahoraesestimadayquesise
deseamayorprecisinpuedetrazarseunagrficaquerelacionelasreasobtenidasenla
rejilla con reas verdaderas (medidas en otro mtodo mas exacto, planmetro por
ejemplo)yobtenerlaecuacinquelasrelacione.Deestamanera,cualquierotramedida
obtenidaconlarejillapuedesustituirseenlaecuacinyobtenerasunvalormscercano
alverdadero.

4)
Planmetroptico.
Esteesunodelosmtodosmsprcticosyprecisosdemedirelreadeunamuestrade
hojas.Unplanmetroconstaesencialmente,deloselementosincluidosenlaFigura8.

Figura4.Elementosdeunplanmetroptico

43


En este dispositivo tenemos que la foto celda recibe una cantidad de luz constante,
produciendoasuvezunacorrienteconstante.Siinterferimoselpasodelaluzconlminas
de superficie conocida se producirn determinadas variaciones de la corriente. De esta
manerahacemosunacalibracindelaparato.DespusIntroducimoslashojas(superficie
desconocida)yobservamoslavariacindecorriente.

Las hojas se conocen por la curva de calibracin. Los planmetros comerciales hacen
directamente la conversin de variaciones de corriente a superficie, por lo que facilitan
muchoeltrabajo.Sinembargo,nosiempresedisponedeunplanmetro,porlocualestil
conocerotrosmtodosdemedicindelreafoliar.

Todoslosmtodosanterioresexceptoelsegundosondestructivos(hayquearrancarlas
hojas). Existen otros mtodos no destructivos que preservan hojas en la planta. Para
conocerestosmtodosconslteseaSestak,et,al(971).

OBJETIVO.
Conocerycompararlosresultadosdecuatromtodosdemedicindelreadelashojas
deunaespecie.

MATERIAL
Hojasdepapel
Tijeras
Balanzaelctrica
Regla.
Rejilla
Planmetro
Hojasdeunaplanta(sorgo,trigo,tabaco,etc.)

PROCEDIMIENTO
Medir el rea de un grupo de hojas por los cuatro mtodos descritos anteriormente.
Reportesusresultadosdeacuerdoalsiguientecuadro:

METODO
AREAFOLIAR
RELACIONAFx/AF4
1)Gravimetrico

2)medidaslineales

3)conteodeintersecciones

4)planmetro

Cuadro 7. Compare los valores obtenidos para cada mtodo y con ayuda de la relacin AFx/AF4
discutalosresultadosenfuncindelaexactitudyeltiempoempleadoparallevarlosacabo.

44

BIBLIOGRAFIA
Burd,D.YLomas,J.1976.Mtodosdemedicindelreafoliar:unestudiodeprecisiny
rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. Iowa State
UniversityPress,Amea,lowa.TraduccindeE.,SolrzanoV.

Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of


Methods.W.JunhN.V.theHague.

Mitchell,R.C.1970.CropGrowthandculture.IowaStateUniversityPress.Ame,lowa.

APENDICE1
Para obtener los valores de a y b de los modelos lineales AF = b x L x A + a se procede
comosigue:
1) Obtenga una muestra de hojas de la especie de Inters. Los tamaos deben cubrir
desdelashojaspequeashastalasmsgrandes.Numerecadaunadeellasyobtengasu
largomximoyanchomximo.
2)Conayudadelplanmetropticouotromtodoquetengaciertaexactitud(elmtodo
delasinteracciones,porejemplo)obtengaelAFfecadahoja.
ConestosdatosseobtieneunaecuacinderegresinlinealutilizandocomoXalproducto
deLxAoaLoAsolas.Lasecuacionessernentoncesdeltipo:
AF=LxAxb+a
AF=Lxb+a
AF=Axb+a
Seleccione el mejor modelo de acuerdo al valor de R2. A continuacin se presenta la
forma de Introducir estos datos en un programa SAS. Se presenta as mismo una de las
salidasyculessonlosparmetrosqueseutilizanparalaelaboracindelmodelo.

45

PRACTICANo.19
TITULO:DETERMINACINDELREAFOLIAR

INTRODUCCIN
La estructura de las plantas es una expresin del proceso conocido como desarrollo, el
queasuveztieneaspectoscuantitativos(crecimiento)ycualitativos(diferenciacin).
Elcrecimientosepuedeevaluaratravsdemedidasdelongitud,peso,volumen,reade
todalaplantaounapartedeella.

OBJETIVO
Estimarelreafoliardeuncultivoporunmtodoindirecto

MATERIAL
Hojasdefrjolypepino,papelmilimtrico,cartulina,sustratosymacetas.

PROCEDIMIENTO
Unmesprevioalaprctica,sembrarde10a15semillas(pormaceta)decadaespecie,de
unamacetacortalashojas,dibujarenunacartulinaelcontorno,medirlalongitudyancho
dehojayrecortarla,siguiendoelcontornomedirelpesodecadahojaydeltotaldehojas.
Porotrolado,recortarunacartulinade10x10cm.ymedirelpeso.Conociendoelrea
(100cm2)ypesodelacartulina,yconociendoelpesodecadahojaydeltotaldehojas,se
podrdeterminarporunasimpleregladetreselreafoliardecadahojayeltotaldela
planta.Sellevaracabode10lecturascompletasendiferentesetapasdecrecimientode
laplanta,segraficaryseinterpretarlosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

46

PRACTICANo.20
TITULO:ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES

INTRODUCCIN
Cuandoregamosunaplanta,elmovimientodelaguavadelsueloalarazquelaabsorbe
principalmenteporlospelosradicales,delarazpasaaltalloconducindolaalashojasy
portranspiracinllegaalaatmsfera.
Para que el agua y nutrientes lleguen a los vasos del xilema y que ascienda el agua, se
tienedosvasorutas:apoplastoysimplasto

OBJETIVO
Distinguirlasdosvasdeabsorcindeaguaynutrientes:apoplastoysimplasto.
Identificarlosvasosascendentesconductoresdelxilemaylosdescendentesdelfloema

MATERIAL
Microscopio,cortestransversalesdetallodejitomate.

PROCEDIMIENTO
Se explicara la importancia de la absorcin de agua y nutrientes, as como las vas de
absorcinenformaesquemtica,yapartirdepreparacionespreviamenteelaboradas,se
observaranlostejidosconductores

BIBLIOGRAFIA
Kramer, P.J. 1974. Relaciones Hdricas de Suelos y Plantas. EDUTEX. Mxico. Salisbury,
F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.

Kramer.P.J.1974.RelacionesHdricasdesuelosyPlantas(versinenespaoldeedicin
de1969).L.Tejada(trad.)Edutex.Mxico,D.F.

47

PRACTICANo.21
TITULO:VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR

INTRODUCCIN
La continua prdida de agua de las hojas por transpiracin, se debe principalmente al
incrementodetemperaturadelaatmsferayaldficitdepresindevaporqueexisteen
staenrelacinconlaplanta.
Esta prdida de agua a travs de los tejidos genera una diferencia de potencial de agua
(A)entrelahojaylaraz,yprovocaunflujodeaguaatravsdelaplanta.Lavelocidad
de este flujo vara considerablemente dependiendo de la especie y, en general, es
directamente proporcional al gradiente de (A 1) entre el suelo y las hojas e
inversamenteproporcionalalasumaderesistenciaseneltrayectodelagua.

OBJETIVO
Determinar la velocidad a que el agua avanza en el sistema vascular de diferentes
especies.

MATERIAL
Diferentes plantas, charola de plstico, navaja, regla, colorantes (rojo congo, azul de
metileno,etctera).

PROCEDIMIENTO
Para demostrar que el agua avanza a diferente velocidad en el sistema vascular de las
diferentesespecies,convieneutilizarplantasaltasalasqueseleshayaquitadolashojas
inferiores.
Prepareunasolucinderojocongoenagua(ocualquierotrocoloranteaninico).Coloque
lasplantasenunacharolaquecontengalasolucincolorida,Corteeltallobajolasolucin
(connavaja)ymantngalosumergidodurantealgntiempo(25minutos).Ahora,squelo
y mantngalo en su posicin natural (perpendicular al piso) y registre el tiempo. Si la
velocidad de transpiracin es alta, el colorante penetrar en los haces vasculares y
avanzar ms rpidamente que en las plantas donde la velocidad de transpiracin sea
baja. Transcurridos aproximadamente 30 minutos, corte el tallo nuevamente en una
regin cerca de las hojas. De este punto empiece a hacer cortes delgados, con navaja y
obsrvelosenelmicroscopio.Registreladistanciaqueavanzelcolorantedesdeelsitio
en donde hizo el corte original y multiplquelo por el tiempo en que se mantuvo en
posicinperpendicular.Assabraproximadamentelavelocidaddelflujodeagua.
Hagalomismoconcadaespecie.

48

Figura5.Sistemaideadoparademostrarelflujodelaguaporelxilema

BIBLIOGRAFIA
MontesMeneses,J.1969.Correlacindelalongevidaddelassemillasdemazyfrjolcon
laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,UACH.

49

PRACTICANo.22
TITULO: INFLUENCIA DE LA HUMEDAD ATMOSFRICA SOBRE LA
ABSORCINDEAGUAPORSEMILLASALMACENADAS.

OBJETIVO
Comprobarquelassemillasabsorbenaguadelmedioenqueestnalmacenadas.

MATERIAL
Semillasdesorgo,trigo,etc.
Acidosulfricoconcentrado,densidad1.84y95%deconcentracin.
Cincotubosdeensayodeunapulgadadedimetroy80cc.
Taponesdecauchoocorchoopapeldealuminio.
Malladealambretipoanjeo
Gradilla
Probetagraduadade100cc.
Balanza
Hornodesecado
Bandasdecaucho

PROCEDIMIENTO
Aplicando sus conocimientos del laboratorio de qumica y con mucho cuidado prepare
20cc de cada una de las soluciones de cido sulfrico siguientes colocndolas en los
respectivostubosdeensayomarcados.Useaguadelallavecomosolvente.

Tubol.H2S04al80%
Tubo2.H2S04al60%
Tubo3.H2S04al40%
Tubo4.H2S04al20%
Eneltubo5coloqueaguanicamente.

Pese5gruposcadaunode3gramosdesemillasdesorgootrigoycolquelasdentrode
cada tubo con ayuda de pedazos de malla de alambre detal manera que no queden las
semillasencontactoconlasolucin.
Tapebienlostubosydejeelexperimentounasemanabajocondicionesdellaboratorio.

NOTA:EncadatuboseproducirunahumedadrelativadeacuerdoalacantidaddeH2S04quecontenga.

Tubos

Humedad PesoinicialPesoluegode GananciaoPrdida


Relativa%
(g)
8dasg
deagua(g)

Pesosecoa
100Cg

PorcentajeAguaen
Baseapesoseco

10

2
3
4

17.0
76.0.
90.0

100.0

Cuadro8.Influenciadelahumedadatmosfricasobrelaabsorcindeaguaporsemillasalmacenadas.

50

Expliquelarazndelosresultados

BIBLIOGRAFIA
Pierre.W.H.,Kirkham.D.,Pesek.J.y.Shaw,.R.(Edo.)1996.PlantEnviromentandEfficient
WaltUse.4a.Reimpresin(1961).

51

PRACTICANo.23
TITULO: MECANISMOS DE ABSORCION Y TRANSPORTE DE AGUA EN LAS
PLANTAS

INTRODUCCIN.
Lasplantasllevanacabolaabsorcinytransportedeaguaatravsdedosmecanismos,
enelprimerodeelloslarazsecomportacomounosmmetrodebidoalaacumulacin
desalesmineralesenelesteledelaraz,loqueprovocaquehaya,cuandolosnivelesde
humedad del suelo lo permiten un fenmeno de osmosis. En el segundo mecanismo de
absorcin de agua se tiene que la transpiracin en las hojas provoca una tensin en la
columnadeaguadelxilema,tensinquesetransmitealolargodeltalloylarazyquejala
elaguadelsuelo,dndoseenformasimultneaunaabsorcinyeltransportedelagua

Figura6.AscensodeaguayTranspiracin

Mecanismosdeabsorcinytransportedeaguaenlasplantas.Alarazsecomportacomo
unosmmetro;B,larazyeltallopresentanunacolumnadeaguabajotensin.

En el caso de la absorcin y transporte de agua por osmosis sta debe pasar por
membranascelulares,porloquecualquierfactorqueafectelaestabilidaddeestosafecta
elprocesodeabsorcin.Porotrolado,enelcasodelaabsorcinytransporteportensin,
unodelosrequisitosesquehayatranspiracin(SalisburyyRoss.1994).

OBJETIVO
1)Demostrarlapresinradicalenlasracesdelasplantas.
2)Demostrarcmosellevaacabolaabsorcindeaguaporlatranspiracin.
3)Demostrarculessonlostejidosresponsablesdeltransportedelagua.

MATERIAL
3
Plantasdegirasol,jitomatede2mesesounaespecieleosa.
3
Mangueradeltex,trozosde5cm.
3
Tubodevidriode60100cm.
Navajadeafeitar
52

Solucindeazuldemetilenoal.0.1%
SolucindeNaCIal10%
Ligas
4Ramasdetrueno
Navajasderasurar
Vaselina
4Tubosdeensaye
Palitosdemaderaparaaplicarvaselina

PROCEDIMIENTO
Presinderaz.Seleproporcionarntresplantasdejitomate,girasolounaleosa.Riegue
abundantementecadaunadelasiguienteforma:
a)Aguadelallave.b)Solucin10%deNaCI

Corte el tallo a tres cm del suelo y elimnelo. Coloque sobre cada mun un trozo de
manguera de ltex del dimetro del tallo y amrrelo. Agregue unas gotas de azul de
metileno y conecte despus un tubo de vidrio en el otro extremo de la manguera,
amarrndolobien.

Figura7.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar

Para mantener el tubo capilar en posicin vertical, sujtelo a un palito de madera


enterradoenelsuelodelamismamacetaoaunsoporteuniversal.Cada15minutosmida
ladistanciarecorridaporlasolucineneltubocapilarhastacompletar60min.
Vuelva a medir a las 2 y 3 horas despus de efectuado el experimento (Fernndez y
Johnston, 1986). Anote las distancias recorridas por la solucin en el tubo capilar en el
siguientecuadro.

53

Tiempo

Distancia

Presin

15

30

45

60

120

180

Cuadro9.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar.

CalculeyanoteenlatablaanteriorencadaIntervalolapresinqueseestdesarrollando
tomandoencuentaqueacada1029.5cm(aprox.)correspondeunaatmsfera.
B)Tensinportranspiracinytejidosconductores.
Tome cuatro ramas de trueno que se hayan conservado en agua. Crteles un poco del
tallo y vuelva a colocarlas en el agua. A dos de las ramas elimneles 3 cm de corteza a
partirdelazonadelabase.
Sumerjalasramasentubosdeensayoconaguaconformealossiguientestratamientos:
a)Ramatestigo,sinvaselina.
b)Ramacubiertaconunabolsadeplstico.Tallosinvaselina.
c)Ramaconvaselinaenlacorteza.
d)Ramaconvaselinaenlamadera.

Midaelconsumodeaguaatravsdelaalturadeestaeneltubodeensayo.
Comparelostratamientos.

BIBLIOGRAFA.
Fernndez.G.yM:Johnston.1986.FisiologaVegetalExperimental.Inst.Interamericano
deCooperacinparalaAgricultura(IICA),SanJos,CostaRica

54

PRACTICANo.24
TITULO:ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN

OBJETIVO
Comprobar la actividad osmtica de la sacarosa (un cristaloide) en comparacin con el
almidn(uncoloide).

MATERIAL
Almidndeyuca
Sacarosa(azcarcomn)
Doszanahoriasgrandes
Dosbeakersde100mlorecipientessimilaresCuchillo
Esptula.

PROCEDIMIENTO
Por el extremo ms grueso de las zanahorias haga un hueco cnico de 3 a 4 cm de
profundidad en el corazn de cada una de ellas, dejando paredes delgadas
(aproximadamente 0.5 cm de espesor) pero cuidando de que no sean perforadas por el
cuchillo.

Lleneelhuecodeunazanahoriaconazcaryeldelaotraconalmidnyluegocolquelas
verticalmenteenvasosobeakers.Anotaloscambiosquesufrenlaszanahorias,elazcary
elalmidn.

Tiempo
Zanahoriaconsacarosa
Zanahoriaconalmidn
2horas
1da
3das

Cuadro10.Actividadosmticadelasacarosayelalmidn

Presenteunadiscusindelporquedelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
delsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacinTcnicaalusuario,hojade
Divulgacin.No.21,Mxico.

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

55

PRACTICANo.25
TITULO:REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA

OBJETIVO
Demostrar que el agua se mueve de sitios de almacenamiento a las hojas cuando las
condicionesasloexigen.

MATERIAL
1ramadenaranjaconfrutos.
1ramadenaranjasinfrutos
1calibradortipovernier

PROCEDIMIENTO
Deje en las dos ramas aproximadamente el mismo nmero de hojas y colquelas en un
lugardellaboratorioparaquesemarchiten.
Tomeeldimetrodelosfrutos.
Observecualdelasdosramassemarchitprimero
Durante los siguientes das vuelva a tomar el dimetro de los frutos para comprobar si
hubocambios.

Inicial2o.Da4o.Da8o.Da

Dimetro

Cuadro11.Redistribucindeaguaenelinteriordelaplanta

BIBLIOGRAFIA
Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

56

PRACTICANo.26
TITULO:ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS

INTRODUCCIN
Desdequeseiniciaelprocesodegerminacindelassemillas,seestableceuncontinuode
aguaentreelsuelo,elsistemacapilardelasplantas(tejidovascular)ylaatmsfera.Este
continuoesdinmicoysigueunpatrnparecidoalde"fuenteydemanda",endondeel
sueloeslafuenteprincipalylaatmsfera,lademandadeagua.
Emovimientodeaguaatravsdeestostressistemas(suelo,plantaatmsfera),obedece
alosplanteamientosdelasegundaleydelatermodinmica,lacualestablecequeelagua
siempresedesplazarhaciaabajodelas"colinas",esdecir,deunareginendondetiene
una gran energa potencial a otra regin de menor energa potencial, provocando una
disminucin de energa potencial. Por tanto, la energa potencial del agua en el suelo y
alrededordelasraces,esmayorquelaenergapotencialenlashojasyenelaire.
Para evitar hablar de energa potencial, los fisilogos vegetales hacen referencia al
conceptode"potencialdeagua"expresadoconlaletragriegapsi().Detalmaneraque
ahoraelflujodeaguasellevaracabohaciaabajodeungradientedepotencialdeagua.
Esimportanteaclararqueungradientedepotencialdeaguaexistesiempreycuandoel
potencial de agua en un punto es diferente del potencial de agua de otro punto. El
potencial de agua es un concepto termodinmico relacionado al potencial qumico del
agua,asuvez,sterelacionadoalaenergalibredelagua.
Las diferencias de potencial de agua (A) determinan el movimiento del agua en el
sentido: sueloplantaatmsfera, aunado a las fuerzas de cohesin de las molculas de
agua,lascualespuedensoportarunafuerzadetensinhastade350bariasprovocadapor
lacontinuaevaporacindelaguaenlashojasypermitenquelascolumnasdeaguaenel
sistemavascularnoserompan.

OBJETIVO
Demostrarqueelascensodeaguaenlasplantassepuedeexplicarenlamismamanera
queelmovimientodeaguaenunsistemafsico.

MATERIAL
Soporteuniversal
Probeta
Manguera capilar de 0.1 mm de dimetro, copa porosa (sta puede ser de barro o
parecidaalasqueseusanenlaspeceras).

PROCEDIMIENTO
Arme su dispositivo, pegue la copa porosa a la manguera capilar del largo que desee.
Compruebequeformauncontinuo,sumergiendolapartelibredelamangueraenaguay
succionandoporlacopaporosa.
Despus,coloquelapartelibredentrodelaprobetagraduadaylapartedelacopaporosa
sostngalatanaltocomoseaposibleconlaspinzasdelsoporte.Llenelaprobetaconagua,
lacolumnadelamangueraylacopaporosaporsuccin.Unavezlogradoesto,marqueel
57

niveldelaguaenlaprobetaytomelecturasdelaprdidadeaguaendiferentesintervalos
(porejemplo,cadadosotreshoras).Sidesea,creecondicionesextremasparafavorecer
eldesprendimientomsrpidodemolculasdeaguadelacopaporosa,seamedianteun
ventiladoroincrementandolatemperaturadellugar.Anotelavelocidadconqueelagua
es absorbida y desprendida. Fije condiciones extremas con el fin de saber si es posible
romperlacolumnadeagua.
Elaboregrficoscondatosquemuestrenlaprdidadeaguaporlacopaporosa,debidoa
losdiferentestratamientosquehayaestablecido.

Fig8.Dispositivoparademostrarelascensodelaguaenlasplantas.

BIBLIOGRAFIA
Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de
FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde
laOEA.CECSA,Mxico,DF.

58

PRACTICANo.27
TITULO:MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN

INTRODUCCIN
Latranspiracinfueunodelosprimerosfenmenosfisiolgicosdescritosenplantas.Se
puede definir como la prdida de agua en forma de vapor que ocurre en las plantas;
depende del suministro de energa y del gradiente de presin entre la superficie
evaporanteyelaire.
Se puede considerar a la transpiracin como el proceso dominante en las relaciones
hdricasdelasplantas,debidoaqueproduceelgradientedeenerga,principalcausadel
movimiento de agua dentro y a travs de la planta y, por lo tanto, controla la tasa de
absorcin y el ascenso del agua. La tasa de transpiracin depende del suministro de
energa para evaporar agua, el gradiente en concentracin o presin de vapor y la
magnituddelaresistenciaalolargodeltejidovasculardelaplanta.
La transpiracin o evaporacin de agua se puede llevar a cabo a travs de lenticelas,
estomas y de la cutcula de las hojas. Sin embargo, la mayor parte del vapor de agua
escapaatravsdelosestomasdelashojas.
Seempleandiferentesmtodosparadeterminarlatranspiracinpero,engeneral,todos
ellosestimanelcambiodepesoolaprdidadevapordeaguadeunaplantaodealguna
partedeella.

OBJETIVO
Estimar la transpiracin en diferentes especies de plantas mediante cinco tcnicas
diferentes.

MATERIAL
Plantasdejitomatecalabaza,tabacouotrotipo
Balanza,campanadevidrio
Manguera
Clorurodecalcioencartuchos
Bombapequea
Clorurodecobaltootiosanatodecobalto
Portaobjetos,tirasdepapelengomado
Estufa
Pipetagraduadade2ml
SoporteconpinzasytirasdepapelfiltroWhatmannm.1.

PROCEDIMIENTO
Prdidaenpesodeunaramadurantedeterminadoperiodo
Cortedosramassemejantesdecualquieradelasplantassealadas.Selleconparafilmu
otro material la parte en donde se hizo el corte. Pese inmediatamente y anote la hora.
Coloque la rama en las condiciones que desee de humedad relativa, temperatura, luz,
etctera. Cada cinco minutos pese hasta completar 30 minutos. Grafique tratamientos
59

contrastantes utilizando prdida de peso cm2 de hoja contra tiempo. Como ejemplo de
condiciones contrastantes se sugieren las siguientes: con luz, con alta o baja humedad
relativa,altaobajatemperatura,etctera.
Transpiracinporunaplantacrecidaenmaceta
Serequierenplantasdejitomate,tabacouotrotipo,crecidasenmacetas.Riguelasbien.
Cubraconunplstico,papelaluminiouotrotipodematerial,lapartedesueloqueest
en contacto con el aire y deje libre nicamente el tallo. Despus, pese la maceta con
planta,anoteestepesoinicial.Coloquelaplantaenunlugarsoleadoypselacadahora,
hasta que se oculte el sol. Grafique entonces la cantidad de agua que pierde cada hora
contralahoradelda.

Si lo considera conveniente, compare dos macetas, cada una en condiciones


contrastantes.
Clorurodecalciocomocolectordeaguaquesetranspira.
Coloqueunaovariasplantasdentrodeunacampanaypermitaqueunacorrientedeaire
fluyaimpulsadaporunabombapequea.Alsalirelairedelacampanallevarconsigoaire
hmedoproductodelatranspiracin.Esteaire,alpasarporloscartuchosdeclorurode
calciosesecar.Comoseanotelpesoinicialdeloscartuchos,ladiferenciaconelpeso
inicialdespusdeunahora,darideadelacantidaddeaguatranspirada.Elexperimento
puederealizarsetanrpidocomosedeseeyexpresarsecomomgH2/cm2dereafoliar/h.
Sepuedeponerunatrampadehumedadantesdequeelairelleguealacampana.

Figura9.Sistemaparamedirlacantidaddeaguaquesetranspira.

Seutilizaclorurodecalcio.
Clorurodecobaltocomoindicadordeaguatranspirada
Este mtodo se basa en la propiedad del CoCI2 para cambiar de azul a rosa
reversiblemente de acuerdo con la humedad existente. Esta tcnica semicuantitativa
indica el grado de apertura estomtica, si se acepta que por ah se pierde la mayor
cantidad de agua. Henderson cre una gama de tonos que van entre el azul y el rosa,
usandoazuldemetilenoyeosina.UsetirasdepapelWhatmannm.1quesetiancon
CoCI2 durante breve tiempo y se almacenan en un lugar fro y seco. Para usarlas,
60

colquelas apoyadas con pana objetos y stos con papel engomado. De acuerdo con la
transpiracin,lospedazosdepapelcambiandecolordeazul,cuandoestnsecos,arosa,
cuandosehumedecen;anoteeltiempoquetardanencambiardecolor.

Papeldeclorurodecobalto

Portaobjetos

Figura10.Medicindelatranspiracinempleandopapeldeclorurodecobalto.

Medicindelaguatranspiradaconunpormetro.
Utiliceplantastrgidas.Hagauncortebajoelaguaenlabasedeltallooramaeinsrtela
inmediatamenteenlamanguera(figura11).Procurequequedeunaburbujadeaireoque
elaguadelapipetaseestabiliceenunaporcinlegible.Sealesumomentoceroconun
cronmetro y anote a intervalos la cantidad de agua que consume. Finalmente, mida el
reafoliarytraceunagrficademl.deH2Ocm2dehoja,contratiempo.

61

Figura11.Pormetrosencilloparamedirlatranspiracin.

BIBLIOGRAFIA
Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.
Trillas,Mxico.

62

PRACTICANo.28
TITULO:TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD

INTRODUCCIN
Se presenta un dilema a nivel estomtico debido al sistema de cierre y apertura. Si los
estomassemantienenabiertos,sepierdeagua,perohaymsdisponibilidaddebixidode
carbono(CO2).Siporelcontrariosecierran,laprdidadeaguaesmnima,perolafijacin
deCO2prcticamenteseanula.LosestomascomosensoresidealesdenivelesdeCO2se
abren o cierran, esto depende de la disponibilidad de este gas, como ya se indic.
Tambinlosnivelesdeaguaendgenospuedenafectarelgradodeaperturaestomtica.
Surgenuevamenteeldilema:prdidadeaguamenosfijacinCO2oahorrodeaguaiguala
pobreza de fijacin de CO2. Existen aparatos capaces demedir el nivel de CO2 fijado, se
conocenconelnombredeIRGA(analizadordegasesenelespectroinfrarrojo).

PROCEDIMIENTO
Elprincipiobsicodelaconstruccindeestosaparatoseselsiguiente.Lasmolculasde
gasqueestnconstituidaspordiferentestomos(heteroatmicas),absorbenradiacinen
laregindelespectroinfrarrojoycadagastieneunespectrodeabsorcincaracterstico.
Se ha utilizado el IRGA para identificar y cuantificar una amplia gama de molculas
heteroatmicascomo:CO2,CO,S02,H2O(vapordeagua)ehidrocarburosgaseosos.La
bandademayorabsorcindelCO2esten =4.25 mconunpicosecundarioen =2.66,
2.77Y14.99J. mUsualmente,lanicamolculaheteroatmicapresenteenelaireconun
espectro de absorcin que se sobrepone con el de CO2 es el del vapor de agua (H2O);
ambasmolculasabsorbenradiacininfrarrojaenlareginde2.7 m,portalmotivo,se
necesitahaceralgunasmodificaciones,comoyasemencion,parapoderdiferenciarlas
dos molculas. La tcnica para estimar la tasa de fijacin de CO2 prdida de agua
consisteenenclaustrarlaplantaopartedeella,enunacmaraquepermitacontrolarel
flujo de gas que entre y/o salga. Dicha cmara debe estar hecha de tal manera que
tambinpermitamantenerunatemperaturaconstanteyelpasodeluzlomscercanaal
espectronatural.
Debeintroducirseporlasvlvulasdeintercambiogaseosounflujoconstantedelcualse
conoceelniveldehumedadydeCO2almicroambientedelaplanta.Lacalidaddeflujola
alterarnicamenteeltejidovegetal,quealserllevadofueradelacmara(flujodesalida
IFsl),seestimarelgradodecambioconrespectoalflujodeentrada(Fe),detectadosen
elIRGA.
Demaneraque:
Flujodeentrada(Fe)=CO2yhumedadconocidos
Flujodesalida(Fs)=CO2yhumedadconocidos
FsFe=a)DiferenciaenlosnivelesdeCO2
=b)Diferenciaenlosnivelesdehumedadrelativa
SilosnivelesdeCO2enelFssonmayoresqueenelFe,entoncesseestarenposibilidad
dedecirquehaydesprendimientodeCO2poreltejido(porejemplo,enlaobscuridad).En
caso contrario, se podr decir cunto CO2 se est fijando por el tejido vegetal (por
ejemplo,CO2cm2delminafoliar).
63

De la misma manera, se puede estimar la humedad que se est perdiendo por


transpiracin.
Lospasosquesesiguenparadeterminarlatranspiracinsonlossiguientes:

1.Humedaddesalidahumedaddeentrada=D
2.DXvelocidaddeflujo=E
3.EX60(min.)=F(mgH2O/h)
4.F=reafoliar=G(mgH2Odm2/h)
5.G=360000=H(mgH2Ocm2/seg.)=velocidaddetranspiracin

BIBLIOGRAFIA
Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.

64

PRACTICANo.29
TITULO:FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION

INTRODUCCIN.
La transpiracin est controlada por tres factores: a) el gradiente de presin de vapor
entre la hoja y la atmsfera, b) la resistencia que ofrezca la hoja y c) la resistencia que
ofrezcaelaire.Elgradientedepresindevaporqueexisteentrelahojaylaatmsferaes
muyfuerteydependemsquenadadelatemperaturadelmedio,queasuvezcontrolala
humedadrelativa.Esporestoquecuandoaumentalatemperaturasepresentatambin
un Incremento de la transpiracin: La resistencia de la hoja tiene varios componentes,
siendodos,delosprincipaleslacutculaylosestomas.Deestasdos,laresistenciadelos
estomasesvariable,yaquepuedenocurriraperturayelcierredestos(Kramer.1974).El
funcionamiento de los estomas est controlado bsicamente por los niveles de
hidratacin de sus tejidos y por los niveles de CO2. Otros factores que influyen en el
comportamiento de los estomas, como la luz, temperatura y viento lo hacen
indirectamenteatravsdelosdosmencionadosanteriormente(SalisburyyRoss,1978).EI
ltimofactoreslaresistenciaqueofrezcaelaire,determinada.porladenominadacapa
limtrofe. La capa limtrofe es una capa de aire que rodea a la hoja y que tiene
propiedadesdiferenteslasquepresentaelesto,delaatmsfera.Principalmentetiene
mayorcontenidodehumedadymenorconcentracindeCO2.Aslapresenciadeunacapa
limtrofebiendefinidapuedeImpedirenciertogradolatranspiracin.Sistadesaparece,
lo que ocurre cuando hay viento, aumenta la transpiracin (Kramer. 1974). La mayor
cantidaddeaguasepierdeatravsdelosestomas.
Comopodemosverlainfluenciadefactorescomolaluz,temperaturaoelvientosobrela
transpiracinocurreavariosniveles.

OBJETIVO.
Determinar la velocidad de transpiracin en varias condiciones del medio ambiente
(Temperatura,vientoyluz).

MATERIAL
4Potmetros
1Calefactor
3Termmetros
1Ventilador
1Lmpara
Ramasdeunaplanta(trueno,etc.)

Parallevaracabolamedicindelatranspiracinseutilizarunpotmetro.Notequeen
esteaparatosemideelaguaabsorbidaatravsdeltallopero,comosabemoslacantidad
deaguatranspiradacorrespondealaguaabsorbida.Elpotmetroqueseutilizaraques
eldiseadoporCocklin(1973).(Figura11).

Sigalosincisosacontinuacin:
a)MonteeldispositivodelaFigura11tantasvecescomocondicionesdelmedioquevaya
aprobar.

65

b) Verifique en cunto tiempo la rama consume 0.2, 0.4 Y 0.6 ml de agua para cada
condicin del medio ambiente en los casos que se requiera, mida la temperatura (luz,
medio ambiente, calefactor). Repita 2 3 veces el ensayo y obtenga un promedio de
tiemporequeridoparaconsumir0.2mldeagua.

Conlosdatosdevolumendeagua,tiempoyreafoliarcalcule,paracadatratamientola
cantidad de agua perdida por unidad de superficie foliar por unidad de tiempo. Para la
determinacindelreafoliardelasramasutiliceunplanmetroomidaellargo(L)yel
ancho(A)decadahojaycalculeelrea(A)conlasiguienteecuacinA=LxAx0.68llene
consusdatoselsiguientecuadro.

TRATAMIENTO

TRANSPIRACIONml
AGUA/cm2/t

mlDEAGUA

TIEMPO

AREAFOLIAR

Testigo

Calefactor

Luz

Ventilador

Cuadro12.Transpiracinenvariascondicionesdelmedio

Discutasusresultadosdeacuerdosilainfluenciaquepresentecadafactor.

Actividadparalela
Comoactividadparalelaaestapracticapuedenobtenerimpresionesdelosestomasdela
planta que se est trabajando. Estas impresiones pueden lograrse usando barniz
transparente de uas, colodin, etc. En este caso de se recomienda el mtodo de E.M.
Engleman(nopublicado)queusaelpegamentodenominadoKolaloka.Secolocaunagota
delpegamentoenunportaobjetoslimpio,seoprimestecontralasuperficiedelahojay
se deja secar durante 5 minutos. Desprenda el portaobjetos. Observe al microscopio.
Puedenhacersepreparacionesdelhazydelenvsycompararlas.

BIBLIOGRAFA.
Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant
Physlology.ASELab.Books.London.

Kramer,P.J.1974.RelacionesHdricasdeSuelosyPlantas.EDUTEX.Mxico.

Salisbury,F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.

66

PRACTICANo.30
TITULO:RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS

INTRODUCCION
Larespiracineselprocesodeoxidacindediversossustratos(almidn,sacarosauotros
azcares, grasas, cidos orgnicos y, en ciertas condiciones, Incluso protenas, pueden
servircomosustratosrespiratorios)paraproducirCO2,H2Oyliberacindeenerga.Parte
de esta energa se pierde en forma de calor y parte se almacena en forma de ATP,
compuestoqueseutilizaendiversosprocesos,comoelcrecimientodelaplanta(Salisbury
yRoss,1994).
Cuandolassemillassesometenalprocesodehidratacinygerminacinpresentanporlo
regular,encuantoahidratacinyrespiracin,unpatrnsemejantealdelaFigura1(Ting,
1982).

Estecomportamientosehadivididoentresfasesyson:
ProcesofsicodehidratacinImbibicin.
Estabilizacindelpeso,iniciodemetabolismocelular,aumentodelarespiracin.
Iniciodelagerminacin,crecimientoderadiculasereiniciaabsorcindeagua.

OBJETIVO.
Determinar la velocidad de respiracin de las semillas en diferentes tiempos de
imbibicin.

MATERIAL
Semillasdechcharo,frjol,etc.2030gcon0,24,36Y48horasderemojo.
Aparatoderespiracin(verFigura12)
Hidrxidodebario0.025M
HCL0.1N
Indicadordefenoftalena
Bombadevaco

Buretade50ml
Soporteuniversalypinzasparabureta
Bombadevaco
MatrazKitasato2
Tapndehule,perforado2

PROCEDIMIENTO
A travs de la bomba de vaci (Figura 12) arrastre el aire del fondo del matraz durante
1.52horas.Agregue50mldeBa(OH)a0.025 Menelotromatraz.Agregueunas34
gotasdefenoftalena.ElCO2delarespiracinsecombinaconelBa(OH)2enlasiguiente
relacin:

Ba(OH)2+CO2BaCO3+H2O
67

Despus de transcurrido el tiempo pertinente titule con NaOH 0.1 N la cantidad de


Ba(OH)2quesobr.Monteundispositivoigual,perosinsemillas;estesereltestigo

Figura12.Dispositivoparamedirlarespiracinporarrastredegases

CalculeelCO2desprendidoatravsdelasiguientefrmula:

Respiracin=(mgCO2min_1g1)(mlHClcontrolmlHCsemilla)x2(Tiempoxpesodesemillas)1

Comparelosresultadosparacadatiempoderemojo.

BIBLIOGRAFA.
Machies, L. and J. G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant
Physiology.W'.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

Roberts, J. Y D.G. Whitehouse. 1976. Practical Plant Physiology. Laboratory Manuals.


LongnonGroup,GreatBritain.155p.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

68

PRACTICANo.31
TITULO: RESPIRACION LA PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA DETECTAR LA
ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS.

INTRODUCCION
Se puede definir como germinacin en una semilla al inicio del crecimiento activo del
embrinqueresultaenlarupturadelatestayemergenciadelanuevaplanta.
La viabilidad se puede definir como el grado en el cual una semilla est viva,
metablicamenteactivayposeelasenzimascapacesdecatalizarlasreaccionesnecesarias
paralagerminacinycrecimientodeIaplntula.
Existen varias pruebas para determinar la viabilidad de las semillas, dentro de stas la
prueba del tetrazolio es ampliamente utilizada y es un medio preciso de estimar la
viabilidad de las semillas. Este mtodo se desarroll en los 1940 en Alemania, por el
profesorGeorgeLakonyyactualmenteesunapruebaderutinaenmuchoslaboratoriosde
semillas.Lapruebadeltetrazoliodistingueentretejidosviablesymuertosdelembrinen
baseavelocidadesrelativasderespiracin,cuandolassemillasestnhidratadas.Aunque
sonvariaslasenzimasqueseactivandurantelarespiracin,lapruebautilizalaactividad
de las deshidrogenasas como un ndice de la actividad respiratoria y viabilidad de la
semilla. Las deshidrogenasas actan en reacciones de xidoreduccin permitiendo la
liberacindeioneshidrgenoquepuedenreaccionarconlasolucinoxidadaincolorade
saldetetrazoliolacualcambiaaformazn(colorrojo)cuandosereduceporlosionesde
hidrgeno.
Laviabilidaddelassemillasseinterpretadeacuerdoalpatrntopogrficodetincindel
embrineintensidaddelacoloracin.

OBJETIVO.
Obtenerelporcentajedeviabilidadygerminacindelaespecieasignada.

MATERIAL
3Cajaspetri
Solucindeclorurodetetrazolioal0.1%
Semillasdeespeciesdeclimatempladoydeclimaclido
1Frascodevidriocontapa
1Pinzadediseccinoagujadediseccin.
1Microscopioestereoscpico.
1.Utilice3gruposde50semillas.Enelcasodesemillasgrandesutilicesolamente25.

PROCEDIMIENTO
2.Primergrupodesemillas.
2.1. Al primer grupo djelo en Imbibicin durante 24 hrs. Despus de transcurrido este
tiempo corte longitudinalmente la semilla abarcando el eje del embrin; deseche una
mitadylaotracolquelaenunacajadepetriquecontenga3mIdesolucindeclorurode
tetrazolio.Elejedelembrindebeestarencontactoconlasolucin.
69

2.2.Despusdeunahoraconunaagujadediseccinoconunapinzavolteelamitaddela
semillayobservesisehacoloreado.Cuenteelnmerodesemillascoloreadas.Obtengael
%deviabilidaddelasiguientemanera:

%deviabilidad=No.desemillascoloreadasx100x(No.totaldesemillas)1

3.Segundogrupodesemillas.
3.1. Desinfecte sus semillas. En un frasco de vidrio con una solucin de hipoclorito de
calcio al 3% deposite sus semillas, cierre el frasco agite y desheche la solucin del
hipocloritoylaveconaguaesterilizada23veces.
3.2.Enunacajadepetriesterilizadalacualtendralgodntendr5mldeaguatambin
esterilizada,coloquesussemillasdistribuyndolasadecuadamente.
3.3.Etiquetesucajadepetriconsugrupo,equipoyespecialidad.Colquelaenunaestufa
a2Cunloteyotrolotedjeloatemperaturaambiente.
3.4.Observesumaterialdiariamenteyanoteelnmerodesemillasgerminadasporda.
Aada agua segn sea necesario. Con sus resultados elabore una grfica (tiempo vs.
nmerodesemillasgerminadas).
3.5.Unavezteniendolasumadelassemillasgerminadas.Obtengael%degerminacin
delasiguientemanera:

%germinacin=No.desemillasgerminadasx100(No.totaldesemillas)1

Comparelosvaloresde%deviabilidadygerminacin

BIBLIOGRAFA
Ross,C.W.1974.LaboratoryPhyslologyLaboratoryManual.Wadsworth.Pb.Co.Belmont,
California.

Machles. L. and J. G, Torrey. 1956. Plants in Action. ALaboratory Manual of


Plant.Physiology.W.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

70

PRACTICANo.32
TITULO:RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDE
AERENQUIMAENARROZ

INTRODUCCIN.
Duranteeldesarrollodeunaplantapuedehaberocasionesenquestaestsometidaa
perodosmsomenoslargosdeexcesodeagua,loquellevaaundesplazamientodelaire
delsueloyenconsecuenciaaunafaltadeoxgeno.Lafaltadeoxigenoproduceasuvez
unainhibicindelciclodeKrebsenlarespiracinyseacumulaentoncesacidopirvico,el
cual se transforma mediante la formacin de acetaldehdo, en alcohol, finalmente si el
alcoholseacumulaenexceso,puedenalcanzarentoncesnivelestxicosqueaadanala
raz(Medina,1977).
Sabemossinembargoquelasplantasterrestrespuedendiferenciarseporsutoleranciaal.,
exceso de agua o inundacin. Este tipo de tolerancia puede ser de dos tipos: tolerancia
morfolgicaytoleranciametablica(Medina,1977).""
Conrespectoalprimertipodetoleranciapuedemencionarsequeencasitodaslasplantas
terrestreshayunflujodeO2desdelaparteareadelaplantahastalasraces,peroporlo
general en las plantas tolerantes a la inundacin la conductividad de los gases desde el
tallo hasta la raz es mucho mayor. Esta conductividad mayor se debe a que en el
parnquimadeestasracesytallossepresentancavidadesqueformancanalespordonde
circula el aire, debido a esto el tejido se describe mejor con el nombre de aernquima.
Cuando una planta crece en condiciones de falta de oxgeno se ha observado que se
presentan incrementos en los niveles de la enzima celulosa que comienza a destruir
algunasdelasclulasdelparnquimaparadarorigenalaernquima.Enconsecuenciasi
observamosunoscortestransversalesdeunarazsometidaainundacinyotrosdeuna
razconaireacin,laprimerapresentarespaciosvacoscarentesdeclulasylasegunda
presentarunparnquimauniformesinorificios.
De esta manera la tolerancia de cultivos agronmicos y hortcolas a suelos con poco
oxgeno puede depender, al menos en parte, de su habilidad para desarrollar sistemas
conductoresdeaire;sehadetectadoaernquimaencebada,trigo,maz(Kawase,1979)y
enpartesdegirasolytomate(KawaseyWhitmoyer,1980)yenarroz.

OBJETIVO.
Observarcortestransversalesdelasracesdeunaplantaresistentealainundacin(con
aernquima)ydeunaplantaconmenortoleranciaaesta(conparnquimauniformeenla
corteza).

MATERIAL
Racesdearrozcrecidoencondicionesdeinundacinydeotraespeciemssusceptiblea
esta(arrozyjitomate,porejemplo).
2Navajasderasurar.
Mduladesaucootrozosdepapa
1CajadePetri
71

1Agujadediseccin
2Portaobjetos
2Cubreobjetos
1Goteroconsolucindeazuldetoluidina
1Microscopioptico

PROCEDIMIENTO
Seleccione una porcin de raz que haya estado sometida a inundacin y otra que haya
tenidoaireacin.Colquelasenmediodedostrozosdemduladesaucoodepapayhaga
cortes lo ms fino posible con la navaja de rasurar. Monte los cortes con agua en los
portaobjetosycubreobjetos.Observelasestructuras,diferenciandounasdeotrastiendo
conelazuldetoluidina.
Esquematicelasestructurasencontradas.

BIBLIOGRAFIA.
Medina,E.1977.IntroduccinalaEcologiaVegetal.SecretaraGeneraldela
OrganizacindelosEstadosAmericanos.Washington.

Kawase,M.1979.Poleofcellulaseinaerenchymadevelopmentinsunflower.Amer.J.Bot.
66(2):183190.

KawaseyWhitmoyer,R.E.1980.Aerenchymsdevelopmentinwaerologged.plant.Amer.J.
Bol.67(1):1822.

'.:.

72

PRACTICANo.33
TITULO:TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS

INTRODUCCIN
Los estomas son poros formados por un par de clulas especializadas llamadas clulas
guardayseencuentranenlaepidermisdelaspartesareasdelamayoradelasplantas
terrestres

OBJETIVO
Dominarlatcnicadeimpresindeestomas

MATERIAL
Plantasdemazyverdolaga,portaobjetosycubreobjetosconcolalocaymicroscopio.

PROCEDIMIENTO
En el porta objeto coloque cuatro gotas de cola loca e impresione el haz de las hojas
presionando fuerte durante un minuto, posteriormente retire la hoja cuidadosamente y
procedaaobservarenelmicroscopio.
Mediante la impresin de estomas se puede observar como estn distribuidos y en que
situacin se encuentran cerrados o abiertos. Tambin se pueden calcular el nmero
promedio de estomas. En monocotiledneas se disponen en lneas paralelas y en
dicotiledneasselocalizandispersos.

BIBLIOGRAFIA
Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

73

PRACTICANo.34
TITILO:DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL

OBJETIVO
ComprobarqueelcierredelosestomasafectalaentradadeCO2,alinteriordelashojasy
sedisminuyelaintensidaddelafotosntesis.

PROCEDIMIENTO
Consultando manuales de laboratorio de Fisiologa Vegetal, disee un experimento para
comprobarlaimportanciadelosestomasenlafotosntesis
EFECTODELTIPODELUZSOBRELAFOTOSNTESIS

OBJETIVO
Determinar cual tipo de luz (segn su longitud de onda) es la ms utilizada en la
fotosntesis.

PROCEDIMIENTO
Siguiendo el mismo procedimiento del ejercicio se pide disear un experimento que
permitamedircomoseafectalaintensidaddelprocesofotosintticosegnlalongitudde
ondadeluzquerecibalaplanta.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant
Physlology.ASELab.Books.London.

74

PRACTICANo.35
TITULO:FERTILIZACINFOLIAR

INTRODUCCIN
La fertilizacin foliar es una tecnologa complementaria a la fertilizacin edfica que,
permite ajustar los requerimientos nutricionales en funcin del estado del cultivo y
aportarnutrientesenmomentosenquelosrequerimientosnopuedensercubiertospor
lacapacidaddeabsorcinodebidoalimitantesambientalestalescomounPHextremoso.

OBJETIVO
Evalulosefectosdelafertilizacinfoliarenplantasctricas

MATERIAL
Aspersora,fertilizantefoliar,aguayplantasctricas

PROCEDIMIENTO
Mododepreparacin:enunlitrodeaguaagregue50grsdefertilizantefoliaryapliquea
lasplantasquelonecesiten(ctricos).

BIBLIOGRAFIA
Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
Agrotecnica de Cu. 15 148. de Resenss, Suelos y Agroqumica. La habana. Cuba. Harl
.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355

75

PRACTICANo.36
TITULO:MADURACINDEFRUTOS

INTRODUCCIN
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,B)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la
floracin, C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas
desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica.

OBJETIVO
Estimarelperiododemaduracin

MATERIAL
Campanaybasedevidrio
Grasa
Pltanosverdesymaduros

PROCEDIMENTO
Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la
campanacongrasa,esteexperimentodemostraralacapacidadquetienenalgunosfrutos
deaportarhormonasdecrecimientoomaduracinsinnecesidadderecurriraotros.

BIBLIOGRAFIA
Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London

HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.

76

PRACTICANo.37
TITULO:POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES

INTRODUCCION

El ambiente lumnico tiene un efecto profundo sobre las plantas y en especial sobre la
estructura y el funcionamiento de las hojas. Su influencia puede ser observada a nivel
morfolgico, anatmico o fisiolgico, sea sobre las hojas que crecen en diferentes
posicionesdelacopadeunmismoindividuo,oentreecotiposdeunamismaespecieque
crecenenambientesdiferentes(Boardman1977).Estascaractersticasdistintivashansido
utilizadascomouncriteriomsparaclasificarlasespeciesforestalesengruposecolgicos
detoleranciaalasombraoengruposdesucesin.

OBJETIVO
Determinarlaposicindelosestomasenplantashidrfitas,mesfitasyxerfitas.Detal
maneraquesepuedaconocercomoelaguahasidounfactorevolutivoimportanteenla
ubicacindelosestomas.

MATERIAL
Hojasdecaf,loto(liriodeaguayhabano(neriumoleander)
placasportaobjetosycubres
zanahorias
cuchillasnuevas
platosdepetri
agujasdediseccin
microscopiocompuesto

PROCEDIMIENTO
Conayudadepedazosdezanahoriahagacortesbienfinosdelashojasdelosdiferentes
ambientesycolque1asenlosplatosdepetriconagua.Conlaagujadediseccincoloque
los cortes ms delgados en portaobjetos agregndoles una gota de agua. Pngalos en
cubreobjetosyobsrvelosalmicroscopio.
Determine la posicin de los estomas en la epidermis del haz o del envs. Ubique la
posicindelosestomasenelcasodequeseencuentrenencavidadesocriptas.
Encadacasohagadibujosilustrativosdelestomaconlacmarasubestomtica.

BIBLIOGRAFIA
Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,RinehartyWinston,New
York

77

PRACTICANo.38
TITULO:CMOCONSTRUIRUNPORMETRO

INTRODUCCIN
Existen varias tcnicas para medir la apertura estomtica. En 1901, Buscaloni seal la
tcnica de microscopia en que se utilizan rplicas de una pasta plstica que se esparce
sobre las hojas. Las rplicas se pueden examinar en el laboratorio, adems de que son
preparaciones permanentes. Esta tcnica es sencilla, aunque muy poco precisa. Su
principallimitanteesque,enmuchasocasiones,laaperturadelestoma(poro)estms
alldelalcancedelapastaplstica.

Existentcnicasindirectasparaestimarelgradodeaperturadelosestomas.Sebasanen
determinarlacapacidaddelashojas.Estasdossonmssensiblesparadetectarcambios
quelasmedicionesenelmicroscopio.
Bsicamente,existendostiposdeinstrumentosquemidenlaresistenciaoconductancia
de las hojas. Ambos se basan en la capacidad de los esto ms para conducir gases:
pormetrosdeflujodemasasypormetrosdedifusin.

Los pormetros de difusin estiman la velocidad de difusin de vapor de agua de las


cavidades subestomticas hacia la atmsfera. El mtodo consiste en aislar
momentneamente una porcin de la hoja y medir su tasa de transpiracin en
determinado ambiente. Para ello, en la hoja se coloca un sensor que responda a los
cambiosenlahumedadcausadaporlatranspiracin.

Lospormetrosdeflujodemasasfuerzanelairedelaparteexternahaciaelinteriordela
hoja.Laresistenciadestaobien,latasadeflujo,esunindicadordelaaperturaocierre
de los estomas. Este tipo de pormetros es efectivo con hojas anfiestomticas porque
cuandoelairebajopresinseaplicaaunacaradelahoja(parteabaxialoadaxial),elaire
entraatravsdelestoma,atraviesaelespaciointercelulardelmesfilo,ysaledelahoja
por los estomas del lado opuesto. Por tanto, el flujo depende de la resistencia de los
estomasdeambosladosdelmesfilo.En1911,DarwinyPertzhicieronporvezprimeraun
pormetro de flujo, prototipo de todos los pormetros, slo que la manera demedir el
flujodeaireatravsdelashojassehamejoradonotablemente.

OBJETIVO
Construirunparmetrodeflujodemasas

MATERIAL
Manguera de hule, trampa de vidrio, probeta, tubo de vidrio con un dimetro 0.5 cm,
papelmilimtrico,soporteuniversal,taponesdehule,trozosdetermmetroyplantasde
mazdeaproximadamentemesymedio.

78

PROCEDIMIENTO
Monteelpormetro,lanicasalidadelflujodeairealolargodelsistemaesatravsdel
tapn, el cual se ajustaa la hoja por medio deotro tapn horadado. Esta salida de aire
estarreguladaporelgradodeaperturadelosestomas,detalmaneraquesistosestn
totalmenteabiertos,todoelflujodeairesaldratravsdeellos,perosiestnparcialo
totalmente cerrados, el flujo de aire se desviar parcial o totalmente hacia el tubo de
vidrioymoverlacolumnadeagua.Silosestomassevuelvenaabrir,lacolumnadeagua
semoverenelsentidocontrario.

Figura13.Porometrodeflujodemasa.

BIBLIOGRAFIA
Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.
Trillas,Mxico.

79

PRACTICANo.39
TITULO:DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPOREL
METODODEMORGAN.

INTRODUCCIN.
Losanlisisdesalesmineralesenelsueloylostejidosvegetalespuedenayudaradeterminar
siunaplantatieneunsuministroadecuadoparasatisfacersusnecesidadesypueden,adems,
evitareldesperdiciodelosmaterialesfertilizantes(Luntetal.,1965).
EnelcasodelosanlisissemicuantitativosdeMorgansemidenlacantidaddesalessolubles
tanto del suelo como de los tejidos vegetales; este ltimo caso es posible debido a que las
plantas absorben mayor proporcin de nutrientes de los que requieren siempre y cuando
stosexistanencantidadesaltas.Estopermiteunaacumulacin,(CookyMiller,1949).Enel
mtododeMorganelplangeneralesobtenerunextractodelsueloodelostejidosvegetales,
transferirpequeascantidadesaunaplacadevidriooatubosdeensayeyagregarreactivos
apropiadosparadesarrollaruncolorounaturbidez,segnlapruebadequesetrate(Luntet
al.,1965).Paracalcularlacantidaddesalesmineralessediseounatablade4coloresode4
lineasdevisibilidad(vermasadelante)queIndicanotrostantosrangosdeconcentracinen
ppm.Deestemodoelcolordesarrolladoolaturbidezdenuestroextractopuedecompararse
con las tablas. Es posible disear tablas que Incluyan ms o menos pasos a la escala de
acuerdoalaexactitudquesedesee(Luntetal.,1965).
Una de las aplicaciones del mtodo del anlisis del suelo ser el clculo de las dosis de
fertilizacintalycomolohizolaSARHenunfolletopublicadoen1977(SARH,1977).Endicho
folletoseutilizansolotresvaloresenlaescaladeconcentracionesdeloselementosyseles
denomina B, M y A (Bajo, Medio y Alto). De acuerdo a sto al analizar el suelo en los
elementosN,PyKlasconcentracionesdelosmismospuedentenerlosvaloresbajo,medioy
alto.
LoimportanteyqueinteresaresaltaraquesqueenelfolletoseIncluyeunatablaqueindica,
paradiferentescultivosladosisdeKgdeelementoquedebenaplicarseporhectrea(Cuadro

1)paracadacondicin.

CULTIVO

CULTIVO

B7127

B712

FRESA

M5105

GLADIOLA

M5105

A040

A000

B4106

B101210

FRIJOL

M084

LINAZA

M68

A040

A44

B4106

B126

GARBANZO

M084

MAIZ

M1050

A040

A 64 0

ANALISISNPK

ANALlSISNPK
7

Cuadro13.DosisdefertilizacindeacuerdoalasproporcionesdaN.PYKexistentesenelsuelo.
Cadavalordebemultiplicarsepor10yalresultadoIndicaalnumerodekgdelelementoque
debenagregarseporha(SARH.1977)
80

Si se habla del muestreo de los tejidos es til recordar que existen cuadros donde se
indican las partes ms convenientes que deben muestrearse en diferentes cultivos. Un
ejemplodestoeselCuadro14.

CULTIVO

NITRATO

FOSFORO

POTASIO

MAIZ

Tallocercadelsuelo

Tallocerca

laminade

delsuelo

lahoja

Pecolodelahoja

FRIJOL

Pecolode

pecolode

lahoja

hoja

Pecolodelahoja

FRIJOLSOYA

Pecolode

Pecolode

lahoja

hoja

Pecolodelahojao
tallo

PAPA

Pecolo(dehoja

Pecolode

Pecolodelahoja

Tallo)

hojatallo

GERANIO

Pecolodehoja

Pecolodehoja

Tallo

GRAMINEAS

Tallo

tallo

Cuadro14.Partesmasapropiadasparamuestrearenalgunoscultivos(CookeyMillar,1949)

EnelcasodegramneasMorgan(Lunt,elal.,1965)recomiendaelusodelashojas.
Para mas detalles acerca de estos temas consultar a Lunt, et al. (1965), Cook y Miller
(1949)yBould(1967).

OBJETIVO
Verificar los niveles de nutrientes en el suelo y en tejidos vegetales en cultivos o en
plantasdeornato.

MATERIAL
Paraobtenerelextractodelsuelo(a)odelostejidos(b):
a)1Embudodevidrio
b)Navajaderasurar
CucharadeplsticoCarbnactivado

1Pipetade10mlTubodeensaye
Papelfiltro Embudodevidrio
GoteroPipetade10ml
SolucinextractoradeGotero
Morgan(verapndice)Papelfiltro

81

Parallevaracabolasdeterminacionesdelosnutrientesseusanlosmismosreactivospara
losextractosdelsueloydelosdetejidos.

Placaporcelanaounvidrioconfondoblanco.

2Agitadoresdevidrio

1Vasodeprecipitado250mlconaguadestilada

Toallaotrapoparasecar

2Tubosdeensayedefondoplano

Tabladeescaladeconcentraciones

ReactivoAparaNitrgenoNtrico.

ReactivoBparaNitrgenoNtrico

ReactivodeNessierparaNitrgenoAmoniacal

ReactivoAparaFsforo.

ReactivoAparaPotasio

ReactivoBparaPotasio.

ReactivoparaCalcio

ReactivoAparaMagnesio

ReactivoBparaMagnesio(verapndice).

PROCEDIMIENTO
ObtencindelExtracto.
Paraelsuelo:
a)Coloqueelpapelfiltroenelembudo.
b)Agregueunacucharaditarasadesuelo.Depreferenciasecadoalsol,nuncaenlaestufa.

c)Agregue10mldesolucinextractoradeMorgan.Djesefiltrartodoellquido.
a1retirarelfiltrodelembudocomprmasesuavementeparaextraertejidoelliquidoque
seaposible.
d) Quite el embudo y ponga el gotero en el recipiente donde se haya recibido el
extracto.Paralostejidos
a)Cortarlamuestrafinamenteconlahojaderasurar.Mezclarbienelmaterial.
b)Tomarconunacucharitaunamuestradelmaterial(unvolumenaproximadode2.5 ml)
yponerloenuntubodeensaye.

c)Agregar7.5mldelasolucinextractoradeMorgan(9mlparapastos)ylapuntadeuna
cucharaditadecarbnactivado.Seagitadurante1minutoysefiltra.Estasolucinseusa
en los ensayos de la misma forma que los extractos del suelo. La nica diferencia es al
utilizarlastablasyaqueenelcasodelasmedicionesdlosextractosdetejidosvegetales
losvaloresobtenidosdebenmultiplicarsepor3yparapastosmultiplicarsepor3.6(Lunt
etal.,1965).

Estimacionesdelassalesminerales.

NitrgenocomoNitrato:
Ponga 3 gotas del extracto del suelo en una depresin de la placa. Agregue 2 gotas del
Reactivo A para nitratos y 7 gotas del Reactivo B. Mezcle bien. La lectura debe hacerse
82

inmediatamenteounoscuantossegundosdespusounavezquehayantranscurridode
12a15minutos.Compareloscoloresconlalminacorrespondiente.

NitrgenoAmoniacal:
Ponga 4 gotas del extracto en la placa, agregue gotas del reactivo de Nessier y deje
reposarunminuto.Agiteycompareelcoloramarilloyanaranjadoresultanteconlaescala
decolorescorrespondiente.

Fsforo:
Ponga 10 gotas del extracto en la placa. Agregue 1 gota del reactivo A y 2 gotas del
reactivoB.Agtese,dejereposar1minuto(nomsdeesto)ycomparelaintensidaddel
colorconlaescalacorrespondiente.

Potasio:
Ponga10gotasdelextractoeneltubodefondoplano,agregue1gotadelreactivoAy12
gotas del reactivo B. Djese reposar 1 minuto, agtese suavemente y mantngase en
reposootros2minutos.Estimelacantidaddeprecipitadoamarilloutilizandolaescalade
comparacindeturbidezdelasiguienteforma:
Coloque el tubo de fondo plano en posicin vertical directamente sobre las lneas de la
escalayaunadistanciade6.2mmdelasmismas.Vaseporencimadeltubocomparando
con los diferentes grupos de lneas hasta encontrar el grupo que apenas se perciba la
cantidaddepotasioeslaquecorrespondeaestegrupodelneas.

Calcio:
Ponga10gotasdelextractoeneltubodefondoplano,agregueunagotadelreactivopara
calcio, agite vigorosamente y deje reposar 5 minutos. Estime la turbidez en la misma
formaqueelpotasio.

Magnesio:
Ponga10gotasdelextractoenlaplacaagregue1gotadereactivoAparaMagnesioy3
gotas del reactivo B. Agite, deje reposar 1 minuto y compare la coloracin con la escala
correspondiente.
En este ensayo slo se miden algunos elementos. Ensayos para otros elementos como
aluminio, manganeso, fierro, azufre, nitrgeno en forma de nitrito, sodio, etc., pueden
encontrarse en el trabajo de Lunt et al. (1965). Reporte sus resultados apuntando los
datosobtenidosenelCuadro1delApndice.

BIBLIOGRAFA.
Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop
Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.

Lunt,H.A.,H.G.M.JacobsonyC.L.W.Swanson.1950.ElsistemaMorganparaanlisisde
suelos.Boletn541,Mayo.EstacinAgr.Exp.ConnecticutNewHaven,USA.Estefolleto
83

fue traducido y adaptado en la UACh con el nombre de Qumica Agrcola Aplicada por
Ojeda,O.D.yDelgadodeG.Z.enelaode1965,dedondesetomaronlosdatos.

SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
delsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacinTcnicaalusuario,hojade
Divulgacin.No.21,Mxico.

Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London

ANEXOS
SolucinextractoradeMorgan
Agregue 100 gramos de acetato de sodio (NaC2H302) a 500 ml de agua (10%). Despus
quelasalsedisuelvaagregue30mldecidoacticoglacial(3%)yaforea1litro.

ReactivoparaNenformadeNitrato
Disuelva0.05gdeDifenilaminaen25mldecidosulfricoconcentrado.Gurdeseenun
gotero de color mbar. La solucin resultante no debe tener ninguna sombra de color
azul; y tampoco deber producir ninguna coloracin cuando se agreguen 4 gotas de la
mismaaunagotadeaguadestilada.Siocurreestareaccinpreparedenuevoelreactivo.
Lasolucinessumamentecorrosivaynodebeestarencontactoconhule.

ReactivoparaNenlaformadeAmoniacoReactivodeNessier
Disuelva5gdeKIen.15mldeaguadestilada.Agregueunasolucinsaturadadecloruro
mercricohastaquecomienceaformarseunprecipitado.Acontinuacinponga40mlde
solucindeNaOHal80%.Aforea100mldjeseasentarduranteunasemana,decntesey
gurdeseenunfrascodecolormbar.Dosgotasdeestereactivoagregadasa4gotasde
lasolucinextractivanodebernproducirprcticamenteningunacoloracin.

ReactivoparaFsforo
ReactivoA.Disulvase12.5gdemolibdatodesodio,calentadopocoapoco,en100mlde
aguadestilada.Mzclense50mldecidoacticoglacialcon350mldeaguadestiladaen
unvasode 600ml.Agrgueselasolucinde molibdatodesodiolentamenteyagitando
continuamentealasolucindecidoactico.Gurdeseenunfrascodecolormbar.
Estereactivonodebecontenermsdeunsedimentomuyligero.Sielmolibdatotieneuna
tendenciadefinidaaprecipitarse,deberdesecharse.

ReactivoB.SolucindeOxalatoEstaoso.Estereactivodebeprepararseenelmismoda
de su utilizacin. Marque con lpiz una lnea a una distancia de 3 a 5 mm del extremo
ancho de un palillo de dientes. Todo el oxalato Estaoso que pueda tomarse con esa
porcindelpalilloseagregaa10mldesolucindeMorgan.Mzclesebiendemaneraque
todalasalsedisuelvaperfectamenteantesdeemplearelreactivo.

84

ReactivoparaPotasio
Reactivo A. Disuelva 5 g de Nitrato de Cobalto (CoCNO3)2 CH2O) en 47.5 ml de agua
destilada y 2.5 ml de cido actico glacial. Gurdese en un frasco de color mbar.
Disulvanse 30 gr de Nitrito de Sodio (NaNO2) en agua destilada y dilyase a 59 ml
tambin con agua destilada. Gurdese en otro frasco obscuro. Mzclense estas dos
solucionesenpartesIgualesporlomenos24horasantesdeusarse.Cbraseelrecipiente
delamezclademaneraquelosgasesvenenososdexidontricopuedanescapardurante
lanoche.Fltresesiesnecesarioygurdeseenunfrascodecolormbarycontapnde
vidrio esmeralizado. Esta Solucin final de cobaltinitrito de sodio puede descomponerse
enunascuantassemanassinoseguardanenunrefrigerador.

Reactivo B. Mzclense 90 ml de alcohol isopropilico con 10 ml de formaldehdo neutro.


Consrveseestereactivoenunfrascodetapaderoscaqueajustebien.

ReactivoparaCalcio
Mezcle10gdeOxalatodeSodiocon100mldeaguadestilada.Djesereposar24horasy
decantelasolucinclaraquesobrenadaamedidaquevayanecesitando.

ReactivoparaMagnesio
ReactivoA.Disuelva0.02deTiazolamarilloen100mldeaguadestilada.Gurdeseenun
frascocolormbar.

ReactivoB.Disuelva15gdeNaOHen100mLdeaguadestilada.

85

PRACTICANo.40
TITULO:SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL

INTRODUCCION
EncuantoalosFertilizantes,stosdebenestarenproporcionesequilibradas.Elexcesode
uno puede producir la carencia o la toxicidad de otro. Un ejemplo sera la interaccin
nitrgenopotasio que, muy frecuentemente, deben estar en proporciones iguales. Otra
interaccin es la del potasiocalciomagnesio en la que el exceso de uno produce la
carenciadelosotrosdos;enmuchoscasos,deberanestarenproporciones4K:2Ca:1Mg.
El exceso de fsforo puede impedir la absorcin de zinc, hierro y cobre. Es decir, una
carencia puede ser causada por la inexistencia del elemento en el substrato o por el
excesodeotroelemento,apesarqueexistierancantidadessuficientesdelprimero.
PRIMERA PARTE: Presentacin de diapositivas correspondientes a deficiencias y
toxicidadesdenutrimentosmineralesendiferentescultivos.

OBJETIVO
Observacin de la sintomatologa de deficiencias y toxicidades de elementos minerales
encultivosdeyucaypastostropicales.

PROCEDIMIENTO
a) Presentacin de diapositivas sobre: Sntomas de deficiencia de macronutrientes y
nutrimentossecundariosenpastostropicales
b)presentacindediapositivassobre:Sntomasdedeficienciasdemicronutrientesyde
toxicidadmineralenpastostropicales
a)Presentacindediapositivassobre:"DesrdenesnutricionaldePlantadeyuca
b)Presentacin de diapositivas alusivas a sntomas deficiencias de macronutrimentos y
micronutrimentos en ctricos, caf, cacao, ajonjol, man, papa, palma africana, coliflor,
remolacha,repolloyalgunasplantasornamentales.

GUIADEDISCUSIONSOBRELASDIAPOSITIVASPRESENTADOS
1.Clasifiqueloselementosmineralessegnsumovilidadporelfloema
2.Culesdelosmacronutrimentosymicronutrimentoscausanclorosis
uniformeogeneralyculesclorosisintervienen?
3.Cmosediferencialadeficienciadenitrgenodeladeazufre?
Ladenitrgenodeladefsforo?
4.Describalossntomascausadosporlasdeficienciasdecalcioymagnesio
5.CmosediferencialadeficienciadeMndeladeFe?

BIBLIOGRAFIA
Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop
Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.
86

PRACTICANo.41
TITULO: EFECTO DE SOLUCIONES NO BALANCEADAS SOBRE EL
CRECIMIENTODEPLNTULAS

OBJETIVO
l. Observar el efecto de soluciones nutritivas no balanceadas en el crecimiento de
plntulas.
2.Comprobarelefectodelatoxicidaddesalesdemetalespesadosobre
Algunasplntulas.

PROCEDIMIENTO
Preparacindesolucionesnutritivas:
l. a) Prepare un litro de una solucin nutritiva completa. Pero en vez de 5 ml de a
disolucinmadredenitratodepotasio,agregue15ml.

b) Prepareun litro de solucin que contenga solamente 5 ml de la disolucin madre de


nitratodepotasio.
2.a)Prepareunlitrodelasolucinnutritivacompletayagregue1mldeunadisolucinde
su1fatodecobreal0.01M.

b) Prepare una solucin que consista de 1 ml de la disolucin de sulfato de cobre al


0.01M,agregadoaunlitrodeaguadestilada.

Vacelassolucionesendiferentesfrascos,coloquelasplntulasenlasranurasdedelos
tapones.

Fjelaseinserteestosenlosfrascos
Cuandoenalgunostratamientoslasplantitashayanalcanzadounaalturade20a25cm
comparesuaparienciaentodoslostratamientosyanote.Cosechelasp1ntu1asysepare
elvstagodelasraces.Midaellargodeltallojuntoconlashojasylarazmslarga.Seque
lasracesconpapelabsorbenteypselaslomismoqueelvstago.Trabajerpidamente.
Calculeelpromediodelasmedidasdelastresp1ntu1asdecadafrasco.Enformasimilar
aladelexperimentoanterior,sequelasplntulasyanoteelpesoseco.

BIBLIOGRAFIA

MULLER,L.E.Manualdelaboratoriodefisiologiavegetal.Turialba.Costarica.IICA.1964.
165p.

PEQUEO PEREZ, J. Prcticas de Fisiologa Vegetal. La habana. Cuba. Editorial pueblo y


educacin.1972.133p.

ROJASGARCIDUEAS,M. Experimentos de Laboratorio para el curso de Fisiologia


Vegetal.Monterey,Mexico.InstitutoTecnologicoydeestudiossuperiores.S.f.51p.

87

PRACTICANo.42
TITULO:CULTIVOSHIDROPNICOS

INTRODUCCION
Desdeelpuntodevistahortcola,lafinalidaddecualquiermediodecultivoesconseguir
una planta de calidad en el ms corto perodo de tiempo, con costes de produccin
mnimos. En este sentido los cultivos sin suelo, tambin denominados cultivos
hidropnicos, surgen como una alternativa a la Agricultura tradicional, cuyo principal
objetivoeseliminarodisminuirlosfactoreslimitantesdelcrecimientovegetalasociadosa
las caractersticas del suelo, sustituyndolo por otros soportes de cultivo y aplicando
tcnicasdefertilizacinalternativas.

OBJETIVO
Cultivarhortalizasenunasolucinnutricincompleta.

MATERIAL
Sustrato:arena,carbonilla,gravadero,etc.
4materasgrandesocanaletas
Solucionesnutritivas

PROCEDIMIENTO
Laveelsustratoconagualimpiavariasveceshastaqueelaguasalgaclara.Agrgueleuna
solucin de hipoclorito de sodio al 0.5% y djela por 2 horas o ms. Lave de nuevo el
sustratohastaquedesaparezcaelolorahipocloritoLlenelasmaterasocanaletasconel
sustrato; siembre las semillas previamente seleccionadas o transplante si hizo un
semillero.
Rieguediariamenteconlasolucinnutritivacompletaquesepreparasegnseindicaenel
Cuadrosiguiente:

a)Solucindeelementosmayores

Componentes

gramos/litro
_____________________________________________________________
Nitratodecalcio

0.70
Nitratodepotasio

0.65
Superfosfatotriple

0.20
Sulfatodemagnsio

0.50
______________________________________________________________

b)Solucindeelementosmenores
______________________________________________________________
Salgramos/litro
______________________________________________________________
SulfatoferrosoFeS04.7H2O
0.00273
88

SulfatodemagnesioMnSO4.2H2O 0.00564
AcidobricoH3Bo3

0.00420
SulfatodecobreCuSO4
0.00030

______________________________________________________________
Cuadro15.Preparacindelasolucinnutritivacompleta

BIBLIOGRAFIA
WITHAM, F.H. et al. experiments in plan physiology. New York, Van Nostrand Reinhold
Company.1971.245p.

89

PRACTICANo.43
TITULO:NUTRICIONMINERAL

INTRODUCCION
Las investigaciones sobre nutricin mineral han hecho muchos progresos al fabricarse
compuestosqumicosconunaltogradodepureza,almismotiempodeponerenprctica
mtodos de cultivos hidropnicos, con soluciones de composicin qumica definida, que
aseguren el crecimiento normal de las plantas y que permiten un control preciso del
suministrodeionesnutritivosalasraces.ProbablementeWoodwarden1699,realizlos
primeros experimentos en cultivo de plantas en medio lquido, sin usar ningn sustrato
slido.En1804,deSaussurerealizunodelosprimerosintentosdeanalizarlosfactores
implicados en el cultivo de plantas en medios nutritivos, estableciendo la necesidad de
suministrar nitrato a la solucin de cultivo. Determinacin de materia seca y cenizas en
tejidosvegetales.

OBJETIVO
Determinarcuantitativamentelamateriasecaylascenizasenmaterialvegetal.

MATERIALES
Bolsasdepapel
Hornoconcirculacindeaire
Balanzaanaltica
Crisolde30mls
Materialvegetal(semillas,tubrculos,hojas,etc.)
Mortero
Mufla
Acidontricoconcentrado

PROCEDIMIENTO
a)Materiaseca
Coloque100gramosdematerialvegetalfrescoquepuedeser:semillas,tubrculos,tallos
yhojasenunabolsadepapelpreviamentepesadoyllvelosaunhornocontemperatura
90100Cpor24horasohastaqueenelmaterialnohayacambioenelpeso.

NOTA:Laspesadasrespectivassepuedenhacerconelmaterialfroparalocualluegodesacarlo
delhornosedebecolocarenundesecadorparaqueenfresincaptarhumedaddelaire.

Determineelporcientodemateriasecayeldeagua.
b)Cenizas
Luego de determinar materia seca, macere la muestra en un mortero hasta que quede
finamente molida. De esta muestra tome la cantidad suficiente para llenar el crisol de
porcelana, previamente pesado, hasta las 2/3 partes. Vuelva a pesar el crisol con el
contenido. Lleve el crisol a una mufla con temperatura entre 400 y 500C Y deje el
materialhastaquelacenizaestlibredecualquiercolornegroogris.Sipersisteelcolor
90

gris, enfre, humedezca cuidadosamente la ceniza con 1 2 mls de cido ntrico


concentradoycontinecalentando.Luegodelaobtencindelascenizas,enfre(useun
desecador)yvuelvaamedirelpesodelcrisolysucontenido.
Determineelporcientodecenizas.

BIBLIOGRAFIA
Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas,
Mxico.
Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

91

PRACTICANo.44
TITULO:FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELAS
PLNTULASYLALIGNIFICACIONDELOSTALLOS.

INTRODUCCIN.
Alcontroldeldesarrollopormediodelaluzseledenominafotomorfognesis.Losefectos
de la luz sobre el desarrollo de las plantas abarcan diversos aspectos, desde la
germinacindelassemillas,elcrecimientodelasplntulas,hastalafloracinyformacin
de rganos de reproduccin y la preparacin de la planta para entrar en el reposo.
Particularmente en el crecimiento de las plntulas la influencia de la luz se ve en la
produccindeclorofila,laexpansindelashojas(enmenormedidaenmonocotiledneas
que en dicotiledneas), el tamao del tallo y las partes que crecen en el mismo, la
presencia de un gancho en el pice de las dicotiledneas (Salisbury y Ross, 1994) y la
cantidaddedepsitosdeIigninaenlasclulasdelacortezadeltallo(MaynardyBassuk,
1996).
Esteltimoaspecto,laIignificacindelasclulasenpresenciadelaluz,hasidoestudiado
en relacin a la capacidad de enraizamiento de las estacas de diversas especies. Por
ejemplo, Maynard y Bassuk (1996) mencionan que la Iignificacin acentuada y el fuerte
desarrollo de las fibras y esclereidas de la vaina perivascular de las dicotiledneas est
correlacionadaconunacapacidaddeenraizamientopobre,ocurriendoalgosemejanteen
especiesforestales,endondelasespeciesdeenraizamientopobrepresentanunafuerte
lignificacin de las fibras del floema, ms desarrollo de esclereidas un cambio menos
activo y menos clulas de los radios en crecimiento activo, lo que produce un anillo
continodeesclernquima.Sinembargosehavistoqueesteaspectopuedeser

manejadoatravsdelaetiolacin,yaqueeldesarrollodelasplantasenausenciadeluz
provoca un retraso en la formacin de las esclereidas y la disminucin de la vaina
perivascular,loquehacoincididoconunaumentodelacapacidaddeenraizamientodel
material tomado de las plantas, notndose que junto a la reduccin de estas
caractersticas hay un aumento de la capacidad meristemtica de los radios,
concluyndose de manera general que, aunque no se ha establecido la causa de este
fenmeno,alparecerhayunarelacinentrelapresenciadetejidoesclerenquimatosoyla
reduccindelacapacidaddeformarraces'(MaynardyBassuk,1996).

OBJETIVOS.
1)Evaluarloscambiosmorfolgicosydecrecimientodeplntulascrecidasenlaluzyla
obscuridad.
2) Observar las diferencias de Iignificacin de las clulas del tallo entre plantas
desarrolladasenlaluzyenlaobscuridad.

MATERIAL
Semillasdechicharo,frjolymazotrigo.
2Frascosdevidriode11.5Its.
92

Papelaluminioocartnnegro.
Navajasderasurar.
Portaobjetosycubreobjetos
Microscopioptico
Algodn

PROCEDIMIENTO
Coloqueenelfondodelosfrascosdevidriounacapadealgodn,humedzcalayescurra
elexcesodeagua.Siembrelassemillas(23dcadaespecie)ytapeunolosfrascoscon
lacartulinanegrademodoquenopenetrelaluz.Mantengalosfrascosenunsitiofresco,
donderecibanlaluzdurante1012dasalcabodeloscualesabralosfrascosytomelos
siguientesdatos:
Alturadelaplanta
Sitiosdeltalloquecrecieron(epicotlioohipocotilo)
Lugarendondeseencuentranloscotiledones(ensucaso)Anchodelashojas
Formaenlaqueseencuentraelpice.
Anchodelashojas(enlasplantasdondesepuedamediresto)Colordelaplanta.
Hagauncuadroquecomparelascaractersticasentrelasplantasdeluzysombra.

Unavez:tomadoslosdatosanterioreshagacortestransversalesdeltallodefrjoldelas
plantas de luz y sombra y observe en el microscopio ptico. Dibuje las diferencias
anatmicas entre ambos tipos de tallo. Discuta estas en funcin de la capacidad de
enraizamientodelostalloscmolostratamientosdeetiolacinseusancomomtodode
facilitarelenraizamientodealgunasespecies.

BIBLIOGRAFA.
Maynard, B.K. N.L. Bassuk. 1996. Effects of stock plant etiolation, shading, bandingand
shootdevelopmentonhistologyandcuttingpropagationofCarpinusbetulusL.fastigiata.
J.Amer.SocHort.Sci.12(5):853860.

Salisbury.F.B.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.D.F.

93

PRACTICANo.45
TITULO:EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA.

INTRODUCCION
Lacaptacindeenergalumnicalarealizaelcloroplastoatravsdebloquesdesistemas
depigmentos(clorofila,carotenosyxantofilas)denominados"antenas"queasociadoscon
protenas configuran los complejos cosechadores de luz (CCL). Las reacciones que
explicaremos a continuacin se desarrollan en sendos centros: en el fotosistema I y II,
cuyoscomponentesfotoactivossonlaclorofilaa,denominadosrespectivamenteP700y
P680.LaletraPsignificapigmentoylosnmerosserefierenalaslongitudesdeondade
laluzabsorbida

OBJETIVO
Comprobarquelaluzincidenotablementeenlamorfognesisdelasplntulas.

MATERIAL
Plntulasdemazydefrjolgerminadasen:
a)Luznormal,b)luzdeficiente,c)oscuridad.
Regla

PROCEDIMIENTO
Examineplntulasdemazyfrjolquehansidogerminadasenluznormalluzdeficientey
oscuridad.Observesucoloracinyhagamedicionesdeltallo,hojas,etc.SegnelCuadro
Siguienteparacadaespecie.

Plntula
Maz

Luznormal

Luzdeficiente

grosordeltallo

largopromediodehojascm.

anchopromediodehojas,cm.

largodelmesocotilo,cm.

Colordehojas

consistenciageneral

Frjol

grosordeltallo,Mm.

largopromediodehojas,cm.

anchopromediodehojas,c.

Cuadro16.Efectosdelaluzsobreeldesarrollodelaplntula

Hagaunadiscusindecmoafectalaluzlamorfognesisdelaplanta.

94

Oscuridad

BIBLIOGRAFIA
ALVIM,PaulodeT.cursoInternacionaldeBasesFilolgicasdelaProduccinAgrcola.Vol.
11. Practicas de Laboratorio. Lima, Per. IICA. Zona andina. 1959. (sin paginacin
consecutiva).

95

PRACTICANo.46
TITULO:ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS.

INTRODUCCION
Utilizando tcnicas cromatogrficas se han identificado un grupo de sustancias en las
plantas verdes llamadas clorofilas, siendo las representantes la a y b. La clorofila a
estaintegradaporunncleodeMg,4N,CyH.Paraquesepuedaformarlaclorofilaes
indispensablelapresenciadelFe.Lasformulasdelaclorofilason:
Clorofilaa:C55H72O5N4Mg
Clorofilab:C55H70O6N4Mg

OBJETIVOS:
Observaryanalizarlafluorescenciaylafotodescomposicindelasclorofilas.

MATERIAL
Extractodeclorofila
Fuenteluminosa:proyector
Vasodeladosplanos
Beakerde250ml.

PROCEDIMENTO
A.Fluorescencia
EnunfrascoconladosplanosviertapartedelextractodeclorofilaIlumnelopormediode
un haz paralelo (por ejemplo el que emite un proyector). Observe fluorescencia de las
clorofilas.

B.Fotodescomposicin
Compareelcolordelextractodeclorofilasconeldelextractoquehasidodejadoporms
de 12 horas a la luz. Mida en cada uno la absorbancia a 660 nm calibrando el
fotocolormetroconacetonaal80%.

Color

Absorbanciaa660nm

Extractofresco

Extractodemsde12hrs.

Cuadro17.Algunaspropiedadesdelasclorofilas

BIBLIOGRAFIA
Michell,J.W.,etal.TestMethodswithplant_regulatingchemicals.Agriculturehandbook
No.126.utitedstatesdepartmentoagiculture.Washitong,D.C.1958.68p.

96

PRACTICANo.47
TITULO: PIGMENTOS NO FOTOSINTETICOS: CAMBIOS DE COLOR DE LOS
PIGMENTOSFLAVONOIDES

INTRODUCCION
Lasantocianinas(griegoanhtos,floryciano,azuloscuro)sonpigmentoscoloreadosque
porlocomnseencuentranenfloresrojas,azulesyprpuras.Tambinsepresentanen
muchasotraspartesdelaplanta,comoenciertosfrutos,tallos,hojaseinclusoraces.Con
frecuencia,losflavonoidesseencuentranconfinadosaclulasepidrmicas.Lamayorade
los frutos y muchas flores deben sus colores a las antocianinas, aunque algunos, como
varias flores amarillas y los frutos del tomate, son coloreados por carotenoides. Los
coloresbrillantesdelasenotoosedebenengranpartealaacumulacindeantocianinas
endasfrosybrillantes

OBJETIVO
En este experimento se comprobara que las diferencias de coloracin no se deben
exclusivamente a la presencia de uno u otro pigmento flavonoide, o a un cierto tipo de
mezcladeestos,sinotambinalareaccindeljugocelular.Unosolodeestospigmentos
escapazdedesarrollardiferentescoloracionessegnelpHcelular,correspondiendolos
coloresrojo,violetayazulareaccincida,neutraybsica,respectivamente.

MATERIAL
Razderemolacha
Floresrojas,azules,blancasyamarilla
Dosbeakersde250ml
Doscampanasdevidrio
Hidrxidodeamonioconcentrado
Acidoclorhdricoconcentrado
Acidoactico0.2N
Hidrxidodesodio0.1N
PapelindicadordepH.

PROCEDIMIENTO
A.EfectodelpHenelcolordelabetacianina(pigmentodelaremolacha).

Prepareunextractodelpigmentodelaremolachaenlasiguienteforma:hiervaporunos
minutosde20a30gramosdeunraspadoderazderemolachaconunos100mldeagua
destilada.Enfrielextractounpocoyfiltre.

Delextractofiltradotome5mlenuntubodeensayo.Pormediodeunpapelindicador
determinesupH.Despusagreguegotaporgota,unadisolucindecidoacticoal0.2N.
Tanprontocomosenoteuncambioenelcolor(comparecontinuamenteconelextracto
original)noagreguemscido.

97

EfecteluegounanuevadeterminacindelpH.Agregueotrasgotasdelcidoparaversi
ocurrenotroscambiosdelcolor.
Tratamiento Color pH
Extractooriginal

Conlaadicindelcidoactico

Conlaadicindehidrxidodesodio

En otro tubo de ensayo repita el procedimiento, aadiendo en lugar de cido una


disolucin de hidrxido de sodio al 0.1 N. En este caso deben ocurrir varios cambios
sucesivoshastaqueladisolucinadquierafinalmenteuncoloramarillo.

Expliquelacausadelosresultados
Tratamiento
Color
pH
Extractooriginal
Conlaadicindelcidoactico
Conlaadicindehidrxidodesodio

Cuadro18.Pigmentosnofotosintticos:cambosdecolordelospigmentosflavonoides

B.Cambiosdecolorenlasfloresbajoatmsferascidasobsicas.
Endosbeakersconaguacoloquefloresrojas,azules,blancasyamarillas.Coloquejuntoa
cadabeakersunplatodepetri.Enunplatoviertahidrxidodeamonioconcentradoytape
todo el conjunto con una campana para crear una atmsfera de vapores de amonaco
alrededordelasflores.

Repita el procedimiento con el otro conjunto pero vierta un poco de cido clorhdrico
concentradoenelplatodepetri.

Cambiosdecolorobservadosenlasflores
Tratamiento
Rojas

Azules

Blancas

Amarillas

Conanhdridodeamonio

Concidoclorhdrico

Cuadro19.Observeloscambiosdecolordelasfloresencadacaso.

Hagaunanlisisdelarazndelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Bldwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Salisbury,F.B.yC.Ross.PlantPhyslology.2nd.De.WadsworthPublishingCo.
Inc.Cal.U.S.A.

98

PRACTICANo.48
TITULO: EFECTO DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ Y DE LA CONCENTRACIN
DELCO2ENLAFOTOSNTESIS.

OBJETIVO
TeniendoencuentalaleydelosFactoresLimitantescientficamentecomprobadaparala
fotosntesis,setratadedemostrarquesiseaumentalaintensidaddelaluz,laplantano
puede aprovechar para la fotosntesis esa mayor energa disponible a menos que la
concentracin del CO2 aumente al mismo tiempo proporcionalmente, siempre que los
demsfactoresnosean1imitantes.
Estacorre1acinfcilmentesepresentaenelcampodeahlaimportanciadeconocerlos
puntosdecompensacindeluzydeCO2.

PROCEDIMIENTO
Siguiendolabibliografaconsultadaparalosejerciciosinmediatamenteanterioressepide
disearunexperimentoquepermitainterpretarelaumentodeintensidaddelaluzyel
contenidodeCO2enrelacinalaintensidaddefotosntesisdeunaplantacualquiera.

BIBLIOGRAFIA
Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,RinehartyWinston,New
York.

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.
Miller,IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F.

99

PRACTICANo.49
TITULO: PIGMENTOS FOTOSINTETICOS SEPARACIN, ESPECTRO DE
ABSORCIONYFLUORESCENCIA

INTRODUCCIN.
Lasplantascontienenvariospigmentosqueabsorbenlaenergadelaluz.
Entrestoslosqueseencuentrenenmayorproporcinsonlaclorofilaadecolorverde
azulado y la clorofila b de color verde amarillento, en ambas es diferente la estructura
qumicalaadsorcinylasolubilidad.
LoscarotenoidessonpigmentosdecoloramarilloyanaranjadoSicontienenoxigenoen
su molcula reciben el nombre de xantofilas; mientras que los carotenos solo estn
constituidos por carbono e hidrgeno. Sin embargo, no son estos todos los tipos de
pigmentosfotosintticos,enelcuadroacontinuacinseproporcionaunalistadeellos:

PIGMENTO

ORGANISMOSENLOSQUESEPRESENTA

LUZADSORBIDA

Clorofilaa

Todaslasplantasverdes

Rojoyazulvioleta

Clorofilab

Plantasverdes

Rojoyazulvioleta

Clorofilac

Algascafs,diatomeas

Rojoyazulvioleta

Clorofilad

Algasrojas

Rojoyazulvioleta

Protoclorofila

Plantasetioladas

Rojocercanoazulvioleta

Bacterioclorofila

Bacteriaprpura

Rojocercanoazulvioleta

Bacterioviridina

Bacteriaverdessulfurosas

Naranjarojo

Ficocianina

Algasazulverdes

Verde

ficoeritrina

Algasrojas

Azuly

Carotenosy
xanthofilas

lamayoradelasplantas,bacteria

AzulyAzulverde

Cuadro20.Pigmentosfotosintticos.(Biwell,1993)

Laextraccindelospigmentosdehojasresultamejorcuandoselestrituraendisolventes
orgnicos,talescomoacetonaalcoholyotrossimilares(Richter,1972).Laseparacinse
haceatravsdelecromatografa.
En la cromatografa de papel la mezcla a separar se aplica 10 gotas en el mismo sitio,
esperandoaquesequeencadaaplicacinysedesarrollaelcromatograma.Ladistancia
viajadaporuncompuestoparticularbajocondicionesconstantesdetemperatura,sistema
de solventes, direccin del flujo y otros es caracterstico y puede ser utilizado para
identificarlo.Larelacinentreladistanciaviajadaporuncompuestoyladelsolventese
conocecomovalorRf(ArdittiyDunn,1969).ElRfsecalculacomosigue:

Rf=distancia(desdeelorigen)Queviajelcompuesto/distancia(desdeelorigen)queviajelsolvente

100

PIGMENTOS

COLOR

VALORESSOLVENTEA

RFSOLVENTEB

Caroteno

Amarillo

0.98

0.90

Feofitina

Gris

0.44

0.28

Xantofilas

Amarillo

0.350.10

0.22

Clorofilaa

Verdeazul

0.28

0.11

Clorofilab

Verdeamarillo

0.17

0.10

Cuadro21.ValoresRfparacromatografaenpapel,consolventes(a)100partesdeterdepetrleocon20
partesdeacetonapuray(b)100partesdeterdepetrleocon12partesdeacetonapura(modificacinde
clegg.1973).

Para obtener un espectro de absorcin, primero se extrae el pigmento y despus se


determinaqulongitudesdeondadelaluzabsorbedichopigmento.
Lasclorofilaspresentandosmximosdeabsorcin,unoenlaparterojayotroenlaparte
azul. Mientras que los carotenoides (carotenos y xantofilas) solamente absorben en la
parteverdeazulyvioletadelespectrovisible.Cuandolospigmentosfotosintticosenla
clulaabsorbenluzloselectronesaccedenanivelessuperioresdeenergaendondeson
capturadosporunaseriedecompuestosreceptoresdeelectrones,porlocualseconserva
la energa luminosa, convirtindola en energa qumica. Sin embargo cuando los
pigmentosestnaislados(oaundentrodelahojacompleta,sana)avecesloselectrones
regresan a su estado basal y emiten la energa absorbida en forma de luz, fenmeno al
queselellamafluorescencia(Bldwell.1979).

OBJETIVO.
1. Extraccin de los pigmentos fotosintticos ms importantes por medio de solventes
orgnicosylaseparacineidentificacindelosmismosconayudadelacromatografaen
papel.
2.Determinarelespectrodeabsorcindelospigmentosfotosintticosextrados.
3.Demostrarelfenmenodefluorescenciaenlaclorofila.

MATERIAL
A)CromatografaBaoMariaBa)espectrodeAbsorcin
1Micropipeta1embudo1vasodeprecipitado
1Vasodeprecipitadode100mlTachueladel00ml
1Morteroypistilopapelfiltrol0mldeacetona
2Tubosdeensayegrande5gdematerialvegetall0mldeterdepetrleo
2Taponesdehule5g30mldeacetonabencinadepetrleo
1Gradilla

PROCEDIMIENTO
101

Tomar 8 ml de solvente (pueden usarse 100 partes de ter de petrleo y 1 parte de


benceno(RovaloyRojas,1977)observequeparaelprimercasosetienenlosvaloresRf,
paracomparar,paraelsegundo,No).
1TiradepapelfiltroWhatmanNo.1,de2x20cm
LmparadeluzUV

1.Obtencindelextracto.Muelalashojasenelmorterohastaextraerlospigmentosdela
hoja. Filtre el extracto y recbalo en el vaso de precipitado. Concentre el extracto en el
baoMariaafuegolento,procurandoquenohierva

2. Obtencin del cromatograma. Monte el dispositivo de la Figura 19. Con ayuda de la


micropipeta, coloque 2 3 gotas del extracto en la lnea Inicial (marcada con lpiz). De
preferencia corra el cromatograma en la obscuridad. Espere 20 30 minutos y marque
con un lpiz las distancias corridas por el solvente y por los pigmentos. Obtenga los
valoresRfparacadauno.

Figura14.Espectrodeabsorcin

B)
EspectrodeAbsorcin
De las tiras de cromatografa en papel obtenidas anteriormente, recorte las partes que
contienencadaunodelospigmentosysecolocanporseparadoenunvasodeprecipitado
quecontenga10mldesolventeadecuadoparacadapigmento.

Pigmento
ClorofilaaClorofilabCaroteno
102

Solvente
Acetona
Acetona
BencinadePetrleoterdepetrleoterde

Mezclarperfectamentehastadisolverlospigmentos,retireelpapelycoloqueelextracto
coneltubodelespectrofotmetroparadeterminarelespectrodeabsorcin.

Determinacindelespectrodeabsorcin.
Siguiendo las Instrucciones de manejo del espectrofotmetro realizar lecturas de
absorbanciade340a700nmenIntervalosde20nm.GrafiqueIalongituddeondavs.La
absorbanciaparacadapigmento.

C)FluorescenciadelosPigmentosFotosintticos
ConelrestodelextractodelaparteBobserveprimerosucolorconlaluzsolaryluego
obsrveloconunalmparadeluzultravioleta(tengacuidadoenevitarqueestaluzllegue
asusojos,yaquepuedequemarlos).

BIBLIOGRAFA.
Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,Rineharty
Winston,NewYork.
Bldwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Clegg,C.J.1973.PlantPhysiology:JohnMurray,AlbemarieSteet,(London.ASELab.Books.

Miller,IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F.
Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.

Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de


FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.

Salisbury,F.B.yC.Ross.PlantPhyslology.2nd.De.WadsworthPublishingCo.
Inc.Cal.U.S.A..

103

PRACTICANo.50
TITULO:IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4

INTRODUCCIN
Los aspectos morfolgicos de las plantas estn estrechamente relacionados con los
aspectos fisiolgicos y estos a su vez dependen del medio ambiente en donde se
desarrollalamisma.EstasmodificacionessehandivididoenlostiposfotosintticosC3,C4
y MAC xerfitas. Estos tipos de plantas han agregado el ciclo bsico de fijacin de CO2.
UnaformadediferenciarlasplantasC3YC4esatravsdesuanatoma,yaquelasplantas
C3presentantpicamenteclulasdeparnquimaenempalizadamientrasquelasplantas
C4tienenclulasdelhazdelavainayclulasdelmesfilo.

OBJETIVO
IdentificarplantasC3yC4atravsde:Cortesanatmicosfijos

MATERIAL
PreparacionesfijasdeplantasC3YC4.
HojasfrescasdeplantasC3yC4(verdolaga,frjol,maz,).
UtensiliosparabaoMaria.
Vasoprecipitadode100ml.
Alcohol80%.
Lugol.
Microscopioestereoscopico

PROCEDIMIENTO
Se le proporcionar un juego de preparaciones fijas para observar al microscopio. Para
retirarlaclorofiladelashojasyteirconLugolprocedecomosigue:
a)sumerjalahojaenaguahirviendodurante1minuto
b) transfiera la hoja a alcohol 80% en un vaso de precipitado. Ponga todo a bao mara
hastaquetodoelcolordesaparezcadesta.
c) coloque la hoja en una caja de petri con agua para que adquiera una consistencia
flexible.
d)tireelaguayagregueunasgotasdeLugolsobrelahoja.Despusde5minutoslavela.
Observe a coloracin y su distribucin en la lmina foliar utilizando un microscopio
estereoscpico.

BIBLIOGRAFIA
Salisbury, F.R.y C .W. Ross. 1944. Fisiologa vegetal. Gpo. Edit. Iberoamericano, Mxico,
D.F.

Medina, F.R.1977. Introduccin a la Ecofisiologia Vegetal. Secretaria General de la OEA,


Washinton.

104

BIBLIOGRAFIAGENERAL

1. Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London.

2. Arumagan, S. And K.G. Shanmgavelu. 1975. Studies of sarcotesta on the seed


germinationofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

3. Arditti,J.yA.Dunn.1969.ExperimentalPlantPhyslology.Holt,RinehartyWinston,
NewYork.

4. Burd, D. Y Lomas, J. 1976. Mtodos de medicin del rea foliar: un estudio de


precisin y rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz.
lowaSlalaUniversity,Amea,lowa.TraducingdeE.,SolrzanoV.

5. Bould, C. 1968. Leaf analysis as a diagnostic method and advisory ald in crop
Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

6. Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M.
1975.FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.
Fotosntesis.De.Omega.Barcelona,Espaa.

7. Cocklin, R.E. 1973. An unbreekeable potometer. En C. J. Clegg (Ed.) Plant


Physlology.ASELab.Books.London.

8. Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull
355.

9. Clegg, C.J. 1973. Plant Physiology: John Murray, Albemarie Steet, London. Lab.
Books.

10. Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo.
Porte1.AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.
Cuba. Harl .P.H.1965. A in the grid los estimating crea of grass leaves. Agron J.
57(e):634.

11. Gherardi,E.yI.F.M.Valio.1976.Ocurrenceofpromotinginhibitorysubstancesin
theseedarilsofCaricapapayaL.J.Hort.Science.51:114.

12. Gaiston, A.W. y Davies, P.J. 1970. Control Mechanims in Plant Development.
PrenticeHall,EnglewoodCliffs,NewYersey.

13. HiII,T.A.1977.HormonasReguladoresdelCrecimientoVegetal.Omega,Barcelona,
Espaa.

105

14. Halevy, A.H. y Kofranetz, A.M. 1977. Silver treatment of carnation flowers for
reducing ethylene damage and extending longevity. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 102
(1):7677.

15. Hartman,H.T.yD.F.Kester.1971.PropagacindePlantas.TraduccindeAntonio
MiranoAmbrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

16. Kestah,Z.Carshy,J.yJarvis,P.G.1971.PlantPhotosyntheticProductionManualof
Methods.W.JunhN.V.theHague.

17. Kramer, P.J. 1974. Relaciones Hdricas de Suelos y Plantas. EDUTEX. Mxico.
Salisbury,F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.

18. Kramer. P.J. 1974. Relaciones Hdricas de suelos y Plantas(versin enespaol de


edicinde1969).L.Tejada(trad.)Edutex.Mxico,D.F.

19. Luckwill, L.C. 1981. Growth regulators in crop production. Edward Arnold, Great
Britain.

20. Primo.Y.E.yR.Cuat.1968.HerbicidasyFitoreguladores.Edit.Aguilar.Espaa.

21. Lunt, H.A., H.G. M. Jacobson y C.L.W. Swanson. 1950. El sistema Morgan para
anlisisdesuelos.Boletn541,Mayo.EstacinAgr.Exp.ConnecticutNewHaven,
USA.EstefolletofuetraducidoyadaptadoenlaUAChconelnombredeQumica
AgrcolaAplicadaporOjeda,O.D.yDelgadodeG.Z.enelaode1965,dedondese
tomaronlosdatos.

22. Maynard, B.K. N.L. Bassuk. 1996. Effects of stock plant etiolation, shading,
bandingandshootdevelopmentonhistologyandcuttingpropagationofCarpinus
betulusL.fastigiata.J.Amer.SocHort.Sci.12(5):853860.

23. Machlis, L. y J.G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant
Physiology.W.H.Freeman,SanFrancisco.

24. Montes Meneses, J. 1969. Correlacin de la longevidad de las semillas de maz y


frjolconlaspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,UACH.

25. Mosqueda, V. R. 1969. Efecto de diversos tratamientos aplicados a la semilla de


papayasobresupodergerminativo.AgriculturaTcnica.2(11):487491.

26. Machies,L.andJ.G.Torrey.1956.PlantsinAction.ALaboratoryManualofPlant
Physiology.W.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

106

27. Mitchell, R.C. 1970. Crop Growth and culture. Lowa State University Press. Ame,
lowa.

28. Patio, V.F. y Y. Villagmez A. 1976. Los anlisis de semillas y su utilizacin en la


propagacin de especies forestales. S.A.G.; S.F.F.; Instituto Nacional de
InvestigacionesForestales.BoletnDivulgativoNo.40.

29. Pierre.W.H.,Kirkham.D.,Pesek.J.y.Shaw,.R.(Edo.)1996.PlantEnviromentand
EfficientWalwUse.4a.Reimpresin(1961).

30. Ross. W.C. 1974. Plant Physlology Laboratory Manual. Wadsworth. Belmont,
California.

31. Roberts, J. Y D.G. Whitehouse. 1976. Practical Plant Physiology. Laboratory


Manuals.LongnonGroup,GreatBritain.155p.

32. Reid, M.S., D.S. Farnham y E.P. McEnrva. 1980. Effecto of silverthiosulfata and
preservativa solutions on the vase lIte of miniature carnations. Hort Science
15(6):807808.

33. Rovalo,Merino,M.yRojasGarcidueas,M.197.ExperimentosdeLaboratoriode
FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.

34. Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,
IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F.

35. Rojas, G. M. 1976. Manual Terico Prctico de Herbicidas y Fitoreguladores. Ed.


Limusa.Mxico.

36. Salisbury, F.B. Y W.C. Ross. 1978. Plant Physiology. 2a. Ed. Wadsworth. California
Iberoamrica,Mxico,D.F.

37. Salisbury F.B. y C.W. Ross. 1994. Fisiologa Vegetal. Gpo. Edit. Iberoamrica,
Mxico.D.F.

38. SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindel
anlisisdelsuelo(porelmtododeMorgan).ServiciodeOrientacin

39. Tcnicaalusuario,hojadeDivulgacin.No.21,Mxico.

40. Salisbury, F.B. y C.W. Ross. 1979. Plant Physlology. 2a. Ed. Wadsworth, Salmont,
California.

41. Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.
107


42. Vaver, R.J. 1980. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura.
Trillas,Mxico.

43. Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura.
Trillas,Mxico.

44. Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,
acoloratlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

108

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