MANUAL DE MICROBIOLOGA

PRACTICA 8
Medios de cultivo y tcnicas de siembra
Introduccin
Las bacterias deben ser cultivadas en los medios correspondientes de
laboratorio para caracterizar su crecimiento, hacer su identificacin y determinar
sus actividades metablicas
Las t!cnicas de aislamiento, permiten la obtencin de microor"anismos a
partir de muestras comple#as $suelo, a"ua, alimentos, etc% en las &ue hay "ran
diversidad microbiana, as' como comprobar la pureza de los cultivos obtenidos
Los cultivos puros est( formados por un solo tipo de microor"anismo) y son
indispensables para conocer las caracter'sticas morfol"icas, propiedades de
tincin, actividad bio&u'mica, pato"enicidad, sensibilidad a antibiticos e
identificacin de las especies microbianas
Objetivos
Conocer las diferentes t!cnicas de aislamiento en medios de cultivo slido
para la obtencin de cultivos puros de bacterias
Conocer los medios de cultivo de uso "eneral, diferenciales y selectivos

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Actividad de la practica
T!cnica de estr'a cruzada
* +n la parte posterior y e,terior de la ca#a, dividirla en - cuadrantes Tomar
una muestra con el asa previamente flameada y fr'a, inocular la muestra
haciendo -./ estr'as simples muy #untas de lado a lado sobre el primer
cuadrante
0 1lamear el asa de inoculacin y hacer "irara la ca#a Petri un cuarto de
vuelta Abrir nuevamente la ca#a y enfriar el asa de siembra tocando la
superficie del medio le#os de la zona de estr'as reci!n hechas
2 Rozar con el asa una vez la superficie del con#unto ori"inal de estr'as y
hacer un se"undo "rupo de estr'as en el se"undo cuadrante, esta vez mas
separadas y en una sola direccin
- Repetir el paso 0 y 2 para el tercer cuadrante $enfriar en el mismo lu"ar &ue
el anterior% y para el cuarto cuadrante no se flamear( el asa, las estr'as
ser(n m(s separadas o abiertas
3iembra en tubos
* 3embrar en los tubos de a"ar nutritivo $inclinados%, con el asa previamente
esterilizada, realizando una pe&ue4a estr'a desde aba#o hasta el pico,
Materiales de laboratorio por equipo Material del equipo
0 5echeros Cinta adhesiva $mas&uin%
* Asa bacteriol"ica en punta Cerillos
* Asa bacteriol"ica en aro * Plumn indeleble o l(piz "raso
2 tubos de caldo nutritivo 1ranela
2 Tubo con a"ar nutritivo Colores
2 Ca#as de Petri con a"ar nutritivo Cloro
* ca#as de Petri con a"ar 6TP
* Ca#as de Petri con +57
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finalizando con una picadura en la base y en los tubos de a"ar nutritivo en
forma recta por picadura
2. Incubar los tubos a 2/ C durante 0- hrs
2 Los tubos con caldo nutritivo se de#aran en a"itacin
3iembra de ca#as de Petri con medios diferenciales y selectivos.
* 8ividir en tres partes, una ca#a de Petri con +57 y a"ar 6TP, sembrar por
estr'a simple
2. Incubar a 2/ C en forma invertida durante 0- hrs
Resultados Recopilar la informacin de la caracterizacin colonial de cada cepa
en el cuadro de resultados
Bacteria1 Bacteria 2 3in inocular $2%
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Aislamiento por
estr'a cruzada
$a"ar nutritivo%
1orma9
Color
Tama4o$mm%
7orde
3uperficie
Aspecto
+levacin
Luz transmitida
Luz refle#ada
Consistencia
3iembra en medios
selectivos y
diferenciales
5edio +57 5edio 6TP
7acteria *
1orma
Color
Tama4o
Tama4o$mm%
7orde
3uperficie
Aspecto
+levacin
Luz transmitida
1
2 3
1
2 3
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Luz refle#ada
Consistencia
7acteria 0
1orma
Color
Tama4o
Tama4o$mm%
7orde
3uperficie
Aspecto
+levacin
Luz transmitida
Luz refle#ada
Consistencia
Nota9 la descripcin colonial puede hacerse considerando los si"uientes criterios
Tubos inclinados de a"ar nutritivo9
Bacteria1 Bacteria 2 3in
inocular
Crecimiento9 arborescente, filiforme,
rizoide, disperso, puntiforme
Color
Tubos de caldo nutritivo
Bacteria1 Bacteria 2 3in
inocular
Crecimiento9 superficie como pel'cula,
como sedimento, turbidez en todo el
Forma: circular, irre"ular, filamentosa o rizoide
Borde: entero, lobulado, aserrado
uper!icie: lisa o ru"osa
"specto: h:meda, seca, butirosa
#levacin: conve,a, plana, hundida
$u% transmitida: transl:cida, opaca
$u% re!lejada: brillante, mate
&onsistencia: dura, blanda, mucoide
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tubo
Color
Tubos rectos de a"ar nutritivo
Bacteria1 Bacteria 2 3in
inocular
Crecimiento9 en forma de pel'cula
superficial, a lo lar"o de la picadura,
solo en el fondo
Color
&uestionario
* ;<ue es el a"ar y de donde se obtiene=, ;cu(les son los
nutrimentos &ue proporciona a los microor"anismos=
0 ;Cu(l es la composicin &u'mica de los medios +57, 6TP, 55=
2 ;cu(les son los componentes o propiedades responsables de su
funcin como medios selectivos o diferenciales=
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- ;Por &u! el a"ar nutritivo es un medio de uso "eneral para el
cultivo de bacteria= Propon"a al"unas sustancias &ue se le
a"re"ar'an para hacerlo selectivo para bacterias >ram ne"ativas=
Fic'as catolo(r)!icas del material biblio(r)!ico su(erido que se encuentran
en la biblioteca de la *M"R
1icha ?o 0@A8
CLA3I1ICACIB? /@* A280C2 5/D@
I37?9
T'tulo9 5anual de 5edios de Cultivos E Publicacin patrocinada por 5+RC6
Autor9
+ditorial9 Alemania9 + 5+RC6, *CCD
8escripcin9 2// p
T+5A39 * 5ICRB7IBLB>IA . CFLTIGB3 . 5A?FAL+3 H 0 5ICRB7IBLB>IA
I?8F3TRIAL . I?8F3TRIA <FI5ICB 1AR5AC+FTICA . I?G+3TI>ACIB? I
8+3ARRBLLB H 2 5+8IB3 8+ CFLTIGB >RA?FLA8B3 . PR+PARACIB? .
CB?3+RGACIB?
?otas9 Incluye referencias biblio"r(ficas e 'ndice
1icha ?o *-*A
CLA3I1ICACIB? A*AD*- 5/D@p
I37?9 CA8.@*/@.*D.D
T'tulo9 Pruebas bio&u'micas para la identificacin de bacterias de importancia
cl'nica E Jean 1 5ac 1addin, Irma Lorenzo trad
Autor9 5ac 1addin, Jean 1
+ditorial9 5!,ico 9 5!dica Panam!ricana, *CCD
8escripcin9 2D* p
T+5A39 * 7ACT+RIBLB>IA . LA7BRATBRIB, R+ACTIGB3 8+ . GIRF3 H 0
5ICRBBR>A?I35B3 . B73+RGACIB? . 5A?FAL H 2 7ACT+RIA3 .
I8+?TI1ICACIB? . LA7BRATBRIB
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?otas9 1otocopia de ori"inal