TCNICAS COPROLOGICAS EN MEDICINA VETERINARIA

NARY XIMENA BONILLA BONILLA COD. 201212583

MARTIN ORLANDO PULIDO MEDELLIN PARASITOLOGA Y ENFERMEDADES PARASITARIAS

UMIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TENNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECIARIAS TUNJA 2013

Tcnicas coprologicas en medicina veterinaria

Las valoraciones coprologicas se realizan a travs de tcnicas que indican la presencia o cuantifican el grado de infeccin causado por los parsitos. Lo que permite clasificar las tcnicas coproligicas en tcnicas cualitativas y tcnicas cuantitativas; para realizar estas pruebas se debe tener en cuenta los siguientes pasos: Recoleccin de materias fecales: se deben tomar directamente del recto o libres de elementos extraos Recipientes para enviarlos: se pueden enviar en bolsas de polipropileno o en frascos de boca ancha libre de aire para evitar contaminar la muestra. Cantidad de las muestras fecales: se debe obtener materia fecal suficiente para los exmenes que se van a realizar y tambin depende de la especie tratada. Conservacin: deben procesarse de inmediato especialmente en climas calidos; se deben refrigerar o aplicar formaldehido o formalina al 10 o 20% en agua o solucin salina

Esto garantizara diagnsticos precisos y por lo tanto se podr realizar un buen tratamiento. 1. Tcnicas cualitativas Son de gran ayuda para un examen clnico de forma rpida y brindando tcnicas para llegar a diagnsticos ms precisos; estas tcnicas no informan la clase de parasito pero dan en trminos cualitativos el grado de infeccin. Tradicional mente se una el sistema de cruces segn campos microscpicos para valorar el grado de infeccin; estas se pueden orientar en infecciones bajas, leves, moderadas o graves con pampos de 1 a 10 formas y con 1 cruce o mas dependiendo del grado de infeccin esto tambin es a criterio particular de quien lo realiza. Los mtodos ms comunes en tcnicas cualitativas son los siguientes: 1.1 Mtodo de frotis directo En una lamina portaobjeto colocar una o dos gotas de solucin salina fisiolgica o isotnica Con una palillo o esptula colocar una pequea cantidad de heces frescas Mezclar con la solucin salina hasta obtener una pelcula poco gruesa y clara Colocar una laminilla sobre la preparacin Mirarla al microscopio con objetivo de 10x y 40x

1.2 Mtodo de concentracin o enriquecimiento Hay varias tcnicas de enriquecimiento que me permitan la utilizacin de mtodos de flotacin, sedimentacin y migracin larvaria.

1.3 Mtodo de flotacin con solucin salina saturada Colocar de 2-5g. de heces en un montero Agregar de 30 a 50cc de solucin salina saturada Disolver con una esptula o varilla de vidrio Filtrar con un cedazo de mallas finas Llenar uno o dos tubos de ensayo por encima del borde Eliminar las burbujas o sustancias que flotan Colocar una laminilla encima del tubo de 15 a 30 minutos Retirar la laminilla y colocarla en un portaobjeto Mirar al microscopio con objetivo de 20x

1.4 Tcnica de flotacin sencilla Colocar en un tubo de ensayo pequeas cantidades de heces Mezclar las materias fecales Llenar hasta el borde con solucin salina saturada Colocar una laminilla en el borde del tubo por tiempo de 3 a 5 minutos Retirar la laminilla y colocarla en un portaobjeto Mirar al microscopio con objetivo de 10x y 40x

1.5 Mtodo de Graham tcnica de cinta de celofn de utilidad en el diagnostico de oxiuros equino y humanos y de tenias caninas de gnero Dipylium. Logra la adhesin de huevos o segmentos de parsitos en la cinta y recuperarlos por sedimentacin. Colocar una cinta adhesiva en la regin perianal Retirar la cinta y montarla en la lamina Observar al microscopio con objetivo de 10x

2. Tcnicas cuantitativas Estas tcnicas indican la cantidad de parsitos existentes informando el grado de infeccin. Usualmente se usa el sistema de valoracin H.P.G (huevos por gramo) o de L.P.G (larvas por gramo) segn sean las formas parasitarias diagnosticadas En medicina veterinaria son frecuentes las tcnicas: 2.1 Dennis Se utiliza para el diagnostico de helmintos trematodos y especialmente para fasciola heptica; con repetidos lavados y filtrados de la muestra fecal y la observacin de los huevos por sedimentacin. Pesar 2g de materia fecal Colocar en un recipiente o mortero con capacidad a 100cc Agregar 25cc de solucin detergente Mezclar con el agitador sin formar espuma Colocar una malla metlica (No.80) en un embudo Filtrar la suspensin en un tubo de 50cc Lavar con soluci0on detergente el recipiente que tenia la mezcla Filtrar el lavado y agregar al tubo de 50cc Adicionar solucin detergente al sedimento del a malla hasta llenar el tubo Dejar en reposo el tubo por 5 a 10 minutos Eliminar las partes del sobrenadante del liquido Lavar el embudo con solucin detergente y agregarla al tubo Llenar el tubo hasta el reborde con solucin detergente Dejar en reposo durante 10 minutos Eliminar el sobrenadante del tubo, dejando 2 a 3cc del sedimento Agregar una o dos gotas de tintura de yodo y dejar en reposo de 2 a 5 minutos Verter el contenido en una caja de preti Mirar al estero microscopio y contar los huevos

2.2 Boravs Pearson Pesar 5g de materia fecal Colocarlos en un recipiente o mortero con capacidad de 100cc Agregar agua corriente y preparar una suspensin Mezclar con un agitador sin formar espuma Colocar una malla metlica (80.) en un embudo

Filtrar la suspensin en una probeta de 1000cc Lavar con agua el recipiente y el tamiz que contenan la muestra Filtrar el lavado y agregarla a la probeta de 1000cc Adicionar agua hasta llenar la probeta Dejar en reposo la probeta por tiempo de 5 minutos Eliminar el sobrenadante dejando 100 a 200cc del sedimento Llenar nuevamente la probeta con agua Dejar en reposo durante 5 minutos ( repetir el ltimo paso 3 veces) Eliminar el sobre pasante de 5cc del sedimento Agregar de 3 a 5 gotas de azul de metileno al 1:1000 Agitar el sedimento y tomar 1cc de este Mirar al microscopio con objetivo de 10x de la

El nmero de huevos contados equivale al nmero de huevos por gramo muestra. 2.3 Mc Master

Pesar 2g de materia fecal reciente Depositarla en un recipiente de Mc Master, calibrado a 28cc Agregar 28cc de solucin azucarada sobresaturada de sheather Agitar o mezclar fuertemente hasta homogenizar Tamizar en un colorador o cedazo metlico (No.80) o colorador comn Presionar el sedimento con una esptula de madera y eliminar el contenido Llenar dos cmaras de Mc Master evitando la presencia de burbujas Mirar al microscopio con objetivo de 10x El recorrido de la cmara debe hacerse tralladando el campo entre columnas

El clculo se basa en el espacio de la cmara y el volumen de la solucin a leer; cada cmara tiene un volumen de 1cc y el nmero total de la cmara a leer debera ser de 30; por la cual como mnimo deben leerse dos cmaras determinar el promedio de las mismas y multiplicar por la constante 30. La formula es recuento de la C1+recuento de laC2x30/numero de cmaras ledas. 2.4 Soll Modificado Pesar 2g de heces Colocarlas en un beaker con capacidad de 40cc Agregar 20cc de agua corriente Agitar y homogenizar la muestra hasta formar una suspensin

Tamizar con un cedazo corriente (No.80) en una caja de preti Agregar 10cc de agua para arrastrar los huevos existentes Comprimir el sedimento con una esptula de madera Desechar el sedimento Distribuir los 30cc en dos tubos de ensayo de 15cc Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos Botar el sobrenadante y dejar 2cc de sedimento Agitar el sedimento y colocar los tubos en la gradilla Agregar solucin azucarada hasta el borde de los tubos Colocar una laminilla durante 5 minutos Retirar las laminillas y colocar sobre 2 portaobjetos Mirar al microscopio con objetivo de 10x

El clculo requiere del conteo total de huevos discriminados por gneros de parsitos; el conteo por gnero se divide por dos y se obtiene el nmero de huevos por gramo de la muestra.

2.5 Baerman Utilizado para el diagnostico de paracitos pulmonares causantes de bronquitis verminosa; tambin es utilizado en exmenes de larvas en pastos o en tejidos Organizar el aparato de baerman uniendo un tubo de ensayo a un embudo por medio de una manguera Colocar el aparato de baerman en un soporte o mesa para baerman Llenar con agua el aparato de baerman hasta 1-2cm por debajo del borde del embudo Colocar en el embudo un tapiz o malla metlica Colocar 10g de la muestra encima del tamiz en contacto con el agua por tiempo de 12 24 horas Cubrir con grasa para evitar la contaminacin con artrpodos Desmontar el aparato de baerman y retirar con cuidado el tubo de ensayo Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos Botar el sobre pasante y dejar de 1-2cc de sedimento. Colocar en la lamina 1-2 gotas del cubrimiento con un portaobjeto hasta agotarlo completamente Mirar en el microscopio con objetivo de 10x

El recuento se basa en la lectura de todo el sedimento y el recuento de todas las larvas existentes. El reporte se da por el nmero de larvas contadas en la cantidad de materia

fecal montada. Existen embudos de diferentes capacidades logrando mejorar diagnsticos entre mayor sea la cantidad de materia fecal examinada. La tcnica de baerman tambin es de utilidad para diagnostico de larvas nematodos existentes en msculos (trichinella spiralis) y larvas existentes en pastos.

Bibliografa http://karenpaterninanegrete.blogspot.com/2011/12/parasitologia-veterinaria-tecnicasde.html