UNIDAD 1
MICROSCOPÍA
DRA. BRENDA TORRES
MICROSCOPIO
Del griego:
“MIKRO” = pequeño “SCOPEO”=
mirar
(mirar cosas pequeñas)
De acuerdo a la radiación que usa ,
se clasifican en:
Óptico
Electrónico
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
Es una escala donde se observa el conjunto de longitudes
de onda que abarca las distintas radiaciones (ondas de
radio, microondas, la luz infraroja, luz visible, luz
ultravioleta, rayos X y rayos Gamma ).De este proviene la
luz visible.
El espectro de luz visible se percibe por el ojo
humano
Su frecuencia determina su color
NATURALEZA DE LA LUZ
La luz blanca está constituida por varios colores diferentes
(Isaac Newton)
Forma parte del espectro electromagnético
Puede ser descrita mediante dos modelos:
+ Por su forma de propagación, naturaleza ondulatoria
(James Maxwell)
+ Por su forma de interactuar con la materia, naturaleza
corpuscular o fotónica (Albert Eisten)
LUZ VISIBLE
Forma parte de una estrecha franja que va desde
longitudes de onda de 380 nm (violeta) hasta 780
nm (rojo).
Espectro o rango, de mayor longitud menor
longitud
El espectro de luz visible puede ser percibida por el
ojo humano y su frecuencia determina su color
(ondas/seg, vibraciones)
MICROSCÓPIO ÓPTICO
Necesita de tres elementos para formar una
imagen.
Luz visible (tipo de radiación visible)
Muestra (materia que interactúa con la luz
visible)
Sistema de lentes (forma la imagen que
visualiza el ojo)
LAS LENTES
Objetos que concentran o hacen diverger los rayos de
luz
CONVERGENTES DIVERGENTES:
: Forman Forman imágenes
imágenes virtuales.
reales.
IMAGEN VIRTUAL IMGEN REAL
LENTE DIVERGENTE LENTE CONVERGENTE
El objeto esta dentro del El objeto está fuera del
plano focal y la imagen se plano focal y la imagen se
forma delante de la lente, se forma detrás de la lente, se
observa aumentada pero no observa aumentada e
IMAGEN REAL FORMACIÓN DE LA IMAGEN
IMAGEN VIRTUAL
1er sistema
Comienza con “Fuente de luz” y “parte
mecánica”
El condensador concentra los rayos de luz
dispersos en la platina. La luz luego es
recogida por el lente “objetivo”. Se
I
consideran 2 tipos de rayos, los que no son
M modificados por la muestra, que constituyen
A
G una luz de fondo sobre el campo visual y los
E
N que son modificados por la muestra o
R interactúan. Estos son enfocados por el lente
E
A
“objetivo”, formando una imagen real
Y diafragma L aumentada o amplificada e invertida.
2do sistema
AUMENTADA E Esta imagen llega al lente “ocular” formando
INVERTIDA
una imagen aumentada mas no invertida.
3er sistema
En este la parte frontal, el lente del ojo
humano usa la imagen virtual producida por
CONCEPTOS DE MICROSCOPÍA
AMPLIFICACIÓN AMPLIFICACIÓN VACÍA AMPLIFICACIÓN TOTAL
Aumento del tamaño Incremento de la imagen sin que Producto de la lente ocular por
de la imagen puedan percibirse en mayores detalles el objetivo
PODER DE RESULUCIÓN
Medida de la capacidad para ver puntos
vecinos como entidades diferente
microscopio óptico 0.2 micrómetro o 200
nm
MEDIDAS DE MICROSCOPÍA
Milímetro: milésima parte del metro
(mm)
Micrómetro: milésima parte del
milímetro
Nanómetro: milésima parte del
micrómetro (nm)
MICROSCÓPIO ÓPTICO
Instrumento óptico que se
usa para aumentar o
amplificar la imágenes de
objetos y organismos no
visibles a simple vista.
Se utiliza par examinar
objetos transparentes o
cortados en láminas tan
finas que se transparentan.
Está conformado por tres
sistemas:
+ Iluminación
PARTES DEL MICROSCOPIO
USO DEL MICROSCOPIO
TINCIÓN DE GRAM
La tinción de Gram es la
más importante de la
tinciones diferenciales.
Gram positivo retienen
el cristal violeta cuando
se tratan con etanol
Gram negativo no
retienen el cristal violeta,
se tiñen con safranina o
fucsina de color rojo.
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Se ha constituido en una herramienta esencial para la
investigación en la ciencia porque ayuda a observar materia
muy pequeña.
Usa:
1. Haces de electrones como fuente de iluminación.
2. Electroimanes como sistema de lentes, pues se puede
enfocar en una pantalla fluorescente o una película
fotográfica o un detector digital que forma la imagen en una
computadora.
EL FACTOR LIMITANTE O PODER DE RESOLUCIÓN
El factor limitante del poder de resolución del
microscopio óptico compuesto es la longitud de
onda de luz.
Imagen en Imagen en
microscopio óptico microscopio
PODER DE RESOLUCIÓN DE MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
Debido a que el microscopio electrónico utiliza electrones y
los electrones tienen una longitud de onda de 0.004 nm
(100,000 más corta que la de la luz), pueden mostrar
estructuras mucho más pequeñas, por lo que presentan alto
TIPOS DE MICROSCÓPIO ELECTRÓNICO
Microscopio de Microscopio de
Transmisión Barrido
ÓPTICA VS ELECTRÓNICA
M. ÓPTICO M.E. TRANSMISIÓN M.E. BARRIDO
MICROSCOPÍA ÓPTICA
VS
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
MICROSCOPÍA DE TRANSMISIÓN
Los electrones pasan a Límite de
través de la muestra, resolución
la cual debe cortarse de 1 a 2 nm
en finas capas.
MICROSCOPIO DE BARRIDO
Los electrones chocan (barren) con la muestra, en
lugar de atravesarla. Produce imágenes
tridimensionales de la superficie del objeto.
