Género Yersinia

Clasificación clásica
• Reino: Bacteria
• División: Protobacteria
• Clase: Gamma protobacteria
• Orden: Enterobacteriales
• Familia: Enterobacteriaceae
• Género: Yersinia
Especies del género Yersinia
10 especies de las cuales 3 son patógenas
para el hombre:
• Yersinia pestis
• Yersinia enterocolitica
• Yersinia pseudotuberculosis
 Características morfológicas y
biológicas del género Yersinia
Las mismas que los de las enterobacterias:
• Bacilos Gram –
• Movilidad v
• No tienen espora ni cápsula
• Anaerobios facultativos
Sin embargo son más pequeñas que las demás
enterobacterias y el agrupamiento es variable:
aislados o en cadena
 Características bioquímicas del
género Yersinia
Las mismas que las de las enterobacterias:
• Oxidasa -
• Fermentan la glucosa (sin producción de gas)
• Reducen los nitratos en nitritos (nitrato reductasa)
+ las características propias del género:
• No poseen lisina descarboxilasa
• No poseen triptófano desaminasa
• No producen gas (H2S)
• No crecen en el citrato como única fuente de C
• No fermentan la lactosa
• Pero test ONPG +
• Fermentan el manitol
 Tema 4
Yersinia enterocolitica
Características morfológicas y
biológicas
• Bacilo G- corto (1.3-3.5 m de largo,
0.5-1.0 m de ancho)
• Flagelos perítricos
• No esporulado
• No capsulado
• Anaerobio facultativo
 Características bioquímicas que diferencian Y.
enterocolitica de las demás especies patógenas

Y. pestis Y. pesuedotuberculosis Y. enterocolitica

Sacarosa - - +

Ureasa - +++ +++

Indol - - - (+)

ODC - - +
 Movilidad
37ºC 28ºC

Y. pestis - -

Y. pesudotuberculosis - +

Y. enterocolitica - +
 Factores de crecimiento
• Temperatura: entre 0 y 42 ºC
temperatura óptima:29 ºC
• pH: entre 4 y 10
pH óptimo: entre 7 y 8
• [sal]: no puede crecer en
presencia de [sal] > 5%
 Resistencia y sensibilidad
• Temperatura: Y.enterocolitica es destruida
en 1-3 min. 60 ºC / Bastante resistente a
la congelación
• Acidez
• Radiaciones ionizantes y UV
• Nitritos y nitratos
• Sal
• cloro
Biovariedades y serovariedades
• Y. enterocolitica es muy heterogénea, siendo
divisible en un gran número de subgrupos,
principalmente con arreglo a la actividad
bioquímica y a los antígenos O del LPS.
• Biovariedades: 1A, 1B, 2, 3,4, 5.
• Serovariedades:
- antígenos somáticos O (75)
- antígenos flagelares H (18) (no se suelen
tomar en consideración)
prueba 1A 1B 2 3 4 5
Hidrolisis del Tween (Tween + + - - - -
esterasa)
Hidrólisis de la esculina d - - - - -
Producción de indol + + (+) - - -
Fermentación de la D- xilosa + + + + - d
Reacción de Voges-Proskauer + + + + + (+)

Fermentación de la trehalosa + + + + + -
Reducción del nitrato + + + + + -
Pirazinamidasa + - - - - -
Β-D glucosidasa + - - - - -
prolinopeptidasa d - - - - -

Esquema del biotipado de Yersinia enterocolitica

 Hidrólisis del Tween
• Tween: estér de sorbitol y de ácidos grasos de cadenas
largas
• Medio del Sierra al Tween 80 (g/L)
- Peptona 10
- NaCl 5
- CaCl2 0,1
- Agar 15
- autoclavar 30 min 120ºC, y añadir 100 mL de solución
acuosa al 10 % de Tween 80 a 900 mL de medio
- sembrar , incubar a 25ºC – 24-48 horas
• Tween esterasa + halo transparente alrededor de las
colonias
• Interpretación: el calcio forma cristales insolubles con los
ácidos grasos liberados por la actividad estérasica sobre
el Tween 80.
 Hidrólisis de la esculina
• Esculina = glucosa + esculetina
• Medio agar con esculina (g/L)
- Peptona 10
- Citrato de hierro amoniacal 1
- Esculina 1
- Agar 20
autoclavar, sembrar (picadura central) y incubar a 30 ºC; observar
durante 5 días
• La esculinasa (β- glucosidasa) hidroliza la esculina rompiendo el
enlace glucosídico entre la glucosa y la esculetina
• La esculetina reacciona con el hierro III del citrato de hierro
amoniacal dando lugar a un compuesto de coloración negra.
 Poder patógeno
• Se caracteriza por 2 componentes:
1- secreción de una enterotoxina
2- su poder invasivo (principalmente)
La virulencia de las cepas está relacionada
con su carácter invasivo en los enterocitos
aunque se han comprobado cepas
invasivas no patógenas
 Los determinantes de virulencia de
Y. enterocolitica
• Los codificados • Los especificados por
un plásmido de
cromosómicamente virulencia
-invasina -YadA
-ail -Yops

-enterotoxina
termoestable (Yst)
-LPS
-adquisición de hierro
 Los factores de virulencia (I)
1- La invasina
• Una proteína 91 KDa de la mb. externa producida por
todas las serovariedades virulentas de Yersinia
enterocolitica
• Confiere al microorganismo la capacidad de adherirse y
entrar en las células epiteliales
• El término a. a. está insertado en la mb. externa
bacteriana y el termino carboxílico está expuesto en la
superficie.
• La porción carboxílica especifica la unión de la invasina
a ligandos específicos (las integrinas β) de las células
hospedadores (las células epiteliales, los macrófagos,
los linfocitos T)
• Las proteínas Inv se expresan sobre todo a 28 ºC
 Los factores de virulencia (II)
Otras proteínas expresadas por Yersinia
enterocolitica
2- Proteínas Ail: en la mb. externa de las cepas virulentas;
también favorecen la entrada a la célula huésped
3- Proteínas YadA: son adhesinas codificadas por
plásmidos; se unen a las integrinas beta 1 en las células
epiteliales estimulando la interiorización bacteriana por
endocitosis (permiten que las células invadan el epitelio
del íleo).
1, 2 y 3  permiten la colonización y la invasion bacteriana
de la mucosa intetsinal.
4- Proteínas superficiales Yops: son proteínas que
destruyen las defensas inmunes (inhibición de la
fagocitosis, apoptosis de los fagocitos)
 Factores de virulencia (III)
5- LPS (toxicidad : lípido A)
6- Adquisición de hierro
7- Una enterotoxina termoestable producida durante el
periodo de crecimiento (Yst) responsable de la diarrea
durante la infección intestinal (secretada únicamente si
la temp. <30ºC)
• Resiste al calor (121 ºC – 30 min.)
• Aguanta el frío (4 ºC – 7 meses)
• No es afectada por proteasas ni lipasas
• Aguanta las variaciones de pH (entre 1 y 11)
►Virulencia relacionada con el carácter invasivo de las
cepas.
 Mecanismo invasivo
Bacterias ingeridas con el alimento contaminado
con heces humanas o animales infectada
s

Adhesión a las células mucosas

de las placas de Peyer

Endocitosis (X débil, acción citotóxica)

Liberadas en la lamina propia intestinal

Invaden las células fagocitarias y se multiplican
causando una reacción inflamatoria local

El conjunto de lesiones producidas origina:

mala absorción, pérdida osmótica de líquidos diarrea
Yersinia puede ser eliminada por las reacciones inflamatorias
o bien pasar a la sangre por vía linfática
 Formas clínicas
• Periodo de incubación: 1-11 días
• 3 formas clínicas:
1- formas entéricas o enterocolíticas
2- formas pseudo-apendiculares
3- otras formas
 Formas entéricas o enterocolíticas
 Niños, especialemnte < 5 años
• Diarrea líquida o semilíquida, a veces
viscosa o purulenta; en raras ocasiones
sanguinolenta pero siempre maloliente.
• 15 a más deposiciones al día
• Muchos ruidos intestinales
• Dolor abdominal
• Fiebre de bajo grado, vómitos no
constantes
• Rara vez la enteritis aguda puede avanzar
hacia la ulceración y perforación intestinal,
el megacolon tóxico, o la trombosis de las
venas mesentéricas
• La angina es un acompañamiento
frecuente
• La enfermedad dura desde unos días
hasta 3 semanas (el niño se cura
espontáneamente)
 Formas pseudo-apendiculares
 Niños > 5 años y adolescentes hasta 15
años y personas debilitadas
• Dolor en la fosa ilíaca derecha (falso
diagnostico de apendicitis)
• Diarrea, consecuencia de una adenitis
mesentérica e ileítis terminal aguda
• Náuseas, vómitos y fiebre no son
constantes.
 Otras formas
Son manifestaciones poco habituales que
se presentan casi exclusivamente en
adultos
• Formas articulares con artritis
• Formas cutáneas con eritema nodoso
• Formas oculares, óseas y urinarias
• Formas septicémicas
 Diagnóstico
• Los síntomas aparecen 24 horas después de la
exposición a Yersinia. La infección sigue alguno de
estos 4 patrones:
1) Los niños < 5 años : enteritis aguda con diarrea
prolongada
2) Los niños mayores y los adultos: gastroenteritis, ileitis
terminal, linfadenitis mesentérica
3) Las mujeres de 15 a 45 años: diarrea acompañada de
artritis y eritema nodoso
4) Abscesos hepáticos: individuos con enfermedad
hepática preexistente, los lactantes, pacientes con
diabetes.
El diagnostico se confirma mediante un cultivo a partir de
las heces
 Tratamiento
• Antibióticos (cloranfenicol, gentamicina)
• Los pacientes deshidratados requieren
reposición de líquidos y electrolitos.
• Los síndromes de gastroenteritis y
adenitis mesentérica son frecuentemente
autolimitados y pueden no requerir
tratamiento antimicrobiano a menos que
sean graves.
 Epidemiología
• Germen telúrico
• También en agua
• 1962: primera cepa aislada de las
heces humanas diarreicas en
Dinamarca.
• Desde entonces un crecimiento
exponencial de la enfermedad
• Transmisión: fecal-oral
• Incidencia global más importante en
países fríos
 Reservorio
• Muchos animales son considerados como reservorios
naturales pero las cepas no son patógenas para el
hombre
ej: biotipo 5 → infección en liebre y cabra pero no en
hombre
• El principal animal que alberga las cepas patógenas
para el hombre es el cerdo  cepas aisladas
frecuentemente en la boca (lenguas- amígdalas) y en las
heces. La infección es asintómatica.
Los serotipos patógenos al hombre pertenecen:
- al biotipo 2 y serotipo O: 5, 27
-al biotipo 4 y serotipo O:3
-raramente al biotipo 1B y serotipo O: 8, 21.
• Ocasionalmente los bovinos- ovinos pueden albergar
cepas patógenas, rara vez los perros y otros animales
domésticos.
 Asociación con los alimentos
• Gran aptitud para invadir la mayoría de
los productos alimenticios
• Se ha demostrado su presencia en:
leche y derivados, carnes
(especialmente cerdo), pescado,
marisco, frutas y hortalizas, platos de
arroz, agua utilizada en preparaciones
culinarias, canales de aves de corral,
etc…
Brotes producidos por alimentos (I)
• Los brotes de yersiniosis son raros
• Casi todos atribuidos a la leche
-1976 N.Y: brote por serovariedad O:8 , 217
afectados: leche sabor de
chocolate/contaminación post-pasteurización
-1981 N.Y: leche en polvo reconstituida /
manipulador alimentos
-1982 EEUU: 172 casos- Leche pasteurizada
(estiércol cerdo)
Brotes producidos por alimentos (I)
-1989, EEUU: O3-15 niños afectados
Despojos crudos (intestino del
cerdo)→manipuladores de
alimentos→niños
-1982, Pensylvania: brotes de judías-O:8 /
agua del pozo
-1981, Washington: O8- tofu /agua de
manantial
 Prevención
• Producción y cría de animales exentos de
gérmenes
• Sistemas higiénicos de transporte y sacrificio de
animales
• Aplicación efectiva de calor a los alimentos (un
tratamiento de 71,8 ºC – 18 segundos las
destruye en la leche)
• Extirpación de la lengua y de las amígdalas
como operación separada y previa al sacrificio
del animal (cerdo)
 Medio de cultivo
• Enriquecimiento en
- agua de peptona 4ºC- 3 semanas
-medio de Rappaport con carbenicilina 22-
25ºC 1-5 días.
• Aislamiento: medio CIN + antibióticos
incubación: 24-48 h, 30 ºC
 CIN (cefsulodina – irgasan -novobiocina)
• Polipeptona 20g
• Extracto de levaduras 2g
• Manitol 20g
• Desoxicolato de sodio 0,5g
• Colato de sodio 0,5g
• Cloruro de sodio 1g
• Piruvato de sodio 2g
• Sulfato de magnesio 10mg
• Rojo neutro 30 mg
• Cristal violeta 1mg
• Irgasan 4mg
• Agar 14 g
pH 7,4-autoclavar 15 min-124ºC- añadir la mezcla de
antibióticos (en 5 mL de agua esteril)
Cefsulodina 7,5 mg
Novobiocina 14g
 Enriquecimiento
en agua de
peptona
4ºC-3 semanas

Medio Rappaport Agar CIN: 24-48 horas; 28ºC

con carbenicilina
22-25ºC-1 a 5 días Manitol +  Yersinia
 Confirmación
1- β-galactosidasa
• ONPG hidrolasa

Suspensión bacteriana
en agua fisiológica
+tolueno Hidrólisis +
+ONPG
 Confirmación:
2- búsqueda de ureasa
• Medio stuart: fosfato monopotásico,
fosfato disódico, extracto de levaduras,
urea, rojo fenol- pH: 6,8
• Incubación 30 ºC durante 24 horas
CO (NH2)2 + H2O→2NH3 + CO2
CO2 + 2NH3+ H2O→CO3 (NH4)2
• La presencia de ureasa se traduce por
una alcalinización del medio detectable
por el viraje del indicador en el tubo