Microbiología-Módulo II

1) Introducción a la célula procariota. (Claudia

Etchebehere)

2) Taxonomía y clasificación de procariotas (Javier

Menes)

3) Crecimiento microbiano (Gianna Ceccetto)

4) Procesos de obtención de energía (Silvana Tarlera)

Introducción a la célula
procariota
 Bibliografía
Brock, Madigan, Martinko, Parker. 2000 Biología de los microorganismos, 8 ed, Prentice Hall
Prescott, Harley, Klein 1999 Microbiología, McGraw-Hill Interamericana.

Página web de la Facultad de Química (Cátedra Microbiología)

www.fq.edu.uy
Página de la Universidad de Wisconsin:
www.bact.wisc.edu
 Esquema
• Microorganismos, qué son?.
• Tamaño y forma
• Diferentes formas de organización celular
• Pared (gram +, gram-, Archaea)
• Membrana.
• Citoplasma y genoma.
• Estructuras típicas:
– Fimbrias, pili, flagelo, endoesporas, inclusiones
citoplasmáticas, cápsula.
• Diferencias entre Bacteria, Archaea y Eucarya.
 Qué son los
microorganismos?
• Organismos que no pueden verse a simple
vista, al menos en parte de su ciclo

• Organismos que viven como células aisladas

o entidades que contienen ácidos nucleicos
capaz de replicarse, por lo menos en parte
de su ciclo.
• Incluye algas, hongos, protozoarios,
bacterias y virus.
 Historia Microbiología
• 1664, Robert Hooke, células vegetales.

• 1673, Anton van Leeuwenhoek, mercader de

telas, describe los microorganismos.

• 1877, Robert Koch, método de tinción,

desarrollo de medios de cultivo sólido.
 Microscopios
• Ojo humano 0.2mm.

• Microscopio óptico , resolución

máxima 0.2 micras (1 micra).

• Microscopio electrónico, resolución

máxima 0.5nm
PROCARIOTAS
TAMAÑO: célula eucariota versus célula
procariota
Tamaños
Formas
 FORMA DE LAS BACTERIAS

cocos bacilos espirilos

Area de superficie vs. volumen

Tamaño pequeño intercambio

más eficiente, permite mayor
velocidad metabólica
Estructura celular
 Pared celular
• Bacteria:
– Gram positivo
– Gram negativo
– Sin pared
• Archaea:
– Diversas estructuras
– Sin pared
 Funciones de la pared
• Rigidez (mantener la forma, evitar la
lisis).
• Comunicación con el medio exterior.
• Puede estar involucrada en
patogenicidad (LPS)
• Barrera para algunas moléculas.
• Espacio periplásmico (enzimas de
transporte, hidrolíticas, etc.)
 Formación de Protoplastos

Baja concentración
de solutos

Alta
concentración
de solutos

Lisozima -- proteína que rompe el enlace

glicosídico 1-4 en el peptidoglicano
Gram +
Bacteria Gram-
Estructura del Peptidoglicano
Pared Celular Gram Positiva
 Otros compuestos químicos
característicos de la pared de Gram+

• Ácidos teicoicos

• Ácidos teicurónicos

• Ácidos micólicos
Membrana Externa de Gram Negativos

Porinas - proteinas que permiten el pasaje de moléculas

pequeñas a través de la membrana
-- específicas e inespecíficas
 Lipopolisacárido (LPS)

• Lípido A (NAG-P + grupos acilos)

• Núcleo del polisacárido
– contiene KDO (cetodesoxioctonato) otros carbohidratos
(ramnosa, ácido galacturónico)
– usualmente específico de especies
• O-antigeno
– número de repeticiones variables
– también contiene carbohidratos
– específico de cepa
• A menudo tóxico para animales - endotoxina
• Crea superficies densamente hidrofílicas
 Funciones del Periplasma
(E. coli)

Proteínas de periplasma de E.coli.

Proteínas de unión
para amino acidos (e.g. histadina, arginina)
Enzimas de biosíntesis
Ensamblado de mureína
Enzimas de degradaciónde polímeros
proteasas
Enzimas detoxificantes
Beta-lactamasas (e.g. penicillinasa)
• Algunas bacterias no poseen pared

• Mycoplasma

• Membrana celular mas gruesa pueden

tener esteroles y lipoglicanos.

• Pleiomórficos
 Pared celular de Archaea
• No contiene peptidoglicano
• Puede ser de
– pseudopeptidoglicano (pseudomureina) tiñe G+
– pseudomureina cubierta de proteina,tiñe G+
– monocapa superficial de proteina o
glicoproteina, sin pseudomureina (alg halófilos,
alg.metanogénicos y termoacidófilos) tiñe G-
• Existen Archaea sin pared
Pseudopeptidoglicano de
Archaea
 Funciones de la pared
• Rigidez y resistencia osmótica (mantener la
forma, evitar la lisis).
• Comunicación con el medio exterior.
• Puede estar involucrada en patogenicidad
(LPS)
• Barrera para algunas moléculas (porinas en
gram negativos).
• Espacio periplásmico (enzimas de
transporte, hidrolíticas, etc.)
 La membrana celular
Estructura:
• Bicapa fosfolipídica con proteínas
embebidas; puede contener también
hopanoides de estructura similar al
colesterol.

• En Archaea, éteres de alcohol isoprenoide,

algunas forman monocapas.
Estructura de la Membrana
Citoplasmática
 Los lípidos en Bacteria y Archaea
tienen diferentes enlaces químicos
Ester - Bacteria Eter - Archea

Isopreno
 Funciones de Membrana
Citoplasmática
• Barrera de Permeabilidad
– sólo moléculas pequeñas, sin carga, hidrofóbicas,
pueden atravesar la membrana por difusión.
• Ancla de Proteínas
– transporte, generación de energía, quimiotaxis
• Generación de fuerza proton motriz
 En fotótrofas: Estructuras intracitoplasmáticas,
soportan el aparato fotosintético
(Vesículas, túbulos, tipo tilacoides)
• Síntesis de pared, y estructuras extracelulares.
 Membrana
citoplasmática de E. coli
 Estructura celular procariota - DNA
• No tiene núcleo. El DNA está en el citoplasma:
“nucleoide” : zona que ocupa el DNA.

• Es haploide. Genoma: una única molécula de DNA de doble

cadena, circular.

• El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) en

procariotas de vida libre; 1000-5000 genes

• No contiene histonas.

• Puede contener otros elementos genéticos no genómicos:

plásmidos y genomas fágicos.
Procariotas

• No tienen
membrana
nuclear
 DNA Cromosomal
–DNA circular
cerrado
–Superenrrollado.

–No hay porcesamiento del

ARNm
–La transcripción está
ligada a la traducción.
 Citoplasma
• Proteínas (enzimas, complejos
enzimáticos, estructurales)
• Ribosomas (70S: 55 proteínas, rRNA 5S,
16S, 23S)- polisomas
• mRNA, tRNA
• Otras macromoléculas, solutos
• Sin estructura visible al microscopio
• No tienen citoesqueleto.
 Estructuras características
• Estructuras con funciones específicas.
• No todos los microorganismos las tienen.
• Son características de género y especie
(taxonomía)
• Ejemplos:
– fimbrias, flagelo, pili, endoespora, cápsula,
inclusiones citoplasmáticas
 Fimbrias - Pili
• Fimbria - filamento proteico
corto, involucrado en
funciones de adhesión a
superficies.

• Pelo sexual - unión a célula

receptora durante la
conjugación.
 Flagelos

Mas de 40 genes involucrados

La energía la proporciona la fuerza protomotriz
 Flagelos
Sólo detectados por técnicas de tinción específicas
Anaerobaculum mobile sp. nov.
Flagelo insertado lateralmente

Barra 0,5 micras

 Endosporas

• Resistencia al calor, radiación, desecación.

• Producidas principalmente por los géneros Bacillus y
Clostridium
• Permite la supervivencia en ambientes desfavorables
• DNA protegido por ácido dipicolínico y proteínas.
• Luego de la activación por stress, la disponibilidad de
nutrientes dispara la germinación y el crecimiento
• La localización de la espora en la célula puede ser
usada para la identificación
Estructura de la espora
 Formación de esporas

A- el ADN se duplica y enrolla alrededor del eje central

(filamento axial)
B- Uno de los cromosamas se rodea de membrana plasmática.
C- el protoplasto es rodeado por la célula madre
D- se sintetizan las cubiertas de la espora.
E- se elimina agua, se forma estructura resistente al calor.
F- se libera la espora por lisis de la célula madre.
En B. subtilis 6-7 horas, 50 genes.
 Inclusiones
citoplasmáticas
• Algunas bacterias tienen estructuras internas
– gránulos de almacenamiento - polifosfato,azufre,
polihidroxibutirato (PHBs)
– vesículas de gas – flotación
– Carboxisomas, clorosomas.
• Gránulos de polihidroxibutirato (PHBs)

vesículas de gas
flotación
 Cubiertas extracelulares
• Glicocalix: Material externo a la pared celular
– Cápsulas - Material en la superficie celular
– Capas mucilaginosas - Material adherido, menos
fuertemente
– Capa S: Subunidades proteicas o glicoproteicas. G+, G-
y Archaea. Pueden constituir la pared
• Funciones
– Protección contra defensas del huésped (fagocitosis)
– Protección contra desecación
– Protección contra virus, toxinas
– Adhesión a superficies (células, objetos inanimados)
formación de biofilms.
Glicocalix

Tinción negativa

Microscoía
electrónica
 Diferencia entre la estructura celular de
Bacteria, Archaea y Eucarya
Propiedad Bacteria Eucarya Archaea
Membrana NO SI NO
nuclear
Organelos NO SI NO
Tamaño 70S 80S 70S
ribosoma
Peptidoglicano SI NO NO
en la pared
Esteroles en NO SI SI
membrana (hopanoides)
Lípidos de Ester unidos Ester unido a Eter,
membrana a glicerol glicerol ramificados
 ¿Cómo se estudia?
• Microscopía (óptica y electrónica)
• Análisis químicos y bioquímicos
• Estudios genéticos (mutaciones)