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INCLUSIÓN Y

PROCESAMIENTO
DE TEJIDOS
CAMILA DEL CARMEN CONTRERAS GUZMÁN
PASANTE TSU HISTOTECNÓLOGO Y EMBALSAMADOR
Fijación
Proceso mediante el cual se preservan los
tejidos deteniendo la autólisis,
permitiendo que los tejidos permanezcan
sin cambios muy cerca del estado in vivo.
FORMOL – FOSFATO (FORMOL TAMPONADO): FORMOL – BICLORURO DE MERCURIO.
FIJADOR DE RUTINA Tejidos hematopoyético y linfáticoreticular.
- solución de formaldehído (37% a 40%)-------------- Se utiliza para los tejidos en los que se aplicará técnicas
100 ml inmunohistoquímicas.

- agua destilada ------------------------------------------- - solución de formaldehído (37% a 40%)--------------150 ml


900 ml
- agua destilada--------------------------------------------850 ml
- fosfato de sodio monobásico (NaH2PO4 –
H2O)-----4.0 gr - bicloruro de mercurio-------------------------------------50 gr

- fosfato de sodio dibásico (Na2HPO4)------------------


6.5 gr

FORMOL – CLORURO DE CALCIO. LÍQUIDO FIJADOR DE BOÜIN.


Se recomienda fijar las muestras en esta solución cuando se desean Tiene un buen poder de penetración y de difusión. Ofrece
preservar lípidos, especialmente fosfolípidos: Antes de obtener los cortes, resultados satisfactorios con ciertos tricrómicos como el de
las muestras se incluyen en gelatina o se congelan directamente para Masson.
seccionarlas con empleando micrótomos de congelación o el criostato. Se le emplea con resultados óptimos en la fijación de
embriones y fetos pequeños pues ejerce cierto poder
- solución de formaldehido (37% a 40%)---------------100 ml descalcificante.

- cloruro de calcio--------------------------------------------10 gr - solución acuosa saturada de ácido pícrico-------------750 ml


- solución de formaldehido (37% a 40%)---------------250 ml
- agua destilada----------------------------------------------900ml - ácido acético glacial--------------------------------------- 50 ml
PRINCIPIOS PARA UNA
BUENA FIJACIÓN
1 2 3 4
Corte Inmediatez Sumerción Volúmen

En piezas de tamaño
El volumen
Cualquier demora El espécimen debe
considerable, del fijador
seca el tejido y estar será de 5-10
auxiliándose del
patólogo, para la acelera la completamente veces su
rápida penetración autólisis sumergido en el propio
del fijador fijador volumen.
TÉCNICA
HISTOLÓGICA
TREN CORTO
DURACIÓN 3-4 HRS
1.- ENJUAGUE MUY BREVE EN AGUA CORRIENTE
2.- COLOCAR EN ALCOHOL DE 96°, 3 CAMBIOS DE 15 A 20 MINUTOS C/U
3.-ALCOHOL ABSOLUTO, 3 CAMBIOS DE 15 A 20 MINUTOS C/U
4.-XILENO 2 CAMBIOS, 15 MINUTOS C/U
5.-PARAFINA HISTOLÓGICA, 3 CAMBIOS, 15 MIN EN CADA UNO
6.- INCLUYA
ESQUEMA 24 HORAS
MANUAL
USAR AGITADOR MAGNÉTICO Y RECIPIENTE DE BUEN TAMAÑO

1.- ALCOHOL DE 80% 1 HORA


2.- COLOCAR EN ALCOHOL DE 96°, 3 CAMBIOS 2 HORAS C/U
3.-ALCOHOL ABSOLUTO, HASTA LA MAÑANA SIGUIENTE
4.-XILENO 3 CAMBIOS, CAMBIOS 1 HORA C/U
5.-PARAFINA HISTOLÓGICA, 3 CAMBIOS, 1 HORA EN CADA UNO
6.-SOLIDIFIQUE EN PARAFINA
7.- DERRITA LA MAÑANA SIGUIENTE
8.- PARAFINA HISTOLÓGICA AL VACÍO 2 HORAS
9.- INCLUYA
ORIENTACIÓN E INCLUSIÓN
EN PARAFINA
La orientación del espécimen se refiere al
correcta inclusión, localización y orientación
CONSIDERACIONES NECESARIAS PARA
LA INCLUSIÓN
ESTRUCTURAS TUBULARES

VASOS DEFERENTES, VENAS, ARTERIAS Y OVIDUCTOS DEBEN SER INCLUÍDAS EN UNA


FORMA TAL QUE LA CUCHILLA CORTE A TRAVES DE LA LUZ TUBULAR.
ORIENTANDOLO LO MÁS VERTICAL POSIBLE
SUPERFICIES EPITELIALES

PIEL, INTESTINO VESÍCULA BILIAR, VEJIGA


URINARIA, ÚTERO.

LA SUPERFICIE EPITELAIL DEBE COLOCARSE EN


LA PARTE MÁS ALTA DEL BLOQUE PARA QUE
SEA LA ÚLTIMA EN SER CORTADA; PUES AL
LLEGAR LA NAVAJA EN ULTIMO MOMENTO
MIMIMIZA LA PRESIÓN QUE CAUSA
DISTORSIÓN DE LA CAPA EPITELIAL
ESPECIMENES MULTIPLES

DEBEN SER INCLUÍDOS UNO JUNTO AL OTRO.


PARA PODER IDENTIFICAR LA SUPERFICIE EPITELIAL PUEDE AGREGARSE SOLUCIÓN
MATRIZ DE EOSINA EN EL ALCOHOL ABSOLUTO EN EL PROCESADOR DE TEJIDOS, DE
ESTA MANERA SE PODRÁ IDENTIFICAR DE MEJOR MANERA
MULTIPLES ESPECIMENES
TEJIDOS BLANDOS Y GANGLIOS LINFATICOS DEBEN DE SER COLOCADO CON
SUFICIENTE ESPACIO ENTRE ELLOS, LA ORGANIZACIÓN METÓDICA DE ESTOS
PERMITIRÁ EL ESTUDIO MÁS FÁCIL
ESTRUCTURAS QUÍSTICAS

DESPUES DE LA DISECCIÓN, LOS QUISTES PEQUEÑOS ADOPTAN UNA FORMA


QUÍSTICA DE CÚPULA. DEBEN SER INCLUÍDOS CON LA SUPERFICIE DE CORTE HACIA
ABAJO PARA QUE LA CUCHILLA CORTE TODAS LAS CAPAS DE LA PARED DE QUÍSTE.
TIPOS DE PARAFINAS

45° 60° 56°


PARAFINA BLANDA PARAFINA DURA
PUNTO DE FUSIÓN PUNTO DE FUSIÓN PUNTO DE FUSIÓN
ALREDEDOR DE 45°C ALREDEDOR DE 60 °C
FUNCIONA MEJOR CON
ALREDEDOR DE 56 °C
FUNCIONA MEJOR CON PARA PROPOSITOS
TEJIDOS BLANDOS TALES
TEJIDOS DUROS TALES
COMO TEJIDO GENERALES
CONECTIVOS
COMO TEJIDO FIBROSO
DENSO O HUESO
PROCESO TÉCNICO DE
INCLUSIÓN EN PARAFINA
A. SE ABREN LAS CAPSULAS DE INCLUSIÓN VERIFICANDO SE ENCUENTRE
DEBIDAMENTE ETIQUETADAS.
B. SE DEPOSITA EL TEJIDO EN EL MOLDE DE METAL Y SE AGREGA PARAFINA,
ORIENTANDO ADECUADAMENTE.
C. UNA VEZ ORIENTADO SE COLOCA MÁS PARAFINA HASTA EL BORDE DEL
MOLDE COLOCANDO ENCIMA EL CASSETE Y RELLENADO ESTE CON MÁS
PARAFINA.
D. DEPOSITARLO EN LA PLACA FRÍA PARA SOLIDIFICACIÓN.
E. SE DESMOLDA Y ESTA LISTO NUESTRO BLOQUE.
MICROTOMIA
BAÑO DE FLOTACIÓN
TINCIÓN Y MONTAJE
GRACIAS
BIBLIOGRAFÍA
LUNA LG, EG METHODS FOR REPROCESSING DRIED TISSUE
SPECIMENS. HISTOLOGIC. 1978;8(2):1.

Bermejo M.ª José. Técnico especialista en Anatomía Patológica


del Servicio Gallego de Salud. Volumen 2. 1ª Edición. España:
Editorial MAD S.L.; 2006.

https://citopatveterinaria.com/procesamiento-histologico-
rutinario-de-los-tejidos/

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