Soluciones Químicas Productivas: Validación de Métodos Analíticos

Soluciones Químicas Productivas
Laboratorio de Aseguramiento de Calidad
VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS

El Tigre, Marzo de 2023
1
1. ¿QUÉ ES LA VALIDACIÓN?
Es el proceso de definir, unos requisitos analíticos y de

confirmar que el método, bajo consideraciones tiene las
capacidades de desempeño consistentes con lo que la
aplicación propuesta requiere.
Nos permite confirmar que un método, es adecuado para su

uso previsto.
Nos permite establecer las características de desempeño y

limitaciones de un método.
Soluciones Químicas Productivas / Lipesa, Marzo de 2023 2

2. ¿POR QUÉ TENGO QUE VALIDAR?
Para demostrar:
Que los métodos que utilizamos proporcionar resultados

confiables para sus finalidad y propósito perseguido.
Que:
Los resultados obtenidos son los correctos, confiable, en

fin demostrar que el laboratorio y los analistas son
competentes para aplicar ese método.
Permite:
A los químicos demostrar que un método cumple con los

objetivos propuestos, es lo suficientemente fiable para
tomar con confianza cualquier decisión basada en él.

3. ¿CUÁNDO SE DÉBE VALIDAR?
Un método débe validarse, cuando es necesario verificar que sus

parámetros de desempeño son adecuados para ser usados con un
problema analítico en particular. Por ejemplo:
Cuando:
Un nuevo método ha sido desarrollado, para un problema en

particular.
Un método establecido ha sido revisado para incorporarle

mejoras o para hacerlo extensivo a un nuevo problema
(adaptación).
El control de calidad indica que un método establecido, está

cambiando con el tiempo. (cuando se sale de rango)

Cuando:
Un método normalizado es utilizado en un laboratorio diferente, o con

analistas diferentes o con instrumentos diferentes.
Cuando:
Se quiere desmotar la equivalencia entre dos métodos, por ejemplo: uno

nuevo y uno normalizado o establecido.
Cuando:
Se cuantifica se tiene que validar, el métodos pueden ir cambiando por el

instrumento, por las variaciones de las condiciones ambientales, por el
analista, por la muestra o por alguna interferencia.

Los métodos
normalizados no se
validan, pero es
necesario llevar a cabo
la verificación o
aplicabilidad del
método analítico.
La verificación o
aplicabilidad es
una validación
parcial del método.

4. ¿QUÉ NECESITAMOS PARA VALIDAR?
Requerimos la implementación de un buen sistema

de gestión de calidad, para poder minimizar las
VARIACIONES, que es el enemigo de la validación.
La naturaleza de la variación
puede ser de tipo aleatorio o sistemático.

5. TIPOS DE VARIACIONES
Variantes Variantes
Aleatorias Sistemáticas
Están ligadas al error Esta ligada al error sistemático es la

aleatorio que es la variación variación que ocurre de igual modo
entre las lecturas sucesivas en todas las mediciones que se
obtenidas de experimentos realizan de una magnitud y pueden
bajo condiciones idénticas. originarse por un defecto del
instrumento una particularidad del
operador o del proceso de medición.
Su variación es
originada por la adición
conjunta de una serie Su variación esta
de causas. originada por una
causa bien definida.

6. FUENTES QUE GENERAN VARIACIONES
MANO DE OBRA: Variación derivada del factor humano.
MATERIA PRIMA: Variación derivada de la utilización de

materiales e insumos.
MEDIO AMBIENTE: Variación atribuida al entorno físico donde

se realiza el análisis .
MÉTODO: Variación derivada del sistema documental

establecido dentro del área de trabajo.
MAQUINAS: Variación derivada del uso de equipos e

instrumentos de medición.

7. ¿CÓMO CONTROLO LAS VARIACIONES?
• Para evitar que las variaciones afecte el

desempeño de los métodos analíticos debemos:
Disminuir las variaciones aleatorias.
Eliminar o controlas las

variaciones sistemáticas.

8. ¿CÓMO LO HAGO?
MEDIO
MANO DE MATERIA
AMBIENT
OBRA PRIMA
E
Analistas Los análisis se
Control de
adecuadamente realicen con
temperatura,
calificados y disolventes,
humedad y
capacitados, en las reactivos y
presión.
actividades estándares del tipo y
analíticas que de pureza adecuada.
realizan. Un área de
Evidencia documentada trabajo acorde a
Evidencia que contemple control los trabajos que
documentada manejo, se realicen .
que lo almacenamiento y
demuestre. disposición final de los
mismos.

8. ¿CÓMO LO HAGO?
MAQUINAS METODO
Los equipos deben estar

calibrados ajustados y Deben estar documentadas
verificados por los usuarios. todas las actividades
Y los instrumentos deben referentes al método.
ser tipo A.
El personal debe
estar capacitado Toda la información debe estar
sobre el uso, manejo estandarizada y detallada de
y limpieza del fácil manejo.
material volumétrico.
Los software utilizados

deben estar validados

9. VALIDACIÓN: DE UN MÉTODO NORMALIZADO
El analista debe familiarizarse, completamente con el nuevo método antes

de usarlo por primera vez.
• Alguien experto en el uso del método le hará la primera demostración

del método del analista.
Se debe usar el método bajo una efectiva supervisión, trabajar con los
materiales de referencia y muestras practicas.(Todos)
• El nivel de supervisión bajara cuando se demuestre que el analista es

lo suficientemente competente para aplicar el método.
Esta competencia puede ser establecida en termino de habilidad del

analista en alcanzar los niveles de desempeño declarados en el método,
como son los referidos a la repetibilidad, el limite detección, etc.

9. VALIDACIÓN: DE UN MÉTODO NORMALIZADO
Es necesario hacer una evaluación de cuantas muestras pueden

manejarse convenientemente a la vez. Es mejor analizar unas pocas
muestras bien, que intentar analizar un número grande y después tener
que repetir la mayoría de ellas.
• Asegurarse que cada cosa que se va necesitar para la aplicación del

método esté disponible antes de empezar el trabajo. Esto involucra el
reunir los equipos, reactivos y normas correctas. (Para todos los
participantes de la validación)
Si es necesario realizar alguna adaptación o cambio del método validado

por alguien más, entonces será necesario la revalidación del método.

10. VALIDACIÓN: DE UN MÉTODO NO NORMALIZADO
 Cuando se trabajan con métodos no normalizados y no validados el laboratorio

deberá demostrar que se ha:
Establecido las tolerancias requeridas por todas las mediciones ejecutadas

dentro del método (Volumen, temperatura, masa, etc.) que deben ser lo más preciso
al realizar las mediciones.
Establecer el Alcance.
Investigar y cuantificar todas las interferencias.
Identificar las fuentes importantes de error.

11. ¿QUÉ PARÁMETROS DEBO MEDIR PARA VALIDAR?
Selectividad (Especificidad)
Exactitud
Linealidad Limite de Detección
 sesgo
PARAMETRO DE DESEMPEÑO
Limite de cuantificación
Robustez
 Repetibilidad
Precisión  Precisión intermedia
 Reproducibilidad
12. ¿QUÉ ES LA EXACTITUD?
Es la Concordancia entre
el resultado de una Se debe utilizar el
medición y el Valor término precisión Exactitud es un
(convencionalmente) como equivalente de concepto cualitativo.
verdadero de la magnitud exactitud
medida.
El termino exactitud, cuando se aplica a un

Expresa que tan cerca conjunto de respuestas de ensayo,
está un resultado del involucra una combinación de
valor verdadero. componentes aleatorios y un componente
común de error sistemático o sesgo.

13. ¿QUÉ DEBO SABER DE LA EXACTITUD?
La exactitud es la cualidad que caracteriza

Expresa la proximidad entre el
la capacidad de un equipo de medición,
valor de referencia y un valor
para dar indicaciones (media de las
encontrado experimentalmente.
lecturas)
La validación de métodos busca

cuantificar la probable exactitud de
Aproximadas al valor verdadero de la magnitud los resultados evaluando, los
medida, con errores sistemáticos cercanos a ceros, efectos sistemáticos y aleatorios
a pesar de que los errores aleatorios puedan ser sobre los resultados. Por
altos. Mientras mayor sea la justeza del equipo de consiguiente la exactitud
medición, tanto menores serán sus errores normalmente se estudia como dos
sistemáticos y más fiel será la medición. componentes: la veracidad y la
precisión.

14. COMPONENTES DE LA EXACTITUD
Veracidad (Sesgo)
Exactitud V + P= E
Precisión (Dispersión)
Error absoluto= E aleatorio + E sistemático

E aleatorio = XI – Ẋ E sistemático = Ẋ - XV corrección= -ES

15. ¿QUÉ ES LA VERACIDAD?
Es una expresión de cuán cerca está la media de un conjunto de

resultados (producidos por el método) del valor verdadero.
Es la ausencia del error sistemático, está basada en la

comprobación de resultados promedios de un método (Ẋ) contra
valores conocidos, es decir, la veracidad se evalúa contra valores
de referencia, o sea, un valor verdadero.
La veracidad normalmente se expresa por medio del término

llamado sesgo (bias). El referirse a la veracidad como “la exactitud
de la media” generalmente no se recomienda

16. ¿QUÉ ES LA PRECISIÓN?
La precisión describe la repetibilidad y o la reproducibilidad de los resultados,

esto es la concordancia entre los valores numéricos de dos o más mediciones
repetidas se han realizado exactamente de la misma forma. En general, la
precisión de un método se obtiene con la facilidad simplemente repitiendo la
medición.
La precisión solo depende de la distribución de errores aleatorios y no se

relaciona al valor verdadero. Las mediciones de precisión normalmente, se
expresan en términos de la imprecisión y se computan como la desviación
estándar de los resultados del ensayo. Las mediciones cuantitativas de la
precisión dependen muchísimo de las condiciones estipuladas.

17. ¿QUÉ DEBO SABER DE LA PRECISIÓN?
La precisión es la capacidad de repetir:
Precisión
Repetibilidad (r) Reproducibilidad (R)
Determina (σ r) Precisión Determinar (σ R)

Intermedia

17. ¿QUÉ DEBO SABER DE LA PRECISIÓN ?
La repetibilidad y la reproducibilidad es más pequeña cuando un método a

sido ejecutado por un solo analista, en un mismo equipo, durante un corto
periodo de tiempo.
La reproducibilidad es mayor cuando se realizan análisis con fines

comparativos entres dos o más laboratorios, aunque se deben respetas
todas las condiciones ya que, al variar unas de ellas, la precisión y la
reproducibilidad se ven afectadas.
La precisión intermedia expresa la variación de los resultados dentro de

un mismo laboratorio, lo que varía es el día, los analistas y equipos
diferentes etc.
La precisión se declara mediante la desviación estándar o la desviación

estándar relativa. Tanto la repetibilidad como la reproducibilidad son
generalmente dependientes de la concentración del analito, por lo que
deben determinarse a varias concentraciones.

18. ¿QUÉ ES REPETIBILIDAD?
 Es el grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del

mismo mensurando, mediciones efectuadas con aplicación de la totalidad de las
mismas condiciones de medición.
El mismo
proceso de
medición.
 Estas condiciones se
denominan condiciones
La repetición
de repetibilidad y incluyen: El mismo sobre un
observador. periodo de
tiempo cortó.
El mismo
instrumento,
usando bajo las La misma
mismas ubicación.
condiciones.
19. ¿QUÉ DEBO SABER DE LA REPETIBILIDAD?
El límite de repetibilidad es el
La repetibilidad puede ser valor máximo, con una
expresada cuantitativamente probabilidad del 95% de la
en términos de las diferencia absoluta entre dos
características de dispersión resultado de ensayos
de los resultados. obtenidos bajo condiciones de
repetibilidad.
El límite de repetibilidad ”r”, es Para confirmación del límite de

el que le permite al analista repetibilidad R2-R1 , se
decidir si la diferencia entre los debe de cumplir por cada 20
resultados de un análisis por como mínimo como 19 análisis
duplicado de la muestra , que representa el 95%, si no
determinados bajo condiciones es así el método esta fuera de
de repetibilidad, es importante. control.

20. ¿QUÉ ES LA REPRODUCIBILIDAD?
 Es la concordancia entre los resultados de las mediciones del mismo

mensurando, cuando se varia una o más de las condiciones de medición.
 Para una expresión de la reproducibilidad sea válida es necesario especificar las
condiciones que varían. El principio de medición.

 Las condiciones cambiadas • El método de medición.
tales como: El observador
• El instrumento de medición.
El patrón de referencia.
• La ubicación.
Las condiciones de uso.

• El tiempo.
21. ¿QUÉ DEBO SABER DE LA REPRODUCIBILIDAD?
La precisión bajo condiciones de

La reproducibilidad puede ser reproducibilidad, es decir,
expresada cualitativamente en condiciones bajo las cuales los
términos de las características resultados son obtenidos con el
de dispersión de los mismo método, sobre ítems de
resultados. ensayos diferentes, con operadores
diferentes, en equipos diferentes
Una declaración valida de

El limite de reproducibilidad: Es reproducibilidad requiriere la
el valor máximo, con una especificación de las condiciones
probabilidad del 95% de la que han sido variadas. La
diferencia absoluta entre dos
reproducibilidad puede ser
resultados de ensayo
obtenidos bajo condiciones de expresada cuantitativamente en
reproducibilidad. términos de la dispersión de los
resultados.

22. ESPECIFICIDAD O SELECTIVIDAD
Es la habilidad de un método de medir solo lo que se intenta medir.
La capacidad de un método de determinar con exactitud y

específicamente al analito de interés en la presencia d otros
componentes en la matriz de la muestra , bajo las condiciones
declaradas de ensayo.
Es la habilidad de evaluar inequívocamente la analito en la

presencia de componentes que pueden esperarse que estén
presente. Típicamente estos últimos podrían incluir impurezas
productos de degradación, la matriz. Etc.

23. LÍMITE DE DETECCIÓN Y LÍMITE DE
CUANTIFICACIÓN
¿Cuándo lo determinó?
DETECCIÓN CUANTIFICACIÓ
N Método analítico se
utiliza para análisis
impurezas o trazas de
Es la cantidad mínima analito, puede ser
del analito que puede Es la cantidad mínima necesario establecer el
ser detectada aunque del analito que puede limite de detección y
no necesariamente cuantificarse, con una
adecuada precisión y cuantificación
cuantificada.
exactitud bajo
condiciones declaradas.
Una versión más Expresa la habilidad de un

moderna y estadística proceso de medición
es que el límite de química para cuantificar
detención es igual al adecuadamente a un
triple de la desviación analito
estándar (LD=3δ) de la
línea base o blanco

24. ¿QUÉ ES LA LINEALIDAD?
Es la capacidad del método para obtener resultados de

ensayo proporcionales a la concentración del analito
dentro de un rango dado.
Por tanto el rango lineal, es el rango de concentraciones

del analito, del cual, el método da resultado de ensayo
proporcionales a la concentración del analito. ****
Para demostrar la linealidad debemos evaluar la

linealidad del sistema y la linealidad del método.
La linealidad del método nos permite evaluar si los

resultados obtenidos son proporcionales a la
concentración del analito.

25. ¿QUÉ ES LA ROBUSTEZ?
 Es la capacidad que tiene el método analítico de proporcionales

resultados validos, en presencia de pequeños cambios, respecto a
las condiciones normales descritas por el mismo.
Procedimientos pueden Existen diversos factores

Cualquier proceso de
ser ( muestreo, que al ser ligeramente
análisis, que se realice
preparación de muestra, modificados pueden
conforme a un
medición del analito, afectar significativamente
procedimiento
adquisición de datos , el resultado final del
establecido
cálculos y resultados) análisis.
Un método analítico es
mas robusto entre
Varia (Tiempo y
Ejemplo: La preparación menos se vea afectado
velocidad de agitación,
de muestra sus resultados frente a
tiempo de reacción, pH)
una modificación en sus
condiciones analíticas.

26. ¿CÓMO INICIAMOS EL ESTUDIO ROBUSTEZ?
Se debe evaluar todo el

Se deben realizar cambios
análisis y definir cuales
deliberados en el método
factores son los que esperan
considerando los factores
influyan mas en el resultado
previamente establecidos.
final.
Se deben evaluar los efectos

Una forma eficaz para
de cada uno de los cambios
evaluar la robustez es
sobre el desempeño del
efectuando un diseño
método en condiciones
factorial.
normales de operación.

27. ¿QUÉ ES LA ADECUABILIDAD DEL SISTEMA?
Son un conjunto de pruebas preliminares que permiten comprobar

que el sistema de medición es adecuado para realizar la
determinación para la que se estableció el método analítico.
Nos permite evaluar si existe algún problema en sistema de

medición y si es el caso, se debe realizar los ajuste que
correspondan para corregir el problema previo al análisis de la
muestra.
Antes de comenzar la validación se deben establecer los criterios

para evaluar la operación del sistema de medición.

28. ¿QUÉ ES EL PROTOCOLO DE VALIDACIÓN?
 Es un procedimiento donde se define todos los criterios que el laboratorio

considera pertinente para realizar la validación, se debe considerar, que para la
validación de métodos analíticos se requiere:
Instrumentos Patrones de
Métodos Calificación de
calibrados y referencias
Documentados. las Analistas.
calificados. confiables.
Verificaciones o Listas de
Integridad de la Calificación de
calibraciones mantenimientos
muestra. proveedores.
intermedias. y equipos.
Definir las Estandarizar el

Buenas
condiciones, método: encontrar
practicas de
equipos reactivos, las condiciones
laboratorio.
muestreo. optimas.

29. ¿QUÉ SON LAS BUENAS PRACTICAS DE
LABORATORIO?
Se refiere a un sistema de calidad que abarca el proceso organizativo y las condiciones en las
que se planifican, realizan, supervisan, registran, notifican y archivan las actividades y análisis
del laboratorio. Las Buenas practicas del laboratorio garantizan la calidad e integridad de los
datos de las pruebas que se presentan. Son el conjunto de reglas en procedimientos
operacionales que buscan asegurar la calidad e integridad de los datos para estandarizar
protocolos, información y documentación de procesos.
¿Para qué sirven las Buenas Prácticas de Laboratorio?
sirven como guía para realizar ensayos con seguridad y rigor ,donde se obtengan datos
confiables. Establece las pautas recomendadas para la gestión de diferentes tipo de
ensayos. Es decir, las Buenas Prácticas de laboratorio representan un sistema de calidad
para los procesos organizativos con el objetivo de garantizar la validez y fiabilidad de los
datos obtenidos.
30. BPL DEL LABORATORIO
 Deben estar enfocadas a cumplir los debes de la Norma ISO/IEC 170025:2017

debido a que, con ellos se garantiza a los clientes de un laboratorio de ensayo o
calibración, ya sean internos como externos, que cuentan con la competencia
técnica, confiabilidad, imparcialidad, consistencia, además de que poseen un
sistema de calidad efectivo y que son capaces de producir resultados
técnicamente válidos, ante sus clientes.
 Tanto la norma ISO 17025 como la BPL hacen parte de sistemas de gestión
macro, donde se implementan; la primera hace parte del manual de calidad y la
segunda, generalmente, de los Sistemas estándar de Operación ( SOP). Siendo
esta es la más destacada y casi única similitud.

31. PROTOCOLO DE LOS METODOS DE ENSAYOS
Para los métodos de ensayos deben incluir:
Criterios de aceptación para Registro de las

cada parámetro de desempeño validaciones
El alcance y el (los criterios de aceptación no realizadas.
propósito. pueden ser cambiados para
ajustarse a los datos.
Análisis
Responsabilidades
estadístico de
y competencias del
las formulas.
trabajo en equipo.
Métodos de ensayos Las características de desempeño

(documentos detallando el a evaluar (exactitud, limite de
paso a paso, no se puede detección, limite de detección,
modificar en la validación) precisión, robustez )

32. PROTOCOLO DE LOS EQUIPOS DE MEDICIÓN
Para los equipos deben incluir:
Calificación de
Programa de Programa de la instalación y
calibración. mantenimiento. de la
operación.
Documentación Marca, modelo,

de todos los manual del
equipos. fabricante.

33. EL LABORATORIO Y LA VALIDACIÓN
 PDL021 El procedimiento Validación de Método (protocolo de validación).

 PDL012 El procedimiento Evaluación del trabajo de los analistas.(calificación de las analistas)
 Tabla de resultado de los métodos acreditados.
 FDL001 El programa de verificación/comprobación y/o ajuste de equipo de medición.
 FDL107 Control y seguimiento del programa de calibraciones.
 FDL105 inventario de Equipos e instrumentos de medición .
 PDLExxxx Procedimientos de Verificación, Comprobación y sus anexos de cada equipo.
 FDL106 Hoja de vida de equipos.
 FDL111 Inventario de patrones y muestras de referencias.
 MDL –XXX Los métodos de ensayos estandarizados.
 FGA008Evaluación de Comportamiento a Proveedores Nacionales de Suministros, Equipos,
Materiales y Otros Generales.
 FGA102 Calificación de los proveedores.

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Error absoluto= E aleatorio + E sistemático

E aleatorio = XI – Ẋ E sistemático = Ẋ - XV corrección= -ES

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