UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AGRARIAS

FACULTAD DE AGRONOMIA

TEMA:PROPAGACION IN- INVITRO

CURSO: Propagación.

PROFESOR: Miranda Armas, Carlos.

INTEGRANTES:

Jerónimo Encarnacion,Jefferson

Malqui Medrano, Graciela

Avendaño Meza, julliño

Diaz Arujo, Renato

 TECNICAS DE PROPAGACION IN-VITRO

• La micro propagación tiene unos significativos en la propagación vegetativa

de especies de importancia hortícola. Es de esperarse que la lista de plantas
propagadas por este método aumente a medida que se registren avances
tecnológicos. Este capítulo se concentra de manera principal en los
procedimientos usados para la reproducción in vitro de cultivares específicas
para su propagación. Estos procedimientos tienen unas amplias gamas de
otras aplicaciones que implican manipulación y regeneración usando callo,
células o cromoplastos. Instalaciones: se deben obtener de instalaciones
especiales de tipo laboratorio para preparar los cultivos, producir y mantener
condiciones estériles y proporcionar las condiciones de crecimiento
adecuado.
Selección: se debe hacer una selección de las partes de la planta que se van a
utilizar como explanes y también de las condiciones de cultivos requeridas, tales
como esterilización, medio de cultivo y condiciones ambientales, las cuales
varían con las diferentes cultivares y especies de plantas. Para adaptar cualquier
cultivo al sistema es necesario efectuar pruebas empíricas sistemáticas.
Eliminación de contaminantes: los contaminantes que invariablemente están
presentes en la superficie de las partes de las plantas se deben eliminar por
desinsectación. Todos los medios de cultivos deben esterilizarse y los cuartos en
que se van a preparar y a mantener los cultivos deben mantenerse tan libres de
contaminantes como sean posibles. Se toman precauciones.
 Instalaciones y equipos
Las instalaciones para cultivo de tejido pueden
clasificarse en tres categorías, de acuerdo con su
objetivo, refinamiento y costo. Estas categorías son
las siguientes:
• instalaciones de investigación, en las que se
efectúan trabajos de mucha precisión, que
exigen equipo muy capacitados y técnicamente
avanzado.
• instalaciones comerciales grandes, en las cuales
se puedan producir millones de platas al año,
• instalaciones limitadas para laboratorios
pequeños de investigación, para viveros
individuales o para aficionados en las cuales se
manejan un volumen de material relativamente
pequeño
Área de preparación
El área de preparación esencialmente es
una cocina con tres funciones básicas: (a) limpiar
los objetos de vidrios, (b) preparar y esterilizar el
medio del cultivo, (c) guardar la vidriería y los
suministros.
Se necesita un método de lavado
eficiente ya sea a mano o en máquina. El lavado
normal va seguido por un enjuague en acido
diluido y luego otro en agua estilizada o
desonzada. Se necesita disponer de un
fregadero, agua corriente y una salida de gas
para calentar y a menudo resultan útiles tuberías
de aire o vacío.
 PREPARACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS
Equipos y materiales
Se necesita el material siguiente:
• Matraces ordinarios de diversos
tamaños en los que se haga la
mezcla para los medios de
cultivo.
• probetas, matraces graduados.
• Botellas para guardar los
reactivos.
• Aparatos magnéticos, agitadores
para mezclar el medio.
• Pipetas distribuidoras y embudos
grandes o buretas.
Recipiente para el desarrollo de los cultivos
En los laboratorios se emplean tubos de ensayos,
matraces, cajas de petri, etc. Para cubrir estos recipientes
se utilizan tapas de diversos tipos, desde algodones,
tapones los cuales no son convenientes en operaciones
prolongadas.
Ingredientes
Los ingredientes del medio de cultivo varían según
el tipo de plantas en la etapa de propagación en la cual se
esté trabajando. Estás pueden hacerse de productos
químicos puros o adquirirse como medio de cultivos pre-
mezclados, es necesario efectuar pruebas empíricas para
comprobar la combinación de ingredientes disponibles
desde sales inorgánicas, compuestos orgánicos,
ingredientes naturales complejos hasta sostenes inhertes.
 Métodos generales de micro propagación in- vitro

• Manejo de las plantas madres

En el manejo de las plantas madres hay que
tener presente dos consideraciones principales. Una es
reducir el potencial de contaminación por hongos,
bacterias, virus y otros organismos patógenos. Otra, es
el control de la condición fisiológica del explante.
En general, las plantas madres deben estar
sanas y en crecimiento activo, que no estén o vayan
entrando en letargo. En ocasiones, la poda o el
incremento de iluminación (aumentando la longitud
del día), resultan útiles para producir nuevas fases de
procedimientos activos.
 SELECCIÓN DEL
EXPLANTE

El tipo de explante en su ubicación, en la planta madre,

varía mucho con el objetivo del cultivo, así como las especies, y a
veces con la cultivar. En ausencia de una información definida,
acerca de una especie o cultivar dada, se puede usar la información
existente acerca de las especies o cultivares afines o se pueden
hacer experimentos con las plantas específicas que se tengan. Para
la obtención de puntas de tallos, de ordinario las plantas más
convenientes son aquellas que están en crecimiento activo,
utilizando ya sea punto de crecimiento axilares quiescentes o
terminales de brotes en crecimiento activo. El tamaño de un explane
puede variar desde uno a 5 milímetros de la punta meristematica,
misma a un trozo de rama o tallo de varios centímetros de largo.
También se puede usar una sección nodal que tenga una yema
lateral.
 Cuidados de los cultivos

PRETRATAMIENTO

Las operaciones de micro propagación pueden incluir un paso de cultivo de

pretratamiento en el en cual los explanes se colocan inicialmente en una caja
de Petri en la superficie de un medio de agar con sales básicas y azúcar pero
sin hormonas.

La función de esta etapa es establecer al explane en el medio de cultivo e inducir el

desarrollo de brotes múltiples para multiplicación posterior, la cual puede implicar:

(a) estimulas la formación de brotes axilares

Etapa 1:
establecimiento (b) la iniciación de brotes adventicios en brotes, hojas, escamas de bulbos,
escapos florales, cotiledones y material similar.

(c) la iniciación de formación de callo en superficies cortadas.

 Cuidados de los cultivos

En la etapa de multiplicación cada explane se ha

desarrollado a formar un macollo de brotes que salen
de una masa basal común, expandida de tejido de tipo
tallo. Ahora esta estructura se divide en propágalos
Etapa 2:
multiplicación.
separados, que se trasplantan a un medio de cultivo
fresco. El tipo de medio que se use depende de la
especie cultivar y tipo de cultivo. De ordinario es
esencialmente el mismo que se usa en la etapa 1, pero
a menudo se aumenta la concentración de citoquinina.
 Cuidados de los cultivos
1. Se pueden hacer estacas individuales y plantarse
directamente en un medio de enraizamiento bajo
niebla o con humedad elevada con o sin tratamiento
con hormonas que estimulan el enraizado.
2. Se pueden volver a cultivar propágalos individuales
En esta etapa se en nuevos recipientes, en un medio de cultivo
Etapa 3: pueden manejar reduciendo la citoquinina con un incremento en la
pre-trasplante en tres formas concentración de auxinas y a menudo reduciendo
básicas: sales inorgánicas.
3. El tercer método consiste en introducir entre la etapa
2 y 3 una fase de alargamiento, colocando los
propágalos en un medio de agra entre dos a cuatro
semanas sin citoquininas y, en algunos casos,
añadiendo ácido giberelico.
Cuidados de los cultivos

Las plantas enraizadas, o sin enraizar, se sacan del recipiente

del cultivo, se lava por completo el agar que lleva a herido,
para remover una fuente potencial de contaminación y se
trasplantas a una mescla de suelo estándar, pasteurizada, en
macetas pequeñas en una forma maso menos convencional.
Etapa 4: Inicialmente se debe proteger alas plantitas de la desecación
Trasplante
colocándolas en una tienda sombreada, con alta humedad o
bajo niebla.

Una vez que las plantitas se han establecido en el medio del

enraizamiento, se les debe exponer en forma gradual a una
humedad menor y a mayor intensidad de luz.
 CONCLUSIÓN

SE CONCLUYÓ QUE LAS TÉCNICAS DE CULTIVOS Y

PROPAGACIÓN INVITO SON FUNDAMENTALES PARA
EL FUTURO DE LA AGRONOMÍA Y HASTA
CONSERVACIÓN DE ESPECIES VEGETALES EN
PELIGRO Y AUMENTAR SU EFICACIA AL
PROPAGARSE.