UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA

ÁCIDOS NUCLEÍCOS: ESTRUCTURA

Y FUNCIÓN

Prof. Anny Y. Lacruz Varela

 ÁCIDOS NUCLEÍCOS: ESTRUCTURA DEL ADN

• IMPORTANCIA DE LOS NUCLEÓTIDOS Y LOS ÁCIDOS

NUCLEICOS.

• ¿QUÉ MOLÉCULA PORTA LA INFORMACIÓN GENÉTICA?

• ESTRUCTURA DE LOS NUCLEÓTIDOS Y DEL ÁCIDO

DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN)
 IMPORTANCIA DE LOS NUCLEÓTIDOS Y LOS ÁCIDOS
NUCLEICOS

• LOS NUCLEÓTIDOS SON MONÓMEROS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS

• LOS NUCLEÓSIDOS TRIFOSFATO (ATP, GTP): ALMACENAN ENERGÍA

• PARTICIPAN EN LA REGULACIÓN METABÓLICA: EFECTORES

ALOSTÉRICOS (ATP-ADP), SEGUNDOS MENSAJEROS (AMPc, GMPc)

• DERIVADOS COMO EL DINUCLEÓTIDO DE NICOTINAMIDA Y

ADENINA (NAD+- NADH + H+): ACTÚAN COMO COENZIMAS

• POSEEN ACTIVIDAD CATALÍTICA, LOS QUE FORMAN PARTE DE LAS

RIBOZIMAS
Bases Nitrogenadas
 Desoxirribosa
Estructura de la desoxirribosa

• La desoxirribosa tiene 5 carbonos y 3 oxígenos.

• Sus átomos de carbono están numerados 1', 2', 3', 4', and 5’.

• Los grupos hidroxilos de los carbonos 5' y 3‘ se unen al grupo fosfato.

• La desoxirribosa carece de un grupo hidroxilo en la posición 2’.

 Nucleósidos
• Un nucleósido es una de las cuatro bases unidas
covalentemente en la posición C1' del azúcar.

• El azúcar en los desoxinucleosidos es la 2'-desoxirribosa.

• Los Nucleósides se diferencian de los nucleótidos en que

carecen de grupos fosfato.

• Los 4 difrentes nucleósidos en el ADN son:

desoxiadenosina (dA),
desoxiguanosina (dG),
desoxicitosina (dC), y
(desoxi)timidina (dT, o T).
 Estructura de la dA

En dA y dG, hay un enlace "N-glucosídico“ entre al azúcar C1' y el N9 de la purina.

Genética Molecular: Estructura del DNA

Nucleósidos del DNA

NH2

N
N
Desoxiadenosina
N N
CH2 O Adenina

H H

H Enlace
H N-Glucosídico
OH H
DESOXIRRIBOSA
 Nucleótidos
Es un nucleósido con unos o más grupos fosfato unidos covalentemente
al (los) grupo (s) 3‘ y/o 5‘ .

Esqueleto del ADN

Es un polímero con una secuencia alternante de azúcar-fosfato.

Las desoxirribosas estan unidas por ambos extremos (3‘- y 5'-hidroxilo)

a grupos fosfato por medio de enlaces tipo éster, conocidos como enlaces
“fosfodiéster“.
Genética Molecular: Estructura del DNA

Nucleótidos del DNA

NH2
Desoxiadenosina
5´monofosfato N
N
(dAMP)
O N N
-
O-P-O- CH 2 O Adenina

O- H H

Fosfatos H Enlace
H N-Glucosídico
OH H
DESOXIRRIBOSA
 Genética Molecular: Estructura del DNA

Nucleótidos del DNA

Base Desoxirribonucleósido Desoxirribonucleótido

• Adenina (A) Desoxiadenosina Desoxiadenosina

5´monofosfato
• Guanina (G) Desoxiguanosina Desoxiguanosina
5´monofosfato
• Timina (T) Desoxitimidina Desoxitimidina
5´monofosfato
• Citosina (C) Desoxicitidina Desoxicitidina
5´monofosfato
Genética Molecular: Estructura del DNA

Nucleótidos del DNA: fosforilación de

nucleótidos monofosfato NH2

N
N

O O O N N
-
O-P- O-P-O-P-O- CH 2 O Adenina

O- O- O- H H

Fosfatos H
H
OH H
Desoxiadenosina 5
DESOXIRRIBOSA
´difosfato
´trifosfato(dADP)
(dAtP)
 ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (polinucleótido):
Estructura del DNA

¨Estructura primaría¨

Desoxirribonucleótidos
unidos por enlaces
fosfodiéster 3´- 5´
 Ejemplo de cadena de ADN
5'-d(CGAAT):
Características:

Esqueleto alternante de desoxirribosa-

fosfato.

Polaridad, 5'- 3' de arriba a abajo

Oxígenos (átomos rojos) de fosfato son

polares

Las bases A, G, C, y T se extienden hacia

afuera
Y se apilan una sobre otra.

Las bases son hidrofóbicas

 Estructura del DNA

Polímeros de Nucleótidos 5´
en el DNA

El polinucleótido
presenta direccionalidad

5´T-C-A-G 3´

3´
Genética Molecular: Estructura del DNA

El Modelo de la doble Hélice

 Las reglas de Chargaff

 Los estudios de difracción

de rayos X del DNA
 Pares de Bases
Ejemplo de un par dA-dT como se encuentran dentro
de la doble hélice de ADN.
 Pares de Bases
Ejemplo de un par dG-dC como se encuentran dentro
de la doble hélice de ADN.
 ADN: Doble Hélice
El ADN es normalmente una macromolécula formada por dos cadenas
polinucleotídicas, mantenidas por fuerzas termodinámicas débiles.

Características:

Dos cadenas de ADN forman una

espiral helicoidal con rotación a la
derecha.

Las dos cadenas polinicleotídicas

van en direcciones opuestas.

El esqueleto azúcar fosfato se

dispone como el pasamanos de
una escalera de caracol.

Las bases de cada nucleótido se

sitúan hacia el interior de la hélice
como si fueran los peldaños de la
escalera.
La doble Hélice
 Estructura del DNA

5´ La doble Hélice 3´

Bandas
3´ Antiparalelas 5´
 Estructura del DNA

Fuerzas que estabilizan la doble helice

 Puentes de hidrógeno
 Efecto hidrofóbico
 Atracciones de Van der Waals
 Atracciones electrostáticas
Vista Superior de la Hélice de ADN
ORGANIZACIÓN FÍSICA DEL DNA PROCARIÓTA
Organización Física del DNA Eucariota :
Cromosomas y Cromatina
Genética Molecular: Replicación del DNA
Genética Molecular: Replicación del DNA
• La replicación es semiconservativa
3´ 3´
3´ 5´
5´ 5´

replicación

3´ 5´ 3´ 5´ 3´ 5´
DNA de DNA de DNA de
doble Hélice doble Hélice doble Hélice
original copia copia
Genética Molecular: Replicación del DNA

Fases de la Replicación

• Iniciación
• Elongación
• Terminación
Genética Molecular: Replicación del DNA

Maquinaria de Replicación: Replisoma

• Topoisomerasas
• Helicasa (Dna B, Dna C)
• Pubs: Proteínas de unión a
banda simple (SSB)
FUNCIONES DE LAS PROTEÍNAS EN LA MAQUINARIA DE REPLICACIÓN
ESPECIFICIDAD
DE LA DNA
POLIMERASA
Genética Molecular: Replicación del DNA

La replicación es semidiscontinua:
Fragmentos de OKAZAKI
TRANSCRIPCIÓN
INICIACIÓN DE LA TRADUCCIÓN:

1) Unión de los factores de iniciación

IF-1 e IF-2, junto con el RNAm a la sub-
unidad ribosomal 30s. IF-1 evita la
unión del fMet tRNAfMet al sitio A. IF-3 evita
la reasociación de las sub-unidades ribo-
somales. El RNAm es anclado al ribosoma
gracias a la secuencia Shine-Dalgarno

2) Apareamiento entre el anticodón del

fMet tRNAfMet y el codon de iniciación
AUG, llegada del IF-2 unido a GTP

3) Reasociación de las sub-unidades ribo

somales: llegada de la sub-unidad 50s, hi-
drólisis del GTP y salida de los factores de
iniciación
ELONGACIÓN:

1) Llegada del 2do ami-

noacil tRNA junto
con el EF-Tu unido
a GTP

2) Formación del pri-

mer enlace peptídico
catalizado por el RNAr
23s (actividad peptidil
transferasa). Trasla-
do del primer aa al
segundo aa que se en-
cuentra unido a su
tRNA en el sitio A

3) Translocación: movi-
miento del ribosoma ha-
cia el 3’del RNAm
TRANSLOCACIÓN
TERMINACIÓN:

- Codón de parada en el sitio A

- Reconocimiento de estos codones

por los factores de liberación RF-1
y RF-2.

- Hidrólisis del enlace peptidil- tRNA

por la actividad peptidil transferasa

- Liberación del péptido, tRNA libre

y disociación de las subunidades
ribosomales
 ALIMENTOS TRANSGÉNICOS. OBTENCIÓN

Conceptos preliminares:

• Plásmidos
• Enzimas de restricción
• Genes de resistencia a antibióticos
• ADN recombinante

Plásmido Ti (inductor de tumores) de Agrobacterium

tumefaciens
 ALIMENTOS TRANSGÉNICOS. OBTENCIÓN

1) Células de A. tumefaciens con 2 plásmidos

a) Plásmido Ti sin ADN T
b) Plásmido recombinante con gen foráneo y gen
de resistencia a la kanamicina

2) La bacteria invade a las células vegetales a través

de heridas o cortaduras en sus hojas

3) Segmentos de hojas son transferidos a un medio

De cultivo sólido (agar) enriquecido con hormonas de
crecimiento y kanamicina

4) Las plantas se regeneran a partir de las porciones

de hojas y sólo crecen las que adquirieron el plásmi-
do recombinante
 Planta de tomate (derecha) resistente a las larvas de in-
sectos: por expresar una proteína tóxica proveniente de
Bacillus thuringiencis

Planta de tabaco transgénica expresando

la luciferasa de la luciernaga (Photinus pyralis),
enzima que permite la emisión de fluorescencia

Plantaciones de soya: a) sin tratamiento con glifosato (herbicida)

Se observa el crecimiento de la maleza
b) Plantación de soya en un campo recién tratado con glifosato,
la soya crece debido a su resistencia al glifosato