Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga

Facultad de Ciencias Biológicas

Área de Biotecnología

EXPRESIÓN GÉNICA
BI- 542 BIOTECNOLOGÍA AGROINDUSTRIAL

Sonia H. Palomino Felices

 Ácidos Nucleicos
Moléculas complejas que se encuentran en el núcleo y
citoplasma celular.

Polímero de nucleótidos
Funciones:

◊ Transmitir las características hereditarias de una generación a

la siguiente.

◊ Dirigir la síntesis de proteínas específicas (estructurales y

funcionales)
 COMPONENTES DE LOS ACIDOS
NUCLEICOS

Nucleótido = Pentosa + B N + Fosfato

1.- Pentosa
2.- BN = Bases Nitrogenadas
Purinas: AyG
Pirimidinas: T, C y U
3.- Fosfato: (Grupo Fosfato) H3PO4
 Los grupos fosfato pueden unirse a una
Base Nitrogenada:
 Si es uno será monofosfato
 Si son dos será difosfato
 Si son tres será un trifosfato
Nucleósido = Pentosa + Base nitrogenada

Nucleótido = Pentosa + Base nitrogenada +

Ácido fosfórico

Polinucleótido = Nucleótido + Nucleótido +

Nucleótido + …
Los nucleótidos se unen entre si para formar largas cadenas
de polinucleótidos, esta unión entre monómeros nucleótidos se
realiza mediante enlaces fosfodiéster entre los carbonos de
las posiciones 3’ de un nucleótido con la 5’ del siguiente
 ADN
Ácido Desoxiribonucleíco

 Contiene la información genética de la célula.

 Esta organizado en cromosomas lineales en
células eucariotas y circulares en procariotas
 Para cada especie el número de cromosomas es
fijo. (El hombre 23 pares, la mosca de la fruta 4
pares)
 Localización del ADN

El orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de

la cadena en el ADN, es el orden de las instrucciones del
programa genético de los organismos
Esquema tridimencional de la Doble Hélice
Esquema de la doble hélice
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡
C≡G T =

Ejemplo: T =

C ≡
A =
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡C
C≡G T =

Ejemplo: T =

C ≡
A =
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡C
C≡G T =A

Ejemplo: T =

C ≡
A =
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡C
C≡G T =A

Ejemplo: T =A

C ≡
A =
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡C
C≡G T =A

Ejemplo: T =A

C ≡G
A =
.

El apareamiento es específico:
A=T
G ≡C
C≡G T =A

Ejemplo: T =A

C ≡G
A =T
Muchos científicos se interesaron en descifrar la estructura del
ADN, entre ellos, Francis Crick, James Watson, Rosalind
Franklin y Maurice Wilkins
 EL MODELO DE WATSON Y
CRICK

Rosalind Franklin; Describió que la estructura del ADN tenía dos

cadena. Y que los grupos fosfato se encontraban en el exterior
Watson y Crick, eran investigadores que integraban todos los datos disponibles en
su intento por desarrollar un modelo de la estructura del ADN. Los datos que se
conocían:
• Que el ADN era una molécula larga y delgada.
• Los datos de las bases proporcionados por Chargaff (A=T y C=G) Las Purinas y
las pirimidinas eran constante para cada especie.
• Datos de la difracción de los rayos X de Franklin y Wilkins.
• Los trabajos de Linus Pauling sobre proteinas (forma de hélice mantenida por
puentes de hidrógeno), quien sugirió para el ADN una estructura semejante.
WATSON Y CRICK (1953)
Por estos hallazgos Watson fue galardonado en 1962, junto con Crick y Wilkins,
con el premio Nobel de Medicina y Fisiología.
 Estructura:
 El conocimiento de la estructura de los ácidos nucleicos
permitió la elucidación del CODIGO GENETICO
 La determinación del mecanismo y control de la síntesis
de las proteínas y el mecanismo de transmisión de la
información genética de la célula madre a las células
hijas.
 Las BN son las que contienen la información genética y
los azúcares y los fosfatos tienen la función estructural
formando el esqueleto del polinucleótido.
 En el caso del ADN las bases son dos purinas y dos
pirimidinas. A,G,T y C.
 En el caso del ARN son 4 BN: A y G (purinas) y C y U
(pirimidinas).
purina pirimidina

pirimidina
purina
FORMACIÓN DE LA DOBLE HÉLICE
ADN PROCARIÓTICO
El ADN Eucariótico
 Se presenta en dos formas:
CROMATINA:
Que es la forma no empaquetada ("uncoiled") y tiene
un 50% de proteínas.
CROMOSOMAS :
Que son ADN y proteínas empaquetados (“coiled") y se
forman durante los primeros estadíos de la división celular.

 El ADN de cada cromosoma es una larga cadena de

ADN bicatenario.
 En las células humanas, el ADN tiene 2 metros de
largo y se encuentra empaquetado en 46 cromosomas
y en total contiene unos 30,000 genes.
 Las proteínas asociadas al ADN se conocen
colectivamente con el nombre de histonas.
 ARN
Acido Ribonucleíco
Actúa como molécula intermediaria
A su vez existen:

ARNm: Lleva la información genética

al ribosoma
ARNt: Adapta el lenguaje de los
nucleótidos al de los aminoácidos
ARNr: Componentes estructurales y
catalíticos del ribosoma
 La ribosa es el azúcar que interviene en la composición
de los nucleótidos (también llamados ribonucleótidos)
que forman el ácido ribonucleico (ARN);
 Las bases nitrogenadas son la adenina, la guanina, la
citosina y el uracilo.
El ARN mensajero (ARNm) es una molécula en forma de cinta, producto de
la transcripción del ADN y portadora del código necesario para sintetizar
las proteínas mediante una reacción llamada traducción. Cada hebra de
ARNm tiene dos extremos, llamados 5' y 3', que determinan el sentido de
lectura.
Los ARN de transferencia (ARNt) son pequeñas estructuras en forma de
hoja de trébol que llevan cada una un aminoácido para integrarlo en una
proteína en fase de síntesis. Para ello se fija a un codón del ARNm
(sucesión de tres elementos específicos del aminoácido de que se trate)
por medio de un anticodón (que es el 'negativo' del codón).
La fijación se produce por medio de los ribosomas, que 'leen' el ARN y se
encargan de dirigir la síntesis de proteínas.
 Los ARN ribosómicos (ARNr) son los componentes principales de
los ribosomas.
 En la estructura de un ribosoma intervienen cuatro moléculas de
ADN de distinto tamaño.
 La subunidad mayor (o subunidad 60 s) lleva los ARN 5 s, 28 s y 5,8
s, mientras que la pequeña (o subunidad 40 s) sólo lleva un ARN 18
s. (Las denominaciones, por ejemplo, 5 s y 18 s, proceden de los
experimentos de centrifugación en tubo de ensayo de las
subunidades ribosómicas y las moléculas de ARN; durante la
centrifugación, los elementos más pesados se acumulan en el fondo
del tubo y forman el sedimento; el número corresponde al
coeficiente de sedimentación de cada componente.)
Dogma central de la biología molecular
 TRANSCRIPCION
Es la síntesis de una molécula de ARNm
complementaria a una de las dos hebras del ADN molde,
catalizada por la ARN polimerasa que tiene alta afinidad
por un promotor.
Transcripción
Promotores:
 Son secuencias precisas ubicadas en el ADN, donde la ARN polimerasa se
une para iniciar la transcripción.

 Se encuentran frecuentemente muy cerca y hacia arriba

(“upstream”) del punto en que se inicia la transcripción,
en el extremo 5’.

 Son más de 100 los promotores identificados y secuenciados

en E. coli.
Un promotor procariota estándar tiene tres partes:

a) El punto de inicio (“starpoint”) de la transcripción de la

secuencia de ADN, que se representa como +1 y casi siempre es una guanina o
adenina.
b) Una secuencia consenso cercana al punto de inicio.
c) Otra secuencia consenso más alejada del punto de inicio.
 El enlazamiento de la ARN polimerasa provoca una “fusión” de la doble
hélice del ADN, lo que a su vez induce la ruptura de los enlaces de
hidrógeno entre los pares de bases formándose la llamada “burbuja de
transcripción” que tiene una longitud de 17 pares de bases.

 Los sustratos para la ARN polimerasa son los 5’-trifosfatos de

ribonucleótido ATP, GTP, CTP y UTP. Se requiere la presencia de un ión
metálico, ya sea Mg2+ o Mn2+, como cofactor. La reacción está
impulsada por la hidrólisis del pirofosfato que se libera.
 La cadena de ARNm crece en dirección 5’3’.

 Cuando la longitud del tramo híbrido ADN-ARN se aproxima

a 12 pares de bases, el extremo 5’ de la cadena de ARN
creciente se disocia de su hebra de ADN complementario y
vuelve a formarse el ADN doble, liberándose el factor sigma.

 La ARN polimerasa continúa a lo largo del molde de ADN

hasta que encuentra una señal de terminación, lo que hace que
el ARN se disocie del ADN molde.
Secuencia de Shine-Dalgarmo (SD):

Es una secuencia corta y rica en purinas, que se encuentra en el

extremo 5’ del ARNm bacteriano, la cual resulta ser
complementaria a una secuencia rica en pirimidinas, que se
encuentra en el extremo 3’ del ARNr 16S.
Esta secuencia es responsable, por lo tanto, de la unión del
ribosoma al ARNm y se encuentra antes del codón de iniciación
(AUG).
Topología típica de una molécula
de ARNm eucariota

El ARNm consta de las siguientes partes:

1) Región no traducida 5’ (extremo protegido con una 7-metil

guanosina).
2) Codón de iniciación (AUG).
3) Región codificadora (codones para los Aas).
4) Codón de terminación (UAA, UGA o UAG).
5) Región no traducida 3’ (con una cola de 20-250 nucleótidos de
adenina, poliadenilación).
Maduración: El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por
tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y se
sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de maduración un sistema
enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las ARN ligasas unen los exones,
formándose un ARNm maduro
 TRADUCCION
Es el proceso que tiene lugar en los ribosomas, mediante el
cual los codones o tripletes del ARNm, que son “palabras”
en un lenguaje (secuencia de nucleótidos) se convierten o
“traducen” por medio del ARNt, que tiene función de un
intérprete, a otro lenguaje (secuencia de aminoácidos),
conservando el mismo significado. El código genético actúa
como un diccionario y los codones de inicio y terminación
son los signos de puntuación.

(ribosomas)
NUCLEOTIDOS AMINOACIDOS
(ARNt)
Dogma central de la biología molecular
El Código Genético:

Es una tabla que establece todas las combinaciones de tres

bases nitrogenadas del ARNm (tripetes o codones) que
codifican para los aminoácidos comunes presentes en la
estructura primaria de
una proteína, después de la traducción.

Comprende 64 codones. De ellos, 61 tripletes corresponden a

los aminoácidos comunes, mientras que 03 tripletes codifican
para la terminación de
la cadena.

Puesto que hay 20 aminoácidos y 61 tripletes que los codifican,

es evidente que el código es muy degenerado.
Solamente el triptófano y la metionina están codificados por
un solo triplete.

Los otros 18 aminoácidos vienen codificados por dos o más

tripletes. La leucina, arginina y serina son especificados por
06 codones cada uno.

El número de codones para un aminoácido determinado está

correlacionado con su frecuencia de aparición en las
proteínas.
ARN de Transferencia

* Cada ARNt es específico para un sólo aminoácido, aunque

puede descodificar más de un codón.
* Un aminoácido se une a su ARNt correspondiente por
medio de la enzima aminoacil-ARNt sintetasa.
* Esta enzima cataliza la reacción de aminoacilación, que es
importante porque:
(a) Forma el enlace aminoacil-éster entre el aminoácido
y el ARNt; y
(b) Al hidrolizarse este enlace, proporciona la energía que
se requiere para formar el enlace peptídico.
Etapas de la Traducción
(Ciclo del Ribosoma)
* Las etapas fundamentales son tres:
1) Iniciación
2) Alargamiento; y
3) Terminación.
* Todas las etapas requieren energía metabólica que
proviene de la hidrólisis del ATP o GTP.
* Todos los componentes pueden reciclarse.
1) Iniciación
 Hay mecanismos para diferenciar un codón AUG “iniciador” de
otro AUG “interno”: en bacterias, el ARNt iniciador transporta una
metionina formilada; en eucariotas sólo transporta una metionina.
 Otro detalle es que en bacterias el codón AUG “iniciador” está
precedido por la Secuencia de Shine-Dalgarmo extremo 5’ del
ARNm, rico en purinas; y complementario al extremo 3’ del ARNr
16S); mientras que en eucariotas, el codón AUG “iniciador” está
casi siempre dentro de una
secuencia contexto (5’…CCA/GCCAUGG…3’).
 Los factores de iniciación (IF, de 03 tipos) de procariotas son
diferentes a los de eucariotas (IF, de 10 tipos).
2) Alargamiento
- El ribosoma se mueve a lo largo del ARNm en dirección 5’3’,
descodificando cada triplete y ensamblando la cadena del
polipéptido en la secuencia correcta.
- Es un proceso cíclico: se descodifica un codón o triplete y se
adiciona un aminoácido al polipéptido creciente.
- Se requieren factores de alargamiento (EF), proteínas específicas
bastante similares entre procariotas y eucariotas.
3) Terminación

- Cuando el ribosoma encuentra un codón de terminación en

el extremo 3’ del ARNm, se suspende el alargamiento.
- La cadena completa del polipéptido se desprende junto con
el último ARNt y las subunidades ribosómicas.
- Participan factores de terminación (RF), que son diferentes
en procariotas y eucariotas.
Esquema del proceso de traducción en procariotas
 MODIFICACIONES
POST-TRADUCCIONALES

La sola secuencia lineal de aminoácidos no garantiza la funcionalidad de

la proteína; deben ocurrir varios tipos de modificaciones covalentes.

a) Proteólisis limitada

* Eliminación del primer residuo del extremo amino (metionina o

formilmetionina).
* Activación de zimógenos (precursores de enzimas) y hormonas.
* Eliminación de péptidos señal (una secuencia de 15-20 Aas en el
extremo N-terminal) en proteínas de secreción: periplasma,
membrana externa, medio de cultivo.
 b) Plegamiento

Se refiere a la obtención de su configuración tridimensional

correcta. En muchos casos la estabilidad de debe a la formación de
enlaces disulfuro entre dos cisteínas (disulfuro isomerasa).
c) Modificaciones químicas

GLICOSILACION
Unión de un monosacárido u oligosacárido a un polipéptido
para formar una glicoproteína (glicosiltransferasas). Importante
para conferir propiedades especiales a las proteínas.
O-glicosilación: cuando el carbohidrato se une al oxígeno
de una treonina o serina.
N-glicosilación: cuando el carbohidrato se une al nitrógeno
de la amida de una asparagina.
ACILACION
Unión de ácidos grasos a las proteínas, por
enlace éster con una treonina o una serina; o
bien por enlace tioéster con una cisteína.
Importante para la formación de la bicapa
lipídica.
ADICION DE GRUPOS PROSTETICOS
Por ejemplo, la mioglobina y su grupo hemo.
 ¿Qué es el gen?
Es un fragmento particular del ADN que
determina una característica particular.
3.- TRADUCCIÓN:
Cada 3 BN codifican un aminoácido y cada triplete se
denomina CODÓN.

UUU GUU AAU CAG

Phe Val Asn Gln

Proceso de síntesis de proteínas
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA
ADN
TRANSCRIPCIÓN

ARN
TRADUCCIÓN

PROTEÍNA
ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS
CODIGO GENETICO
LAS CADENAS DE ADN SE SEPARAN
TRANSCRIPCIÓN
ELIMINACIÓN DE INTRONES
Los intrones pueden contener “información antigua”, es decir,
fragmentos de genes que probablemente se expresaban pero que
actualmente no se expresan.

Tradicionalmente se ha afirmado que los intrones son fragmentos de

ADN carentes de información. Sin embargo esta afirmación es
cuestionada y actualmente goza de pocos adeptos.

Se sabe que los intrones contienen varias secuencias pequeñas que son
importantes para un ajuste eficiente.
EL ARN SE UNE AL RIBOSOMA
EL ARNt SE UNE A LOS AMINOACIDOS
TRADUCCIÓN
INTERRUPCIÓN DE LA SÍNTESIS DEL POLIPÉPTIDO
FORMACIÓN DE LA PROTEINA COMPLETA