Tema 6

Estructura y replicación
del material genético

Dr. Antonio Barbadilla
Tema 6: Estructura y replicación del

material genético
1
1
Objetivos tema 6:
Estructura y replicación del material
genético
Deberán quedar bien claros los siguientes puntos:
•Cómo se descubrió la naturaleza química del

material hereditario
•La composición química de los ácidos nucleicos
•La estructura 3D del DNA: naturaleza
complementaria y antiparalela de la doble cadena
del ácido desoxirribonucleico (DNA)
•La extraordinaria capacidad explicativa del
modelo del DNA de la función biológica
fundamental de esta molécula
•La replicación semiconservativa
•Enzimología de la replicación
Tema 6: Estructura y replicación del 2

material genético
2
La transformación bacteriana en
Streptococcus pneumoniae (Griffith 1928)
Rugosa
Muerte por neumonía Cepa resistente
Lisa
No muere Tema 6: Estructura

Muerey replicación del 3
material genético
3
¿Cuál es el Principio transformante?
Principio
Rugosa Lisa

material genético
4
Colin MacLeod
El elemento transformante Maclyn McCarty
es el DNA (1944)
Oswald
Avery
Ver animación
experimento
tranformación
bacteriana
Sólo DNA produce transformación

material genético
5
5
Experimento de Alfred Hershey y Martha
Chase con fagos (1952)
Bacteriófago T4
El DNA es el
material
infeccioso

material genético
6
Componentes de los ácidos nucleicos
adenina
timina
guanina
citosina

material genético
7
Reglas de Chargaff
1. Proporción de purinas = Proporción de pirimidinas
A+G=C+T
2. A=T
3. G=C Tema 6: Estructura y replicación del 8

material genético
8
1953. Año culminante:
J. Watson y F. Crick resuelven la
estructura tridimensional del DNA
(Nature 171: 737-738)
Watson y yo hemos
encontrado el
secreto de la vida

material genético
9
1953. Año culminante:
Dos líneas de evidencia:
•Reglas de Chargaff
•Fotografías de difracción de rayos X

material genético
10
Significado reglas de Chargaff
Complementariedad de
Temalas bases
6: Estructura y replicación del 11
material genético
11
Difracción de rayos X
Hemoglobina
Linus Pauling

material genético
12
Interpretación del patrón difracción de rayos X del DNA
Rosalind E.
Franklin
Crickdel
Tema 6: Estructura y replicación 13
material genético
13
Modelo en metal
del DNA
J. Watson y F. Crick
Concluyen: La estructura del DNA es una
doble hélice, formada por cadenas orientadas
en direcciones opuestas (antiparalelas). La
estructura se mantiene gracias a enlaces de
hidrógeno entre las bases nitrogenadas que se
encuentran orientadas hacia
el interior de 14las
14 cadenas
material genético
Doble hélice, formada La estructura se mantiene gracias
por cadenas orientadas a enlaces de hidrógeno entre las
bases nitrogenadas que se
en direcciones opuestas
encuentran orientadas hacia el
(antiparalelas).
interior
Tema 6: Estructura de las cadenas
y replicación del 15
material genético
15
Desnaturalización del DNA
•Separación de las dos hebras por calor

•Una mayor proporción G-C tiene una mayor
temperatura de desnaturalización (‘fusión’)
100
Porcentaje G + C
80
60
40
20

70 80 90 100 110
Temperatura de fusión (desnaturalización)
material genético
16
Hélices levógiras y dextrógiras
material genético
17
DNA-B dextrógira

material genético
18
Ver artículo
Nature
1953

material genético
19

material genético
20
La estructura del DNA suministra una
explicación asombrosamente
simple del fenómeno de la herencia
La estructura explica:
•La naturaleza de la secuencia lineal de los genes

(información digital cuaternaria en secuencias
unidimensionales de monómeros A,T,G,C)
•El mecanismo de replicación exacta de los
genes
•La naturaleza química de las mutaciones
•Por qué la mutación, la recombinación y la
expresión génica son fenómenos separables a
nivel molecular

material genético
21
Esencial a la relación
íntima entre estructura
molecular y función
genética del DNA es el
concepto de molde
La complementariedad de las
bases nitrogenadas permite que
la secuencia de una cadena
sencilla de DNA actúe como un
molde para la formación de una
copia complementaria de DNA
(replicación) o de mRNA
(transcripción)

material genético
22
Y ahora las declaraciones de Watson y
Crick sobre el ADN. Esto es para mí la
prueba verdadera de la existencia de Dios
Salvador Dalí
Antes pensábamos que nuestro futuro

estaba en las estrellas. Ahora sabemos que
está en nuestros genes.
James Watson

material genético
23
Una estructura
tan bonita tenía,
por fuerza, que
existir

24
material genético
J. Watson
Una estructura
tan bonita tenía,
por fuerza, que
existir
Tema 6: Estructura y replicación del J. Watson

25
material genético
25
El DNA
contiene información
digital cuaternaria en
secuencias unidimensionales
de monómeros A,T,G,C
(cristal
26
aperiódico) Tema 6: Estructura y replicación del
material genético
26
Hay grandeza en esta concepción de la
vida,... que mientras este planeta ha ido
girando según la constante ley de la
gravitación, se han desarrollado y se están
desarrollando, a partir de ununacomienzo
molécula tan
sencillo, infinidad
helicoidal asombrosa,
de formas
infinidad
cada
de vez
formas
más
bellasvez
cada y maravillosas
más bellas y maravillosas
Charles Darwin

material genético
27

material genético
28
Replicación del DNA

material genético
29
25 de Abril 1953
It has not escaped our notice that the

specific pairing we have postulated
immediately suggests a possible
copying mechanism for the genetic
material.

material genético
30
Posibles modelos de replicación

material genético
31
•Semiconservativa: una cadena sirve de molde para una
nueva cadena
•El experimento de M. Meselson y F. Stahl (1958)
demuestra que la replicación es semiconservativa
Mathew Meselson Frank Stahl


material genético
32

material genético
33
•Enzimas que sintetizan (replican) el DNA
•E. coli
•DNA polimerasa I (rellena huecos y repara)
•DNA polimerasa II y III (función principal en
la síntesis)
•Añade bases en ambas cadenas en la
dirección 5’  3’
•Requiere un 3’ OH final
•Eucariotas
•5 polimerasas
 y  principal en replicación
,  y  exonucleasas
•Corrección de pruebas: actividad 3’  5’
exonucleotídica. Sustituye bases mal emparejadas
(10-5) por correctas (10-7); mecanismos de reparación
adicionales la reducen hasta 10-10 Tema 6: Estructura y replicación del 34
material genético
34
3’ 5’
Las polimerasas
conocidas añaden
nucleótidos
solamente en la
dirección 5’  3’

material genético
35

material genético
36
¿Por qué no hay una enzima que
polimerice en la dirección 3´-> 5?
No funcionaría la corrección de errores por

falta de un trifosfato que suministre la
energía de enlace covalente azúcar-fosfato

material genético
37
Adición 5’3’

material genético
38
P
P
OH
OH
P
P
PP
OH
3’
P
5’
PP + H2O
P
P
OH
PP
OH
P
OH

P
material genético
39
(hipotética)

material genético
40
P
OH
OH
P PP
PP
OH
3’ 5’
P
PP + H2O
P
OH
PP
P
OH
OH
(hipotética)
P
PP

P
material genético
41
Corrección de errores

material genético
42
P
P
OH
POH
P
P
PP
OH
3’
P
5’
PP + H2O
P
P
OH
OH

P
material genético
43
P
OH
P
OH
PP
OH
3’ 5’
P
(hipotètica)

material genético
44
Replicación del DNA (2)
•Replicación: continua (cadena adelantada, cebador
sólo inicio) y discontinua (cadena retrasada)
•Discontinua
•Cebador (pequeño RNA 2-60 nucleótidos
añadido por enzima primasa o RNA pol que
provee 3’ OH.
•Fragmento de Okazaki por DNA pol III
(1500 bp en procariotas y 150 en eucariotas)
•Pol I elimina cebador 3’ -> 5’ y llena huecos
(gap)
•Ligación (DNA ligasa, enlace fosfodiéster)

material genético
45

material genético
46

material genético
47
Polimerasa III
Polimerasa I

material genético
48
¿Por qué el cebador es RNA?
El cebador es más proclive al error, por

lo que debería eliminarse y el RNA
puede detectarse y eliminarse
fácilmente por la DNApol I

material genético
49
El replisoma: complejo enzimático de la
replicación que coordina la síntesis de las
dos cadenas, maquinaria molecular
•Dímero de la DNA pol III (núcleos
catalíticos)
•Primosoma: formado por dos enzimas
•Primasa
•Helicasa (desenrolla el DNA)
•Proteína de unión a cadena sencilla, ssb
(Unión Y, estabiliza el DNA de cadena
sencilla)
•Topoisomerasas tipo I (rotura una cadena)
y II (rotura de dos cadenas) junto a DNA
ligasa -> Relajación del superenrollamiento

material genético
50
El replisoma: una maquinaria de replicación extraordinaria

material genético
51

material genético
52
DNA pol III + abrazadera beta -> Enzima procesiva

material genético
53

material genético
54
Topoisomerasas

material genético
55
•Origen de replicación:
•Secuencia reconocida (Ori C en E. coli) por
proteínas iniciadoras. Varios orígenes en
eucariotas
•La replicación es bidireccional
Horquilla
replicación

material genético
56
En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orígenes de
replicación (~500 en levaduras y 60000 en mamíferos). Cada
unidad de replicación es un replicón. La replicación es
bidireccional

material genético
57
En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orígenes de
replicación (~500 en levaduras y 60000 en mamíferos). Cada
unidad de replicación es un replicón. La replicación es
bidireccional

material genético
58
Links de interés
Watson-Crick original paper (1953 Nature)
Trabajos estelares del descubrimiento de la doble
hélice
DNA: el secreto de la vida (Animación)
Celebración 50 aniversario descubrimiento de la dobl
e hélice en la UAB
DNA Structure
The Search for DNA - The Birth of Molecular
Biology
Image Library of Biological Macromolecules - DNA
DNA berkeley
DNA Learning Center
Beginner's guide to Molecular Biology
Glosario de Genética molecular
DNA Replication
Animación de la replicación

material genético
59

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1. Proporción de purinas = Proporción de pirimidinas

3. G=C Tema 6: Estructura y replicación del 8

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Dos líneas de evidencia:

•Fotografías de difracción de rayos X

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Tema 6: Estructura y replicación del 12

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•Separación de las dos hebras por calor

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•La naturaleza de la secuencia lineal de los genes

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Antes pensábamos que nuestro futuro

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Tema 6: Estructura y replicación del J. Watson

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Mathew Meselson Frank Stahl

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No funcionaría la corrección de errores por

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Tema 6: Estructura y replicación del 37

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Tema 6: Estructura y replicación del 38

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