PURIFICACION DE ADN

PRESENTADO POR:
DANIELA ALEJANDRA VARGAS
LIYIBETH CAVANZO
MILDRED SANTAMARIA

Centro de Gestión Agroempresarial del Oriente. Vélez

EL ADN

Fuente: www.quo.es
 DIFERENCIAS ENTRE ADN
VEGETAL Y ANIMAL
Las diferencias entre el ADN de las plantas
y los animales se encuentra en la
secuencia de bases en la hélice. Estas
diferencias afectan los métodos de
extracción, ya que impacta en el
rendimiento y la pureza del ADN.
 PURIFICACION DEL ADN

Es una de las fases necesarias para llevar a

cabo una correcta extracción del ADN.
 OBJETIVO DE LA
PURICACION DEL ADN
PASOS GENERALES DE LA
PURIFICACION DE ADN

Fuente: www.danagen.es
• Lisis celular
• Centrifugación
• Separación de las proteínas
• Separación del ARN del ADN
• Electroforesis de ADN.
 PURIFICACION DE ADN
VEGETAL
• Ruptura de tejidos y paredes celulares.
• Ruptura de membranas.
• Inhibición de enzimas que destruyen al
ADN.
• Extracción de contaminantes.
PURIFICACION DE ADN
ANIMAL
• Liberar el ADN de las proteínas
• Centrifugación
• Precipitación
PURIFICACION DE ADN DE
MICROORGANISMOS
• Lisis celular
• Eliminación de ARN
• Eliminación de proteínas
• Precipitación
 METODOS DE
PURIFICACION
• Métodos de eliminación de sales
• Métodos de extracción orgánicos
• Gradientes de densidad de cloruro de cesio
• Métodos de intercambio aniónico
• Métodos basados en sílice - Kits DNeasy
Tissue
 PURIFICACION POR
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
• Cromatografía de penetrabilidad.
• Cromatografía de adsorción.
• Ultrafiltración.
• Bolas magnéticas
Los ácidos nucleicos se unen selectivamente a
bolas paramagnéticas en presencia de sales
caotrópicas mientras que el resto de los
contaminantes son eliminados de la muestra. Los
ácidos nucleicos purificados se eluyen de la
solución con las bolas paramagnéticas bajo
condiciones de baja salinidad.
 Bibliografia
• Rocha P, Teoría y práctica para la extracción y purificación
del ADN de palma de aceite. Recuperado en: file:///C:/
Users/User/Downloads/921-921-1-PB.pdf

• Dorado G, Purificación y análisis de DNA cromosómico

bacteriano. Departamento de Bioquímica y Biología
Molecular, Campus Universitario de Rabanales, Edificio
Severo Ochoa, 14071-Córdoba recuperado en: https://
www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biol-mol/p
dfs/43%20PURIFICACIÓN%20ANÁLISIS%20DNA%20BA
CTERIANO.pdf
• Bio-Rad: Protocolo que acompaña al “Quantum Prep
Miniprep Kit”. Nelson DL, Cox MM (2001): “Principios
de Bioquímica”, 3ª ed. Editorial Omega (Barcelona,
España), pp 1119-1128. recuperado en: http://
www.divulgacion.ccg.unam.mx/files/pdfs/como/Purifica
cion_extraccion_DNA-RNA.pdf

• Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL (2003): “Bioquímica”,

5ª ed. Editorial Reverté (Barcelona, España), pp 152-
154. recuperado en:
http://www.divulgacion.ccg.unam.mx/files/pdfs/como/Pu
rificacion_extraccion_DNA-RNA.pdf
GRACIAS