Esterilización

microbiología
Godinez Guerrero Dulce
Gonzalez Granados Juan Jesus
Rios Hernandez Andrea
 Esterelización
Proceso por el cual se obtiene un producto libre de
microorganismos viables.
 Métodos de esterilización
Físicos Químicos
• Calor húmedo (autoclave) • Oxido de etileno

• Calor seco (estufa/horno) • Plasma de peróxido de hidrogeno

• Radiación • Pastillas de formol

• filtración • Soluciones químicas

 Calor seco
La esterilidad se consigue por las altas
temperaturas del aire. Es un método muy Ventajas del método: Es un método
usado en  Estomatología. Consisten en el efectivo y seguro para esterilizar
aprovechamiento de calor que produce una metales y espejos, pues no oxida o
resistencia eléctrica dentro de un recipiente   corroe y los bordes cortantes no
   herméticamente cerrado o cuba, entrepaños pierden filo.
para colocar instrumental, termostato, y un
regulador automático de  temperatura. 
 Calor húmedo (autoclave)
Características
Es el medio más práctico y eficaz para
la esterilización en el consultorio
estomatológico. La esterilización se
logra por el vapor de agua
supercalentado y mantenido a
presión, que provee una caldera de
metal           de paredes resistentes y
tapa de cierre hermético. Se
compone de un cilindro de cobre, con
una tapa en su parte  anterior, la que
cierra herméticamente.
Ventajas del método
a. El ciclo necesario para la
esterilización es corto
b. Se caracteriza por una buena
penetración
c. Da la posibilidad de esterilizar
gasas algodón, campos, gomas
y otros materiales, así como de
esterilizar instrumental
rotatorio. 
Esterilizadores de vapor
Gravitacional
En este método la cámara del esterilizador
Posee una cámara interna y una cubierta
externa, la cual una vez cerrada la
puerta del esterilizador
herméticamente, arroja el vapor
caliente dentro de la cámara interna
y va penetrando; desplaza el aire y
después lo expande por la parte
inferior de la misma
Pre-vacío
evacua el aire por completo antes de
introducir el vapor. Cuenta con una
bomba de vacío que desplaza el aire de
la cámara según el grado de vacío
deseado, reemplazando por vapor a
través de un sistema de inyectado, que
facilita la penetración del vapor a los
paquetes, reduciendo los tiempos de
funcionamiento y esterilización
 Ciclos de
esterilización
 Esterilizador gravitacional
• Temperatura: 121ºC.
• Humedad: 90%.
• Tiempos: (Total 45’ del ciclo).
• Para el llenado de la cámara:
Hasta alcanzar la temperatura
adecuada, 5´.
• Exposición: 20´ para la
penetración de vapor a los
paquetes.
• Expulsión de vapor 5´ para la
completa.
• Secado y enfriamiento de los
paquetes: 15´
Esterilizador de pre-vacio
Temperatura: 133ºC. 
Humedad: 90%. 
Tiempos: (Total 20´ del ciclo). 
Para el pre-vacío y alcanzar la
temperatura adecuada: 6´. 
Exposición: 4´. 
Secado y enfriamiento de los
paquetes: 10´. 
Radiaciones ionizantes.

Rayos gamma Rayos beta Rayos ultravioleta

Son radiaciones . Son radiaciones no

ionizantes que se usan en Se usan principalmente en ionizantes. No tienen
la industria de artículos la industria. Su poder efecto esterilizante sobre
médicos, odontológicos de penetración es algunos
y    farmacéuticos. menor que el de las microorganismos. Son de
Se caracterizan por una radiaciones gamma  baja energía y escasa
alta energía y gran penetración. Su acción es
penetración. Es un método superficial y se usan para
costoso.  mantener una baja tasa de
microorganismos
Ebullición
Agua en ebullición
El agua hierve a 100ºC, este
sistema ofrece todas las
garantías de esterilización
siempre y  cuando se cumpla el
tiempo en que el material debe
permanecer en ebullición, para
lograr la muerte de las
bacterias, no así las de las
esporas que aún siguen
resistentes
Aceite en ebullición
Para esto se utiliza un aceite
especial volátil, aprovechando
la ventaja de que el aceite
hierve a          una temperatura
mayor que la del agua, la que
puede llegar a 300ºC. Desde
luego, no hace falta que hierva,
basta                con mantener el
instrumental a 130ºC
Es un procedimiento de emergencia y consiste en colocar
directamente en la llama el objeto que se desea
esterilizar. Con la llama se consigue una temperatura
muy alta que puede exceder, en la de gas, los
1000ºC. Esta temperatura tan elevada deteriora el
instrumento, y para evitarlo, se debe colocar por
encima de la llama a fin de que no reciba
directamente el calor de esta.

Flameo
Agentes químicos

Oxido de etileno Plasma de peróxido Soluciones químicas

de hidrogeno

es un poderoso agente Consiste en un conjunto de El uso de soluciones

esterilizante gaseoso de iones, electrones y salinas para la
acción lenta, inflamable partículas atómicas neutras esterilización consiste en
cuando aparece en que se produce mediante la inmersión del
concentraciones iguales temperaturas altísimas o instrumental en
o superiores al 3 %, y fuertes campos desinfectantes de alto
altamente tóxico cuando electromagnéticos. nivel, los cuales tienen
es ingerido o inhalado acción bactericida,
virucida, fungicida y
esporicida. 
 Utilizados para determinar la
eficiencia del proceso de
esterilización
Metodos • Indicadores o controles físicos.
• Indicadores o controles químicos.
comprobatorios • Indicadores o controles microbiológicos
o biológicos.
de
esterilizacion
Procedimiento previo
• No existe un procedimiento de esterilización
y desinfección a todos los casos.
• Se debe de tener en cuenta la naturaleza del
objeto y la naturaleza biológica del
contaminante.
• El procedimiento de esterilización debe ser
valorado previamente.
• Existen valores tabulados de tiempo de
exposición, temperatura y concentración de
principios activos para los métodos de
esterilización mas usados que nos permiten
elegir el mas adecuado para casa caso
Esterilización previa
• Será necesaria cuando el material
y/ o equipos hayan sido utilizados
con material infeccioso o presunto Para las pipetas, micropipetas y
infeccioso. tubos de hemólisis puede
emplearse este método o
sumergirlas inmediatamente
cajas de Petri inoculadas, después de ser utilizadas en
tubos conteniendo cultivos solución desinfectante de formol
de microorganismos, frascos al 10 % durante una hora
empleados en el cepario, etc.
Serán esterilizados en
autoclave a 1 atm. de presión
durante 15 – 30 minutos.
Limpieza previa
• Se realizará para eliminar las partes gruesas de suciedad o residuos no infecciosos.
Se empleará el raspado con espátulas, cepillo, esponjas metálicas, paños, etc. Se enjuagará
repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión.

• Se aconseja un último enjuague con agua destilada. Se dejará secar en canasto o rejilla
de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a 60 – 80 °C.
 Tubos de ensayo Pipetas

tubos de hemólisis y tubos de se obtura el extremo superior con

Khan: se confecciona en tapón un filtro de algodón y luego se
de algodón y se cubre con un envuelven con tiras de 4 a 5
capuchón de papel aluminio. cm. de ancho de papel madera
(se esterilizan en estufa). comenzando por la punta de la
misma. Debe rotularse cada una
con la capacidad y graduación
correspondiente (se esterilizan
en estufa).
 Desinfección Antisepsia

Es la eliminación “selectiva” de Es el uso de una sustancia química

ciertos microorganismos no toxica (antiséptico) sobre
indeseables a fin de impedir su tejidos vivos, para prevenir o
transmisión por interferencia en detener el crecimiento o la
su estructura o metabolismo.  acción de los microorganismos
ya sea inhibiendo su actividad o
destruyéndolos
Parámetros de letalidad termica

Ecuacion 1 Arreglandola Ecuación 3

N =Concentración o ecuación 2 Donde:  
actividad enzimática =Concentración o
K= Constante de actividad enzimática
proporcionalidad inicial.
T= Tiempo
Representación gráfica de la ecuación de
sobrevivencia
 Valor D

• A más calor, más rápido

mueren los
microorganismos.
• Si más rápido mueren,
más rápido es el proceso.
• La velocidad del proceso
está expresado por el
valor D.
.
Valor D = tiempo de
exposición requerido (en
minutos) Figura: Valor D; Temperatura VS tiempo
para reducir 1 log (90%) de Fuente: (Stumbo, 1973)

los microorganismos.
Valor D
Sustituyendo (4) en Despejando t de la
(2) se obtiene: ecuación anterior del
ecuación 5 tiempo
ecuación 6

Ecuacion 4
 Valor Z

Valor Z = el número de
grados de temperatura
requeridos para
obtener una variación
de 1 log del valor D.
Figura: Valor Z; Valor D VS tiempo
Fuente:(Stumbo, 1973)
 Valor F

• Valor F = una medida de la capacidad de inactivar bacterias

en función de la temperatura.
• Matemáticamente el valor F es expresado como la tasa de
mortalidad por minuto en función de la temperatura.
Conclusión

• La esterilización es un proceso mediante el cual se eliminan por remoción o

muerte todos los microorganismos viables de un objeto, superficie o medio.
• En el trabajo cotidiano de un laboratorio de microbiología es necesario que
todo el material esté estéril.
• Existen varios métodos físicos y químicos de esterilización
• La muerte de los organismos contaminantes ocurre principalmente por
desnaturalización de las macromoléculas.
 Referencias
1) •Miguel Hernández de Elche. (2013). Esterilización por calor. https://www.youtube.com/watch?v=24tXvaLfAC8
2) •Tortora, Gerard J (2004). Microbiology “An Introduction” (8va edición). Pearson Prentice Hall.
3) •https://es.wikipedia.org/wiki/Esterilizaci%C3%B3n_(microbiolog%C3%ADa)
4) •Q.F WILY JARA. (2018). Validación de Procesos de Esterilización en la Industria Farmacéutica.
http://www.digemid.minsa.gob.pe/UpLoad/UpLoaded/PDF/Establecimientos/Reuniones/Reunion_III/III_Validaci%C3%B3n_de_Procesos_de_Esterilizaci
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5) •Lic. Laura de Oliveira. (2017). Determinación de los parámetros de tiempo y temperatura óptimos para un proceso de pasteurización que asegure la estabilidad
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ESCUELA DE BIOLOGÍA. CARACAS, VENEZUELA. http://saber.ucv.ve/bitstream/123456789/16824/1/T.E.G%20Samuel%20Chirinos.pdfAndrés Leonardo
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6) •Víctor Manuel Terry Calderón (2019). cinética de la destrucción térmica. https://es.slideshare.net/victorterry1/cinetica-de-la-destruccion-termica
7) •Patricia Rosario Reyes. (2013). Antisépticos, desinfectantes y métodos de esterilización. https://pt.slideshare.net/jesminde1/antispticos-desinfectantes-y-mtodos-
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8) •Sofía Gutiérrez de Gamboa. (2008). MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M
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9) •Rosa Salazar (2019). PARÁMETROS DE LETALIDAD TÉRMICA Valores D y Z. https://microbiologiaitt.es.tl/7-.--Par%E1metros-de-letalidad-t-e2-rmica

%2C-valores-D-y-Z.htm
10) •Prof. Dra. Zoila del S. López Díaz. Prof. Dr. Michel García Tarrau. (2014). TEMA VII: MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN MATERIAL DE APOYO A LA
DOCENCIA ASIGNATURA ESTERILIZACIÓN Y BIOSEGURIDAD PRIMER AÑO. http://uvsfajardo.sld.cu/tema-7-metodos-de-esterilizacion