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Características

Morfológicas de los
Microorganismos
CELULA EUCARIOTA Y PROCARIOTA
MARCO ANTONIO ZARATE ARCE

MEDICO CIRUJANO

MAESTRO EN MICROBIOLOGIA CLINICA

DOCTORANDO EN MICROBIOLOGIA
Células Eucariotas

 Las células eucariotas son más grandes y de


estructura más compleja que las procarióticas, y
una diferencia fundamental es que las células
eucarióticas poseen un verdadero núcleo.
Células Eucariotas - Estructura
Células Procariotas -
Morfología
 Cocos
Células Procariotas -
Morfología
 Bacilos

Bacilos Fusiformes Formas Filamentosas


Células Procariotas -
Morfología
 Espiral
Células Procariotas -
Estructura
 Carecen de membrana nuclear, siendo el núcleo es
difuso.
 Material genético libre en el citoplasma.
 Sólo constituyen organismos unicelulares, como las
bacterias.
 Citoplasma no presenta prácticamente ningún
orgánulo y la membrana plasmática posee unos
pliegues hacia el interior.
 Pared celular composición variada, rígida y
responsable de la forma de la célula.
Glicocalix

 Denominación Cápsula.
Capa mucilaginosa.
Función:
• Adherencia.
• Resistencia a la desecación.
• Material de reserva.
• Patogenicidad y virulencia.
Pared Celular

Rigidez
Peptidoglucano Forma Celular Gram+ Protoplastos
Barrera Gram- Esferoplastos
Espacio Periplásmico

Incluye:
 RNasa y fosfatasa.
 Penicilinasa.
 Proteínas de transporte de nutrientes
 Proteínas de unión a estímulos químicos.

Existe: Oligosacárido.
Membrana Citoplasmática
 Espesor: 7,5 nm.
 Composición: fosfolípidos (20% - 30%) y proteínas (50% - 70%).
 No contienen esteroles menos rígidas que las de los eucariotas.
Función de la membrana citoplasmática:
 Actúa como barrera.
 Contiene enzimas biosintéticos producción de energía y
síntesis de la pared celular.
 MC. de muchas bacterias se extiende dentro del citoplasma
formando unos túbulos que se llaman mesosomas:Centrales y
Periféricos.
Membrana Externa G-
Elementos de esta membrana externa son muy distintos a los de
una membrana típica:
 La bicapa es altamente asimétrica.
 En la capa externa existe un 60% de proteínas y un 40% de
lipopolisacárido (LPS).
 En la capa interna no hay LPS, existiendo fosfolípidos (FL),
lipoproteínas (LPP) y otras proteínas.
Funciones de la Membrana Externa
 Actúa como tamiz molecular.
 Condiciona propiedades de superficie:
 Es la estructura donde se fijan los componentes del
complemento.
Bacteria Gram Negativa
Matriz de las G+
Constituido por:
 ácidos teicoicos.
 ácidos teicurónicos.
 ácidos lipoteicoicos.

Funciones de los polímeros de la matriz:


 Suministra una carga negativa a la pared celular
 Ac. teicoicos y teicurónicos constituyen el antígeno somático
O de las bacterias G+.
 Algunas bacterias sumistran junto con el PG, receptores
específicos.
Bacteria Gram Positiva
Área Citoplasmática
Ribosomas:
 Formados por dos subunidades de diferente tamaño: 50
S y 30 S que conjuntamente forman el ribosoma
bacteriano 70 S
Inclusiones:
 Glóbulos de sulfuro
 Gránulos de volutina
 Poly-ß-hidroxibutirato (PHB). Con sudam III se tiñen de
negro.
 Glucógeno.se tiñe rojo con lugol.
 Magnetosomas
Área Nuclear

 Procariotas no poseen una membrana que englobe


al núcleo.
 El material nuclear ocupa la zona central de la
célula formado por un único cromosoma circular.
Flagelos
Flagelos Polares Flagelos Perítricos
 Flagelos Monotricos

 Flagelos Lofótricos

 Flagelos Anfítricos
Fimbrias Pilis
Tinción de
Microorganismos
Colorantes
 Usados como:
 Indicadores de pH en medios de cultivo.
 Indicadores de oxidorreducción.
 Demostrar funciones fisiológicas.
 Existen colorantes naturales y sintéticos.
 Clases de Colorantes:
 Ácidos
 Básicos
Tipos de Coloraciones
Simples:
 se usa un único colorante, que siempre es de tipo básico.
 Se utilizan solamente para incrementar el contraste;
 Si se utiliza un mordiente, hay que añadirlo justo antes del
colorante.
Diferenciales:
 se utilizan para distinguir entre tipos de microorganismos. consta
de dos etapas:
 una tinción primaria
 una tinción de contraste.
 Ejemplo: la tinción de Gram y la tinción de ácido-alcohol
resistencia, ambas aplicadas a bacterias.
Coloración Gram
Bacterias G+ Bacterias G-
Coloración Azul de Metileno

 Es un colorante básico, electropositivo.


 Es una sal cuya base es coloreada y el ácido es
incoloro.
 Es un colorante nuclear.
Muestras
Patológica del
Aparato
Respiratorio
Muestras de V.R.A.
 Los estreptococos grupo A son los responsables de faringitis
bacteriana.

 En la orofaringe pueden existir otras bacterias potencialmente


patógenas, como Staphylococcus Aeuras, Streptococcus
Pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella Catarrbais,
enterobacteriaceas y Pseudomonas

 La muestra se recogerá con una torunda de Dacron o alginato. La


muestra se debe tomar de las aéreas amigdalares, la faringe
posterior y cualquier exudado

 Los estreptoccos grupo A y C diphtheriae son muy resistentes , su


transporte al laboratorio no requiere precauciones especiales.
 Los intentos de tomar muestras para cultivo de la epiglotis,
pueden conducir a obstrucción completa de la vía aérea en
pacientes infectados. Por esa razón ,se evitaran tales cultivos.

 El diagnostico especifico de una infección sinusal requiere


aspiración directa del seno , transporte anaerobio apropiado hasta
el laboratorio
Muestras de V.R.I.

 Se pueden usar diversas técnicas para recoger muestras de


las vías respiratorias inferiores : expectoración espontánea
o inducida con solución salina, la broncoscopia y el
lavado broncoalveolar, la aspiración transtraqueal y
aspiración directa a través de la pared torácica
Esquema de cómo se obtiene un cepillado bronquial protegido
con catéter durante un examen broncoscopio.
Tomado de Microbiología de Koneman
Vías respiratorias:
 Nariz:
 Muestra: frotis de fosas nasales.
 Volumen: 1 torunda. Recipiente: medio de transporte Stuart.

   Garganta:
 Muestra: frotis de faringe posterior, de úlceras, o lesiones purulentas. Hisopo con medio
de Stuart
 Volumen: 1 torunda.
 Recipiente: medio de transporte Stuart.  

   
 Esputo:
 Muestra: esputo (no saliva). Envase estéril
 Volumen: 2 ml. de boca ancha
 Recipiente: envase estéril de boca ancha.
 

 Aspirado bronquial:    
 Muestra: aspirado bronquial, transtraqueal o muestra de broncoscopia.
 Volumen: 1 ml.
 Recipiente: envase estéril.
Muestras
Patológicas del
Aparato Digestivo
Heces
Un gran número de bacterias pueden causar infecciones
gastrointestinales.

Su recuperación en cultivo requiere recogida de una muestra de heces


adecuadas, transporte al laboratorio e inoculación en medios selectivos
apropiados.

Las muestras de heces se recogen en un bote limpio y cierre hermético


y después se transfieren a un recipiente impermeable con sellado
hermético. La muestra se transporta lo antes posible al laboratorio
para evitar los cambios ácidos en las heces (debido a metabolismo
bacteriano), que son tóxicos para gérmenes como Shigella.
Muestras de Heces
Coprocultivo habitual:
 Muestra: muestra de heces.
 Volumen: 1 g de heces.
 Recipiente: contenedor especial Para-pak.
 Consideraciones: estudio de Salmonella, Shigella, y Campylobacter.

Para Yersinia, E. coli:


Muestra: muestra de heces.
Volumen: 1 g de heces.
Recipiente: contenedor especial Para-pak.
Contenedor
especial Para-Pak
Para Aeromonas y Plesiomonas:
Muestra: muestra de heces.
Volumen: 1 g de heces.
Recipiente: contenedor especial Para-pak.
Muestra Patológica
del Aparato
genitourinario
Muestras Genitales
 A pesar de la variedad de bacterias asociadas con enfermedad de transmisión
sexual, se centran en el aislamiento de Neisseria gonorrborae y Chlamdia
trachomatis

 El exudado uretral o endocervical debe ser inoculado de forma inmediata en


medios selectivos apropiados para recuperación de N gonorrborrae . Esos
medios contienen antibióticos para suprimir el crecimiento de otros
microorganismos que pudieran estar presentes en la muestra.

 N gonorrborae se muestra sensible al frío y su crecimiento requiere dióxido


de carbono; por tanto, los medios se deben templar antes de la inoculación y
después se colocaran en una atmósfera enriquecida con CO2.

 Parte del exudado se extenderá tambien sobre una porta de cristal, se


realizara una tinción con GRAM y se realizara al microscopio.
La otra bacteria importante de enfermedades de transmisión sexual es
Treponema Pllidum, el agente etiológico de la sífilis. Este
microorganismo no se puede cultivar, por lo el diagnostico se establece
mediante microscopia o serologia.

El material de las lesiones se examina mediante microscopia de campo


oscuro, puesto que el organismo es demasiado fino para detectarlo con
microscopio óptico

Además estos microorganismos mueren con rapidez en contacto con el


aire y la desecación, por lo que el examen microscópico se debe
realizar en el momento de recoger la muestra.
Muestras
Patológicas
Urinarias
Muestras Urinarias

La orina constituye una de las muestras enviadas con mas frecuencia


para cultivo. Puesto que la uretra esta colonizada por bacterias
potencialmente patógenas, se debe desechar la primera porción de la
orina obtenida mediante micción

Además, los patógenos pueden crecer en la orina, por lo que se evitara


el retraso en el transporte hasta el laboratorio,

Una vez recibida la muestra en el laboratorio, se inoculan 1 a 10 ul


de orina en cada medio de cultivo. De esta forma se puede cuantificar
el número de organismos.
Secreciones Urogenitales
 Muestra: secreciones vaginales o uretrales, torundas de cérvix,
líquido prostático,...
 Volumen: 1 torunda ó 0,5 ml.
 Recipiente: medio de transporte Stuart (en muestras líquidas usa el
tubo estéril de tapón verde).
 Consideraciones: para estudio de Chlamydias utilizar medio de
transporte específico.

Hisopo con medio Tubo estéril de tapón verde Transporte para


de Stuart Chlamydias
Muestra Sistema de transporte Volumen de Consideraciones
muestra

Respiratorio-faringe Torunda sumergida en - Frotar el área de


medio de transporte inflamación ; recoger el
exudado , evitar contacto
con saliva , que puede
estreptocco grupo A

Respiratorio-epiglotis Recoger sangre para el 20ml (adulto ) La aplicación de una


cultivo 5-10ml (niño ) torunda , puede precipitar
el cierre completo de la
vía aérea ,

Respiratorio-senos Tubo o via estéril 1-5 ml Muestras se recogen con


anaeróbios aguja y jeringuilla

Respiratorio-vías aéreas bajas Vía estéril con tampón 1-2 ml Esputo expectorado
de rosca , tubo o vial Muestra de broncoscopia
anaerobio solo para Aspirado Transtraqueal
muestras recogidas
evitando la flora del
tracto alto
Muestra Sistema de Volumen de Consideraciones
transporte muestra

Orina – porción Bolsa estéril 1-10 ml Evitar contaminación de las muestras por
media de para orina bacterias de uretra o vagina
micción

Orina sondaje Bole estéril para 1-10 ml La primera micción se evita porque esta
orina contaminada por bacterias uretrales

Orina Tubo estéril 1-10 Evitar bacterias uretrales


aspiración
suprapubica
Genitales Torunda 1-10 La muestra se debe tomar en área de
sumergida en exudación
medio de
transporte

heces Bole estéril con 1-10 Requiere transporte rápido al laboratorio


tampón de rosca para evitar acción bactericida a los
patógenos
Muestras
Patológicas de
Piel
La muestra debe ser representativa y
suficiente;Debe ser tomada con precaución y con
materiales estériles para no ser contaminada.

Se debe tener en cuenta datos del enfermo para que


a partir de ello pueda dar lugar a una hipótesis de
la patología, que será corroborado con la muestra
microscópica
 Tipos de Muestra: Raspados, Trozos de piel, Biopsias.
 Examen de las Muestras: Examen microscópico en
fresco, tinciones permanentes.
 Cultivo: Utilizar la porcion no tratada de la muestra
 Métodos de recogida: Asépticos, frotis; sin conservantes.
 Agentes Patógenos Probables: Trichophyton, especie de
Candida y otras levaduras cutaneas
Muestras Patológicas
del Liquido
Cefalorraquídeo
 Se toma la muestra del LCR a través de una punción
lumbar.

 La recogida de la muestra se hace con absoluta


asepsia y se coloca en frascos estériles que cierren
con tapon, teniendo en cuenta que sea la cantidad
adecuada.

 Se realiza el frotis y luego se tiñe con la tinción


Gram.
 Tipo de muestra: Liquida, que se debe procesar tan
rápido como sea posible.
 Examen de las muestras: pueden se
Macroscópicas , Microscopicas, Químicas.
 Agentes patógenos probables: Virus del herpes
simple, virus de la parotiditis.
Muestras Patológicas
de Medula Ósea
 Tipo de muestra: Se le saca un poco de medula
ósea con algún instrumento adecuado ;el lugar mas
común de sacar esta muestra es en el hueso del
esternón.

 Agentes patógenos probables: Salmonella Tiphy,


Leishmania.

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