BOLILLA 2

• TRANSPORTE ELECTRONICO y
FOSFORILACION OXIDATIVA
• Cadena Respiratoria. Complejos. Inhibidores y
desacoplantes. Síntesis de ATP. Translocasas
• OTROS SISTEMAS DE TRANSPORTE:
Sistema Microsomal. Oxigenasas.Catalasas
• Formacion de species reactivas del oxígeno:
Radicales libres. Sistemas de protección
 Compuestos
Hidratos de carbono con uniones
ricas en
GLUCOSA energía
O
X
I
Lípidos D NADH

ACIDOS GRASOS A FADH2

C O2
I
O
N ATP
Proteínas
AMINOACIDOS
Adenosina Trifosfato (ATP)
Energía de Hidrólisis de los Compuestos
de elevada Energía
• ATP DGo’= - 30,5 kj/mol
DGp= - 50-65 kJ/mol
O O O
‫װ‬ ‫װ‬ ‫װ‬
-O-P-O-P-O -P-O-Ribosa-Adenina

‫ו‬- ‫ ו‬- ‫ ו‬-

O O O
Mg MgATP2- Activación de Acidos grasos
Polimerización de ARN ó ADN (desioxi)
Activación de Aminoácidos
Quimioluminiscencia

O 3-
‫ו‬ AMP + PPi
O P O
‫ו‬
‫ו‬

‫ו‬
O
2 Pi
 O
C
‫ו‬ O – PO3
CH2 C H2
‫װ‬ ‫ו‬
C – O – PO3 C-O-PO3
‫ו‬
COO- H2
‫ו‬
Fosfoenolpiruvato 1,3-Bisfosfoglicerato
DGo’ = - 61,9 kJ/mol DG o’= - 49,3 kJ/mol

O CH2
‫װ‬ ‫ו‬ CH3
-O – P – NH – C –N – CH
3 ‫ו‬ O
‫ו‬ ‫װ‬
O- NH2 C - SCoA
Fosfocreatina Acetil-CoA

DGo’ = - 43,0 kJ/mol DGo’ = - 32,2 kJ/mol

 OXIDORREDUCTASAS
(DESHIDROGENASAS)

• Deshidrogenasas ligadas a NAD ó

nicotinamídicas
AH2 + NAD+ A + NADH + H+
Deshidrogenasas ligadas a FAD ó a FMN

AH2 + FAD (FMN) A + FADH2 +(FMNH2)

El FAD tiene además

un nucleótido de
adenina unido al
fosfato
P-Ribosa-Adenina
 DISTINTAS FORMAS EN QUE LA CELULA PUEDE
TRANSFERIR ELECTRONES

1.- Transferencia de 1 e-: Fe +++ Fe++

2.- Transferencia de un átomo de hidrógeno
(H+ + e-): AH2 + B A + BH2
3.- Transferencia de un ion Hidruro (:H-)
AH2 + NAD+ → A + NADH + H+

4.- Transferencia de e- desde un reductor orgánico

al oxígeno: R-CH3 + ½ O2 RCH2-OH
 MECANISMOS DE SINTESIS DE ATP

• FOSFORILACION A
NIVEL DE HIDRÓLISIS DE
SUSTRATO UNA UNION DE
ALTA ENERGIA

• FOSFORILACION CADENA
OXIDATIVA RESPIRATORIA

O2
 Destino de los equivalentes de
reducción
Memb.externa
Memb.interna

Matriz C. de
Krebs

Memb.interna
Crestas
Espacio intermemb.
mitoc.
 CADENA DE TRANSPORTE
ELECTRONICO

• Los componentes de la cadena se

encuentran en la membrana mitocondrial
interna.
• Reciben equivalentes de reducción de NADH
Y FADH2 producidos en la matriz.
• Los componentes se encuentran ordenados
en orden creciente de sus potenciales de
reducción.
• El aceptor final de electrones es el oxígeno.
 Potenciales de reducción estándar

2 H+ + 2 e- → H2 -0.42 V
NAD+ + H+ + 2 e- → NADH -0.32 V
S + 2 H+ + 2 e- → H2S -0.23 V
FAD + 2 H+ + 2 e- → FADH2 -0.22 V
Acetaldehído + 2 H+ + 2 e- → etanol -0.20 V
Piruvato + 2 H+ + 2 e- → lactato -0.19 V
Cu+ → Cu2+ + e- -0.16 V
Citocromo b (Fe3+) + e- → citocromo b (Fe2+) + 0.075 V
Citocromo c1 (Fe3+) + e- → citocromo c1 (Fe2+) + 0.22 V
Citocromo c (Fe3+) + e- → citocromo c (Fe2+) + 0.235 V
Citocromo a (Fe3+) + e- → citocromo a (Fe2+) + 0.29 V
Fe3+ + e- → Fe2+ + 0.77 V
½ O2 + 2 H+ + 2 e- → H2O + 0.82 V
 COMPONENTES DE LA CADENA DE
TRANSPORTE ELECTRONICO
• FLAVOPROTEINAS: FMN ó FAD: Transportan 2 e- y 2
H+

• PROTEINAS FERROSULFURADAS: transportan e-

(Fe+++ Fe++)

• COENZIMA Q ó UBIQUINONA: Quinona isoprenoide no

proteica.Transporta 1 e- y libera 2 H+ a la matriz.

• CITOCROMOS b, c, c1, a, a3: Proteínas que contienen

un grupo hemo. Transportan 1 e-
 Fumarato Complejo II
SUCCINATO
FAD DESHIDROGENASA
Succinato
NADH II
Fe-S
e-
NAD+
FMN

I Cit.c
Fe-S Coenzima Fe
Q Fe Fe-S
Fe Fe

Complejo I
Cit.b /Centro Fe-S/ Cit c1
NAD UBIQUINONA
REDUCTASA Complejo III Fe/Cu Cit.a
CITOCROMO C – IV Cit a3
COENZIMA Q OXIDO
REDUCTASA Complejo IV Fe/Cu
CITOCROMO
OXIDASA O2
 Reacciones que proveen de NADH a la
cadena respiratoria
• Piruvato deshidrogenasa

• Isocitrato deshidrogenasa

CICLO DE KREBS
• Malato deshidrogenasa

• a-cetoglutarato deshidrogenasa
CR
Sustrato + NAD+ Producto + NADH + H
 REACCIONES DEL COMPLEJO I

NADH + H+ NAD+ + 2 e- + H+ (Eo= - 0,32 V)

FMN + 2 e- + 2 H+ FMNH2 (Eo= - 0,22 V)

NADH + H+ + FMN → FMNH2 + NAD+

Camino de los equivalentes de reducción
en el Complejo I
 COMPLEJO II

• Succinato-coenzima Q oxidorreductasa
• Coenzima: FAD
• Proteínas ferrosulfuradas
• Transfiere equivalentes de reducción desde
succinato a la coenzima Q

Succinato + E-FAD Fumarato + E-FADH2

E-FADH2 + Prot-Fe+++ E-FAD + Prot-Fe++

Prot-Fe++ + CoQ Prot-Fe+++ + CoQH2

 Deshidrogenasas que entregan
electrones a la Ubiquinona
• Acil-CoA deshidrogenasa

FADH2 ETFP CoQ

ETFP-ubiquinona
oxidorreductasa

• Glicerol-3-fosfato deshidrogenasa

FADH2 CoQ
 CAMINO DE LOS ELECTRONES desde el
COMPLEJO III al O2

½ O2 + H+
CoQH2 Fe+++ Fe++ Fe+++ Fe++ Fe+++ Fe++
Cit. Cit. Cit. Cit. Cit.
b566 b562 Fe-S
c1 c a.a3
CoQ Fe++ Fe+++ Fe++ Fe+++ Fe++ Fe+++ H2O

Complejo IV
Complejo III
 Ordenamiento de los Componentes de la
Cadena Respiratoria
Piruvato 3-P-Glicerol
3-P-Glicerol
Malato
Acil-CoA
Isocitrato
FAD

NADH-UBQ Cit b Cit a

reductasa
(Fe-S) Cit a3
CoQ Cit c IV O2
FMN I III 2 Cu
Cit c1
(Fe-S)
FAD
II
a-cetoglutarato
SUCCINATO b-OH-
Glutamato
Butirato
3-OH-AcilCoa
 SINTESIS DE ATP
TEORIA QUIMIOSMOTICA
ESPACIO
INTERMEMBRANA

MATRIZ
TRANSLOCACION DE PROTONES Y
SINTESIS DE ATP
 POSTULADOS DE LA TEORIA
QUIMIOSMOTICA
• Membrana mitocondrial impermeable a protones
• Expulsion de H+ durante el transporte de electrones
• Formación de un gradiente electroquímico (H+ y
cargas positivas)
• El pasaje de los H+ a través de Fo activan la ATP
sintasa

-Complejo I (H+ desde matriz hacia espacio interm.)

-Complejo III (H+ desde matriz, QH2 y hacia espacio interm.)
Complejo IV (H+ desde matriz hacia espacio interm.)
 Esquema translocasa ADP-ATP y
transportador de Pi.

Citosol ADP ATP Pi

Membrana
mitocondrial
interna
Mitocondria
ADP ATP Pi
 INHIBIDORES

• Inhibidores del transporte electrónico

Inhiben solamente el transporte de e-
• Inhibidores de la fosforilación
Inhiben la síntesis de ATP , indirectamente eel
transporte de e-
• Desacoplantes
Impiden la síntesis de ATP pero no inhiben el
transporte de electrones
• Inhibidores de la translocasa
Inhiben la entrada de ADP y la salida de ATP
desde la mitocondria
 ACCION DE INHIBIDORES

Antimicina A (antibiótico) CN-

Rotenona (insecticida)
bloquean citb/citc1 CO
Amital (barbitúrico)
Inhiben la
Inhiben Fe-S/CoQ citocromo oxidasa

NADH FMN Fe-S CoQ cyt b Fe-S cit c1 citc cit a cit a3 O2
(-0.32) (+0.82)
Tetrametil p-
Aceptores fenilendiamina
artificales Azul de
de 2,6 diclorofenol Ferricanuro
metileno
electrones indofenol
 INHIBIDORES DE LA FOSFORILACIÓN

• Oligomicina: Bloquea el flujo de protones

a través de Fo.

• Se inhibe la síntesis de ATP

• Se acumulan protones y se produce una

fuerza inversa deteniéndose el transporte
de electrones.
 DESACOPLANTES

Actúan como ionóforos eliminando el

gradiente de protones.
O-

+ H+

2,4 Dinitrofenol (DNP)

Forma protonada que
atraviesa la membrana
 Relacion P/O en presencia de Inhibidores

c/Inh. del P/O = 0

COMPLEJO I
e- e- e- (Q al O2)
• Sustrato: NADH
e-
Sin e- c/Inh. del P/O = 3/1
Inhibidor e- COMPLEJO II
e- e- e-

P/O = 3/1
C/ DESACOPLANTES

P/O = 0/1
e- e- e- e- e- e-
e- e- e- (Q al O2)
 P/O = 2
c/Inh. del
• Sustrato: FADH2 COMPLEJO I e- e- e- (Q al O2)

e-
Sin
Inhibidor
e- c/Inh. del P/O = 0
e- COMPLEJO II
e- e- e- (Q al O2)
P/O = 2
C/ DESACOPLANTES

P/O = 0

e- e- e- e- e- e-
e- e- e- (Q al O2)
Oxidaciones alternativas de transporte de
electrones en plantas
NADH

NADH Ubiquinona O2
deshidrogenasa UQ
oxidasa

Calor

NAD(P)H
Deshidrogenasa
alternativa
 OXIDASAS Y OXIGENASAS

• Localización: Microsomas y peroxisomas

• No asociados a la producción de ATP
• Usan O2 como sustrato
Oxid.
OXIDASAS No incorporan O2

Incorporan un
MONOXIGENASAS
átomo del O2
OXIGENASAS
Incorporan los 2
DIOXIGENASAS átomos del O2
 OXIDASAS

• Oxidación peroxisómica de ácidos grasos

Flavoproteína: FADH2 FAD y O2 H2O2

• Citocromo oxidasa
Hemoproteína: Fe++ Fe+++ y O2 H2O
 MONOOXIGENASAS u OXIGENASAS DE
FUNCION MIXTA ó HIDROXILASAS

• AH + BH2 + O=O A-OH + B + H2O

Sustrato NADH, NADPH, FMNH2,

principal Co-Sustrato
FADH2, BH4

1 O se incorpora al sustrato y el otro O forma agua

Hidroxilación de esteroides
CITOCROMO P-450 Hidroxilación de fármacos

Hidroxilación de xenobióticos

CITOCROMO b5 Desaturación de ácidos grasos

 ESQUEMA DE REACCION Y UBICACIÓN
CELULAR DEL CITOCROMO 450
O2 RH

NADPH
NADP+
R-OH
H-OH CY P450
CITOPLASMA

MEMBRANA
RETICULO
ENDOPLASMICO