 La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-

visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisión de fotones y una

espectrofotometría. Utiliza radiación electromagnética (luz) de las regiones
visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro
electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm.
 Es una técnica analítica que permite identificar un analito en una muestra así como su
concentración, además junto con otras técnicas analíticas permite determinar la estructura de una
molécula donde implica la espectroscopia de fotones en la región de radiación ultravioleta-visible.
 El espectro electromagnético representa la radiación absorbida o emitida en función de la longitud
de onda
 Esta técnica es complementaria de la espectrometría de fluorescencia,
que trata con transiciones desde el estado excitado al estado basal,
mientras que la espectrometría de absorción mide transiciones desde el
estado basal al estado excitado.
El Espectrofotómetro
ESPECTROFOTÓMETRO
 Las muestras en solución se ponen en una pequeña celda de silicio.
 Se utilizan dos lámparas: una de H o deuterio para la región UV, y una de
W / halógeno para la región visible
 Se utiliza también una celda de referencia que contiene solo solvente.
 La luz pasa simultáneamente por la celda de muestra y la celda de
referencia.
 El espectrómetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa
por la celda de referencia.
 La radiación transmitida es detectada y el espectrómetro obtiene el
espectro de absorción al barrer la longitud de onda de la luz.
 APLICACIONES
 La espectrometría UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinación cuantitativa de soluciones
de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos muy conjugados.
 Soluciones de iones metálicos de transición
Las soluciones de iones metálicos de transición pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz
visible) debido a que los electrones en los átomos de metal se pueden excitar desde un estado
electrónico a otro. El color de las soluciones de iones metálicos se ve muy afectado por la presencia
de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una solución diluida de
sulfato de cobre es muy azul; agregando amoníaco se intensifica el color y cambia la longitud de
onda de absorción máxima.
 Compuestos orgánicos
Los compuestos orgánicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugación, también
absorben luz en las regiones del espectro electromagnético visible o ultravioleta. Los disolventes para
estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o el etanol para
compuestos orgánicos solubles. Los disolventes orgánicos pueden tener una significativa absorción
de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometría UV. El etanol
absorbe muy débilmente en la mayoría de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente
pueden afectar la absorción del espectro de un compuesto orgánico. La tirosina, por ejemplo,
aumenta su máximo de absorción y su coeficiente de extinción molar cuando aumenta el pH de 6 a
13, o cuando disminuye la polaridad de los disolventes.
 La espectrofotometría UV VISIBLE, un
“adelanto” científico, es actualmente la
técnica más precisa y exacta para el
control de la medida, la formulación y la
calidad de los colores deseados en los
alimentos preparados. Los
espectrofotómetros miden la reflectancia
espectral o la transmitancia de un objeto a
través de todo el espectro de longitudes
de onda de luz visibles a un humano, de
400nm a 700nm (nanómetros), lo que
permite una especificación precisa de
cualquier color deseado. Los
espectrofotómetros ofrecen una mayor
especificidad, es por esto que son los
instrumentos elegidos para la formulación
del color en productos alimenticios,
establecimiento de estándares y
tolerancias, comunicación del color entre
plantas y el control de calidad del color
en las operaciones del proceso.
 Durante la última década, los
espectrofotómetros, se han adoptado cada
vez más en la industria alimenticia para la
estandarización del color y la inspección de
control de calidad de los ingredientes antes
de usarlos, para la especificación del color
del producto final (particularmente en
mermeladas, jaleas, reservas, bebidas, etc),
en la investigación y desarrollo de nuevos
productos alimenticios y bebidas, y en la
selección de alimentos y potencial de las
técnicas de selección de factores que van
desde el contenido natural de grasa a la
categoría de calidad de carnes, aves y
pescados.
 Es posible determinar un gran número de sustancias como son: ácido
ascórbico, fructuosa, glicerol, ácido 1-glutámico, lactosa, galactosa,
maltosa, glucosa, rafinosa, dsorbitol, etanol, ácido acético, etc. Estas
técnicas analíticas son de múltiples aplicaciones en bioquímica general y
bioquímica de alimentos, y esta es la razón de su importancia. En Química
Clínica también son muy utilizados los métodos de espectroscopia UV.