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MTODOS CLSICOS

Separacin de los componentes de inters


de una muestra (analitos), mediante:
Precipitacin
Extraccin
Destilacin
MTODOS CLSICOS

ANLISIS CUALITATIVO
Los componentes separados se tratan con
reactivos originando productos que se
pueden identificar por su color, punto de
ebullicin o de fusin, su solubilidad, su
olor, ndice de refraccin o alguna otra
propiedad.
MTODOS CLSICOS

ANLISIS CUANTITATIVO
La cantidad de analito se determina
mediante medidas gravimtricas o
volumtricas.
MTODOS INSTRUMENTALES
A principios del siglo XX, los qumicos
comenzaron a usar fenmenos distintos
para resolver los problemas analticos

Las propiedades fsicas:

Conductividad
La absorcin o emisin de luz
La relacin masa/carga y la
Fluorescencia
MTODOS INSTRUMENTALES
A estos mtodos ms modernos para la
separacin y determinacin de especies
qumicas se les conoce, en conjunto
como mtodos instrumentales de
anlisis.
MTODOS EN ANLISIS INSTRUMENTAL

Cualitativo: de la medicin de una


propiedad se puede indicar la presencia de
un analito en una matriz.

Cuantitativo: la magnitud de la propiedad


medida es proporcional a la concentracin
del analito en la matriz.
MTODOS EN ANLISIS INSTRUMENTAL

Frecuentemente, el mismo mtodo


instrumental es usado para el
anlisis cualitativo y cuantitativo.
DIFERENCIA ENTRE MTODOS CLSICOS
E INSTRUMENTALES

Los mtodos clsicos estn basados en


interacciones materia-materia, esto es,
en reacciones qumicas.

El analito se determina por medidas


gravimtricas o volumtricas.
DIFERENCIA ENTRE MTODOS CLSICOS
E INSTRUMENTALES

Los mtodos instrumentales, basados


en interacciones materia-energa:
utilizan un instrumento ms o menos
complejo para evaluar una propiedad
fsica o fsico-qumica del sistema objeto
de anlisis.
DIFERENCIA ENTRE MTODOS CLSICOS
E INSTRUMENTALES

Un mtodo analtico se considera fsico


cuando no incluye reaccin qumica
alguna y la operacin de medida no
modifica la composicin qumica del
sistema.
1.2 CONCEPTO DE ANALISIS INSTRUMENTAL Y
COMPONENTES DE UN INSTRUMENTO PARA EL
ANALISIS QUIMICO

Qumica Analtica

Trata acerca de los mtodos de


determinacin de la composicin
qumica de la materia
Mtodo cualitativo

Informacin referente a especies atmicas


o moleculares o a grupos funcionales de
una muestra

Mtodo cuantitativo

Informacin numrica referente a cantidad


relativa de uno o varios de los componentes
de una muestra
CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTO RENDIMIENTO HPLC

Anlisis Instrumental

Es el conjunto de tcnicas y mtodos para


realizar los procedimientos de la Qumica
Analtica mediante el uso de instrumentos.
Como campo parcial de la qumica analtica, el
anlisis instrumental trata la identificacin y
anlisis de materia desconocida.

Teniendo en cuenta este objetivo existen bajo la


especialidad "anlisis instrumental" cuatro
grupos de procedimientos basados en la
naturaleza de la seal analtica estudiada
Mtodos Electroanalticos, Se entiende bajo el trmino
"electrnica analtica" diferentes procedimientos de anlisis, en
algunos casos muy complejos. Uno de estos procedimientos es la
conductometra. Se usa la conductividad elctrica de un lquido
(prueba) para determinar el contenido y su concentracin.

Mtodos Espectroscpicos, En la espectroscopia se


descompone la radiacin de una prueba segn su energa; los
espectros pticos se pueden observar con un espectroscopio.
En la espectroscopia se usan diferentes tipos de procedimientos.
Estos se pueden dividir en 4 categoras principales: Espectroscopia
de slidos, espectroscopia lser, espectroscopia atmica y
espectroscopia molecular.
Mtodos de Anlisis pticos Con estos procedimientos se
iluminan las pruebas por luz o radiacin electromagntica. La
radiacin respectivamente la luz es reflejada o refractada
parcialmente. Esta variacin se puede medir con un
refractmetro.

Mtodos Cromatogrficos La cromatografa describe un


procedimiento qumico en el que se separa una mezcla en su sus
componentes individuales mediante una fase mvil y una fase
estacionaria. La fase estacionaria consta, segn el procedimiento,
de materia slida o un lquido, y la fase mvil de un lquido o Gas .

Se diferencian bsicamente la una de la otra. Esto aplica tanto a


los campos de aplicacin como al a la realizacin del
procedimiento.
INSTRUMENTO PARA EL ANLISIS
QUMICO

Transforma informacin relacionada con


propiedades fsicas o qumicas del analito en
una seal analtica

Convierte la seal analtica que no suele ser


detectable ni comprensible directamente por un
ser humano en una forma que s lo es

Dispositivo de comunicacin entre el


sistema en estudio y el analista o cientfico
Diagrama simple del proceso de medicin
instrumental

Estmulo Respuesta

Fuente de energa Sistema Informacin


(electromagntica, objeto de Analtica
elctrica, mecnica o
nuclear)
estudio

La informacin resultante surge de la interaccin del estmulo con el analito.


Ejemplo: paso de una banda estrecha de longitudes de onda de luz visible a
travs de una muestra para medir la capacidad de absorcin del analito
COMPONENTES TPICOS DE UN INSTRUMENTO DE
ANLISIS

Medidor
Generador de o escala
seales
Seal de
entrada
Seal mecnica
analtica Transductor o elctrica Procesador Registra
de entrada o de seales dor
detector

12,301 Unidad
digital

Transductor
de salida o
lectura
Generadores de seales

Produce una seal, mediante una fuente de energa, que


indica la presencia y, con frecuencia tambin, la
concentracin del analito.
En algunos casos, el generador de seal es un compuesto o
un ion generado a partir del propio analito.

En emisin atmica, el generador son los tomos excitados


o los iones del analito que emiten fotones de radiacin.
En anlisis de pH, el generador de seal es la propia
muestra, siendo la seal la actividad del in hidrgeno.
En otros casos, el generador de seal es ms elaborado.
Detectores (transductores de entrada)

Dispositivo que convierte un tipo de energa (o seal) en otro.


Ejemplos: termopar, que convierte una seal de calor
radiante en un voltaje elctrico; fotoclula o fotocelda, que
convierte la luz en corriente elctrica.
Los transductores que actan sobre una seal qumica se
denominan detectores.
La mayora convierten las seales analticas en un voltaje o
corriente elctricos que se amplifican o modifican fcilmente
para accionar un dispositivo de lectura.
Procesadores de seales

Modifican la seal transducida procedente del detector de tal


forma que se adece al funcionamiento del dispositivo de
lectura.
La modificacin ms comn es la amplificacin (un proceso
en el que la seal se multiplica por una constante mayor que
la unidad).
A menudo, adems de la amplificacin, las seales se filtran
para reducir el ruido, se multiplican por una constante menor
que uno (se atenan), se integran, se derivan o se aumentan
exponencialmente.
Dispositivos de lectura

Es un transductor que convierte una seal procesada en una


seal que puede ser entendida por un observador humano.
Generalmente, la seal transducida toma la forma de la
posicin de una aguja en un medidor de escala, de un trazo
en un registrador de papel, o de una serie de nmeros en una
pantalla digital.
En otras ocasiones, el dispositivo de lectura da directamente
la concentracin de analito.
Circuitos, dispositivos elctricos y
microprocesadores en los instrumentos

En los instrumentos analticos ms modernos, el detector


convierte la seal analtica en una elctrica que se procesa
de diversos modos y que despus se muestra mediante un
dispositivo de lectura.
Tambin emplean uno o varios dispositivos electrnicos
sofisticados, como amplificadores operacionales, circuitos
integrados, convertidores analgico-digitales y digital-
analgicos, contadores, microprocesadores y ordenadores.
EJEMPLOS DE COMPONENTES DE INSTRUMENTOS
Instrumento Generador de seal Seal analtica Transductor de Seal Procesador de Lectura
(Fuente de energa o entrada transducida seal
estmulo)

Fotmetro Lmpara de wolframio, Haz de luz Fotoclula Corriente Escala de Medidor de


filtro de vidrio atenuado elctrica medida corriente

Espectrmetro de Llama Radiacin UV o Tubo Potencial Amplificador, Registrador


emisin atmica visible fotomultiplicador elctrico desmodulador, sobre papel
monocromador,
cortador

Coulombmetro Fuente de corriente Corriente de la Electrodos Corriente Amplificador Registrador


continua celda elctrica sobre papel

Medidor de pH Muestra, electrodo de Actividad del Electrodos de vidrio Potencial Amplificador, Unidad
vidrio in hidrgeno y de calomelanos elctrico digitalizador digital

Difractmetro de Tubo de rayos X, muestra Radiacin Pelcula fotogrfica Imagen Revelador Imgen
rayos X para polvo difractada latente qumico ennegrecida
en una
pelcula

Comparador de Luz solar Color Ojo humano Seal del Cerebro Respuesta
color nervio ptico humano visual al color
Seleccin de un mtodo analtico

Eleccin ETAPAS DE UN ANLISIS CUANTITATIVO


del mtodo
TPICO
Obtencin de una
Muestra representativa

Preparacin de
la muestra

Definicin de Evaluacin de la
repetibilidad confiabilidad de los resultados

Eliminacin de Medicin de la Clculo de los


interferencias propiedad del analito resultados
Consideraciones importantes en
los mtodos analticos

Aunque muchas veces es el instrumento el


elemento ms visible e impresionante del
mtodo analtico, solo es uno de los
componentes del anlisis total.
Antes de enfocar el papel de la instrumentacin
en un mtodo analtico, el analista debe
considerar otras etapas importantes para la
determinacin.
Seleccin de un mtodo analtico
Se requiere definir con claridad la naturaleza del
problema analtico, respondiendo las siguientes
preguntas:

1. Qu exactitud se requiere?
2. De cunta muestra se dispone?
3. En qu intervalo de concentraciones est el analito?
4. Qu componentes de la muestra interfieren?
5. Cules son las propiedades fsicas y qumicas de la
matriz de la muestra?
6. Cuntas muestras hay que analizar?
Seleccin de un mtodo analtico

Exactitud requerida: determina el tiempo y el esmero


que requerir el anlisis
Cantidad de muestra existente e intervalo de
concentracin del analito: determinan lo sensible
que debe ser el mtodo y el intervalo de concentracin
al que debe adaptarse
Componentes presentes en la muestra que
interfieren: determina la selectividad del mtodo
Propiedades fsicas y qumicas de la muestra:
influyen en la eleccin del mtodo
Nmero de muestras por analizar: condiciona la
seleccin desde el punto de vista econmico
Criterios de funcionamiento de los instrumentos:
parmetros de calidad

Criterios que se utilizan para decidir si un determinado


mtodo instrumental es o no adecuado para resolver un
problema analtico

Parmetros de calidad

Permiten reducir la eleccin de los instrumentos a


tan solo unos pocos
a) Criterios cualitativos para seleccionar mtodos
analticos

1. Velocidad

2. Facilidad y comodidad

3. Habilidad del operador

4. Coste y disponibilidad del equipo

5. Coste por muestra


b) Criterios cuantitativos para seleccionar mtodos
analticos
Criterio Parmetro de calidad
1. Precisin Desviacin estndar absoluta, desviacin
estndar relativa, coeficiente de variacin,
varianza

2. Exactitud Error absoluto sistemtico, error relativo


sistemtico

3. Sensibilidad Sensibilidad de calibracin, sensibilidad


analtica

4. Lmite de deteccin Blanco ms tres veces la desviacin estndar


del blanco

5. Intervalo de concentracin Concentracin entre el lmite de cuantificacin


(LOQ) y el lmite de linealidad (LOL)

6. Selectividad Coeficiente de selectividad


Criterios cuantitativos para seleccionar mtodos
analticos
Precisin

La precisin de los datos analticos se define


como el grado de concordancia mutua entre los
datos que se han obtenido de una misma forma.
Mide el error aleatorio, o indeterminado de un
anlisis.
Precisin
Parmetros de calidad
Trminos Definicin
Desviacin estndar absoluta, s
N
x i x
2
i 1
s i 1
N1

s
Desviacin estndar relativa (RSD) RSD
x

s
Desviacin estndar de la media, sm sm
N

s
Coeficiente de variacin, CV CV x 100%
x

Varianza s2

xi = valor numrico de la i-sima medida

x i
x media de N medidas = i 1
N
Exactitud
La exactitud mide el error sistemtico, o determinado, de un
mtodo analtico.
Se define por la ecuacin:

exactitud x t
Donde:
es la media de la poblacin para la concentracin de un
analito de una muestra cuya concentracin verdadera es
xt.
Para determinar la exactitud hay que analizar uno o varios
materiales estndar de referencia cuyas concentraciones de
analito se conozcan.
Los resultados contendrn tanto errores aleatorios como
sistemticos, a menos que se realicen suficientes anlisis para
que el error aleatorio se reduzca.
CURVA DE CALIBRACIN

Los mtodos clsicos son mtodos absolutos (se


relacionan con patrones bsicos, como el Kg, el
Amperio o el segundo; ejemplo: gravimetra) o
estequiomtricos (la determinacin se basa en la
relacin estequiomtrica de una reaccin entre el
analito y un agente valorante; ejemplo: volumetra).

Los mtodos instrumentales son mtodos relativos,


en los cuales se compara la seal analtica obtenida
para una muestra, con la seal obtenida con uno o
ms patrones.
El calibrado consiste en obtener una relacin
matemtica entre la seal analtica y la
concentracin/composicin de la muestra, siguiendo
un proceso en el que intervienen uno o ms patrones.

La funcin analtica encontrada podr utilizarse para


calcular la concentracin de un analito en una
muestra a partir de la seal instrumental obtenida.

En la prctica, y siempre que es posible, se prefiere


trabajar en una situacin de linealidad, en la cual la
ecuacin que relaciona la seal analtica y
concentracin es una lnea recta.
Calibrado directo a travs de Curvas de
calibracin
Para construir una curva de calibracin se sigue el
siguiente procedimiento:

Se prepara una solucin estndar de la sustancia que se


desea determinar
Generalmente se hace una dilucin de la solucin anterior,
a una concentracin conveniente para trabajar (solucin
patrn)
De la solucin patrn se toman diferentes cantidades, de
tal forma que se tenga una serie de soluciones de
concentraciones diferentes y conocidas
Se agregan reactivos y se mide en un espectrofotmetro a
la longitud de onda analtica
Se grafican los valores de concentracin en funcin de
la absorbancia

Si al graficar no se obtiene una lnea recta debe


realizarse un ajuste matemtico
Sensibilidad

Definicin cualitativa de Sensibilidad:


Es una medida de la capacidad de un mtodo o
instrumento de discriminar entre pequeas diferencias
en la concentracin del analito (de diferenciar pequeas
variaciones en la concentracin del analito).

Dos Factores limitan la sensibilidad:


Pendiente de la curva de calibracin
Reproducibilidad o precisin del sistema de
medicin.
Sensibilidad de calibracin

Definicin cuantitativa de Sensibilidad de calibracin:


Es la pendiente de la curva de calibracin del analito de
inters.
Representando una curva de calibracin:

S mc Sbl
Donde:
S = seal medida
c = concentracin del analito
Sbl= seal instrumental de un blanco
m = pendiente de la lnea recta Entre dos mtodos que tengan igual
precisin, ser ms sensible aquel cuya
curva de calibracin tenga mayor pendiente.
Qu grfica tiene mayor sensibilidad?

a b c
Sensibilidad analtica

Inconveniente de la Sensibilidad de calibracin:


No considera la precisin.
Mandel y Stiehler proponen la Sensibilidad analtica
definiendo la siguiente ecuacin:

m

ss

= sensibilidad analtica
m = pendiente de la curva de calibracin
ss = desviacin estndar de las seales o medidas
Sensibilidad analtica

La sensibilidad analtica posee la ventaja de ser


relativamente insensible a los factores de amplificacin.
Si se aumenta la ganancia de un instrumento por un
factor de cinco, el valor de m se incrementar en cinco
veces.
Este aumento vendr acompaado del correspondiente
aumento en ss, y por tanto, la sensibilidad analtica se
mantendr prcticamente constante.
Lmite de deteccin

Concepto de Lmite de deteccin:


Concentracin o peso mnimo de analito que puede
detectarse para un nivel de confianza dado.
Depende de:
La relacin entre la magnitud de la seal analtica y el
valor de las fluctuaciones estadsticas de la seal del
blanco.
A menos que la seal analtica sea mayor que la del
blanco en un mltiplo k de las variaciones del blanco
debidas a errores aleatorios, no ser posible detectar
con certeza la seal analtica.
La mnima seal analtica distinguible Sm se toma como
la suma de la seal media del blanco Sbl ms un
mltiplo k de la desviacin estndar del mismo:

Sm Sbl k bl
Donde:
Sm= seal mnima distinguible
Sbl = seal del blanco
bl = desviacin estndar del blanco
k = multiplicador

Experimentalmente Sm puede determinarse realizando


20 o 30 medidas del blanco.
Lmite de deteccin

Despus, los datos se tratan estadsticamente para


obtener Sbl y sbl . Al final, el lmite de deteccin,
se calcula de la siguiente manera:

S m Sbl
cm
m
Kaiser argumenta que un valor razonable para la
constante es igual a k=3, siendo el nivel de confianza de
la deteccin como mnimo de 89%.
Lmite de deteccin

Es la mnima concentracin o la mnima masa de analito


que se puede detectar para un nivel de confianza dado.

Intervalo lineal
Intervalo de concentracin aplicable

El intervalo til de un mtodo analtico va desde la


concentracin ms pequea con la que pueden realizarse
medidas cuantitativas (lmite de cuantificacin, LOQ)
hasta la concentracin a la que la curva de calibracin se
desva de la linealidad (lmite de linealidad, LQL).
Como lmite inferior de las medidas cuantitativas se
toma, en general, aquel que es igual a diez veces la
desviacin estndar cuando la concentracin del analito
es cero (10 x Sbl).
Para que un mtodo analtico sea aplicable, debera
tener un intervalo de al menos dos rdenes de magnitud.
Intervalo de concentracin aplicable

Respuesta del instrumento LOL

Cm LOQ

Intervalo til

Concentracin
Relacin Seal-Ruido
Una MEDIDA ANALTICA INSTRUMENTAL
consta de dos componentes:

Informacin del analito Informacin ajena no


que interesa al qumico deseada que degrada
la exactitud y la
precisin del anlisis,
aumentando el lmite
inferior de la cantidad
de analito que se
puede detectar.

SEAL RUIDO
EFECTO DEL RUIDO SOBRE UNA
SEAL ANALTICA
EFECTO DEL RUIDO EN UNA MEDIDA DE
CORRIENTE

Corriente, A x 10-15
Corriente, A x 10-15

0 1 2 3 0 1 2 3
Tiempo, horas Tiempo, horas

Registro grfico experimental Media de las fluctuaciones


de una corriente continua de
0.9 x 10-15 A
Relacin Seal-Ruido

Datos sin ruido nunca pueden obtenerse en el


laboratorio.
En la mayora de las medidas, el valor promedio de la
seal de ruido R es constante e independiente de la
magnitud de la seal total S.
Por ello, para seales pequeas el valor del ruido da
lugar a errores ms importantes que en el caso de
seales grandes.
En general, se considera imposible detectar seales
cuando la relacin S/R es menor de 2 3.
Relacin Seal-Ruido

Por tanto, para describir la calidad de un mtodo


analtico o el funcionamiento de un instrumento, la
relacin seal/ruido (S/R) es un parmetro de calidad
mucho mejor que el ruido solo.
Para una seal, la magnitud del ruido se define como la
desviacin estndar s del valor de la seal medida,
mientras que la seal viene dada por la media X de la
medida. S/N estar dado por:

S media X

R desviacin estndar s
Fuentes de ruido en los anlisis
instrumentales

Proviene de una multitud de


variables incontroladas que
Ruido qumico afectan la qumica del sistema
analizado (variaciones en
temperatura y presin que
afectan el equilibrio qumico).

Se asocia a cada componente


del instrumento (a la fuente, al
Ruido Instrumental transductor de entrada, a todos
los elementos que tratan la
seal y al transductor de
salida).
Ruido Instrumental

El ruido de cada uno de los componentes del


instrumento puede ser de distinto tipo y provenir de
distintas fuentes. Por lo que el ruido que acaba
percibindose es una mezcla compleja que no se puede
caracterizar por completo.
Su origen puede relacionarse con fenmenos elctricos
del propio instrumento o en variaciones en la radiacin
electromagntica del ambiente que es recogida por los
componentes del instrumento (ruido ambiental).
Aumento de la relacin entre Seal y
Ruido

Es imposible eliminar completamente el ruido, pero es


posible minimizar su efecto aumentando la relacin S/N
tanto a nivel de hardware (empleando componentes
que eliminan o atenan el ruido sin afectar a la seal
analtica), como de software (empleando programas
informticos capaces de separar las seales analticas
de un entorno ruidoso).
VALIDACIN DE UN
PROCEDIMIENTO ANALITICO

Procedimiento para establecer por medio de estudios


laboratoriales una base de datos que demuestren
cientficamente que un mtodo analtico tiene las
caractersticas de desempeo que son adecuadas para
cumplir los requerimientos de las aplicaciones analticas
pretendidas.
Implica la demostracin de la determinacin de las
fuentes de variabilidad y del error sistemtico y al azar
de un procedimiento, no solo dentro de la calibracin
sino en el anlisis de muestras reales.
Calibracin en Anlisis Instrumental

Segn la ISO (International Standard Office), la


calibracin se define como el conjunto de operaciones
que permiten establecer, en determinadas condiciones
experimentales, la relacin existente entre los valores
indicados por el aparato o instrumento, con los valores
obtenidos en la medida de valor conocido del analito.
CALIBRACIN DE LOS MTODOS
INSTRUMENTALES

Los mtodos clsicos son mtodos absolutos (se


relacionan con patrones bsicos, como el Kg, el
Amperio o el segundo; ejemplo: gravimetra) o
estequiomtricos (la determinacin se basa en la
relacin estequiomtrica de una reaccin entre el
analito y un agente valorante; ejemplo: volumetra).

Los mtodos instrumentales son mtodos relativos,


en los cuales se compara la seal analtica obtenida
para una muestra, con la seal obtenida con uno o
ms patrones.
El calibrado consiste en obtener una relacin
matemtica entre la seal analtica y la
concentracin/composicin de la muestra, siguiendo
un proceso en el que intervienen uno o ms patrones.

La funcin analtica encontrada podr utilizarse para


calcular la concentracin de un analito en una
muestra a partir de la seal instrumental obtenida.

En la prctica, y siempre que es posible, se prefiere


trabajar en una situacin de linealidad, en la cual la
ecuacin que relaciona la seal analtica y
concentracin es una lnea recta.
Los tres mtodos de calibrado aplicables son:

Calibrado directo a travs de Curvas de


calibracin: obtencin de la funcin analtica
mediante la medida de patrones y clculo de la
concentracin de analito por interpolacin.

Mtodo de estndar externo: adicin a una muestra


de cantidades crecientes de patrn y clculo de la
concentracin de analito por extrapolacin.

Mtodo de estndar interno : similar al calibrado


directo, pero aadiendo un patrn interno a las
disoluciones patrn y a la muestra, con el fin de
compensar posibles fluctuaciones en la seal
analtica.
Mtodos de mnimos cuadrados

Es un mtodo matemtico utilizado para ajustar, a


una lnea recta, una serie de puntos o valores cuando
se presentan algunas desviaciones. Se basa en la
ecuacin de la lnea recta:

Y mX b
En donde:
Y = son los datos determinados o valores a ajustar
m = la pendiente
X = son valores o datos conocidos
b = es la ordenada de origen
Frmulas para el ajuste


XY


X Y
n

m
C

C X 2

X
2

b
Y m X
n
Coeficiente de correlacin


nXY X Y
2

nX X nY Y
2
r 2 2 2 2

RESOLVER PROBLEMAS