Qumica Biolgica Patolgica

HEMOGLOBINOPATIAS
I-Alteraciones Estructurales

Tema:3 (3) Dra. Silvia Varas

qbpatologica.unsl@gmail.com
Esquema de la Molcula de
Hemoglobina
Ontogenia cadenas de globina
1
 , ,
, ,
Sntesis de cadenas de globina
% en embrin, feto y lactante
 UNION DEL HEM A LA GLOBINA Y AL OXGENO
El hierro se une la Hys
F8 ( histidina
proximal)
Al otro lado se
encuentra la Hys E7
(histidina distal)
donde se une el O2,
CO2 y CO

Cada subunidad esta constituida

por 8 hlices rotuladas AH
conectadas por uniones
polipeptdicas cortas
 RESIDUOS EN CONTACTO CON EL HEM

Los residuos no
polares en los
segmentos C, CD, E, F
y FG protegen la
abertura al impedir
que el agua penetre.
 BOLSILLO DEL HEM

La jaula hidrofbica donde se

encuentra el hem es la fuerza
estabilizadora principal para la unin
del hem a la protena

El medio no polar dificulta la

oxidacin de Fe2+ a Fe3+.
 Desoxihemoglobina
La oxigenacin pone a las cadenas mas
juntas

Oxihemoglobina
 Estado Desoxihb o
Tenso (T)
Estado (T): hay
cerca 22 contactos
(12 puentes de
hidrogeno)

Estado Oxihb o
Relajado (R)
Estado R: hay
cerca 40 contactos
(19 puentes de
hidrogeno)
 La mayora de los
movimientos de
oxigenacin/deoxige
nacin toma lugar en
las interfaces 12
(21)
Las interfaces 11
(22) permanecen
inmviles

Desoxigenacin:
Oxigenacin: ------
HEMOGLOBINOPATAS

ALTERACIONES CUALITATIVAS
Hemoglobinopatas estructurales
ALTERACIONES CUANTITATIVAS
Sndromes Talasmicos
 Clasificacin:
ESTRUCTURAL TALASEMIAS PERSISTENCIA
ES HEREDITARIA DE
- talasemia HEMOGLOBINA F
Cadenas - talasemia Con delecin
Cadenas - talasemia
Cadenas - talasemia
Cadenas - talasemia Sin delecin
Fusin de Ligado al cluster
Cadenas: No Ligado al cluster



 Clasificacin segn Fenotipo
I-Propiedades fsico-qumicas alteradas
A-HbS (polimerizacin deoxihb S): sndromes drepanocticos
B-HbC (cristalizacin): anemia hemoltica, microcitosis
II-Variantes de Hemoglobina Inestables
A-Anemia hemoltica de cuerpos de Heinz Congnita

III- Variantes con afinidad al O2 alterada

A-Variantes con alta afinidad: eritrocitosis
B-Variantes con baja afinidad: anemia, cianosis
IV-Hemoglobina M
A-Metahemoglobinemia, cianosis.

V- Variantes que causan un fenotipo

talasmico
 VARIANTES ESTRUCTURALES
DE HEMOGLOBINAS
NOMENCLATURA
PATOLOGIA MOLECULAR:
a-Sustituciones de una nica base. HbS
b-Variantes de cadena de hemoglobina
elongadas (cadenas alargadas). Hb CS
c-Cadenas de globinas truncadas (delecin
de fragmentos). Hb Leiden, Gun Hill
d- Hemoglobinas de fusin (hibridizacin
anmala). Hb Lepore
a-Sustituciones de una nica base.
b-Variantes de cadena de Hb elongadas.
 Mutantes de Terminacin: Cadenas Alargadas

Los mutantes de terminacin son todos variantes de la

cadena alfa globina donde hay una nica sustitucin de base
en el codn stop UAA .
Hb Constant Spring. 1 y 2 Adulto Normal; 3 y 4 heterocigota para HbCS y -talasemia
con HbH;5:Adulto Normal; y 6 componente heterocigota para -talasemia y HbCS
 c-Cadenas de globinas truncadas
En este caso, un o ms aminocidos
adyacentes se pierden, pero se
conserva el resto de la cadena
normal. Estas variantes involucran la
delecin de 1 o ms codones intactos,
no afectando el marco de lectura de
la protena restante.
Consisten en una perdida de uno o varios nucletidos en
la secuencia del DNA que codifica la sntesis de una
cadena de globina. Son ejemplos de deleciones las Hb
Freiburg (delecin de un aminocido), Hb Lyon (delecin
de dos aminocidos) y Hb GunHill (delecin de cinco
aminocidos).
 d- Hemoglobinas de fusin
Hemoglobina Lepore
Hemoglobina Kenya

Hb Lepore tiene los -El gen hbrido se llama Lepore y

primeros 20 a 80 - El gen hbrido se llama anti-Lepore
aminocidos de las
cadenas y los
ltimos 50 a 100
aminocidos del
extremo C-terminal
de la cadena .
 Clasificacin segn Fenotipo
I-Propiedades fsico-qumicas alteradas
A-HbS (polimerizacin deoxihb S): sndromes drepanocticos
B-HbC (cristalizacin): anemia hemoltica, microcitosis
II-Variantes de Hemoglobina Inestables
A-Anemia hemoltica de cuerpos de Heinz Congnita

III- Variantes con afinidad al O2 alterada

A-Variantes con alta afinidad: eritrocitosis
B-Variantes con baja afinidad: anemia, cianosis
IV-Hemoglobina M
A-Metahemoglobinemia, cianosis.

V- Variantes que causan un fenotipo

talasmico
I-Hemoglobina con Propiedades
Fco-Qco Alteradas
Hemoglobina S
Hemoglobina C
Hemoglobina E
Hemoglobina D
 Anemia Falciforme, Drepanoctica,
en Forma de Hoz (sickle), o HbS
6

Cadena
GTGGAG

WT: Ac.Glutmico
GTGGAG

S: Valina
 Fisiopatologa:
POLIMERIZACION DE HEMOGLOBINA
La presencia de HbS, permite a esta
polimerizar cuando se desoxigena
(Estado T), ya que la valina (pero NO
Ac.Glutmico) puede unirse a
steres complementarios en cadenas
de globina adyacentes
 1 2

La valina (2) se une a un

bolsillo hidrfobo sobre la
subunidad 1 de una molcula
vecina de oxihemoglobina.
 c/polmero= 14 haces longitudinales= cuerpo tactoide
a

b
Estructura cilndrica, insoluble y rgida
c

Micrografa electrnica de fibras teidas negativamente de HbS y la estructura

deducida por reconstruccin de la imagen tridimensional. Las fibras reconstruidas esta
presente como modelos de balones, (cada baln representa un tetrmero de HbS). Los
modelos se presentan como la cubierta exterior (a), el ncleo interno (b) y una
combinacin de ambos filamentos el externo y el interno (c)
Fibras de desoxihemoglobina S
Fisiopatologa:
POLIMERIZACION DE HEMOGLOBINA
DESHIDRATACION CELULAR
DISMINUCIN DEL NO Y DISFUNCIN DE
ENDOTELIO
ADHESIVIDAD CELULAR ANORMAL
INFLAMACION
ISQUEMIA-REPERFUSIN
LA ACTIVACIN DEL SISTEMA DE
COAGULACIN
VASCULOPATIA CRONICA
 6
2
1

VCAM (vascular cell adhesion molecule )

SCAVENGING o BARRIDO DE
OXIDO NITRICO (NO)
HEMOLISIS INTRAVASCULAR SCAVENGING de NO Y DISFUNCIN DE ENDOTELIO
Diagnstico Anemia con HbS:
 Caractersticas clnicas
1. Fase estacionaria.
Corresponde, generalmente, a los primeros aos de vida (1-4 aos), y
sus manifestaciones clnicas son las propias de un sndrome hemoltico
crnico moderado o intenso (anemia, palidez cutneo-mucosa,
subictericia conjuntival y retraso del crecimiento seo y gonadal).
2. Fase de expresividad aguda.
Se inicia a partir de los 4 aos de edad, con agravamiento del cuadro
anmico (Hb < 80 g/L) y aparicin de diversas manifestaciones clnicas
de carcter agudo debidas a las crisis vasooclusivas que afectan de
forma importante a diversos rganos, aunque muy especialmente al
pulmn, al rin y al tejido seo (drepanocitosis).
Las crisis vasooclusivas constituyen, de hecho, la manifestacin clnica
ms caracterstica y grave de la anemia falciforme y, muchas veces, el
primer sntoma. Se trata de ataques, muy dolorosos y pasajeros, que
pueden durar das o semanas.
3. Fase de expresividad crnica. Es propia de los pacientes que han
logrado sobrevivir la primera infancia, por lo que es caracterstica de la
adolescencia y la edad adulta. El carcter evolutivo crnico de la anemia
falciforme afecta de forma importante al crecimiento y desarrollo
corporal, al sistema nervioso central, cardiovascular, pulmonar,
hepatobiliar y gastrointestinal. Asimismo, condiciona lesiones graves de
la funcin renal y trastornos visuales que pueden conducir a la ceguera
Otras variantes
estructurales de Hb
Hemoglobina C: fue la segunda variante a ser
identificada electroforeticamente. Resulta de la sustitucin
de Lisina por Ac.Glutmico en la posicin 6 de la cadena
de de globina. Existe un nmero de observaciones que
sugieren que la Hemoglobina C es menos soluble que la
Hemoglobina A y tiene tendencia a cristalizar en el
eritrocito.
Hemoglobina D: este termino se usa par describir un
numero de variantes de hemoglobinas que tienen una
velocidad de migracin idntica a HbS en una
electroforesis a pH alcalino. La mas comn de estas
hemoglobinas es la Hb DLOS ANGELES, sus eritrocitos son
normales excepto por el elevado numero de clulas target.
Hemoglobina E: Es la variante ms comn en el mundo.
Resulta de la sustitucin de Acido Glutmico por Lisina en
la posicin 26 en la cadena de globina.
 Microscopia contraste de fase. Note 3 sickled cells con
Frotis de sangre. Enfermedad Hb SS con sickle- cells. proyecciones (formacin tactoide).

Frotis de sangre de enfermedad con Hb CC. Numerosas target

Frotis de sangre de Enfermedad Hb SC. Note frecuencia de cells y una poblacin de microesferocitos (hipercromtica).De las
target cells, caracterstica de Hb C y las clulas son pequeas y clulas no esferociticas, virtualmete todas son target cells.
densas, irregular, refleja su contenido de Hb S.
FS de enfermedad con Hb C postesplenectomia. Note las
inclusiones semejantes a una barra en dos clulas como Enfermedad de Hb CC postesplenectomia. Microscopia de
resultado de cristalizacin de Hb C. Estas clulas son contraste de Fase. Note la barra cristalina de Hb C in una
virtualmente removidas en pac. con bazo. clula.

FS de enfermedad Hb DD. Note target cells en una FS de enfermedad Hb EE. Hipocromia, anisocitosis
poblacin de esferocitas pequeos, poikilocitos, y y target cells.
 Clasificacin segn Fenotipo
I-Propiedades fsico-qumicas alteradas
A-HbS (polimerizacin deoxiHb S): sndromes drepanocticos
B-HbC (cristalizacin): anemia hemoltica, microcitosis
II-Variantes de Hemoglobina Inestables
A-Anemia hemoltica de cuerpos de Heinz Congnita

III- Variantes con afinidad al O2 alterada

A-Variantes con alta afinidad: eritrocitosis
B-Variantes con baja afinidad: anemia, cianosis
IV-Hemoglobina M
A-Metahemoglobinemia, cianosis.

V- Variantes que causan un fenotipo

talasmico
II-Desordenes de Hemoglobinas
Inestables
Anemia Hemoltica de Cuerpos de Heinz Congnitos, (CHBA)
(Congenital Heinz body hemolitic anemia)

Tipo 1: Sustituciones en la
vecindad del bolsillo del hem .
La unin del hem a la globina
involucra interacciones
especficas con residuos de
aminocido no polares en las
regiones CD, E, F, y FG
 Desordenes de Hemoglobinas
Inestables
Anemia Hemoltica de Cuerpos de Heinz Congnitos, (CHBA)
(Congenital Heinz body hemolitic anemia)
Tipo 2: Ruptura Estructura
Secundaria de -hlice.
Prolina no puede participar
excepto como parte de uno
de los tres residuos iniciales.
Hay sustituciones de Pro

Tipo 3: Mutaciones en la interfaz

11

Tipo 4 : Deleciones de
aminocidos

Tipo 5: Cadenas Elongadas

 OxiHb (6HS)
NADH
Formacin Cuerpos Heinz
NAD+
- Superxido
MetaHb (6HS) + O2
dismutasa
Hb sin hem
Hemicromo 1 (Reversible)

Hemicromo 2 R(Irreversible)
H2O2
GSH Catalasa
Cadenas Precipita (4 HS)
I Glutation
precipitadas peroxidasa

GSSG
Cuerpos de Heinz (unido MP)
H2O

LISIS
 Mecanismo de formacin de los Cuerpos de
Heinz

Autoxidacin

in superxido

Los hemicromos son molculas de metahemoglobina en las que la quinta o

sexta posicin de coordinacin con el hierro se une en otra posicin de la
normal, generando una distorsin de la molcula
 Mecanismo de Hemlisis:

Una teora propuesta como mecanismo de hemlisis seria la siguiente

(1) un aumento de la oxidacin y fosforilacin de tirosina en la protena AE1;
unin de los hemicromos a la protena Banda 3
(2) reclutamiento progresivo de AE1 fosforilada en grandes complejos en
membrana lo cuales contienen hemicromos y
(3) paralela lisis de los eritrocitos y una masiva liberacin de vesculas que
contienen hemicromos.
II-Mecanismos de Remocin Fagoctica de
Eritrocitos

La secuencia de eventos sera:

a- Unin de los hemicromos a la protena Banda 3,
b- Oxidacin de los dominios citoplasmtico de Banda 3,
c- Generacin de agregados de alto peso molecular de Banda 3
(clustering de banda 3) que une IgG y complemento,
d- Opsonizacin con Ac anti- Banda3
e- Reconocimiento por parte del sistema mononuclear-fagoctico y
fagocitosis por macrfagos.
 Clasificacin segn Fenotipo
I-Propiedades fsico-qumicas alteradas
A-HbS (polimerizacin deoxiHb S): sndromes drepanocticos
B-HbC (cristalizacin): anemia hemoltica, microcitosis
II-Variantes de Hemoglobina Inestables
A-Anemia hemoltica de cuerpos de Heinz Congnita

III- Variantes con afinidad al O2 alterada

A-Variantes con alta afinidad: eritrocitosis
B-Variantes con baja afinidad: anemia, cianosis
IV-Hemoglobina M
A-Metahemoglobinemia, cianosis.

V- Variantes que causan un fenotipo

talasmico
III-
 Clasificacin segn Fenotipo
I-Propiedades fsico-qumicas alteradas
A-HbS (polimerizacin deoxiHb S): sndromes drepanocticos
B-HbC (cristalizacin): anemia hemoltica, microcitosis
II-Variantes de Hemoglobina Inestables
A-Anemia hemoltica de cuerpos de Heinz Congnita

III- Variantes con afinidad al O2 alterada

A-Variantes con alta afinidad: eritrocitosis
B-Variantes con baja afinidad: anemia, cianosis
IV-Hemoglobina M
A-Metahemoglobinemia, cianosis.

V- Variantes que causan un fenotipo

talasmico
 TALASEMIAS PERSISTENCIA
HEREDITARIA DE
HEMOGLOBINA F
Con delecin
- talasemia

- talasemia
- talasemia Sin delecin
Ligado al cluster
- talasemia No Ligado al cluster
- talasemia
 Alguna pregunta?
 Vamos a la Talasemias