DETERMINACION DE

GLUCOSA Y
HEMOGLOBINA
GLUCOSILADA
Integrantes:

Gloria

Apolo Giovanni Melo Iriarte

MTODOS DE MEDICIN DE
GLUCOSA
Actualmente las mediciones de glucosa se realizan en
suero o plasma.
El suero o plasma se debe refrigerar y separar de las
clulas para evitar la perdida sustancial de glucosa por
fraccionamiento celular.
Se emplean iones de fluoruro de sodio como anticoagulante
ya que inhibe las enzimas glucolticas.

Glucosa sangunea de ayuno

(GSA)
Glucosa sangunea de ayuno se debe obtener
despus de un ayuno de casi 10 horas (no >16h)
Los valores normales en personas en ayunas oscilan
entre 70 a 100 mg/dl, cuando los valores exceden los
100 mg/dl (hiperglucemia) se sospecha la presencia de
diabetes mellitus
En los mtodos mas comunes de anlisis de glucosa
se emplean las enzimas oxidasa de glucosa o hexocinasa.

OXIDATO DE GLUCOSA
La oxidasa de glucosa es una enzima especifica que
reacciona solo con -D-glucosa convirtindolo en acido
glucnico. Se consume oxigeno y se produce perxido
de hidrogeno.
La reaccin se puede monitorear
-Polarogrficamente midiendo la tasa de desaparicin
de oxigeno con un electrodo para oxigeno

-Consumiendo el perxido de hidrogeno en una segunda

reaccin catalizada por peroxidasa y oxidando un
compuesto colorante (comnmente hidrazona de
3-metil-2-benzotiazona y la N,N-dimetilanilina). Se puede
monitorear espectrofotomtricamente y es proporcional a
la cantidad de glucosa presente en la muestra. (reaccin
de Trinder)
Valores reducidos: concentraciones altas de
acido urico, bilirrubina y acido ascrbico (oxida las
peroxidasas)
Valores altos: oxidantes fuertes

Hexocinasa
Es mas exacto porque la reaccin de acoplamiento con
deshidrogenasa de glucosa-6 fosfato es muy especifica.
Se puede llevar a cabo en suero o plasma recolectado
con heparina, EDTA, fluoruro, oxalato o citrato.
Puede causar una disminucin falsa una hemolisis total
y concentraciones extremadamente altas de bilirrubina.

La hexocinasa en presencia de ATP convierte la glucosa

en glucosa 6-fosfato. La glucosa 6-fosfato y el cofactor
NADP+ se convierten a 6-fosfogluconato y NADPH
mediante la deshidrogenasa de glucosa-6-fosfato. El
NADPH tiene un mximo de absorbancia fuerte a 340 nm;
la tasa de aparicin de NADPH se puede monitorear por
medio de un espectrofotmetro y es proporcional a la
cantidad de glucosa en muestra.

HEMOGLOBINA
GLUCOSILADA
Compuesto de hemoglobina que se forma cuando la
glucosa reacciona con el grupo amino de la hemoglobina.
La molecula de glucosa se une de manera no enzimtica
a la molecula de hemoglobina para formar una cetoamina.
La tasa de formacin es directamente proporcional a las
concentraciones de glucosa plasmtica.

Debido al promedio de vida de los eritrocitos la

concentracin de hemoglobina glucosilada refleja
una concentracin promedio de los 2 a 3 meses previos.
La medicin de protenas glucosiladas proporciona
informacin ms reciente acerca de las cantidades
de glucosa (ltimos 15-20 dias)

La hemoglobina A1c (HBA1c) es la detectada, es un

mtodo confiable para monitorear el control de la diabetes.
Esta constituida por tres componentes: A1a, A1b y A1c. la
Hba1c es el componente que se une de forma mas
intensa a la glucosa, por lo que proporciona datos mas
precisos.

VENTAJAS

Valoracin del xito del tratamiento y control del paciente

Comparar xito en tratamientos
Individualizar los regmenes de control diabeticos
La muestra puede tomarse en cualquier momento, dado
que no se ve afectada por variaciones de corto plazo
(ingestin de alimentos, ejercicio, estrs)

VALORES NORMALES
Personas no diabticas 4.5-6.0%
y en diabticos:
buen control <7%
aceptable 8-9%
mal control>9%
Se ha determinado que por cada cambio de 1% hay un
cambio de 35 mg/dl (2mmol/L) en la glucosa plasmtica
promedio

INTERFERENCIA
Enfermedades que modifiquen el tiempo de vida del
eritrocito (hemoglobinopatas) afectan la concentracin
de hemoglobina glucosilada.
Hemoglobinopatas causan variaciones en la
hemioglobina A, lo que pueden afectar los resultados.

MTODOS
Mtodos basados en diferencias estructurales
Mtodo

Descripcin

Inmunoensayos

Anticuerpos policlonales o
monoclonales hacia el
grupo N terminal
glucosilado de la cadena
de Hgb

Cromatografa de
afinidad

Separa con base en la

estructura qumica
usando borato para
enlazar protenas
glucosiladas

Caractersticas

Preferido ya que no
depende de la
temperatura ni afectado
por otras hemoglobinas

Mtodos basados en diferencias de carga

Mtodo

Descripcin

Caractersticas

Cromatografa de
intercambio inico

Cama de resina con carga Es muy dependiente de la

positiva
temperatura y es afectada
por hemoglobinopatas

Electroforesis

Separacin basada en
diferencias de cargas

Enfoque isoelctrico

Tipo de electroforesis con Interfiere con pre-Hgb A1c

punto isoelctrico para
separar

Cromatografa lquida
de alta presin (CLAP)

Una forma de
cromatografa de
intercambio inico

Interfieren valores de Hgb

F

Separa todas las formas

de gluco Hgb: A1a, A1b,
A1c

BIBLIOGRAFIA
Bishop Michael L. Qumica Clnica Principios, procedimientos y
correlaciones 5 edicion Mc Graw Hill
Pagana Kathleen Laboratorio Clnico Indicaciones e
interpretaciones de resultados Editorial Manual Moderno