MORFOFISIOLOGA

BACTERIANA
BACTERIAS
Las bacterias poseen una
estructura relativamente simple.
Son microorganismos procariotas,
es decir, unos microorganismos
unicelulares sencillos, sin
membrana nuclear, mitocondrias,
aparato de Golgi ni retculo
endoplsmico que se reproducen
por divisin asexual. La pared
celular que rodea a las bacterias
es compleja, y existen dos formas
bsicas: una pared celular gram
positiva con una gruesa capa de
peptidoglicano y una pared
celular gram negativa con una
delgada capa de peptidoglicano,
as como una membrana externa.
Algunas bacterias carecen de
pared celular y compensan su
ausencia sobreviviendo tan slo
en el interior de clulas del
organismo anfitrin o en un
ambiente hipertnico. Para
realizar una clasificacin
preliminar de las bacterias se
utiliza su tamao (de 0.3 a 25
m o ms), forma (esferas,
bastoncillos, espirales) y
disposicin espacial (clulas
aisladas, en cadenas y
formando cmulos); mientras
que su clasificacin definitiva se
refiere a sus propiedades
fenotpicas y genotpicas.
El organismo humano est
habitado por miles de especies
bacterianas distintas; mientras
algunas mantienen una relacin
parasitaria temporal, otras habitan en
el ser humano de manera
permanente. Tambin se encuentran
bacterias en el ambiente, como el
aire que se respira, el agua que se
bebe y los alimentos que se comen;
aunque muchas de ellas son
relativamente avirulentas, otras son
capaces de provocar enfermedades
potencialmente mortales. La
enfermedad puede deberse a los
efectos txicos de los productos
bacterianos (toxinas) o bien a la
invasin de regiones corporales que
acostumbran a ser estriles.

La morfologa bacteriana debe
considerarse desde dos puntos de
vista:
clulas individuales y grupos de
clulas, segn se observan al
microscopio.
colonias bacterianas que se
desarrollan en medios slidos
apreciables a simple vista y formadas
por un nmero muy grande de clulas.
Las diferencias en el tamao, la forma
y ciertos detalles estructurales son
caractersticas de los principales
grupos de bacterias y proporcionan las
bases fundamentales para su estudio.
Las colonias bacterianas, compuestas
por masas de clulas individuales,
tienen caractersticas de tamao,
consistencia textura y color.
MORFOLOGIA BACTERIANA
MORFOLOGIA COLONIAL
ELEVACIN
CONTORNO
FORMA
MICROSCOPIA
Antes de estudiar la morfologa de los
microorganismos es necesario revisar los
diferentes mtodos que permiten
averiguar su tamao, forma y estructura.
Microscopio compuesto.
Con el microscopio ordinario, los objetos
se ven con luz transmitida. Para ser visto
y delineado, el objeto debe ser lo
suficientemente grande como para
proyectar una sombra. El objeto ms
pequeo que puede ser visualizado es
una esfera de 250 a 275 nm de dimetro.
Microscopio de campo oscuro
Se utiliza luz reflejada en lugar de luz
transmitida. La luz incide oblicuamente
sobre el objeto, y as este aparece
brillante iluminado contra un foco oscuro.
Tiene una considerable utilidad para
poder observar microorganismos muy
finos, en especial espiroquetas o
leptospiras de muestras clnicas.
Su desventaja es que muestra imgenes
con poca resolucin.
Microscopio de contraste de fases
La luz es dispersada cuando atraviesa un
objeto de diferente grosor o ndice de
refraccin que el fluido circundante, lo que
produce un cambio de fase.
Permiten observar el objeto como una
sombra dbil contra su fondo oscuro.
Las bacterias pueden observarse en vivo sin
tincin, en una preparacin hmeda.
Este microscopio es mucha utilidad en el
estudio de la estructura de la clula viva, no
modificada por los procesos de fijacin y
tincin.
Microscopio electrnico
Utiliza un flujo de electrones en lugar de un
haz de luz. El haz de electrones es
enfocado por lentes magnticas y el objeto
interpuesto intercepta dicho haz
proyectando una sombra que es registrada
en una placa fotogrfica para dar una
micrografa electrnica.
Resolucin: 10 000 a 50 000.
Tincin con metales pesados.
Microscopio de transmisin.
Microscopio de barrido.
Con estos microscopios se hace posible ver
con detalle la estructura microbiana,
determinar tamaos y forma de pequeos
virus.
MICROSCOPIO DE BARRIDO
MICROSCOPIO DE TRANSMISIN
TINCIONES
Las clulas bacterianas para poder ser
vistas al microscopio de luz, se deben
fijar y teir.
La mayora de las bacterias se tien
uniformemente sin diferenciacin de la
estructura interna.
En las clulas viejas se observa a
menudo una tincin irregular, con
diferenciacin de grnulos o reas
teidas ms intensamente.
Clasificacin de las tinciones
Tincin positiva.
Implica el uso de colorantes para teir a
las clulas y aumentar su contraste.
Tincin simple (azul de metileno).
Tinciones diferenciales (Gram, esporas).
Tincin negativa.
las clulas permanecen sin teir, pero se
colorea el fondo de manera que las
clulas quedan dibujadas (cpsula).
Tincin de Gram
Realizar un frotis
1 gota cristal violeta durante 1 min.
Lavar con agua corriente
1 gota de lugol durante 1 min.
Decantar
Decolorar con alcohol/acetona , 3
seg.
Lavar con agua corriente
1 gota safranina durante 1 min.
Lavar con agua corriente
Secar al aire
Tncin de Ziehl-Neelsen
Principio:
La tincin de Ziehl-Neelsen es una coloracin diferencial til en la
identificacin de Micobacterias. La caracterstica de cido-resistencia de estos
microorganismos hace de esta coloracin un mtodo rpido en eldiagnstico,
presuntivo, de infeccin micobacteriana. Las micobacterias son coloreadas de
rojo por la Fucsina y retienen el color a pesar de la accin del cido y del
alcohol.
Procedimiento:
1. La muestra puede extenderse directamente en el portaobjetos o bien
concentrarla y examinar el sedimento.
2. Se prepara el frotis de forma habitual y se fija con Metanol . El portaobjetos
que debe contener la preparacin debe ser nuevo.
3. Cubrir la preparacin con Fucsina Bsica Fenicada y calentar hasta
observar emisiones de vapor pero evitando la ebullicin. Mantener caliente la
preparacin de 10 a 15 minutos.
4. Lavar con agua.
5. Decolorar con Alcohol-Clorhdrico 97:3 durante 1 minuto aproximadamente
o bien hasta que ya no aparezca un color rojo, a continuacin lavar con agua.
6. Realizar una tincin de contraste con Azul de Metileno Fenicado, 3 min.
7. Lavar de nuevo con agua, secar al aire y observar con objetivo de
inmersin.
Resultados:
Los microorganismos teidos con el primer colorante (Fucsina) de rosa o
rojo son los cidoresistentes, presuntivamente micobacterias. Los otros
organismos o clulas de la tincin son de color azul.


Tincin de Schaeffer y Fulton
Estructura de la clula procariota
Dentro de la membrana citoplasmtica
estn las estructuras internas que incluye
el citoplasma, nucleoide, ribosomas,
mesosomas, inclusiones citoplasmticas
y en algunas bacterias la espora
bacteriana.
Citoplasma
El citoplasma de las clulas bacterianas es
menos complejo que el de las clulas
eucariotas. No contiene retculo
endoplsmico aunque las bacterias Gram
positivas pueden poseer una red fibrosa
muy fina.
El citoplasma bacteriano es un sistema
coloidal delimitado por la membrana
citoplsmica, presenta una consistencia
parecida a un gel, cuya fase dispersante es
agua (85%) junto con diversas sustancias
en solucin (citosol) y cuya fase dispersa
est constituida por macromolculas y
partculas submicroscpicas; ribosomas,
cromosomas y plsmidos.


El citoplasma es una solucin acuosa de
sales, azcares, aminocidos, vitaminas,
coenzimas y una gran variedad de otras
sustancias solubles.
En el citoplasma encontramos adems
inclusiones citoplasmticas:
grnulos de polisacridos
inclusiones lipdicas
grnulos metacromticos (Volutina)
grnulos de azufre
cianoficinas
carboxisomas
magnetosomas
vacuolas de gas

GRNULOS DE POLISACRIDOS
Inclusiones tpicamente formadas por glucgeno y almidn.
INCLUSIONES LIPDICAS
Las inclusiones lipdicas aparecen en varias especies de
Mycobacierium, Bacillus, Azotobacter, Spirillum y otros
gneros.
GRNULOS METACROMTICOS
Se conocen tambin como grnulos de volutina. Estos grnulos
son bastante grandes .
GRNULOS DE AZUFRE
Bacterias quimiolitotrofas y fototrficas que oxidan el H2S a S.
El S puede ser oxidado nuevamente para producir in sulfato y
las inclusiones desaparecen.
CIANOFICINAS
Polmero de carbono y nitrgeno que se forma en
cianobacterias. Es el nico material de reserva conocido de
nitrgeno y no es sintetizado en los ribosomas.
VACUOLAS DE GAS
La funcin de las vacuolas de gas es
mantener la flotabilidad, de modo que las
clulas puedan permanecer en el agua a la
profundidad adecuada para recibir suficiente
cantidad de oxgeno, luz y nutrientes.
MAGNETOSOMAS
Partculas de magnetita (Fe3O4). El
alineamiento de los magnetososmas imparte
propiedades magnticas, lo cual se cree
orienta a las bacterias en el medio
ambiente.
GRANULOS DE -HIDROXIBUTIRATO
Depsitos de energa y carbono reutilizable.

Granulos de polifosfatos
Magnetosomas
Ribosomas
Estructuras relacionadas con la sntesis de protenas.
Son partculas constituidas por RNA y protenas.
Aproximadamente 60% de la masa del ribosoma es RNAr
y el 40% protenas.
Los ribosomas de clulas procariotas tienen una
constante de sedimentacin 70S (Svedberg).
Las subunidades del ribosoma son 50S y 30S.
RNA ribosomal (RNAr) 80%. Componentes estructurales
del ribosoma y catalizadores en la sintsis de protenas.
RNA transferencia (RNAt). Traducen la informacin
gentica de los nucleotidos a los aminocidos.
RNA mensajero (RNAm), contiene la informacin
gentica del DNA.

Esporas bacterianas
Esporas bacterianas o endosporas es un
cuerpo oval, que se forma dentro de la
clula bacteriana, representa un estado de
letrgo y es altamente resistente en el ciclo
vital de la bacteria.
Puede haber esporas deformantes o no
deformantes.
El tamao de la espora y su localizacin es
constante dentro de cada especie.
Puede ser central, subterminal o terminal.
El protoplasto de la espora, con una
membrana limitante, semejante a la
membrana celular vegetativa, esta
rodeada por el crtex, una capa de
peptidoglicano modificada.
El crtex esta rodeado por una o ms
capas protecas complejas.
Finalmente la espora puede estar
rodeada por un exosporium delgado y
muy ajustado.
La endospora se encuentra en estado de
latencia.
En algunos casos se observa oxidacin
de glucosa y otras reacciones
enzimaticas.
Tiene una maquinaria metablica que le
permita la germinacin y el crecimiento
La latencia esta relacionada con la
presencia de el cido dipicolnico (cido
2, 6-dicarboxi-piridina), que es un
quelante del calcio.
La espora es un estado de resistencia en
el desarrollo de la clula.
Impermeable a los colorantes. Resistente
al calor, la desecacin, presin
hidrosttica y a muchos agentes qumicos.
La resistencia al calor de las esporas se
debe a la poca cantidad de agua que esta
presente en el core.

Las esporas se forman con mayor
facilidad bajo condiciones optimas para el
crecimiento de la clula vegetativa.
La esporognesis es inducida por
deplecin de nutrientes, por lo general
fuente de carbono y nitrgeno y rara vez
por falta de fosfatos.
Solo se forma una espora por clula.
Cuando la espora se encuentra en un
medio favorable germina.
El primer paso de la germinacin es la
activacin de la espora.
Es un proceso rpido, irreversible y
degradativo.
Paso dos activacin de enzimas que
degradan el crtex, liberando pptidos,
calcio y c. dipicolnico.
Sntesis de RNA, la sntesis de protenas
y ms tarde la sntesis de DNA y
metabolismo.

Membrana Citoplasmtica

La membrana citoplasmtica de una bacteria es a primera vista una
bicapa lipdica que recuerda a la membrana de las clulas eucariotas
y que est formada por fosfolpidos y protenas. Sin embargo
existen marcadas diferencias entre ellas:

1.- La membrana citoplasmtica de las bacterias es
excepcionalmente rica en protenas, un 70% del peso seco son
protenas, y no contiene esteroles (a excepcin de los micoplasmas,
que s contienen). (Hopanoides)

La estructura de la membrana se estabiliza por enlaces de hidrgeno
e hidrofbicos. Tambin se combinan cationes como Mg2+ y Ca2+
con cargas negativas de los fosfolpidos.

2.- La membrana citoplasmtica presenta repliegues hacia el interior
del citoplasma, conocidos como mesosomas. Hay dos tipos de
mesosomas, de acuerdo a su funcin;

Los mesosomas de tabique intervienen en la formacin de paredes
transversas en la divisin celular.

Los mesosomas laterales en los que se concentran citocromos y
otras enzimas de la cadena respiratoria..
3.- El cromosoma bacteriano est firmemente
adherido a la membrana citoplasmtica, la que
participa en la segregacin de las cromtides
hijas durante la divisin celular, en forma
anloga a lo que el aparato mittico durante la
meiosis de las clulas eucariotas.

4.- La membrana citoplasmtica es el sitio en
donde se sintetizan el ADN, los polmeros que
componen la pared celular y los lpidos de
membrana.

5.- La membrana citoplasmtica contiene todo el
sistema de transporte de electrones de la clula,
semejante a lo que ocurre en las mitocondrias
de una clula eucariota.



6.- La membrana citoplasmtica contiene las
protenas receptoras que funcionan en el
movimiento dirigido o quimiotaxis de la bacteria
hacia nutrientes solubles.

Adems, de la misma manera que la membrana
celular de las clulas eucariotas, la membrana
citoplasmtica de las bacterias cumple
funciones de barrera permeable selectiva y
participa en la secrecin de protenas hacia
el exterior, tales como las exotoxinas,
capaces de producir enfermedad.

La membrana citoplasmtica de las bacterias es el
equivalente funcional de la mayora de los
organelos de una clula eucariota.

Divisin por fisin binaria
La membrana externa

Funciones de la membrana
citoplasmtica
Barrera de permeabilidad:
Evita la perdida pasiva de componentes del
citoplasma y la entrada indiscriminada de
constituyentes.
Estn presentes muchas enzimas implicadas
en el transporte de sustancias hacia el interior y
exterior de la clula.
Sitio donde se produce energa.
Puede estar energticamente cargada , en la
que existen separacin de protones H+ e
hidroxilos OH- a la que se le llama fuerza
motriz potencial.
En algunos puntos de la cadena de transporte
de electrones se bombean protones al exterior de
la membrana crendose un gradiente
electroqumico de protones. Este gradiente es una
forma de energa potencial que puede realizar un
trabajo:

Transporte de solutos
Sntesis de ATP
Rotacin de flagelos
Movimiento deslizante
Transporte inverso de electrones
Sistemas de transporte de membrana
El transporte de nutrientes y la expulsin de
sustancias de desecho son procesos clave
en la vida de las clulas.
Existen cuatro mecanismos generales de
transporte.
Difusin facilitada, nico mecanismo que
no requiere energa. Difusin pasiva de un
sustrato en contra de un gradiente de
concentracin (glicerol).
Transporte dependiente de unin a
protenas. Aquellos que comprenden una
protena transmembranal ms un
componente periplsmico de unin (esto en
las bacterias gram negativas).


Translocacin de grupo. Aquellos como el sistema
fosfotransferasa que implica una serie de protenas
que cooperan en el transporte para efectuar la
captacin neta de algunos azcares (glucosa y
manosa). Participan tambin en el movimiento hacia
las fuentes de carbono (quimiotaxia) y regulacin de
otras vas metablicas.
Transporte quimiosmtico. Aquellos que implican
solamente una protena transmembranal. Existen
tres tipos bsicos: uniporte, simporte y antiporte.
Todos requieren gasto de energa, ya sea fuerza
motrz, ATP o compuestos de alta energa.
El transporte se lleva a cabo por un
cambio conformacional de la protena tras
la unin del sustrato especfico.
Protenas uniportadoras:
Transportan una molcula en un solo
sentido.
Protenas simportadoras:
Transportan sustancias junto con otra
que frecuentemente es un protn.
Protenas Antiportadoras:
Transportan una sustancia en un sentido
y simultneamente otra en sentido
opuesto
Pared celular
Debido a la gran cantidad de solutos disueltos se
genera una considerable presin dentro de la
bacteria, para resistir esta presin posee una
pared celular (5-20 atm.).
Esta pared tambin le confiere forma y rigidez.
Tenemos paredes Gram positivas y Gram
negativas.
Gram negativa es ms compleja (peptidoglican y
membrana externa).
Gram positiva es ms ancha (peptidoglican y
cidos teicoicos).
Es el lugar donde se localizan numerosos
determinantes antignicos que permiten
diferenciar a las bacterias entre si.

La protege de los cambios de la presin
osmtica del medio que la rodea.
La endotoxina de algunos grupos tambin
se encuentra aqu (Gram negativas).
La pared celular se "fabrica" mediante una
serie de etapas enzimticas en las que
participan al menos 30 enzimas.
Es el sustrato donde actan
antimicrobianos como los beta-lactmicos.
Participa en la divisin celular.



Peptidoglican
En la pared celular de la bacteria hay una capa rgida
responsable de la resistencia de dicha pared.
Esta capa se denomina peptidoglican o murena.
En las bacterias Gram-positivas el peptidoglucano
representa el componente mayoritario de la pared celular
de 50-90% en peso, mientras que en Gram-negativas
supone slo del 1 al 20%.
La composicin de este compuesto es similar en G (+) y G
(-).
Formada por capas muy finas de dos derivados de
azucares:
N-acetilglucosamina
cido N-acetilmurmico
Un pequeo grupo de aminocidos
(L-alanina, D-alanina, D-glutmico y o Lisina o cido
diaminopimlico).
La cadena de glucanos formada por carbohidratos
estn conectados por enlaces peptdicos
cruzados formados por los aminocidos (rigidez).
Este entrecruzamiento se presenta de manera
caracterstica y diferente en las distintas bacterias,
que presentan mayor rigidez entre ms completo
sea el entrecruzamiento.
Gram (-), enlaces peptdicos del grupo amino o
del c. diaminopimlico con el grupo carboxilo de
la D-alanina terminal.
Gram (+), el enlace cruzado se hace usualmente
por un entrecruzadiento del pptido.
La formacin de los enlaces peptdicos cruzados
recibe el nombre de transpeptidacin.
Las cadenas lineales de un polisacrido formado
por residuos alternativos de N-acetilglucosamina
y
N-acetilmurmico unidos mediante un enlace
(,1- 4).
El N-acetilmurmico est unido a un tetrapptido
(segmento de 4 aminocidos) que se caracteriza
por poseer D-aminocidos.
Los distintos tetrapptidos estn conectados
entre s:
Por medio de puentes de pentaglicina
(pentapptido formado por 5 glicinas), como
ocurre en las Gram-positivas.
Directamente, como ocurre en las Gram-
negativas.

Gram positiva
Cualquiera de los aminocidos presentes en
el tetrapptido puede estar tambin presente
en el puente cruzado.
Adems otros aminocidos se encuentran en
el puente cruzado, como lisisna, tronina,
serina y cido aspartico.
Nunca se encuentran aminocidos de
cadena ramificada, los aromticos y los que
contienen azufre, as como la arginina,
histidina y prolina.
El peptidoglican nicamente se encuentra en
los procariontes.
El cido N-acetilmurmico y el aminocido
cido diaminopimlico nunca se encuentran
en clulas eucariotas.

Gram positivas
Las bacterias Gram positivas tiene unidas al
peptidoglican polisacridos cidos llamados
cidos teicoicos.
Los cidos teicoicos contienen unidades repetidas
de glicerol o ribitol (polioles).
Los polioles estn conectados por enlaces ster
con el cido fosfrico, formando una cadena lineal
y tienen unidos otros carbohidratos y D-alanina.
Regulacin de las autolisinas para el crecimiento
de la pared celular durante el crecimiento y
divisin celular.
Las autolisinas abren la pared ya existente para
hacer un espacio a nuevas subunidades.
Algunos cidos que contienen glicerol se unen al
lpido de la membrana y se denominan cidos
lipoteicoicos.
Los cidos teicoicos son importantes antgenos de
superficie.
Ejem:
El Streptococcus pneumoniae, determinante
antignico de Forssman.
El Streptococcus pyogenes, el cido lipoteicoico
se relaciona a la protena M para facilitar la
adhesin a las clulas animales.
Las cadenas pueden tener una longitud de 30 o
ms unidades repetidas, aunque son comunes de
10 o menos.
Adems de la D-alanina , otros sustitutos pueden
estar unidos al hidroxilo libre del glicerol y del
ribitol: glucosa, galactosa, N-acetilglucosamina,
N-acetilgalactosamina o succinato.

Anclaje de la pared con la membrana
celular.
Barrera externa a la permeabilidad.
Se enlazan al magnesio e intervienen en
el suministro de este a la clula.
Cuando hay escases de fosfato en la
clula se producen cidos teicurnicos
que contienen en sus unidades repetidas
azcares cidos como: cido N-
acetilmanosurnico o el D-glucosurnico,
en lugar de cidos fosfricos.

Gram negativas
Las predes celulares de las Gram negativas
contienen tres componentes al exterior de la capa
del peptidoglican:
1.- Lipoprotena.
Sirven para entrecruzarlas capas de la membrana
exterior y del peptidoglican.
Presenta 57 aminocidos, representada por
repeticiones de una secuencia de 15 aminocidos;
es un pptido enlazado a los residuos de cido
aminopimlico del peptidoglican.
El componente lipdico (diglicrido tioter ligado a
una cistena terminal), se inserta de forma no
covalente en la membrana externa.
Estabiliza la membrana externa y la fija en la capa
de peptidoglican.
2.- Membrana externa.
Es una estructura de dos capas; su hoja interna
se asemeja a la membrana citoplasmtica,
mientras los fosfolpidos de la hoja externa son
sustituidos por molculas de lipopolisacrido.
Contiene canales especiales constitudos por
molculas de protena llamadas porinas que
permiten la difusin facilitada de compuestos
hidrflicos de bajo peso molecular, como:
azcares, aminocidos y algunos iones.
Contiene un conjunto de protenas implicadas en
el transporte de molculas como la vitamina B12 y
los complejos Hierrosiderforo.
La protena OmpA es abundante, acta como
receptor de varios bacterifagos y participa en la
fijacin de la membrana externa al peptidoglican.

La protena OmpA es el receptor de las
fimbrias sexuales en la conjugacin
bacteriana.
Evita que ciertas enzimas presentes por
fuera del peptidoglican abandonen la
clula.
Estas enzimas estn presentes en una
zona que recibe el nombre de espacio
periplsmico.
Estas enzimas son importantes para la
incorporacin de nutrientes en la clula.
Las molculas grandes de antibiticos
penetran la membrana externa muy
lentamente.

3.- Lipopolisacrido.
Es un complejo lipdico denominado lpido A,
al cual se le adiciona un polisacrido
formado por un centro y una serie terminal
de unidades repetidas.
Lpido A. Consiste en unidades del
disacrido glucosamina fosforilado al cual
estn unidos varios cidos grasos de cadena
larga.
El cido -hidroximirstico siempre esta presente
y es exclusivo de este lpido, los otros cidos
grasos (larico, mirstico y palmitico) y otros
sustitutos son diferentes en cada especie
bacteriana.

La porcin central del polisacrido es similar en todas
las especies G(-), cetodesoxioctonato (KDO), pero cada
especie tiene una unidad repetida nica.
Las unidades repetidas generalmente son trisacridos
lineales, o tetra o pentasacridos ramificados.
El LPS es muy txico para los animales, se le ha
denominado endotoxina y solamente se libera cuando
la clula se lisa.

Cuando el LPS se disocia en lpido A y
polisacrido, la toxicidad se atribuye al lpido A.
El polisacrido es la parte antignica de la
superficie celular denominado antgeno O.
La especificidad antignica esta dada por las
unidades repetidas.
El nmero de posibles tipos antignicos es muy
grande.
Algunas bacterias tienen glucolpidos cortos que
carecen de antgeno O, su LPS truncado tipo R, a
esta estructura se le llama lipooligosacridos
(LOS).
LOS tienen una gran diversidad antignica y
estructural an en la misma cepa.
LOS es un factor de virulencia.
Espacio periplsmico
Es el espacio entre la membrana interna y la
externa.
Contiene la capa de murena y una solucin de
protenas similar a un gel.
Las protenas periplsmicas incluyen protenas
de enlace para sustratos especficos (azcares,
vitaminas, aminocidos e iones), enzimas
hidrolticas (fosfatasa alcalina, 5-nucleotidasa)
que fragmentan sustratos no transportables y
enzimas destoxificantes (-lactamasa y
aminoglucsido fosforilasa).
Contiene polmeros ramificados de D-glucosa
denominados oligosacridos derivados de la
membrana que participan en la osmorregulacin.
PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS CIDO
ALCOHOL RESISTENTES

Determinadas bacterias (Corinebacterium,
Nocardia y en especial Mycobacterium)
presentan una pared celular muy compleja, con
abundancia de lpidos (cidos miclicos).

Estas bacterias no se tien con los colorantes
normales, pero una vez que se han teido con
fucsina (forzando mediante calentamiento de la
preparacin), tienen resistencia a decolorarse por
una mezcla de cido clorhdrico-alcohol. Por ello
se denominan como bacterias cido-alcohol
resistentes.


Qumicamente, esta pared celular consiste en
un esqueleto formado por dos tipos de
polmeros, unidos covalentemente entre s:

Un peptidoglucano especial (la diferencia ms
importante es que en vez de N-acetil murmico
existe N-glucolil-murmico);

Un arabinogalactano de gran peso molecular.

Ambos polmeros se encuentran enlazados a
travs de fosfodister entre una unidad de
murmico y una de las arabinosas. Pero a su
vez, este esqueleto se une covalentemente a
los cidos miclicos.
Los cidos miclicos son -hidroxicidos
grasos ramificados, cuya longitud de cadena es
grande (desde C78 a C91 en Mycobacterium).
Estn unidos al esqueleto de la Pared celular de
forma uniforme, a travs de enlaces con los -OH
en 5 de las unidades de arabinosa.

Por lo tanto, el esqueleto de la Pared celular
de estas bacterias consiste en:
peptidoglucano---arabinogalactano---cidos
miclicos.

Pero aparte de este esqueleto complejo, la
Pared celular de las bacterias cido-alcohol
resistentes exhibe una variedad de lpidos:

1) Glucolpidos:

a) Micolatos de trehalosa unidos con cidos miclicos.
Constituyen el llamado factor de crecimiento en cuerdas,
debido a que son responsables de la agregacin de los
individuos bacterianos en forma de cuerdas.

b) Sulfolpidos de trehalosa: estn localizados en la
periferia de la P.C., importantes factores de virulencia. En
Mycobacterium tuberculosis estos sulfolpidos de trehalosa
funcionan como evasinas, es decir, facilitan el que la bacteria
escape a la accin de los macrfagos inhibiendo la fusin del
fagosoma con el lisosoma, lo cual puede explicar el hecho de
que estos microorganismos tengan xito como parsitos
intracelulares.

c) Micsidos: Localizados en la periferia, consisten en la
unin por enlace ster entre cidos miclicos y azcares
(incluyendo cidos urnicos, desoxiosas, aminozcares,
etc.).

Ceras

Unin de cidos miclicos con ftioceroles (alcoholes
ramificados de alto peso molecular: C30 - C34).

El alto contenido en lpidos confiere una serie de
propiedades a estas bacterias:

Aspecto y consistencia crea de sus colonias.

Crecen formando grumos en medios lquidos

Gran impermeabilidad de la pared celular, que a su vez
condiciona una gran resistencia a la desecacin y gran
resistencia a sustancias antibacterianas (detergentes,
oxidantes, cidos, bases, etc).

Pared celular Mycobacterium
Flagelo
Organelos responsables de la locomocin de la
bacteria e implicados en la quimiotxis y
percepcin bacteriana.
Son prolongaciones filamentosas largas que se
extienden ms all de la superficie celular.
En las clulas vivas, el filamento flagelar est
curvado en forma de una hlice rgida o
semirrgida.
Los flagelos aparecen en bacterias alargadas.
Pueden partir de los extremos de las clulas o
de un lugar prximo, o estar repartidos a todo lo
largo de la superficie celular.
La localizacin y el nmero de flagelos es
constante en cada especie bacteriana.

Un solo flagelo polar montricos
Uno o ms flagelos en loftricos
uno de los extremos.
Penachos en ambos extremos
anftricos
En toda la superficie pertricos
Filamento
La porcin distal del filamento mide de
12-15 m de dimetro y de longitud
variable de 1-70 m.
Esta formado por microfibrillas protecas
de flagelina, ms o menos paralelas
combinadas para formar un cilindro
hueco.
Es una hlice levgira.
Se ha comprobado que la especificidad
antignica y el peso molecular vara
entre las distintas especies.
Manguito
Es un solo polipptido, con un dimetro
ms grande que el del filamento y
levemente curvado.
Es distal al cuerpo basal.
Es una articulacin universal,
permitiendo la transmisin del
movimiento rotatorio desde el cuerpo
basal hasta el filamento helicoidal.
Cuerpo basal
Es la porcin ms compleja del flagelo.
Se encuentra situado dentro de la envuelta
celular.
Formada por un cono central o bastn sobre el
cual hay dos o cuatro estructuras semejantes a
anillos.
Los anillos estn unidos a una de las capas de la
envuelta celular por su borde externo.
En las Gram negativas el cuerpo basal consta de
dos pares de discos o anillos.
En las Gram positivas solo hay un par de discos.
Los componentes del cuerpo basal son protenas.
Los genes implicados en su sntesis se
denominan fla.
Movilidad
Las bacterias se deslizan por rotacin del
flagelo helicoidal con torciones
proporcionadas por el motor flagelar
(cuerpo basal).
El deslizamiento o movimiento de
traslacin, se produce cuando el flagelo
gira en sentido contrario a las manecillas
del reloj.
Si la bacteria es multiflagelada, forma un
paquete que se arrastra detrs de la
clula.
Cuando el motor flagelar se invierte, se
producen volteretas o vueltas.
La energa para el motor flagelar no se
produce con ATP, proviene del potencial
electroqumico de los protones que
atraviesan la membrana o fuerza motora
del protn.
El potencial transmembranal y pH
transmembranal contribuyen con la fuerza
motora.
Espiroquetas Filamento axial
especial
Spiroplasmas movimiento por
pliegues
Cianobacterias
Mixobacterias arrastrando
Mycoplasmas
Filamento axial
Quimiotaxis
Las bacterias mviles pueden
reaccionar frente a gradientes de
concentracin de ciertos compuestos
qumicos o nutrientes como azcares y
aminocidos (quimiotxis), oxgeno
(aerotaxis), temperatura
(termotaxis),niveles de luz (fototaxis).
Pueden ser repelidas por algunas
sustancias nocivas y desechos de otras
bacterias.
Cuando son estimuladas por atrayentes
qumicos se suprimen los giros
inespecficos, dando direccin y sentido
al movimiento.
En la membrana citoplasmtica y en el
espacio periplsmico se encuentran los
quimiorreceptores especficos para los
agentes quimiotcticos.
La unin de ambos produce una seal
en el citoplasma, la cual controla la
direccin de rotacin del motor flagelar.
La capacidad de moverse en medios
muy viscosos tambin es importante en
la patogenia, ya que les permite
penetrar en las membranas de clulas
mamferas.
Fimbrias
Estn constituidos por subunidades
protecas dispuestas regularmente
(fimbrilina o pilina), con un core hueco.
Tienen una estructura recta.
Su dimetro vara de 3 a 25 nm y su
longitud de 300 a 1000 nm.
Pueden aparecer en los extremos de las
clulas o estar distribuidas por toda la
superficie.
El nmero de fimbrias oscila desde uno a
varios centenares.
Las fimbrias salen de la membrana
celular y se proyectan a travs de la
pared celular.
No se conoce bien la ultraestructura del
aparato de insercin.
Las fimbrias son ms comunes en los
bacilos Gram negativos, pero tambin en
algunos Gram positivos.
Existen variaciones morfolgicas y
funcionales.
Tienen propiedades adherentes que
facilitan la unin con otras clulas (primer
paso de la colonizacin bacteriana).
Pilis sexuales, implicados en la formacin
de parejas especficas durante la
conjugacin bacteriana y sirve para iniciar
el contacto entre dos clulas, las une y
ayuda en la transferencia del material
gentico.
Los pilis sexuales se distinguen de las
otras fimbrias porque su dimetro vara
de 6-14 nm y su longitud ms de 20 m y
muy escasas de 1-10 por clula.
Cpsula
Capa mucilaginosa, glucocalis o cpsula.
Cpsula: rodea a la clula aislada.
Capa mucilaginosa: envuelve a la
colonia.
Glucoclis: Polisacridos extracelulares
que componen este organelo bacteriano.
La cpsula no se tie con las tinciones
habituales.
Se utiliza la tincin de tinta china o tincin
negativa (impide la penetracin de
partculas de carbn).

Contienen un 99% de agua, se colapsan
cuando son secadas al vaco, por lo que no
se observan en microscopa electrnica.
Su tamao es muy variado. ejem.
En pneumococo y Klebsiella, el grosor de la
cpsula es ms grande que el dimetro de
la clula.
La sustancia que forma la cpsula ms
simple son homolisacridos (polmeros de
un monosacrido, que incluyen celulosas
bacterianas, levanos, dextranos y glucanos).
La mayora son heteropolisacridos ms
complejos que tienen cido urnico como
constituyente adicional.
Los constituyentes monomricos
incluyen:
Hexosas neutras como: D-glucosa, D-
galactosa y D-manosa.
Metil pentosas como: L-fucosa y L-
ramnosa.
Polialcoholes como: ribitol y glicerol.
Aminoazcares y cidos urnicos.
Fosforo.
Las cadenas de polisacridos pueden ser
lineales o ramificadas.
La biosntesis de la mayora de los
polisacridos se lleva a cabo en la
membrana citoplasmtica.
La cpsula protege a las bacterias frente a
metales pesados txicos, desecacin y
virus.
La naturaleza aninica y la estructura fsica
del glucocalix promueve la concentracin de
nutrientes procedentes del medio.
Sirve para la adherencia bacteriana a
superficies inertes y a clulas hospederas
provocando procesos de infeccin y
enfermedad, permitiendo la colonizacin.
Protege a la bacteria de la fagocitosis,
tienen resistencia a la accin bactericida del
complemento y a los componentes del
suero.
La cpsula es inmunognica.
Se utiliza para identificacin serolgica y
tipificacin.
Gram negativas:

Klebsiella
pneumoniae.
Haemophilus
influenzae.
Neisseria meningitidis.
Escherichia coli.
Aeromonas spp.

Gram positivas.

Streptococcus
pneumoniae.
Bacillus anthracis.

Cryptococcus
neoformans.
Fenotipo

Macroscpica

Resiembra

Medios especiales

Microscopa

Reaccin de
Quellum


Mtodos de identificacin de la
cpsula
Microscopa de
Contastre de fases
Microscopia
de
Flourescencia
Material gentico
El genoma de las bacterias consiste en
una molcula nica de DNA circular
superenrollado.
580 a ms de 4 600 kpb.
Los genes bacterianos son haploides.
En el cromosoma se encuentran los
genes esenciales para el crecimiento
bacteriano
Confiere sus peculiaridades genticas a
la bacteria.
Regula la sntesis proteica.

Algunas especies bacterianas pueden
invadir organismos superiores debido a
que poseen genes especficos para
determinantes antignicos.
Estos genes se agrupan juntos en el
DNA y se les llama islas de
patogenicidad.
Estos bloques pueden ser muy
largos(hasta 200 kpb) y codifican para la
virulencia bacteriana (adhesinas,
invasinas, exotoxinas, movilizacin).
Salmonella, Mycobacterium, E. coli,
Shigella, Helicobacter.
Replicacin
La replicacin del DNA bacteriano
empieza en un punto especfico (locus
ori).
Se extiende en ambas direcciones.
Las dos cadenas viejas de DNA se
separan y se utilizan como moldes para
las cadenas nuevas (semiconservadora).
La estructura donde se separan las
cadenas se llama horquilla de replicacin.
La replicacin del cromosoma bacteriano
esta rigurosamente controlada.
Plsmidos
Son pequeas molculas circulares de DNA
que estn presentes y se replican por
separado de los cromosomas
(extracromosmico).
Varan de tamao desde algunos hasta 100
kpb.
No producen dao celular.
Son excelentes vectores genticos.
Se pueden transferir entre bacterias.
Portan genes vinculados con funciones
especializadas (median su transferencia a
otros organismos, adquisicin o reacomodo
de DNA, asimilacin de genes evolutivos
independientes dando como consecuencia
la resistencia a los antibiticos).
R100
Transferencia del DNA
El intercambio gentico entre bacterias se
caracteriza por, intercambio de
fragmentos pequeos de un genoma
donador a una bacteria receptora.
Los tres principales tipos de intercambio
gentico en procariontes se diferencian
por la forma en que se donan.
Conjugacin.
Transduccin.
Transformacin.
Conjugacin: solamente se transfiere una
cadena de DNA.
Transformacin: la captacin
directa del DNA por la clula
receptora.
Transduccin: el DNA se transporta dentro
de la cubierta de un fago y se transfiere al
receptor por el mecanismo de infeccin
utilizado por el fago.