Reacfivo de Grupo Scmgufneo
NOVACLON E™
Anti�D lgM + lgG 0197
Me:zcla Monoclonal
P a r a prueba en Placo, Tuba y Microplaca.
_ .�,9i•pos�Jvo. t,\edicp.d• piogngsjfcpJn.�i!rp .-•'"-· ·-'"- -.
<!) Oo�ino-Contl0n� 0.1� de azida det sodio
cm'
Contiene gomo de 16t,t:( ,de otigen natural
,
Conslllte !as instrucciones de USO
n,1ooc
1<>c 4, lfmltes de temperotura-Almacene o 1 -lOOC
l MMUCOR i'v\edizlnische D!agnostik GrribH
� Robert-Sosch-Sirasse 32
63303 Dreieich, A!emania
Representante en !a comunidod Europea
Fabrlcante:
.......,d
Djml(ii�m Biologi�a!� Limi!ad . ,'
- 5 lmor Drtve. Dartmouth. Nova Scotto CANADA 838'1 M l
Tel: 902-468-3992 Fax: 982-46-8-3599
Caducidod Dafilno
NUmero de !ote NUmero de cot61ogo
INDICACIONES DE USO
RESUMEN
El ontigeno Rho (DJ fue- reconocido en 1 939, Desde del reconodmiento inicial de!
ontfgeno O,·cerco d� 50 antigenos dife·rente s se conoce que formon pcrte del sisremo
Rh, La mayorfa de !os anticuerpos de grup6 sanguine.o Rh son inmunes, originados en
respUesta al estfmulo por emborazo o por tronsfusi6n. El ontfQeno D es aitomente
inmunogimlco y se ha reportado que estimulo la producci6n de anticuerpos onti-D en
un 50-85% de !os indivlduos D negativos quienes se exponem a una sangr-e D positive. El
A,ntl:D. es de importanclo considerobie ya que este ontlcverpo pueds causar le
Enfermsdod . Hemolitico del Recien . Nacldo por •, incompattbTiidod Rh (HON) y
reacciones hemollticas postransfusionO!eS groves, El ontigeno o ·y su forrna D debi!
(formolmente l!omodo DuJ son por !o tor. to conslderados en lo selecci6n de rutino de
sangre para fronsf•,;si6n. Le de!ecci6n 6pfimo de c€:lulas D d8bttes mediante !os
raact;vo:5 de grvpo mngt.ineo An1!-D pueden requerf !o apfo:oci6n de un
proc1tdimiento de pru&ba de af'fig!obul'.no indirec:o. Lo5 f8rminos comlJnmente
utmzodo5 , Rh po3itlvo y Rh negative se reHeren especificamenfa o !a presencla o
ausencia del onffgeno ·. D. la frecuencia d e · Qente Rh positivo en !a pob!od6n
cai.Jc6siCa eis oprox irriadamenfe del 85%.
PRINCIPIO
Lo prueoa uti!iz.oda con este reoctivo de grupo songulneo se basa en el pr'.ncipio d e
hemoglvtinociOn directa. La incvbaci6n de !as celulas rojas de prueba con
NOVACLONl:'1" Anti-D !gM + lgG Mezc!a Monoclonal resultar6 en una reocd6n
antfgeho onticUe'rpo 'espedfico. si el antfgeno D correspondiente est6 presente en las
c&lulos rojOs: lo det&cci6flV:sible de estb reacci6n.' se po�e ·d e maniffe:Sfo mediante
as,;;:u:inoci6n de lo'.5 c&li.Jlas- �flgUidOli-dEda centrffogoci6n:-ta ausenc:io: de og!utint1ci6n­
fndica un resultodo de pruebo negative y den.fro de las !imitaciones aceptados del
proced!miento de pruebo, lndico lo ousencia del antigeno D (Rh 1) en los cBJu!o.s rojos
de prueba,
REACIIVO
Onicamente para Uso ProfesionaI Diagn6stico In-vitro.
NOVACLONfiM .Ant1-D lgM + lgG Mezclo Monociono! se prnpara a, p9rtir de Antl�C lg,V,
monoclonal humane (lfneo celulor D l 75- 2) y arfi. -D lgG monoclonal humano {llnea
celu!ar D4 I 5 l E<).NOVACLONET" Mti-D lgM + lgG Mezclo Manoclanol esta hecho pora
vtmzarse en pruebas en paco, tubo y mlcrop!aca ·y provee uno pruebo cuolitatlvo
espe:::ffica para lo det&cciOn del ontigeno D correspondiente en celulos sangulneos
humanm. El d�wente uiaoo para este reactive bojo en protefna contiene cloruro de
,
. wdio, Cl!bUmlna se'rico bovino, buffer y otros componentes sa!fi'ccionOdos ,poro
fO'Vorecer , •I f(incionamiento def' reodivo. Se le odiciona azido de sodi<:i o vna
concenfrdC•:m flhal de 0.1" como agel'ltei anf1111icr9blon.o.
No lo diiuyo. Utl!ice. to! y ,como se proporciono.
PRECAUCIONES:
Una tu;bidez marcada puede ir.dlcar contamlnaci6n bactericma o . detorioro det
reactivo. No utl:ice reoctivos contornlnados o froscos sin etiquetar. No lo u+llice u11a vez
que hay a l!egado a su fecha de caducidad. Almacene de 1-1 o�c cuon,;:io no se utilice.
No conge!e. No !o ingiero. ·
Permita que los r-eocttvos olcancen la temperature ambfente (18-25°C) antes de
-uti!h:arlos.
<!) Precauci6n: Lo azidc do ,oaia.es t6x,ca. No lo ingiera. Lo azido de ,adio puede
reaccionar con el cObre dstos t)Jb�ria, y fo�arJ1zldos metc;ilicoi ex plo.sivos. Pora lavor
t.:il!ice suflciant� c◊nfidad de aQUO para evitar la ·tormaci6n de residV05 de o:zidas.
Este prodvcto tiene compcnentes (bulbos goteros} que contienen !Otex p!Ostico
natural, el cue! s� sobe que causa reoccfones a1!§rgicas en olgunos individuos.
Todm los productos san9uineos se deben de ttotor como potencicilmente inf8ccios:os.
.B ,:noterbl. huma:io_a.part;:_ de\ c�ot 5& �•riva est� , prodvcto se e nc,on'.r6 n�gotivo
cuando se prob6 de 0dJerd6' c'�n..Joi' p,ve�?s , requaridas par F9A. Nd se conocen
metodos de prueba qve pvedon garantizor que, loi productos derivados de· .i:angre
humano no tronsmltir6n ogentes infeccfosos.
Este producto 5e debe considerer biopeligrosb y su disposlci6n debe .ser conform€! a los
requerimientos oplicab!es para·1a dfsposici6n de t."loteria! de desecho blopeHgroso.
Este producto contiene a!b!Jmino bovin.o: Esto albUmino se deriva de songre bovir.o
co,ectada en estoblecimler,tos aprobodos por USDA. lo fuente bovlna no provi�ne de
gar.ado reCIE!n nacido, lastlmodo, transportado de un !ado a otro o sacrlficado en
-���;� ?or,(?t��·�,- ?,�.r:9.ce 9:::'.� �(;>J� 1'? ��':�(?ici::a!ic bovine espongiforrne -o fiebre
. b. o cer:trifugoci6r, de fuerza equivolenfe
RECOLECCJON DE LA MUESTRA
No se requiere preparaci6n especlo! de/ pacfente/donodor antes de fa tofna de
muestra. Los muestros de sangre se deben de tomormedionte procedimfentos m:S.dicos
aprobadm,
Los muedros de .songre se pueden colector con o si11 onticoa9ulonta. Los &n·trodk,t a
por?ir de �u��trm ,coapvlodas � ,:nuestros, on}icoaguladm con ED!A se puedfm prober
hruta 1-4 "dfoS OOSJ)utis de su·recolt!lcci6r, 10. Muestr�s. ,ct�, songre_,an�lcoagula?os, con
ACD. CPD y CPDA-1 se · pueden p(obor hosto su 19'cha 'de caduddad, Todas !os­
rnuestros de eritrocitos se deben de: guardor adecuodomente de 1 - l 0'-'C. Se puede
utmzor unc solud6r: conservodoro c!e eritrocifot para prolonger el oimocenomiento de
los rnismos. El oimacenamtento profongodo de los eritrocITo5 antes de lo prueba puede
.. ,,r�s�\tor en (el deterioro _de lot pntfgenos elitroclorip$ y ' puecien res,u!tor reacdones m6s
d'bifes d! 10s esperodas, · ,
PROCEDIMIENTOS ,.
� NOVACLONErn An!i-D lgM + lgG Mezcla Monoclonal {para
pruebo en placa, tubo y microplaca).
-lonado: Pipetos autom6ticos, so!uci6n soil.no isot6nica
{Se recomitmdo salina di! fosfatos regulodo a un pH de 6,5-7.5),
Reactivos de Grupo Sanguineo
NOVACLONE ™
Anti-D lgM + lgG
Mezcla Monoclonal
Para prueba en Placa, tuba y Microplaca
,,,,
I M M U C O R"
► PRUEBA EN PLACA: P!acos de vidrio 6 o!6siico TP-12 Plotos, ogitadores ciS mcdera.
► PRUEBA EN Tuso: T'Jbos de prueba d0 pl6stico [po!i0stireno) o de Vidrio de 12 x 75 mm
o 10 x 75 mm, ogitador de tubos, centrffuga serol6gica (900. 1000 ref).
► METODO E�l M1CROPLACA: Microp!ccas con fondo en U 11gldas, centri.fuga calibrada con
soportes de microplacas, ogitodor d e microplocos {opcional, pero recomendodo).
Otros moteriales recomendodos no proporelonado1: CG!ulos rojas control de feno11po
Rh conocido, Antiglobulind humono & ce1u1as control Antiglobullna.
Poro . I� pruebo . &fl, r,:iicropiqca ��n inst0)m8,f'.l�i? .�ut��ot�o�o, ,ref/erase
- o l�J
in,truCdOn&iPmvistoS en el mClnual del operador deTinstrurnentO:
A •
Lo5 usuorio5 son tespomobles de la validaci6n de cualquler occesorlo disposlflvo poro
esw intenC:i6n'de uso.
PROC!DIMl!NTOS DE PRUEBA
M�ooo DI! ..1!:U!.A IM PlACA:
Noto: Los procedimientos en placo no son lo suficientemente sensibles No coloque las
places/ platos en una superficie callente.
1. Prepare ur,a suspensi6n de elitrocitos del 35-45%, Las suspenslones de erltrocitos se
pueden preparer en :'!iOlino o en suero o plasma grupo compatib!e /aut61ogo (songre
total).
2. Adicionar una goto {aprox. 40-50 µl) de NOVACLONE Anti-D lgM + lgG Mezclo
Monoclonal en ef espado correspondiente en la placa {o un pocillo de un TP-12
ploto).
3. Uli!izondo una pipeta outom6tica, cdicione dos gotas de la suspensi6n de eritrodtcs
del 35�45% a coda gota de NOVACLONE'M Ariti-D lgM + lgG Mezcla Monodona!.
4, Utillzando 1-!n O£;!!tador
, limpio mezc!e compl�tameme cada suspensi6n de c61ulos
rojas sobre un 6f-ea de lo ploca de aprox. 20::40 mm (6 dentro de coda microp!cca
TP-1 2}. Utilice diferentes aplicodores para coda suspan,i6n.
5, Suovemente mueva (lodee) la placa por 2 minutos y examine lo agluflnaci6n
macrosc6pica.
6. Al final de los 2 mlnuto.s:, aque-llas pruebos qv& no muestren oglutinoci6n se
interpretan como negotivo5. , Tenga especial cu1dodo de no tom.or como
aglutinoci6n la presttncio de fibr1na o el hecho de que la reaccl6n se comience a
secar en lo periferio del Orea de reacci6n.
7. SI la prvebo es negotiva y ·5e requiere de u:1a prJeba paro D debtt, onallce d e
ocuairdo a! mlttodo d & pru�bo para D debl.
MBODO DE PIUISA EN ruao:
1. Prepcre uno suspensi6n de! 2-4% de los elitrocnos de prueba er1 solud6n ?J!ina
isot6nico. Se recom!enda el us-o rutinario de suspension es de eritrocltos lavados para
reduclr er riesgo de encontrar reacciones anormaies.
2. Dispense una gata· {oprox. 40-50 µLJ de NOVACLONETM Anli-D. lgM + lgp Mezcla
��orfodon"al BE?iitro dff;lr0Cl6ae pruebb-t§tiquetado adec\Jdtfdfn1�fnte: - -·
3. Utilizondo uno pipeta outom6tico, adiclone uno goto de ta suspensi6n de! 2-4% de
eritroc1tos a los fubos de pn.,1eba.
4. Mezcle el contenido d& coda tubo comp!etcmente.
5. Cenfrlfugue por:
a. 1 5-30 segundos o 900-1000 ref
b. o centritugaci6n de fuerzo equivalente.
Noto: Lo fueiu:I cttntrluga apticada debe ser lo minima rt1querida para producir un
sobrenadante claro y un bof6n de cf!1Ufas rojos clorom�mt• deJineodo que pueda
f6ci!m&nts resusp11tnders11t, No · se recomienda uno , velocida d o liampo de
cenfrifugoci6n Vnicos para todos tos tipm da centnfugas disponibtes o aplicaciones de
fas prue-bos. Los ce-nlrifugos .se deben de co!ibrar ;ndividualmtmfe poro d�termjncr Q-1
fiempo 6ptimo y ve-iocidad r,iqueridos pora obtene-r ,'as resultodos esperado�.
6. Suovemente resusper.dd el bot6n de eritmcitos y examine mocrosc6picom&nie la
aglufincci6n, No lo veo a l micrciscopfo. : ·,
7. Registre sus resu!fodos.
Nota: Las reacciones dCbites con NOVACLONE™ Anfi-D lgM + IgG Mezcla Monoi::tonal
se pueden favorecer seguidas de una Jncubaci6n de 5 mfnut6S a femperafura
amblente (18-25'-'C) y centrlfugando ta/ y como .se indlc6 en los paSos _5--7 anterlores.
METooo D E PRUESA PARA O obit tml!ZANDO E L PROCEOJMIENTO D E PRUEIJA O E ANT!GtO'BUUNA
INDIRECTA MOD!f!CADO (AIM);
l . Prepare un::i suspensi6n del 2-4% de eri}rocitos lovados. Los eritrocitos se deben de
lovar muy blen por lo menos uno vez y suspenderse en solino Jsot6nico.
2. Coloque uno .iota {aprax. 40-50 µL} di! NOVACLONETM Anii-D lgM + lgG Mezcla
Monoclonal en vn tvbo correctom�nt« eflquetodo.
3. Ufllizando uno pipeto outom6tico. odicione una goto de la ,suspens16n · '' del 2-4% de
eritrodtos de prueba o coda 1ubo,
4. Mezc!e completomente el contenido de! tubo e incvoe a 37�C f± 1 i:.c) por 1 5
minutos.
5. love IQ'S c0_tu!as eri coda tJ.?bO uflo v'!1 C:9.l),-S9iin.a }�ot6.�ica_.__ . .,, ,, _, . , ,
6. Oe�pu&s del Ulfimo !avodo, decante por completo lo saline isot6nico ·poro 05'1Quror
le eF!""linoci6n de residvo.s de salino y !a forrnaci6n de un bot6n de c!§lulas rojas
"seco" resu!tonte.
7. Adlcione dos gotas de Antl-globulino h!Jmono poliespecffica o AntHgG a coda tubd
con el bot6n de cE!!ulas seco. \Referirse a las instrucciones del fobricante para usar
la Anti-globvlina hvmana).
8, Agite suave y completamenfe para resuspender e! bot6n de celulas rojas.
9. Centrifvgue inmediotomente por:
a. 1 5 seguridos de 900--1 000 rfc
c. o de acuerdo con las instruccione's de oso'deHobriconte
10. Suavemente resuspendo el bot6n de·celulas·y• examine macrosc6pk:omente lo
aglutinaci6.n. No lo lea microsc6picam•nte.
1 1 . R:&gistre sus resultados.
12. Confirme la vaiidez de los pnJebos negativos con celulas sensibilizados con lgG de
ocuerdo a las instrucciones del fobricante.
Nota: Este procedlmlento abreviado de tavado de antigJobvllna, requlere que las
ctf>Julas rojas de prueba seem prelavadas, Qfiiizando sollna lsot6nica por lo menos una
vez; despues sean re.suspendldas en salina isot6nica a una concenlfaci6n def 2-4%.
Los celulos. no se deben de usar sin lavar o svspenderse en ·plasma o suero para este
procedlmfento de prueba de antrglobullno modlflcodo tol y como fue descrlto.
Mtrooo EN MICROPlACA;
El slguiente es un metodo manual rec·oinendodo· para la pruebo en mfcroplaca
utllizando este reactlvo. Ex!sten mefodos·olternatlVos ·que pueden ser adecuados sI se
validan opropladamente por el usuorio.
NOTA: Les microplacas de diferentes proveedort:t:s, hon demosfrodo variaciones en las
propfQdades est6ticos, lo cuof pu0dQ resultor en ,reacciones no·especfffcos de tos
ct!Julas roja1 y prote{nos. Se recomiendo qu� las mi�roplocm 51n user seon pre--tratodas.
antes de su uso, para minimizor la odher"ncio de /05 ct/ulos rojas,

l. A·cada pozo de lo,_microplaca, odicione una goto {aprox,c 40.50'!,ll) de AJb\Jmina
serica bovina al 20-30%. (BSAJ.
2. Mezcle medionte · agitociOn ,uove:.o vtil_izi:mdo Vn · agftodor de mlcrop!ocos para
oseguror que !os pozm est6n cubiertos al mlsmo nivoL
3, Permito que lo microp!aco repose ·de· 10-15 minutos a temperature dmblente \aprox.
18-25'CJ.
4. Decante .el contenldo de BSA de· los poros de lo m;('.roplaca mediarite goipecitos
suaves, der\tro de un conten�dor d_e -__desi,c_hos_.oproptado.
5. lave la microp!oco porlo menos 10 veces con aguo daslilado.
6. Enjuagui; ld ·micrciplClca dos"veces coli aQu"d "dostilado" o desionizadd
7, E!imine Oil exceso de ogua med1ante golpecitos suaves a la · mk::roploca"
ue al__?�e;_(;J nf&, de, u1ili_zarlo.
,,�."�=•��::o�:.;�t=�&q
NOTA: NOVACLONE Arlti-0 IgM + lgG Mez.clo Manoctonal se ufifizo en el siguiente
™
procedimiento sin difuci6n o modificoci6-n odiciona/,
l. Prepare uno sui;pe"nsi6n de eritrocito!i _del 2�4 � con· soluci6n safina isot6nica.
(Se recomienda ei Uso rufincirlO da SUtPensiories de eritrocitos tOvados para reducir e!
riesgo de e-ncon tror rf!tacciones onormoiesj
-
2. Dispense_ una _gota _ (aprox. 40-SOµL) de NOVACLONf:TM Anfi�D lgM + lgG Mezc1o
Monoclortat o :coctd pozo de l o microp!aca,
3. Adl_done una goto (aprox, '40-50\.1L) de lO suspe nsi6n de eritrocitos del 2-4% a cOda
pozo de prueba.
4. _Mezcle completome_nte el contenldo de !Os poios rriedlcinte · - g61pe_dfos a la
..microploco o al_te_m_otiv�m_ente _utmza_ndo_ un ogit_a dor de mlcrop1ac_as.-.,.
5. Centrlfugue por 20-30 segundos a aprox , 400 g (350.450g)."
6. lea y- registre sus resu,ltado� l)tiliza_ndo u:io de los slgu!entes mef?_d6s_svQeridOs.
❖ Mi3todo· de Agitbci6n/Resuspemi6n:
l . R�.•s_u5pendo e! bot6n_ d__e c�!_utas_rojas en _to�_ po:Zos m,6(:iio_-:,_t • �ovi�i_en!os ITHJnuolEis
cle · lado· o lodci_ ·de - lo ·micr6placa o __a!t4'rnofrvamer.te utltlondo -Un ogitador .de
microplacas.•••
2. Observe el tondo de la miCropiaco y ex"aniii& 16 prs3endo de d°ghJtlhado:s.
❖ MS:fodo de lndfnaci6n y Dl!:persl6n:
1 . Incline lo microp!aca a un 6nguio apro:.: , de 700.
2.- Perrnlta oproximodamente:en 2 o -4 mir.utos que· · ei bot6n de celulas comiE!nce -o
dispersorse.
3. Observe el patr6n de dispersi6n- de code pozo; revisondo el fondo de lo microploco.
Paro lo prueba en microplcco con equlpo aufomatliado, refi'E!rase··o IOs im:trucciofles
descritas en el manual de us·o def instrUmento.
NOIA: El uso de ayudos vlsuoles suplementariasta!e·s como espejos para !o lecture de
microp!Ocas.o·lupos pueden cryudor a la lecture.
* Tletnpo _d e mezc!odO S_ugerido para el ogitodbr'd•· m_k::ropiaca:s:JS_-30 :se_9iJndos:
*"' No se · poede ,recornendar ono.veloddod o ·.tiempo·de centrifugaci6n UniCo · pgriJ
todos Jos tipos de centrifvgas dispon>bles o opllcociones de pruebo, Cada laboroforio
debe ca!ibrar sv centrifugo individvolmente para determlnar--el fiempo · y ye!ocidod
6Pfimci:s" que produzcan uno reoccion de · oglu1inocl6n !o svficie n htmtmt8-fuerte co11
c.§tulos de ontigeno positlvas y· a lo vez que permit& una resvspensi6n comoleto ·y .f6cfl
de !as ·reocciones negotivas.
"'"'* l!na ·gufa de resuspensi6n -!ugi,rida ··poro Ogitodores .de microplacos ·es:-de 3C
segi.Jhdos en un punto . medio _-de velocidad, Diieren·t�ts agifadoms _d e--mio6j)la_cm
varfon-en su ve!ocldod. por lo tonto coda laborotorio debe ca!ibror su ctgrtodor·cta
microplacds a uno velocidad 6pfimo y tiempo requerido que permito·una· _conipletd
resuspensi6n de las c9!ulos de prueba negofiVas o! mismO tl"mpo que s.9- rTiante:nga
una fuerzo de og!utinaci6n m6xlrno con cE!lu!as p-osil!vos.
CONTROlfS
Es esencicl el uso de- controles de prueba para todo1 Jo:s procedlml•ntoi de pru&ba.
l . Roramente se observan res,J!todos folsos positives con reoctiVo5 bojos en protftinb.
Cuando se _ ob:seryan, v_i: ualmen_te i,ndic_a_n· ogregaci6n e,sp_o,nt6ne_q _d_� las cellJl.(l_s_ roj(;Js,
10 cual puede ocumr .aUn en so!ina. Si se de,ea, 5!1 puede prober en para:e1o·un- contrbl
que comfsta de cetlulas rojas ·de Pruebo·suspe-ndidas en albUmino bovina serico.al 6�
_
8% o en su-ero o Plasma aut6!ogo. _ . :· _ - __ .
2. Lo ap!icaci6n de c61u!os control sensib!lizodcs con -lgG · s• _ considera un
procedimiento de control esenclal para cOntirrnar , la - validez -dS -!as pruebm de
onfig!obulina di§bHes o negativas. . tlpos: de ce!ulm D porciaies r11vsuciles _ (variontesJ que se presentan muy r6romente. El
3, Se recomienda ampllomeinte que la reactividad de !os reoctiv6s de grvpo )o nguin&o
Sfif confirmen codo (jfa de vso medionte pruebds conlfcil c6n ce-lutos rojaS antio!ino
p_ositiva s - y nf!tgativos. Sa _ debe_n se[ecciolX]r ·_ceruias P()_sltivcis para _-represl!fntdr-- la
ex_pres:i6n dt!b� _(je ontigeno e1p_ecffic9 y _ c_uondo aplique. � .9�ben selecclonar c0!ul_as
opr:opiodas · o por1"ir d_e donodores h8{erocigotos cUyas·_c&fulas rojasBx Pll!ison ·uoa _dosis
Unica del antrgeno ·respeC:tlvo.
Paro la p_rueba en microploCo con · equlpo outomat1zadb, refierase a las instrucc!ones
descritas en el manuo1 de uso del imtn;mento.
fNTERPRE!ACfON OE LOS RESUlTADOS DE PRUEBA
Pru_eb�1,en_ f{aca�_Tu�O y_ M�ctopl_aqa .,_ ._: _·.-_:-_.-,
POS_ITIV.O (+}: __De�'.tro_._d� las _l�i()ito_ciones oceptab!ei r der pr�)cedifni�nto·· de_ pr00_ba, 10
og!utin-aci?� de !Os erifroc�tos �o� NOVACL_O�ET,,., (:nti_"'.D lg_M-+ lgG -Mezcla Mol1o-.::!ona!
indico la presencla del Clntfgeno D fRH 1 } correspondiente.
N{)_TA:_ Reo;;ciones_muy �€tbi!es positlvos pueden_indicar_ lo presencia _del onlfgen_o :,
porclal o cuanfitativamente d€!bi! D (ReferirsC a Umitaciones ded Procedimtento d�
Pruebo, m6s adelohte},
/'OSIDVO (Prueba para D del:>11):
nehtro· de las llmitdciorieratepfobles de! pr6Cedimiento de p·rveba, -l d og!utinaci6ri"de
!os eritrocitos . con NOVACLONftM Anti-D · lgM + lgG · Mezclo Monoclonal por . -.,.!
procedimiento de pruebo· ·para D DSbii (prueba de cntlg!obuHno .i,-,directa)
Vnicomente indi_C:CJ'.'. 9-u_� _l os.,�e1_u,l_as r�J05- ·d�:P�bg _son_:d,elJenotip·en:>,Pl?blf:-;�'�Pi?'>'>'.f
Noto: Problemos -en'los cE'Julos confrol de ontigfobiJiina-sensibilizodos con lgG para
re_accion_ar cucindo se odicionon a _ pn1ebos de pntiglobulino __indirBcfo _ negotivo
invoJida el resultodo de pruebo negotivo orioinoJ. (Refe-rirs& . ·a _,Umitodones · del- "
Procedimiento de · Prueba, m6s od01ante).
NEGATJVO (•):
Dentro de -las !imltaciones acep½obl1,:s del _ procedlm:ento de_- pruebo. lo NO
oglvtinoCi6n d& los eri:frocitm co11 NOVACLONE™ Antl�D lgM t- lOG M_e·zcto Monoclonal
indfca la ousenclo de! antigeno D (RHl) ccrrespo[.dien!e. _._- _ ,_ , :-· _ , ._ _. . _ ., .
Noto: Un resuifodo da la prueba de an_tiglobu!}na indl'ecto con c_itl_ulo_s que demuestran
_ Uno_ pruebo de ontiglobulin_a _dl'ec_to ·po1itiva _no _Sft pue_d8 int_erprat�r c_o_nfiati,leme_nte
con respecto - a_ D d9bil (Referhe .a Um!tocione$ de . Procedimiento -d• _Pruaba, -m6s
adelante)
Noto: Si se reo!iza simult6ne-amente un control de pociente con el an6Esls y mvestra
oglutinoci6n-, no se pueden obtensr conclusiones v61idos reiocionodas ol resul:ado de
pruebo.
Prueba en mlcroplac:a:
M. etodo de res.uspensi6n/ogltoci6n:
·<SEJ,i,f'_tqipa ·-_ug,-re J.l)t t?.cf.o.-::P05it�9 _ c o� }O- P(_�s-�_n�t�-;J�--,, :�eJ_ula� ·,agl_� tin_C]_f_ia � ·10s.: _cuOlos
-
pu,iciion'ci6silli,drie' pi,r~lo', IO!!l'll:fm' icl"f,rcic�i6n '(,imilar'o la,:- pn,,etla, de- t(Jbo). lo,
reaccione, n&gativas · es.t6:n indicodas por una resuspemi6n- comp!eta (je los gl6bulos
mjos sin aglutinodos vis:ibles.
Mi§todo de· inclln□ci6n y dispers!6n:
Los resu!tcidOS negatives est6n indicodos por vn Hujo suave ·ae cetukis _por e l-cpstado
del micropocillo.
Un tesuftodo positive se indica por.k::i_pre141ncia .de u_n b()!6n intocto -cts_-cetuli:JirJtufli
_queda_ ,E!n_ el f<:ind_o del pozo d• _lo mi_c_rc:}PIOca; ·AJter_n-otivorn•nte,-__.�ste bot6n:puede
d�sprenderse y _c_oer. en -. U!) _· grupo gr_a_nde. Er'.'l_ --ocosiones. -.lo�_ - re.acciones_ _ po,:itiv_o1
pueden aparecer com_o -1:1n_o_ mono_capa · .s61ida -de cl,lulOs sabre el fondo del _pocillo:
•sfos ·-reaccion�s .suelen .oporecer , coma una og!utinacl6n normal de-sPues ·de . la
resuspensl6n o agitoci6n.
M6todo autom6tico o semfautom6.fico ,de _ Mlcroplaca
Poro infsrpra�od6n de los resvltados de lo prueba- en mlcrop!cca con iriStn..imentaci6n
automatizcd_a, retie-rose a !as instruccion es prov!stos en el manual de! operador.
llMIIAClbNES DEL PROCEDIMIENTO
l . En ,or·as ocosiones, !os orilrocitos · cllb16rlos in · viv6 co"n·- inrrtunoglobuiir,cs puede
cglvtinar espont6neamente y no -,specificamenta en o!gunm medk:ls reaclivcs. Este
fe n6meno us-ualmente se asodo con · reoc1ivas · fomiiJodos. con aditivos
mocromolecutors5 y ije alto contenido en pro1efr,as.
HOV...,ClONET• ·Anti-D JgM � lgG Mel'zc!a Moi'i6ci6"na1 e·s:to f0rm·ulad0 en· vn medio
bajO en protelna, et cuol normolmentef no oi'Or'nueve agluifnaci6n
espont6nea. Sin embargo, muy rora·vez, ·atgunos ce!ulos rojas ruertamente cubfertas
,;:;.on inmvnog!obulincs pueden ag!vtinar de mo_nem no espedflco en medlos baj_os
en proteina. En tales -cosos, circunstancias simiiares - podrian probablemente
observorse en las pruabo,: de gn.Jpo ABO. Si las c4ilulas de prueba son reactlvos con
Anti�A, Anti-B y Anli.D, p"Jede ser oconsejob!e un _ contr_ol odicionol. · Puede ser
con-,eniente rea1:zor un anOHsis que com!sfa yo s:ea de olbUmino i"Srica bOvil1o del 6�
8% o suero/p!osmo de pacientes out61ogos. Si ia pruebo control da uno reacci6n
po![tiva. no se puede hocer vna interpretad6n · v6Jid0 dl!tl resultadO Rh.
2, El uso de celuim de pru"ba sin la var pucde provocor reaccfones fa!so posif:Vos toles
como aqvellm a.socio dos con rou!eavx o autoanticv"rpo3, El uio rutinorio de ·cetulas
rojos. !ovadas. suspendidos en so!ino para lo pruebo en tubo puede i'edocf el riesgo
de toles reacdones fa!so posmvas.
3. Las c�!ulas rojas sin lovor o ,uspendidas en suero o plasma cut6iogo no s.e de-ben umr
en le Prueba de Mtiglobu!ino lndfrecta modificada para D debit como se de-scribe
oqui: esto podria re5u!tar en uno neut.rollzociOn porciol-da lo Anti-globulino Hu·mono
debido a procedim!entos de lovodos i,:i5uffc!entes y,por consiguiente a resu:tados
d6biles o fo!sos negat;,.,o:s. Si se utillzori celulas rop�_ sin layor; se pod�i_or:i re_�u-�ri_r .3·a 4
lcvodos consecutivos para e!imtrar lgG s8ricos re,iduoles para nevor o ·cobo uno
prveba efectiva de ontiglobulina.
,4.''Uno . prueba '. de _antiglbt,_�_li no . indirecta _positiv� :_pora _ :-D ·dib_l ·•" :- PU4:'{je • -validar
mediante una prue:ba de antiglobu!ino directo negativa macrosi:6picom9nte o uno
p,ueba de antiglobultno indirecfo negotlvc utiHzando un control opropiodo [ej.
albUmino serica bovina al 6-8%).
5, Alounos c01vlm rojas pueden expresoront_fgeno D (iH l J parciol o cuon.titofrtomenfe
d9bil y pvcde por lo tanto, dem6stroi"rf;taccbnes m6s. d0bile5 que las esperodas · con
Anfi�D. -
6. Ejempios rares de eritrocitos pl)$· 6en expreSarSe en forrrios inusuai.ii"deil"CliitQeno D
{RHl) como lo fa!ta de epitopes espedfico5 {D pcrciol}, NOVACLONETI".Ahti-D lgM +
li;iG Mezclo Monoc!onof puade no detector iodos los coses: de D porcial. Es ri'l6s,= este
reactivo puede reoccionar con c01ulos D d6b\les y raros ejemplos de _c€/fu1as D
porciaies {8j. fenotlpo Crawford, R,:,"'cr etc.) que pueden .haber sldo _ previomente
probados e interpretados como Rh negaJ:ivo ufilllando ot_ra.s fuentes de onti-D.
7. Retrbso en ia /echJra de-lm: pruebo5. resvm•nsl6n vigor05a del bot6n de cl&lulos rOjos
y otros tecnicoS\ICJriCible5 osociadas con e1__ rundonorhiento··,d&_ la �e�a -p_u eden
_ocasionor resu!tados m6s: d!'!:bi!es de lo ssperodo o _resuHo_dosJ_�l_,os n_e:gotivo,.
NOVACLOHE1'M_ Anti�D lgM +-. lgG M"zclo-Monoclonol no-!e d&b&;_de .u:sar poro.prob6r
citlulas rojm trotadas con em:lmos. Es m6s, para mlnlmizar otros rte�gos de reacciones
fa/so positives, e:!ife reocflvo no :!ie debe probar cuando est� frfo. i4.segUres.e que est_e
reoctfvo-y .cua!quler rnveslro de celulos alconcen lo_.femperotura ombiente {oprox;
, 18�25 GJ ontes de.probor, :- _- : · .
Q
8. Se pvedan presentor reac_ciomn in&$pi!trodame_l1te dl!bil•s:o folso1 _ neQOtiv9s
celulos:-rojm que hon 1ido $Qmtttidos a <:;ondk;iones prolongadas y/a inapropiodas
de .almacenarriiento.
lo.- Otras voricb!es tales c_o mo tecnicos i11apropiodo�. -centritugacf6n o incuboc!On
i-napropfoda, 1nadecuoda !lmpieza del material de vidrio. pH de !a so!ina incorrecto
y /o materiales contamlnados pueden cousor resuitodos falsos negativos o fo!sos
CARACTfRISTICAS �SPECfFICAS DE IUHCfONAMIENTO
Coando se · u_ti!_izd de Ocuerdo_ . _(J ,_Os:__(mtn.JccioneJ de Uso, el· _(eotliVa · H·ovACLONE'"'
AntJ.:D IQM :J- lgG Mezcla Monoclona! aglutina especificom&nte celulos rojas humonos
si 1'1 antigeno_ O__ correspondiente est6 pres�nte. La reactfvido_d de coda Jote de _DBL
NO:'.{�__c�_q_t:-J E1�_�1_1:D ._lgM_+ _ii;iG,�,t.�zc_la_ Mqt1odonol_s_•_ h_a :v•_rific9doiCOl),.��--P.!'.l!)•_l.d.a._: .­
c0Jvios'rojas prot,odo de · acuerdo o _lo1 _instru�ckm�s d&_v.so=. _Coda _Iota de �ute reactivo
se ha probodo de ocuerdo o los m6todm: recomendodos par la FDA.dB USA y CGSB
Conadiense.NOVACLONET"' Anti-D lgM + lcG · Mi'zcla Monodono! ho mostmdo
copacidod para detector mucr:os c8tuto� ds fanotipo D d!3bil el cuol puadl9 hober sido
inierpretodo previarr:ente corno Rh negotj,va -{o._ D . d&bil}. E5tO pued&, lncluir alguri_m
_-
con'lponenfe Anti_-0 _! QM mori6donol deriVado - de lo _ llnea ._celulor-. D1 7�-2 : n_o _ha
demostrodo reoctividod con· ninguna c8.lulo porcial D cataQorio Yl probado o l o fecho.
Lo-e5:pe"cificidod - der cad_a lote ho slcio velificod.a por :os metodo_� en· pi_a_coy tu_bC).
recomendado� con _u n panel de ceiu_las ne_cotivo_s .paro a: an;tigeoo D_. (�hlJ Y_ 1?03-U_iv,(}S
;:toro los _ar1ifgenos __ :qua_ : _ti�;men_ -yno :tre�u_Gt,nc_io _ d81 '.-J % _- o m6s -- en la poblaci6n
norleome'rlcana en. gene:roL Cada lotl'J tambil.!n _se. prob6 por et m0todo en tubo y
m:croc-!oca ·recomer.dado contra vn mlnimo de 3 muestras pmifivm para el antigeno
BQ:1 . La. p.resencio do o.r:ficuorpos o l_os ontigenos de boja fr&cuenc!a C...., Ytp, �, J y ,v--­
se excn.,ye er. ios o:;¢:!1s:1s de especlf:cidac rutnorios sl es.t6n Cisponlc!es lat celulo.s Pe
dr:6iisfs odocuadoi.
Desvioc_l9t1as· �"ri /as_inStr1Jcciot1es ce uso pueden ocasior.or fati'as _•n :91: funcic,nCJmiento
--
_6pfirno del_ producto. Los procedimientos_ di:1 pruebo e_n p/oca-_ puedtm · no ..ser._JQ '
svficientem&nte ·-s&nsib/es para le · odacuodo_ dtttecci6n · _de la - �xpr"!i6n _ antigenico
di,bfl.
LciS-"modificodOnes o prciced1m1eiitOs '-de PNeba:'delinidaJ por e/"usuan·a · pued9n
reauerfr de volicicci6n.
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Fabrka·d� ·eo CaneidOJ=> Or._ _Don:,1�irin �fol_O_O_rcals__Um�.,d,
5 lsnor Dnve, Oortmouth, NovO s·colia. B3B 1 M l ; Cdnoda.
lmportado �er: labor_o1orios_tlcon, S.A:
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g��!��s�����n°e���,7� d���i���d;;-�:��;�lt �;!��(���� ����).
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ACOndlclona��-y dl1tribuido � o:��ta1jorOtor10�: oeon,- $.A.
Avenida-fndusfria 19tkfrico di!! M8:6:o·Ho:3, Ccilonio Xocoy ahudco, t.P, 5◄060,
110)110:)on-tto de 3oz, Estodo-de M&xico. Mffxico.
_Tat: (55) 5362-02�99
Fax: (55} 5362-1792
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Rev. 30/04/2021 - IN-215-0