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IgM: : Primer anticuerpo que fabrica el cuerpo para combatir una nueva infección
4.- DEFINICIONES
El Toxoplasma gondii es un parásito que puede infectar a la mayoría de los animales y las
aves. Solo puede llevar a cabo el ciclo completo de reproducción en gatos domésticos y
salvajes. Estos son los principales huéspedes del parásito.
FUNDAMENTO:
5.- DESARROLLO DEL
PROCEDIMIENTO La determinación inmunoenzimatica cualitativa de anticuerpos específicos se basa en la
técnica Elisa (Enzyme-linked Immunosorbent Assy)
Las placas de Microtitulacion están cubiertas con antígenos específicos unen a los
anticuerpos de la muestra. Después de lavar los pocillos para eliminar todo el material de
muestra no unida, el conjugado de peroxidasa de rábano (HRP) se añade. Este conjugado
se une a los anticuerpos capturados. En una segunda etapa de lavado se retira el
conjugado no unido. El complejo inmune formado por el conjugado unido se visualiza
añadiendo substrato tetrametibencidina (TMB), que da un producto de reacción azul
TIPO DE MUESTRA:
Suero o plasma
FUENTE DE MUESTRA:
5 ml de sangre
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CONTENEDOR DE RECOLECCION:
En un tubo sin anticoagulante tapa roja o con acelerador del coagulo (gel activador)
TAMAÑO DE MUESTRA:
15muestras
La muestra de sangre del paciente debe ser obtenida por punción venosa recolectando
la cantidad adecuada después se debe depositar el tubo en baño de maría en seco para
que se retraiga el coagulo y se centrifuga para obtener el suero con el cual vamos a
procesar la muestra correspondiente.
EQUIPOS Y MATERIALES
Es muy importante llevar todos los reactivos y las muestras a temperatura ambiente
(20-25 °C)
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Placa de microtitulación:
Diluir el tapón de lavado 1+19 por ejemplo 10 ml del tapón de lavado +190 ml de agua
destilada. El tapón de lavado diluido es estable durante 5 días a temperatura ambiente
(20-25 °C). En caso de aparecer cristales en el concentrado, calentar la solución a 37 °C
por ejemplo un baño María. Mezclar bien antes de la dilución.
La solución esta para su uso y debe almacenarse a 2-8 °C protegida de la luz. La solución
debe ser incolora o podría tener un color ligeramente azul claro. Si el sustrato se
convierte en azul, es posible que haya sido contaminado y no puede ser utilizado en el
ensayo
Requisitos de almacenamiento
Todos los reactivos de ensayo para esta prueba se almacenan a de 2-8 °C y deben de
estar situado en el departamento de serología.
Dilución de la muestra
Antes del ensayo, las muestras tienen que estar diluidas en relación 1+100 con el tapón
de dilución de muestra IgM POR EJEMPLO 10ul de la muestra con 1 Ml de tapón de
dilución de muestras IgM, mezclar bien con la mezcladora Vortex.
PROCEDIMIENTO
• Encender el analizador
• Click en icono Gemini
• Seleccionar Log On
• Escogemos la opción supervisor
• Seleccionamos el icono de llave
• Colocamos el rack de muestra
• Seleccionamos Scanner on se enciende las luces para colocar el rack de muestra
y seleccionamos la prueba a realizar.
• Vamos a la hoja de trabajo y verificamos que todas las pruebas a realizar estos
seleccionados. Y star.
Para que un ensayo se considere valido deben seguirse estrictamente las presentes
instrucciones de uso y deben cumplirse los siguientes criterios:
El Cut- off se obtiene de los valores de la extinción de los dos controles Cut- of
Cut-off=0,43
1.591 x 10 = 37 NTU
0,43
Ejemplo:
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Interpretación de los resultados
Positivo >11 NTU: Los anticuerpos contra el patógeno están presente. Ha producido un
contacto con el antígeno (patógeno resp. Vacuna)
Zona intermedia 9-11 NTU: Los anticuerpos contra el patógeno no se pudieron detectar
claramente. Se recomienda repetir la prueba con una muestra fresca en 2 a 4 semanas.
Si el resultado es de nuevo en la zona intermedia, la muestra se considera como negativa.
Interferencias
Se realiza una autocomprobación cada vez que inicia el software GEMINI. El instrumento
se inicializa y verifica todos los módulos del instrumento. Estos se comprueban de la
siguiente manera:
Fotómetro Se mide el voltaje de referencia del extremo frontal y también las señales de
fondo oscuro del fotodiodo. Cada filtro se prueba para elegir la ganancia de lectura
óptima y el ruido en la ganancia óptima. Se miden las transmisiones del canal óptico
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6.- FORMULARIOS Y - REGISTRO DE MANTENIMIENTO EQUIPO
REGISTROS - Registro de muestras rechazadas e identificada inadecuadamente
7.- REFERENCIA
Inserto de Toxoplasma IgM NOVATEC
8.-ANEXOS
FECHA DE VIGENCIA:
FEBRERO 2023