86439 DIRECT COOMBS (480003):86498/86428 MonoclRH.

Kphenotype

ScanGel
DIRECT COOMBS
86439

12 tarjetas

GELES FORMULADOS CON ANTIGLOBULINAS

MONOESPECFICAS DE ORIGEN POLICLONAL
O MONOCLONAL MRIDO
Test directo con lantiglobulina

IVD
Todos los productos fabricados y comercializados por la sociedad Bio-Rad
se hallan bajo un sistema de garanta de calidad desde la recepcin de las
materias primas hasta la comercializacin de los productos finales. Cada lote
de producto final se somete a un control de calidad y slo se comercializa si est
en conformidad con los criterios de aceptacin. El fabricante conserva la
documentacin referente a la produccin y al control de cada lote.

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I - UTILIZACIN Y PRINCIPIO DE LA PRUEBA

Esta tarjeta est estrictamente reservada para uso profesional e in vitro.
Destinado a la prueba directa de antiglobulina (Coombs direct), este ensayo
se utiliza para estudiar la sensibilizacin in vivo de los glbulos rojos por
anticuerpos IgG y/o por la fraccin C3d del complemento.
Asocia los principios de aglutinacin y de filtracin en gel.
Una tarjeta ScanGel DIRECT COOMBS permite ensayar 2 muestras. Para
cada muestra deben utilizarse tres microtubos: IgG, C3d, Ctl .
La reaccin se obtiene y se lee tras la centrifugacin de unos microtubos
especialmente diseados, rellenos de gel impregnado del reactivo antiglobulina.
La suspensin de glbulos rojos se deposita en el pocillo de cada
microtubo y se centrifuga. Los glbulos rojos no aglutinados se depositan
en el fondo del microtubo, mientras que los aglutinados se retienen por
todo el gel en funcin de su tamao. Su posicin en el gel determina la
intensidad de la reaccin.

++

+++

++++

La capacidad del gel para separar los glbulos rojos del suero elimina la
fase de lavado obligatoria en la tcnica convencional de la prueba directa
de antiglobulina (Coombs Direct).

II - CARACTERSTICAS DE LOS REACTIVOS

El primer y el cuarto microtubos contienen cada uno un gel impregnado con
un reactivo antiglobulina anti-IgG. La fraccin anti-IgG se prepara con
sueros de cabras hiperinmunizadas.
El segundo y el quinto microtubos contienen cada uno un gel impregnado
con un reactivo antiglobulina anti-C3d. La fraccin anti-C3d es un anticuerpo
monoclonal mrido producido a partir del clon 053A714.
El tercer y el sexto microtubos contienen cada uno un gel sin reactivo
especfico. Corresponden al control (Ctl).
Este reactivo contiene azida sdica (< 0,1 %) como conservante.
El cdigo del producto y el nmero de paneles por caja se indican en la
etiqueta de la caja.

III - CADUCIDAD Y CONSERVACIN

La fecha de caducidad y las condiciones de almacenamiento se indican en
la caja.
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Los tajetas deben conservarse a temperatura ambiente, de +15C a +25C.

Las tarjetas debern almacenarse verticalmente, protegidas de las fuentes de
calor, en un local con escasas variaciones de temperatura e higromtricas.

IV - PRECAUCIONES
La calidad de los resultados depende del respeto de las buenas prcticas
de laboratorio siguientes :
No utilizar los reactivos despus de la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta.
No utilizar tarjetas que muestren signos de desecacin o burbujas, o si la
lengeta de sellado muestra signos de deterioro o est parcialente retirada.
Como los reactivos contenidos en los microtubos tienen una
naturaleza diferente, es indispensable tomar las precauciones
necesarias para no provocar contaminaciones inter-microtubos,
especialmente cuando se retira la lengeta de aluminio y en las
etapas de distribucin.
Utilizar una punta de pipeta para cada muestra.
Comprobar la precisin y el correcto funcionamiento de las pipetas y de
los otros equipos.
Llevar guantes y gafas de proteccin durante la manipulacin de los
reactivos y de las muestras.
No pipetear directamente con la boca.
Evitar las salpicaduras. En caso de salpicaduras, limpiar las superficies
manchadas con leja de 12Cl diluida al 10% y secar con papel
absorbente. El material utilizado para la limpieza deber ser desechado en
un contenedor especial para residuos contaminados.
Producto y fungible que hayan estado en contacto con muestras o
reactivos que contenga material de origen humano deben ser descartados
una vez descontaminados.
Las fichas de seguridad estn disponibles bajo peticin.

V - RECOGIDA Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS

La sangre debe obtenerse en condiciones de asepsia en un tubo sin o con
anticoagulante (EDTA).
Tras la obtencin, la prueba debe realizarse lo antes posible. Las muestras
que no puedan analizarse rpidamente debern conservarse entre +2C y
+8C para ser sometidas a prueba en las 48 horas siguientes.
Las muestras obtenidas en tubos secos deben ensayarse antes de la
refrigeracin.
En ningn caso debe observarse hemlisis.
No calentar las muestras.

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VI - TCNICAS
Material suministrado
Tarjetas ScanGel DIRECT COOMBS

Material necesario pero no suministrado

ScanLiss : medio de suspensin de los glbulos rojos
86441 ScanLiss 100 ml
86442 ScanLiss 500 ml
Centrfuga : ScanGel Centrifuge
Pipetas automticas o semiautomticas
Puntas de pipetas
Tubos de un solo uso
Contenedor especial para residuos con riesgo biolgico
Leja
Guantes de ltex
Papel absorbente
Gafas de proteccin
Controles
Controles positivo (glbulos rojos sensibilizados por un anticuerpo de
naturaleza IgG conocida y/o por la fraccin C3d del complemento) y
negativo (glbulos rojos no sensibilizados).
Procedimiento
Seguir estrictamente el protocolo propuesto.
Antes de su utilizacin, llevar todos los reactivos a temperatura ambiente.
Por centrifugacin, separar el suero o el plasma de los glbulos rojos de la
muestra a probar.
a) Preparacin de una suspensin de glbulos rojos
Para cada muestra :
Poner 1 ml de ScanLiss en un tubo de un solo uso identificado.
Aadir 10 l del precipitado globular de la muestra.
Mezclar.
La suspensin de glbulos rojos est lista para su uso.
b) Tcnica
1. Identificar el panel con el nombre o el nmero de muestra correspondiente.
Retirar completamente la lengeta de aluminio.
Resuspender los hemates anted de usar.
2. Distribuir 50 l de cada suspensin de glbulos rojos en el pocillo de los
microtubos adecuados.
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3. Centrifugar inmediatamente 10 minutos en ScanGel Centrifuge. El

retraso entre el final de la distribucin y el principio de la centrifugacin
no debe exceder los 10 minutos.
4. Leer las reacciones. La lectura debe efectuarse durante la
siguiente hora tras el final de la centrifugacin.

VII INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

La presencia de aglutinados (en la superficie o dispersos en el gel)
corresponde a un resultado positivo.
Un sedimento de glbulos rojos en el fondo del microtubo corresponde a
un resultado negativo.
Una reaccin positiva en uno de los microtubos slo puede ser vlida si el
microtubo Ctl es negativo.
Si el microtubo Ctl presenta una reaccin positiva :
Lavar los glbulos rojos con solucin salina isotnica (NaCl 0,9%).
Repetir el procedimiento como se indica en VI.a y VI.b.
Si el microtubo Ctl da siempre una reaccin positiva repetir la prueba
utilizando otra tcnica que no sea la tcnica de filtracin en gel.
Un resultado positivo en el microtubo IgG indica la presencia de IgG
detectable en los glbulos rojos.
Un resultado positivo en el microtubo C3d indica la presencia de C3d
detectable en los glbulos rojos.
Los resultados slo son vlidos si los controles positivo y
negativo dan los resultados esperados.

VIII - COMPORTAMIENTO
La evaluacin de las especificaciones se ha realizado con 677 muestras
(346 donantes, 108 pacientes, y 223 recin nacidos).
Cada resultado ha sido comparado con el obtenido en tcnica de tubo o
filtracin de gel.
Se ha ensayado la reproducibilidad de la aplicacin y ha demostrado unas
buenas especificaciones tanto intra como interensayo.

LMITES
Los resultados anormales pueden ser consecuencia de :
una contaminacin bacteriana o qumica del suero, del plasma, de los
glbulos rojos o del material.
una medicacin o un estado patolgico del paciente que provoque una
reaccin cruzada.
el uso de un medio de suspensin para los glbulos rojos diferente al
recomendado.
una prparacin de los glbulos rojos diferente a la recomendada.
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una resuspensin incompleta de los glbulos rojos.

una hemlisis de las muestras.
a presencia de fibrina (imagen de un sedimento celular compacto en el
fondo de un microtubo acompaado de una fina banda rosada en la zona
superior del gel correspondiente a los glbulos rojos retenidos por los
residuos de fibrina).
contaminacin entre microtubos.
uso de otro procedimeinto del descrito anteriormente.

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IX - LITERATURE
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Under license from DIAMED SA, 1785 Cressier-sur-Morat, Switzerland

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