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Capítulo 6

SDS Poliacrilamida gel

Electroforesis de
Proteínas

BJ Smith
Instituto de Investigación del Cáncer, Chester Beatiy
Laboratorios, Royal Cancer Hospital,
Fulham Road, Londres, Estados Unidos
Reino

Introducción

Probablemente la técnica más utilizada para analizar mezclas de

proteínas es la electroforesis en gel de poliacrilamida SDS. En esta técnica, las
proteínas reaccionan con el detergente aniónico dodecilsulfato de sodio (SDS
o lauril sulfato de sodio) para formar complejos cargados negativamente. La
cantidad de SDS unida por una proteína y, por tanto, la carga del complejo,
ES aproximadamente proporcional a su tamaño.

Comúnmente, se unen alrededor de 1,4 g de SDS por 1 g de proteína, aunque

hay excepciones a esta regla. Las proteínas generalmente se desnaturalizan y
solubilizan mediante su unión a SDS, y el complejo forma un elpsoide alargado
o varilla de una longitud aproximadamente proporcional a Por lo tanto, las
proteínas de forma ácida o básica pesan molecular

41
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42 Herrero

Complejos cargados negativamente que pueden separarse basándose en

diferencias de carga y tamaño mediante electroforesis a través de una matriz
de gel de poliacrilamida similar a un tamiz.
Ésta es la base del sistema de gel SDS, pero debe su popularidad a sus
excelentes poderes de resolución que se derivan del uso de un "gel de apilamiento".
Este sistema emplea los principios de los isotacóforos, que tratan eficazmente
muestras de grandes volúmenes (dentro de lo razonable) en zonas concen­
muy pequeñas, lo que luego conduce a una mejor separación de las diferentes
especies. El sistema se configura haciendo un "gel apilable" encima del "gel
separador", que tiene un pH diferente. La muestra se introduce en el sistema a
en el gel de apilamiento. Con un campo eléctrico aplicado, los iones se mueven
hacia los electrodos, pero al pH que prevalece en el gel de apilamiento, los complejos
proteína­SDS tienen litros intermedios entre los iones Cl­ (presentes en todo el
sistema) y los iones glicinato (presentes en el buffer del depósito). ). Los iones Cl­
tienen la mayor movilidad.

Los
siguientes iones más grandes se en zonas estrechas en el
concentran en el gel de apilamiento, pero no se separan allí de manera efectiva.
Cuando las zonas en movimiento alcanzan el gel de separación, sus respectivas
movilidades cambian en el pH que prevalece allí y el frente del ion glimato alcanza
las zonas del complejo proteína­SDS para dejarlas en un campo eléctrico
uniformemente amortiguado para separarse entre sí según el tamaño y cargar.

Generalmente se encuentran disponibles tratamientos más detallados de la

teoría de la rsotacoforesis y la electroforesis 1). (por eres la literatura

ejemplo, el sistema de tampones utilizado en el sistema de gel que se describe a

continuación es el de Laemmli (2), y se utiliza en un gel de poliacrilamida en forma
de losa. Esta forma permite realizar electroforesis simultáneas de más de una
muestra y, por lo tanto, ES ideal para fines comparativos.

Materiales

1. El aparato requerido está disponible comercialmente o puede

fabricarse en el taller, pero generalmente se ajusta al diseño de Studier (3) El
gel se prepara y se hace funcionar en una cámara estrecha formada por dos
placas de vidrio separadas por espaciadores de metacrilato u otro material
adecuado.
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Geles SDS 43

como se muestra en la Fig. 1. Los espaciadores son más largos

que las placas de vidrio (para que sean fáciles de quitar), miden
aproximadamente 1 cm de ancho y tienen cualquier espesor (por
ejemplo, 0,5 mm para un gel fino). Los pocillos de muestra en los
que se cargan las muestras están formados por un “peine” de
plantilla que se extiende a lo largo de la parte superior del gel y
tiene el mismo grosor que los espaciadores. Normalmente, los
“dientes” de este peine tendrán 1 cm de largo, 2­ 10 mm de ancho,
y separados por unos 3 mm. La cámara se sella con vaselina
blanca (vaselina). También se requiere una fuente de alimentación de CC.
2 Soluciones madre. Los productos químicos deben ser de grado
reactivo analítico (Analar) y el agua debe ser destilada. Todas las
soluciones madre deben filtrarse. Las soluciones frías deben
calentarse a temperatura ambiente antes de su uso.

Fg. 1. La construcción de una losa de gel, mostrando las posiciones de las

placas de vidrio, los espaciadores y el peine.
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44 Herrero

(1) Stock ncrylamlde s&&on (agente acrílico total hasta estafa­

tienda, %T = 30 % p/v, proporción de monómero acrílico de película

cruzada, %C = 2 7 % p/p)

Acrilamida 73
ser acrílico gramos 2 8

Disolver lo anterior y completar hasta 250 ml de agua. ES estable durante semanas en

vidrio marrón. Esta solución madre es a 4°C.

(11) Tampón de gel de separación atascado

Ficha de datos de seguridad (MSDS)

registro

Tampón “Tns” [2­

amino­2­(hidroximetil)­propano­1,3­ 45 5 gramos

droll

Disuelva lo anterior en menos de 250 ml de agua, ajuste el pH a 8,8 con HCl y lleve el
volumen a 250 ml. Esta solución madre
es estable durante meses a 4°C.

(III) Existencias de persulfato de amonio.

persulfato de amonio 10 gramos

Disolver en 10 mL de agua. Esta solución madre durante semanas en es estable

vidrio marrón a 4°C.
(IV) Tampón de gel apilable en stock.

Registro
de SDS

Tampón “Trrs” 15 1 g

Disolver lo anterior en menos de 250 ml de agua, ajustar el pH a 6,8 con HCl y

completar hasta 250 ml. Compruebe el pH antes de su uso. Esta solución madre es
estable durante meses a 4°C.

(v) Tampón Reservozr (glucemia 0,192 M, SDS al 0,1 Tris de 0,025 M,

% p/v).

28 8 gramos
glucemia
Búfer “trrs” 6,0 gramos

Ficha de datos de seguridad (MSDS) 2,0 gramos

Disolver lo anterior y llevar a 2 L en agua. La solución debe tener aproximadamente un

pH de 8,3 sin ajuste.

Esta solución se prepara fácilmente cada vez.

(VI) Disolvente de muestra madre (doble concentración):

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Geles SDS 45

Ficha de datos de seguridad (MSDS)

0 92
P­mercaptoetanol gramos 2 ml
Tampón
Jog
de glicerol “7 rls”
03i3
bromofenol Azul 2 ml
(0 1% p/v solución en agua)

Disolver lo anterior en menos de 20 ml de agua, ajustar el pH a 6,8 con HCl y

llevar a 20 ml. Compruebe el pH antes de su uso. Expuesto al oxígeno del aire,
el poder reductor del P­mercaptoetanol disminuye con el tiempo. Periódicamente
(después de algunas semanas), agregue agente adicional o renueve la solución.

Esta solución madre es estable durante semanas

a 4°C.
(~122) Mancha protem.

Coomassle Azul Brillante R250 0 25 g

Metanol 125 ml
Ácido acético glacial 25 mL
Agua 100ml

Primero disuelva el Coomassle colorante en el componente de metanol.

nent, luego agregue el ácido y el agua. Si se disuelve en un orden diferente, el
comportamiento de tinción del tinte puede diferir.
El tinte se utiliza mejor cuando está recién hecho. Para obtener mejores
resultados, no reutilice el tinte; su eficacia disminuye con el uso. Si este tinte
no está disponible, utilice el tinte equivalente PÁGINA azul 83.

(VW) Solución de desmontaje.

Metanol 100 ml
Ácido acético glacial 100 mL
Agua 800ml

Mezclar bien. Úselo recién hecho.

Método

1 Limpie y seque a fondo las placas de vidrio y los tres espaciadores, luego
móntelos como se muestra en la Fig. 1, con los espaciadores colocados a 1­2
mm de los bordes del vidrio.
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46 Herrero

platos. Sujete la construcción con clips bulldog. Luego se aplica vaselina blanca
(derretida en un baño de agua hirviendo) alrededor de los bordes de los
espaciadores para mantenerlos en su lugar y sellar la cámara. Sujete la cámara en
una posición vertical y nivelada para separar la mezcla de gel (por ejemplo, 30 ml
para una cámara de aproximadamente 14 X 14 X 0,1
2. Un volumen suficiente cm) y se prepara de la siguiente manera.

Mezcla lo siguiente:

Solución madre de acrilamlda 15ml 75ml

Agua destilada

Desgasifique en una bomba de agua y luego agregue.

Tampón de gel separador de caldo 7,5 ml 45

Stock de solución de persulfato de amoníaco onzas líquidas

N, N, N', N'­tetrametil­
etilendiamo (TEMADO) 15PL

Mezcle suavemente y use inmediatamente (porque la polimerización comienza

cuando se agrega TEMED). La etapa de desgasificación elimina el oxígeno, lo
que inhibe la polimerización al absorber los radicales libres y también
desalenta la formación de burbujas al verter el gel.

3. Pipetee o vierta con cuidado la solución recién mezclada en la cámara sin generar
burbujas de aire. Vierta hasta un nivel de aproximadamente 1 cm por debajo de
donde quedará la parte inferior del peine bien formado cuando esté en su posición.
Cubra
con cuidado la solución de acrilamlde con butan­2­01 sin mezclar (para eliminar
el oxígeno y generar una parte superior plana para el gel). Dejar la mezcla hasta
que cuaje (0,5­1,5 l­4.

4. Prepare lo apilado gel (5 ml) de la siguiente manera. Mezclar el

siguiente*

Stock de solución acrílica 0 75ml 3ml

Agua destilada

Desgasifique en una bomba de agua y luego agregue.

Tampón de gel para apilamiento de existencias 125 mL

Solución madre de persulfato de amonio 15 /.LL
TEMED 5 FL
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Geles SDS 47

Mezclar suavemente y utilizar inmediatamente.

Vierta el gel separador butan­2­01, del polimerizado
lave la parte superior del gel con agua y luego un poco de mezcla de gel
apilable, y llene el espacio que queda en la cámara con la mezcla de gel
apilable. Inserte el
peine y deje que el gel repose hasta que fragüe (aproximadamente 0,5 lh)*
5.
Cuando el gel apilable se haya polimerizado, retire el peine sin distorsionar las
formas del pocillo. Retire los clips que sujetan las placas e instale el gel en el
aparato.
Llene el aparato con tampón de
depósito. El amortiguador del depósito se puede hacer circular entre los
depósitos de ánodo y cátodo para igualar sus valores de pH. El tampón
también se puede enfriar (haciéndolo circular a través de una bobina de
enfriamiento con hielo), de modo que el calor desprendido durante la
electroforesis se disipe y no afecte el tamaño o la forma de las zonas (o
bandas) de proteínas en el gel.
Saque el espaciador inferior del gel y elimine las burbujas tanto de la parte
superior como de la inferior del gel, ya que podrían aislar parcialmente el gel y
distorsionar la electroforesis.
Verifique el circuito eléctrico encendiendo la alimentación
(CC) brevemente, con el cátodo en el extremo del gel (es decir, la parte
superior). Utilice el gel inmediatamente. 6. Mientras se polimeriza el gel (o
antes de .
fabricarlo), prepare las muestras para la electroforesis. Una muestra seca puede
disolverse directamente en un disolvente de muestra de concentración simple
(es decir, la solución madre diluida dos veces con agua) o disolverse en agua
y diluirse con un volumen de disolvente de muestra de concentración doble.
La concentración de la muestra en la solución debe ser tal que proporcione
una cantidad suficiente de proteína en un volumen no mayor que el tamaño
del pocillo de la muestra. Algunas proteínas pueden reaccionar adecuadamente
a temperatura ambiente; practique, caliente las soluciones de muestra en agua
hirviendo durante 2 minutos. Enfríe la solución de muestra antes de cargarla.
El colorante azul de bromofenolcon SDS
indica en unos
cuando minutos de
la solución pero como es ácida
muestra
al volverse amarilla. general

Si esto sucede, agregue un poco de NaOH,

suficiente para que el color se vuelva azul.
7. Cargue el gel. Tome el volumen requerido de muestra en una inyección de
solución microsyrmge. o pipeta y con cuidado
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48 Herrero

en un pozo de muestra a través del buffer del depósito. La cantidad de muestra cargada
depende del método de detección (ver más abajo). Habiendo cargado todas las muestras sin
demora, inicie la electroforesis encendiendo la alimentación (CC). En un gel de

aproximadamente 0,5 mm de espesor y aproximadamente 14 cm de longitud, un en

voltaje aplicado de aproximadamente 150 V da una corriente de aproximadamente 20 mA

(que cae durante la electroforesis si se emplea un voltaje constante).

El

frente del tinte azul de bromofenol tarda aproximadamente 3 h en llegar al fondo del gel. Un
voltaje mayor acelera los electroforesis, pero genera más calor en el gel.

8. Al final de la electroforesis (por ejemplo, cuando el frente del tinte llega al fondo del gel), las
bandas proteicas del gel se pueden visualizar mediante tinción. Retire el gel de entre las
placas de vidrio y sumérjalo en la mancha de proteína inmediatamente (aunque un retraso
de aproximadamente una hora no es notablemente perjudicial para un gel de 15% T). El
gel se deja allí con agitación suave hasta que el tinte haya penetrado en el gel
(aproximadamente 1,5 h para geles al 15% T de 0,5 l mm de espesor). El tinte que no está
unido a proteínas se elimina transfiriendo el gel a una solución decolorante.

Después de aproximadamente 24 h, con agitación suave y varios cambios de agente

decolorante, el fondo del gel se vuelve incoloro y deja bandas de proteínas de color azul,
violeta o rojo. Coomassle Blue R250 y PAGE blue 83 tiñen visiblemente tan solo 0,1 l kg
de proteína Brillante

en una banda de aproximadamente 1 cm de ancho.

Notas

1 El agente reductor en el disolvente de la muestra reduce los puentes disulfuro intermoleculares

y, por lo tanto, destruye la estructura cuaternaria y separa los subumtos, y también oxida

el sulfuro intramolecular para garantizar la máxima reacción con SDS. El glicerol está
presente para aumentar la densidad de la muestra y ayudar encautiverio
la carga. del mismo sobre
el gel. El colorante azul de bromofenol también ayuda a cargar la muestra, haciéndola

visible, y marca la posición del frente de electroforesis en el gel. El tinte también indica
cuándo la solución de muestra está acldlc girando 2 La polimerización

amarillo.
de acrilamlda y blsacrilamida ES
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Geles SDS 49

mitigado por la adición de TEMED y persulfato. El persulfato activa el TEMED y

lo deja con un monómero de acrilamida de electrones desapareados para producir
que reacciona con otro un nuevo radical reacciona con un
monómero, y así sucesivamente para formar un polímero. La bisacrilamida se
incorpora de esta manera a las cadenas poliméricas y forma así cruces entre ellas.

3. El sistema de gel descrito es adecuado para electroforesis de proteínas en el

rango M1 de 10.000 a 100.000. Las
proteínas más pequeñas se mueven en la parte delantera o forman bandas
difusas y de rápido movimiento, mientras que las proteínas más grandes apenas
entran en el gel, si es que lo hacen. La electroforesis de proteínas más grandes
requiere geles de mayor tamaño de poro, que se obtienen mediante dilución de
la solución madre de acrilamida (reducción del %T) o mediante ajuste del %C (el
tamaño de poro más pequeño está al 5%C, cualquiera que sea la temperatura).
%T) El %T mínimo es aproximadamente 3%, útil para la separación de proteínas
con pesos moleculares de varios millones.
Estos geles con %T bajo son extremadamente débiles y pueden
requerir fortalecimiento mediante la inclusión de agarosa al 0,5% p/v. Los geles
de poros más pequeños, para electroforesis de proteínas pequeñas, se preparan
aumentando el %T y ajustando el %C. Se puede encontrar empíricamente que
dicho ajuste de %T y %C mejora la resolución de especies que migran de cerca.

Se puede realizar una combinación de geles de poros grandes y

pequeños, adecuada para electroforesis de mezclas de proteínas de tamaños
amplios, en un gel de gradiente, preparado con el uso de un aparato de
creación de gradientes al verter el gel de separación (consulte el Capítulo 7). ).

4. Dado que las proteínas (o más bien, sus complejos con SDS) se resuelven en gran
medida sobre la base de diferencias en sus tamaños, la movilidad electroforética
en geles de SDS puede usarse para estimar el peso molecular de una proteína
comparándola con proteínas de tamaño conocido. [como se describe en (I)]. Sin
embargo, debe recordarse que algunas proteínas tienen propiedades anómalas
de unión a SDS y, por tanto, movilidades anómalas en geles de SDS.

5. Si es necesario, el gel se puede almacenar durante 24 h (preferiblemente en

frío), ya sea solo como gel separador, bajo un tampón de gel separador diluido
cuatro veces en agua, o junto con el gel de apilamiento con el peine.
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a C

Fig. 2. Ejemplos de proteínas sometidas a electroforesis en geles de

poliacrilamida SDS (15% T) y teñidas con Coomassie Bril­liant Blue R
250 como se describe en el texto. La electroforesis fue de arriba a abajo.
(a) Buena electroforesis. Muestra, izquierda, carga de 15 qg de proteínas
histonas de núcleos de eritrocitos de pollo. Muestra de la derecha, una
carga de 5 kg (total) de proteínas marcadoras de peso molecular
(obtenidas de Pharmacia). Las M, son, de arriba a abajo: fosforilasa b,
94.000; albúmina, 67.000; albúmina ovalada, 43.000; anhidrasa
carbónica, 30.000; inhibidor de tripsina, 20.100; ol­lactoalbúmina,
14.400. (b) Ejemplos de artefactos. Muestra, izquierda, la banda más
rápida (abajo) se ha distorsionado al encontrar una región de alta
densidad de poliacrilamida (que surgió durante una polimerización en
gel muy rápida). Muestra, derecha, el efecto sobre la sobrecarga de
proteínas al aumentar el tamaño de las bandas (las proteínas de la
muestra son como en la muestra, izquierda). La sobrecarga extrema
también puede causar el estrechamiento de las bandas que migran más
rápido, como ha sucedido aquí hasta cierto punto (ver anchos de bandas
rápidas con anchos de bandas en la muestra, izquierda). (c) Ejemplo de
un artefacto. Muestra, izquierda, el “efecto del pozo final” de la distorsión
de la muestra cargada en el pozo final, que no se ve en muestras de otros pozos (p. ej., mue

50
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Geles SDS 51

tabla 1
Algunos problemas que pueden surgir durante la preparación y uso de
Geles SDS

Falla Causa Remedio

Farlure o una tasa (a) Hay oxígeno presente (a) Desgasificar las
(1)
reducida de (b)
polimerización Las soluciones madre soluciones (b) Renovar las
en gel soluciones madre

(especialmente
acrilamina y persulfato) están envejecidas

(11) Formación de una Penetración del gel Cubrir la solución de

capa superior por butan­2­01. gel con
pegajosa al gel. butan­2­01 sin
mezclarlos.
No dejar reposar
butan­2­01 sobre
gel polimerizado.

Pozos de muestra deficientes

(14
(4 Los pozos están (a) El gel de apilamiento (a) Retire el peine con
destrozados o resiste la cuidado o utilice un gel
rotos. extracción del de %T inferior
peine
Los pocillos contienen (b) El peine queda flojo (b) Reemplace el peine por
@I
una red suelta de uno más ajustado.

poliacrilamida.

(3 Tinción

(4 insatisfactoria La (a) El tinte está (a) Utilice una solución de

tinción ES débil. ligado tinte más concentrada,
eficientemente un tiempo de tinción
más prolongado o un
tinte más sensible.
La solución de tinte
debe contener un
disolvente orgánico
(p. ej., metanol),
que elimina
el SDS de la proteína
a la que se aplica
el tinte. entonces
puede bmd

(continúa)
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52 Herrero

Cuadro 1 (confznuado)

Falla Causa Remedv

(b) El stammg es desigual (b) La penetración o (b) Agite el gel durante el

decoloración estampación y el
del tinte es desestampado.
desigual Aumente el
tiempo de

(4 Bandas manchadas debido a que (c) El tinte se ha decoloración (c) Vuelva a teñir el
gel. Reduzca
decolorado y se ha eliminado de la proteína
el tiempo de
decoloración o utilice un
tinte que estampe
las proteínas de forma indeleble, por ejem
Proción Marina
MXRB (ver
Capítulo 14) (d)

(4 El gel está marcado (d) El tinte sólido está presente Asegúrese de que el tinte esté
tiñe de manera en la solución que completamente
no específica mediante la tinción. disuelto o filtre la
solución antes de usarla.
1t

limpiar o renovar
(4 Los contaminantes son (a) El aparato y/o las soluciones (4 CL

están madre aparentes ellos según sea necesario

contaminados (b) El material no protemático de
la muestra (p.

ej., ácido nucleico) (b) Pruebe con otro tinte que

se ha teñido (c) no manche los
Las muestras
se han contaminado contaminantes.
entre sí debido a
su

sobrecarga o su filtración (c) No llene demasiado los

lateral entre las pocillos de muestra.
capas de gel Asegure una buena
adherencia de las
capas de gel entre sí
lavando
minuciosamente el gel
polimerizado antes
de la aplicación de
capas posteriores.

(continuado)
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Geles SDS 53

Tabla 1 (continuación)
Falla Causa Recurso

(vi) Las bandas protem no (a) Electroforesis insuficiente (a) Prolongar la carrera
están
suficientemente resueltas

(b) El tamaño de poro (b) Modificar el %T

del gel separador y/o %C del gel separador
es incorrecto (a) Mantenga las

(vii) De vez en cuando (a) Las cantidades cargas aproximadamente de

se producen cargadas difieren tamaño similar cada
pequeños cambios mucho vez
en los dispositivos

electroforéticos de
las proteínas estándar.

(b) Los constituyentes del (b) Utilice un lote de un producto

gel varían en calidad químico durante el
de un lote mayor tiempo posible.
a otro o con Reemplazar
soluciones madre

edad y reactivos envejecidos

(viii) Bandas de de
distorsión

(4
Las bandas se (a) Las proteínas de la (a) Utilice disolvente de
han manchado muestra son muestra nuevo y/o
o rayado. msolubles o SDS adicional y
permanecen agente reductor
agregadas en el (especialmente
disolvente de para soluciones de
la muestra. muestra concentradas)
Hay materia más Filtre las soluciones madre
soluble o una burbuja antes de usarlas y
en el gel que ha elimine las burbujas
interferido con de las mezclas
la migración de gel.
de las bandas
de proteínas.

El tamaño de los poros Asegúrese de que las

del gel es soluciones de gel
consistente con m. estén bien mezcladas
y que el polimenza­
non no esté muy

(continúa)
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Herrero
54

Tabla 1 (continuación)

Falla Causa Remedio

rápido (para ralentizarlo,

reducir la cantidad
de persulfato
añadido)
(b)
04 La migración de proteínas Parte del gel ha Eliminar las burbujas
ha sido desigual sido musulado. adheridas al gel antes
(las bandas están de los electroforesis.
dobladas)
Fuga eléctrica Asegúrese de que el
los espaciadores laterales

están en su lugar

El enfriamiento del Mejore la mg de frío

gel es desigual del gel o reduzca la mg
(lo que permite de calor reduciendo
que una parte del el voltaje o la fuerza
gel funcione iónica de los
más rápido que tampones.
otra)
La banda y/o Repita los electroforesis,
Sus vecinos pero con cargas
están sobrecargados más pequeñas.
Deje espacios (es
decir, pocillos de
muestra sin carga)
entre muestras
vecinas muy
cargadas. Si es
necesario, modifique
el sistema [por
ejemplo, ver (vz)] y,
por lo tanto, los

movimientos
relativos de las
bandas, de modo
que no interfieran entre
sí.

La muestra bien Evite usar los pozos

utilizada estaba finales.
al final de la fila
de

(contwzu)
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Geles SDS 55

Tabla 1 (continuación)

Falla Causa Recurso

pocillos (el
“efecto del pozo
final”)
Las bandas no tienen (c) La muestra se cargó (c) Compruebe que los
(4
un tono uniforme. de manera fondos de los pocillos
ness desigual de muestra sean
rectos y
horizontales [ver (m)]

Si se dejan en su lugar para evitar que se sequen,

durante las proteínas disueltas en el disolvente de la muestra son estables
muchas semanas. Si se mantienen congeladas (a ­10 °C o menos), aunque la
congelación y descongelación repetidas provocan la degradación de las
proteínas.
7. El resultado Lo ideal es que los electroforesis en geles SDS tengan proteínas
en forma de bandas delgadas y rectas que se separan bien de otras bandas. Sin
embargo, puede que esto no sea siempre así. Algunas fallas y luego sus soluciones
se dan en la Tabla 1. Se muestran algunos ejemplos en la Fig. 2.

8. Tenga cuidado con los peligros de descarga eléctrica y de incendio, y del

monómero neurotóxico de acrilamida.

Referencias
1 Deyl, Z (1979) EZectrophoreszs A Survey of fechnques and applz­canons Part A*
Techntques Elesevrer, Amsterdam 2 Laemmh, Reino Unido (1970)
Cleavage of estructural proteínas durante el ensamblaje de la cabeza del bacteriófago
T4 Nature 227, 680­685

3 Studier, F. W (1973) Análisis de proteínas y ARN tempranos

del bacteriófago T7 en geles en placa J Mel Bzol 79, 237­248