CÓDIGO:

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA FDOC-090

VERSIÓN: 01
EMISIÓN:
02/03/2020
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO PÁGINA
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FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO: BACTERIOLOGÍA
PROGRAMA: BACTERIOLOGÍA
NOMBRE DEL CURSO: HEMATOLOGIA I
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: CONTEO DE ERITROCITOS

1. OBJETIVOS

 Conocer la técnica de conteo de glóbulos rojos en cámara de Neubauer.

 Calcular el número de glóbulos rojos por µL (1012 /L).
 Realizar e interpretar los resultados.

2. INTRODUCCIÓN

Los eritrocitos son las células más numerosas y se caracterizan por ser células anucleadas que
contienen una proteína especial denominada hemoglobina, la cual interviene en los procesos de
respiración tisular. La función principal de los eritrocitos es trasportar oxigeno de los pulmones a los
tejidos a los pulmones, el eritrocito tiene forma de disco bicóncavo para utilizar la máxima cantidad
posible de hemoglobina, ya que esta forma le proporciona un área de superficial mayor para que la
hemoglobina se combine con el oxígeno. Además, los glóbulos rojos cambian su forma cuando es
necesario para atravesar los capilares más pequeños.
Los recuentos manuales de eritrocitos se realizan en raras ocasiones debido tanto a la inexactitud del
recuento como a su dudosa necesidad. Están disponibles otros parámetros eritrocitarios manuales
más exactos como el micro hematocrito y la hemoglobina.
La cámara de neubauer o hematocitómetro es un instrumento de vidrio que se utiliza para realizar los
recuentos manuales de glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas. Presentan dos zonas rayadas
idénticas, separadas por un surco horizontal y limitadas a cada lado por un canal vertical; cada zona
es un cuadrado de 3 mm de lado, dividido en nueve cuadrados de 1mm de lado, por lo cual su área
es de 1 mm2 . Con la cámara se emplea una laminilla de cuarzo que presenta una superficie plana
muy bien lograda. La distancia entre la cara inferior de la laminilla o cubreobjetos y la superficie de la
cámara es de 0.1 mm. Los cuatro cuadrados grandes de las esquinas, utilizados para el recuento de
leucocitos, están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños, cada uno de los cuales tiene un
volumen de 0.00625 mm³ (0.25 x 0.25 x 0.1). El cuadrado central esta subdividido en 25 cuadros más
pequeños – separados entre sí por líneas dobles. Cada uno (A por ejemplo), mide 0.2 x 0.2 x 0.1, es
decir tiene 0.04 mm2 y 0.004 mm³ de área y volumen respectivamente. Nótese que 1/25 ésta
subdividido en 16 cuadrados pequeños para facilitar su recuento ;los cuadrados A-B-C-D-E, son
utilizados para el recuento de eritrocitos(sombreados en color color) (Anexo 1).

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3. PROCEDIMIENTO

+Mezcle cuidadosamente la sangre anticoagulada durante un minuto aproximadamente, con el fin de

obtener una mezcla homogénea.

+Realice la dilución 1:200, para un volumen final de 1000 µL

+Llene la cámara, sujetando la pipeta como si fuera un lápiz, controlando el flujo de líquido; la punta
de la pipeta se sitúa en el borde del cubre objeto, en cada uno de los extremos del hematocitómetro y
se llena la plataforma correspondiente. No se debe hacer burbujas y los surcos adyacentes no deben
contener líquidos.

+Deje reposar por 3 minutos para que las células se distribuyan.

+Utilice los objetivos de bajo poder 10x para localizar el cuadrado central y comprobar que las células
estén uniformemente distribuidas. Si no es así repita el procedimiento.

+Pase luego a objetivo de 40x y con la luz reducida bajando ligeramente el condensador, proceda a
contar células en 5 de los 5 cuadros pequeños situados en el gran cuadro central.

+Realice el recuento en el siguiente orden: Cuadro superior izquierdo, Cuadro superior derecho,
Cuadro inferior derecho, Cuadro central

+El recuento de los eritrocitos por mm3 se calcula teniendo en cuenta:

 Área contada.
 Profundidad de la cámara
 Dilución empleada
Calcular el número de eritrocitos por µL (x 1012 /L) de sangre con el uso de la fórmula de cálculo para
conteos de células del hematocitómetro. Las variaciones se dan con el factor de dilución y el factor de
volumen. Para el conteo de los eritrocitos el factor de dilución es 200 y el de volumen de 0.02 mm³
(superficie = 0.2 mm2; profundidad = 0.1 mm)
Calculo:
# De células contadas x factor de dilución
R = ______________________________________________
Profundidad de la cámara x superficie

Consideraciones estadísticas:
Cuando las células rojas se cuentan al azar por métodos manuales o técnicas automatizadas, la
variación en observaciones repetidas, teóricamente, sigue la distribución de Poisson. Una
característica de tal distribución es que la desviación estándar, en observaciones repetidas, es igual a
la raíz cuadrada del número medio de células contadas. Idealmente, es deseable contar un mayor
número de células para obtener un mayor grado de precisión. En técnicas automatizadas,

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obviamente, se posibilita el conteo de un número de células más elevado que en los métodos
manuales.
Si la diferencia entre 2 retículos es menor que las 2 desviaciones estándar, el recuento es preciso y se
procede a multiplicar por 10.000 la X obtenida.
Ejemplo:
Eritrocitos contados en el retículo A: 450
Eritrocitos contados en el retículo B: 430
X= (450+ 430) /2 = 440
DS = 440 = 20.9
2DS = 42
Diferencia del retículo A y el retículo B:
450 – 430 = 20; 20<42 que las 2 DS.
El recuento es aceptable y se debe multiplicar por 10.000 e informar el recuento de glóbulos rojos por
milímetro cúbico o por litro.

Valores de referencia
Hombres: 4.700.000 – 5.300.000/ mm³ (4.7 - 5.3 x 1012 / L)

Mujeres: 4.000.000 - 4.700.000 / mm³ (4.0 – 4.7 x 1012 / L)

4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS.

 Sangre total anticoagulada con EDTA.

 Cámara de neubauer
 Cubreobjetos o laminillas
 Pipetas automáticas
 Solución salina 0.85
 Agitador.
 Microscopio.

5. EQUIPOS DE PROTECCIÓN PERSONAL Y/O COLECTIVA.

 Bata de laboratorio antifluído manga larga

 Guantes
 Tapaboca
 Gorro
 Uso de zapatos cerrados
 Gafas de protección

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6. MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS.

TIPO DE RESIDUO DISPOSICIÓN FINAL

Elementos de protección personal Canecas rojas
 Guantes
 Tapabocas
 Gorro
 Jeringas
Elementos cortopunzantes Guardian

7. CUESTIONARIO O ACTIVIDADES COMPLEMENTARIAS.

PRELABORATORIO
1. Investigue 5 causas clínicas donde el conteo de los eritrocitos se encuentra por debajo de los valores
normales.
2. Enuncie 3 fármacos que pueden disminuir el conteo de los eritrocitos y justifique su respuesta
3. Diga 3 causas de origen técnico que alteran el conteo de eritrocitos.
4. Aplicando la fórmula para el cálculo de eritrocitos diga cuál es el factor final resultante de la formula

MATERIAL COMPLEMENTARIO
Revisar el enlace: https://www.youtube.com/watch?v=fNwtbLtaddA

8. BIBLIOGRAFÍA

BERRIO, Margarita; CORREA, María Cecilia; JIMÉNEZ, Marta Elena. El hemograma: análisis e
interpretación con las 3 generaciones. Medellín: Editorial Universidad de Antioquia, 2003.
CARO DE CORCHO, Nury et al. Atlas de Citología Hematológica. Medellín: Editorial Universidad de
Antioquia. 2002. 169 p.
COLOMBIA, INSTITUTO NACIONAL DE SALUD. Manual de garantía de calidad en química clínica y
hematología. 3 ed. Bogotá: Instituto Nacional de Salud, 1998. 140 p.
HECKNER, Fritz y FREUND, Mathias. Atlas de hematología. 9 ed. Madrid: Marbán Libros, 1997. 135 p.
HENRY, John Bernard. Diagnóstico y tratamiento clínicos por el laboratorio. 9 ed. Barcelona: Ediciones
Científicas y Técnicas, 1993. 1509 p.
MANASERO, Aura Rosa. Reporte Gráfico del cuadro hemático: automatización y relación con el FSP.
Bogotá: CEJA (centro editorial javeriano), 2000. 141 p.
MCDONALD George; PAUL, James y CRUICKSHANK, Bruce. Atlas de hematología. 5 ed. Madrid:
Editorial Médica Panamericana. 1993. 277 p.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología clínica. 2 ed. México: Editorial El Manual Moderno, 2000. 83 p.
PLATT, William. Atlas de hematología en color. 2 ed. Barcelona: Editorial JIMS. 1982. 645 p.
SANS-SABRAFEN, J. Hematología clínica. 3 ed. Barcelona: Mosby / Doyma Libros, 1995. 614 p.

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RODAK.Bernadette F Hematología Fundamentos y aplicaciones clínicas 2ªed. Editorial medica

Panamericana.
VELEZ A.Hernan y otros .Hepatología. Fundamentos de medicina. Sexta edición. Corporación para
investigaciones biológicas .Medellín Colombia .2004.
VELEZ A.Hernan y otros .Hepatología. Fundamentos de medicina. Quinta edición. .Corporación para
investigaciones biológicas. Medellín Colombia .1998
CORTES.B Armando. ABC DE LA MEDICINA TRANSFUSIONAL.Primera edición. Editorial Feriva
Ltda..Cali Colombia
SANS-SABRAFEN, J. Hematología clínica. 5 ed. Barcelona: Mosby / Doyma Libros, 2006.
WHO Classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues.4 ed. 2008

9. RECOMENDACIONES

 Asegúrese de que el diluente esté libre de sangre u otros contaminantes.

 Limpie la cámara y la laminilla de cuarzo con un trapo libre de hilas. El uso de etanol al 95%
facilita el proceso de limpieza.
 El conteo de las células rojas demorará más tiempo que el conteo de las células blancas, puesto
que el número es mucho mayor. El proceso debe hacerse tan rápidamente como sea posible
evitando que se seque la dilución lo que causaría inexactitud en el recuento final.
 La homogenización de la muestra para el recuento eritrocitario y demás mediciones del
hemograma, constituye un aspecto fundamental y es fuente de error constante en sesgos
positivos o negativos. El rango de error es de 20%.

10. ANEXOS

Anexo 1. Cámara de neubauer

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