INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
“Hidrolisis de RNA y DNA e identificación de bases púricas y pirimidinas por
cromatografía en capa fina”
Balbuena Nequis Héctor Emiliano
Chavarría Ramírez Lizeth
3FM2 Sección 2
INTRODUCCIÓN ANÁLISIS DE LA TÉCNICA
Los ácidos nucleicos son Reactivo Función
biomoléculas grandes que cumplen DNA pool Tomarlo como referencia para
funciones esenciales en todas las identificar las bases nitrogenadas a
células y virus. Una función comparación de DNA hidrolizado.
importante de los ácidos nucleicos DNA hidrolizado Identificar bases nitrogenadas.
implica el almacenamiento y la
RNA pool Tomarlo como referencia para
expresión de información genómica.
identificar las bases nitrogenadas a
El ácido desoxirribonucleico, o ADN,
codifica la información que las células
comparación de RNA hidrolizado.
necesitan para producir proteínas. Un
RNA hidrolizado Identificar bases nitrogenadas.
tipo relacionado de ácidos nucleicos, HCl 2N y 6N Romper enlaces por puentes de
denominado ácido ribonucleico hidrógeno de las bases nitrogenadas.
(ARN) se presenta en diferentes Adenina, citosina, guanina, timina. Bases nitrogenadas tomadas como
formas moleculares que cumplen referencias para saber cuáles estarán
funciones celulares múltiples, que presentes en la muestra de DNA.
incluyen la síntesis proteica. Adenina, guanina, uracilo y citosina. Bases nitrogenadas tomadas como
referencias para saber cuáles estarán
Algunas de las diferencias entre ADN presentes en la muestra de ARN.
y ARN ya las hemos mencionado, por
ejemplo, que el ADN es de cadena
doble y el ARN de cadena simple. RESULTADOS
Otras diferencias:

• El azúcar que lo componen es

diferente. En el ADN es la
desoxirribosa y en el ARN la
ribosa
• En las bases nitrogenadas del
ARN la Timina se sustituye
por Uracilo, siendo entonces
Adenina, Guanina, Citosina y
• El peso molecular del ARN es
menor que el del ADN
Imagen 1. Cromatograma de muestra DNA y ARN pool
OBJETIVOS
!"
Rf= !$
• Aislar DNA de célula vegetal
• Separar las bases Tabla 1. DNA POOL
nitrogenadas del DNA y RNA # de mancha Xa(cm) Xb(cm) Rf
por cromatografía en capa a partir del
fina a partir de hidrolizados
punto de
de los mismos.
aplicación
• Identificar las propiedades de 1 2.1 6.9 0.30
las bases nitrogenadas al
2 2.5 6.9 0.36
absorber la luz UV.
3 3 6.9 0.43
• Analizar las funciones del
4 5 6.9 0.72
DNA y RNA incluyendo sus
diferencias.
 Tabla 2. RNA POOL
Conclusión
# de mancha Xa(cm) Xb(cm) Rf
a partir del • El método de cromatografía al ser un método que nos permite
punto de separar los compuestos de una mezcla, por medio de la afinidad,
aplicación beneficiando a la separación de las bases nitrogenadas, de esta
1 1.7 6.9 0.24 manera se pudo determinar que bases nitrogenadas tienen en su
2 2.2 6.9 0.31 composición tanto el ARN como el DNA, usando su capacidad de
3 2.6 6.9 0.37 absorber luz UV del cromatograma. Por lo tanto, se concluye que
4 4.2 6.9 0.60 las bases nitrogenadas que forman al ADN son: adenina, timina,
guanina y citosina; mientras que las bases nitrogenadas que
componen al ARN son: Adenina, timina, guanina y uracilo.
Tabla 3. Bases nitrogenadas
# nombre de Xa(cm) Xb(cm) Rf Bibliografía
la base
Timina 5 6.9 0.72 Alberts, B., Johnson, A., et. al. (4ª Ed.). (2004). Biología
Adenina 3 6.9 0.43 molecular de la célula. España: Ediciones Omega.
Guanina 2.3 6.9 0.33
Citosina 2.1 6.9 0.30 Audesirk, T. y Audesirk, G. (8ª Ed.). (2008). Biología, La vida
Uracilo 4.2 6.9 0.60 en la Tierra. México: Prentice-Hall, Hispanoamericana.

Curtis, H., y Barnes, N. (6ª Ed.). (2001). Biología. España:

Tabla 4. Pool e hidrolizado
Editorial Médica Panamericana.
# nombre de Rf pool Rf
la base hidrolizado
DNA 0.75 -
Timina 0.73 0.72
Adenina 0.46 0.43
Guanina 0.42 0.33
Citosina 0.36 0.28
Uracilo 0.66 0.64
ARN pool 0-67 -

Imagen 2. Cromatografía de muestras de DNA y RNA hidrolizado

Discusión

Al realizar la poractica fueron tomadas muestras de ARN Y DNA

tanto pool como hidrolizado, así como muestras de las bases
nitrogenadas que los componen a cada uno de estos (adenina,
guanina, citosina, timina y uracilo), siendo colocadas en papel
cromatografico. Una vez que fueron metidas al solvente de
desarrollo y posteriormente a la cámara para que fueran leidas con
luz UV, debido a que las bases nitrógendas son capaces que
absorberla.