INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL

“Aislamiento de DNA de espinaca e hidrólisis de RNA y DNA e identificación de bases púricas y pirimídicas por cromatografía en capa fina ”

Acosta García Paula Zoe, Guerrero Reyes Leonardo” Grupo: 3IM3 Sección B
OBJETIVOS : también la Timina, y en el caso del RNA, se halla el
● Realizar el procedimiento para la purificación del Uracilo. Además de que la estructura del DNA se trata de
DNA vegetal. una doble hélice antiparalela. (Voet, D. & Voet, J.G. 2006).
● Realizar una cromatografía en capa fina de los Sabiendo esto, observando las manchas de DNA
hidrolizados de RNA y DNA para identificar las hidrolizado sabemos que se tiene una correspondencia
bases nitrogenadas con la luz ultravioleta. con las marcas de las bases nitrogenadas, lo que nos
● Calcular Rf del DNA de espina en la confirmó que, en efecto, se trató de DNA. Además ahora
cromatografía en capa fina. podemos observar que los valores de Rf son
● Calcular la pureza de acuerdo a la lectura de correspondientes con dichas correlaciones, así es como
absorbancia en una colilla de tabaco. Figura 1: Visualización del corrimiento en capa fina del para el DNA pool y el DNA hidrolizado, los patrones de las
RESULTADOS: DNA de espinaca. bases nitrogenadas coinciden de manera muy precisa.
Tabla 1."Rf del corrimiento en la cromatografía de las Por otra parte, observamos la curva tipo del tabaco
muestras hidrolizadas del vegetal". construida a partir de los espectros de absorbancia a 260
nm, por lo que, se realiza el cálculo de pureza y se obtiene
Muestra Rf
que esta es menor a 1.8. Con esto, nos damos cuenta de
que nuestra muestra fue contaminada con proteínas y
0.6666
DNA sales, lo cual no es óptimo para el resultado esperado.
CONCLUSIONES:
0.5972
● La revelación de la cromatografía se realizó a
0.4652 260 nm y se observaron manchas oscuras.
● El valor de pureza de tabaco es de 1.2164, lo
RNA 0.5555 cual significa que nuestra muestra fue
contaminada.
0.6389 REFERENCIAS:
Figura 2: Gráfico “Absorbancia en nm vs Lectura en ● Aryal, S. (2019). Deoxyribonuclease (DNase)
Alanina 0.5139 espectrofotómetro” Test – Principle, Procedure, Uses and
Interpretation. MicrobiologyInfo. Recuperado de:
Timina 0.7777 Cálculo de pureza de muestra de tabaco. https://microbiologyinfo.com/deoxyribonuclease-

Guanina 0.5972
A 260nm 0.697 dnase-test/
Pureza: = =1.2164 ● Campbell M.K., Farrel S.O., “Bioquímica”,
A 280nm 0.573 Thomson Editores, 4a. Edición pp.370-372,
Citocina 0.6805 DISCUSIÓN: (2004).
El DNA y RNA se diferencian entre sí mediante sus anillos
Uracilo 0.75 centrales, así como las bases nitrogenadas que se
presentan en estos. En ambos casos se halla Adenina,
Citosina y Guanina, pero en el caso del DNA se halla