Cuestionario Previo

1. ¿Cómo se determina el espectro de absorción una solución colorida?

Los espectros de absorción se miden mediante un instrumento denominado
espectrómetro. El espectro de absorción, es decir, la luz absorbida en función de
la longitud de onda, constituye una verdadera seña de identidad de cada
sustancia o molécula.
Cuando un rayo de Iuz pasa a través de una solución colorida, parte de esta
radiación es absorbida y Ia restante se refleja o se transmite, de acuerdo a sus
características fisico-quimicas, a este fenómeno se Ie denomina absorción
diferencial y constituye parte fundamental de la espectrofotometría, ya que en
ella es muy importante el tipo y la cantidad de energia absorbida.

2. ¿Cómo se selecciona la longitud de onda apropiada en un espectro para la

aplicación en la determinación de concentraciones por espectrofotometría?
Las mediciones de absorbancia se hacen en la zona de longitudes de onda
donde se espera que absorba la sustancia problema. Si se trata de
sustancias coloreadas, las mediciones se realizan en la zona visible del
espectro electromagnético (380 a 800nm). En el caso de sustancias no
coloreadas, las mediciones se realizan en la región ultravioleta del espectro
electromagnético (200 a 380nm).
En el espectro se determina la longitud de onda óptima de absorción de un
analito. Éste se obtiene midiendo la absorbancia de disoluciones que
contiene al analito a diferentes longitudes de onda. Posteriormente se
representa la absorbancia frente a la longitud de onda y se obtiene la
longitud de onda de máxima absortividad, que corresponde con el punto
máximo de absorción del analito.

3. ¿Qué establece la ley de Lambert-Beer?

(
! = − %&' =ℇ·%·,
()
Donde:
A es la absorbancia (o absorbencia)
( es la intensidad de la luz una vez ha atravesado el medio
() es la intensidad de la luz incidente
ℇ es el coeficiente de absorción o la absorbancia molar de la sustancia
% es la distancia que la luz atraviesa por el cuerpo
, es la concentración de sustancia absorbente en el medio

Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de

longitud de onda fija) y concentración de un cromóforo en solución. La
absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración,
 es decir, la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la
concentración en la solución; también depende de la distancia que recorre la
luz por la solución, a igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz
por la muestra más moléculas se encontrará; y por último, depende de ε, una
constante de proporcionalidad.
La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c
altos, ε varía con la concentración, debido a fenómenos de dispersión de la luz,
agregación de moléculas, cambios del medio, etc.
La aplicación obvia de la ley es el uso del colorimétrico para determinar la
concentración de una gran variedad de moléculas que absorben luz ( p.ej.
carotenos, clorofila, hemoglobina, etc).

4. ¿Qué es, para qué sirve y cómo se construye una curva patrón?
Uno de los métodos más utilizados para determinar la concentración de una
muestra problema, es el método de la curva de calibración. Esta curva de
calibración es una gráfica que relaciona la concentración de al menos cinco
soluciones de estándar de concentraciones conocidas, con la absorbancia de
cada uno de ellos a la longitud de onda máxima (λ max).
Una vez obtenida la gráfica se determina la función matemática que presenta
dicha recta a través del tratamiento estadístico de regresión de los mínimos
cuadrados, la cual relaciona la absorbancia y la concentración de un analito.
La siguiente ecuación matemática corresponde a dicha función:
A=mc+n
Luego se mide la absorbancia de la solución problema y se interpola su valor en
la gráfica o se reemplaza en la ecuación, para obtener el valor de
concentración del analito.
Al hacer la curva de calibración, se debe emplear la longitud de onda de
máxima absorbancia (λmax.), para obtener una recta con la máxima pendiente
y así tener mayor sensibilidad y precisión al hacer las mediciones.

Curva de Calibración Interpolación

5. ¿Explica porque se requiere adicionar KI a la mezcla I2/agua?

Se adiciona KI porque el Yodo es poco soluble.
Procedimiento Experimental

Inicio

Procedimiento Curva Patrón

Encender el Preparar soluciones de

espectrofotómetro y distinta
esperar 15 minutos concentración, a
partir de la solución de
referencia (3 −
Seleccionar la longitud 4( (0.0027 − 0.2)
de onda mas baja (se Ver tabla 2
sugiere 330nm)

Con el valor de la
Introducir la celda con el blanco
longitud de onda
(disolvente con un volumen hasta la marca
seleccionada a partir
indicada; nunca llena) en el porta-celda
del espectro de
absorción, realizar la
Oprime la tecla de calibración en calibración con el
Absorbancia (0A/100%T) y esperar hasta blanco
que se ponga en ceros la absorbancia, a
continuación, sacar de la celda
Determinar la
absorbancia para
cada solución de la
Introducir la celda con la solución de yodo
serie tipo. Registrar las
(a una concentración de 2.1012 M, para lo
lecturas de
cual se tiene que hacer una dilución de
absorbancia en la
1:10. Registrar el valor de absorbancia a
tabla 2
una longitud de onda seleccionada (nm)

Incrementar en 10nm la longitud de onda y

repetir el procedimiento a partir del punto
3. Realizar lecturas hasta llegar a 510nm.
Registrar datos de absorbancia en tabla 1
Fichas de Seguridad de Reactivos

Reactivo Rombo de Seguridad Tratamiento Riesgo

Si se ingiere, induzca el
Eliminar el vómito inmediatamente.
recipiente en Dar a beber grandes
una planta de cantidades de
0 tratamiento de agua para diluir. En caso de
residuos irritación cutánea: Lavar
KI 1 0 aprobada, con inmediatamente durante 15
las minutos, En caso de
características contacto con los ojos:
del producto en Enjuagar inmediatamente
el momento de durante 15 minutos. En caso
su eliminación. de inhalación: retirarse al
aire fresco.
Eliminar el Si se ingiere, Llamar a un
recipiente en médico. En caso de
una planta de irritación cutánea: Lavar
tratamiento de inmediatamente durante 15
1 residuos minutos. En caso de
(3 2 aprobada, con contacto con los ojos:
0
las Enjuagar inmediatamente
características durante 15 minutos. En caso
del producto en de inhalación: retirarse al
el momento de aire fresco. Consultar a un
su eliminación. médico.

0
No requiere No presenta riesgos para la
93 : 0 0 tratamiento para salud ni para el medio
sus residuos ambiente; evitar ingerir.

Hoja de seguridad:
Yoduro de Potasio: Reactivos Meyer. (2018, 10 enero). Yoduro de potasio. Recuperado 15 de
Octubre de 2022, de http://reactivosmeyer.com.mx/datos/pdf/materias/hds_6630.pdf
Yodo: Reactivos Meyer. (2017, 28 noviembre). Yodo. Recuperado 15 de Octubre de 2022, de
http://reactivosmeyer.com.mx/datos/pdf/materias/hds_7165.pdf
Referencias
• Canela., Erick. (2017, 7 marzo). Técnicas colorimétricas. Recuperado 15 de Octubre de
2022, de
http://revista.cleu.edu.mx/new/descargas/1703/articulos/Articulo08_Tecnicas_colorime
tricas.pdf
• Guzmán, Díaz, David, et al. Introducción a la técnica Instrumental, Instituto Politécnico
Nacional, 2010. ProQuest Ebook Central,
http://ebookcentral.proquest.com/lib/bibliodgbsp/detail.action?doc
• Montes., H. (2018, julio). VALORACIONES FOTOMÉTRICAS. Recuperado 15 de Octubre de
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https://idus.us.es/bitstream/handle/11441/82151/TFG_Helena.%20FINAL%20PDF.pdf?seq
uence=1&isAllowed=y
• U-Cursos. (2010). INTRODUCCION TEORICA FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRÍA.
Recuperado 15 de Octubre de 2022, de
file:///Users/dannagisellepartidapena/Downloads/Guia_TP_2_Quimica_II_2010.pdf
• UPO. (2021, 18 marzo). PRÁCTICA 4. ESPECTROFOTOMETRÍA. Recuperado 15 de Octubre
de 2022, de
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica4.pdf