UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE ZACATECAS

“FRANCISCO GARCÍA SALINAS”

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LICENCIATURA EN BIOLOGÍA

MODELOS EXPERIMENTALES

DOCENTE:
DRA. GLORIA GUILLERMINA GUERRERO MANRÍQUEZ

EQUIPO:
GONZÁLEZ HERNÁNDEZ JORGE
RECENDEZ ORTIZ ALEXANDRA MELANIE
RODRÍGUEZ GARCÍA HAZEL ALEXEI JOSELYN

7º B
 Type II Secretion Substrates of Legionella
pneumophila Translocate Out of the
Pathogen-Occupied Vacuole via a
Semipermeable Membrane
Los sustratos de secreción de tipo II de Legionella pneumophila se trasladan fuera
de la vacuola ocupada por el patógeno a través de una membrana semipermeable
 Importancia
● La infección de macrófagos y amebas desempeña un papel fundamental en
la patogénesis de L. pneumophila.
● El sistema T2S de L. pneumophila contribuye en gran medida a la infección
intracelular.
● Se desconoce la localización de los sustratos de T2S dentro de la célula
huésped infectada.
● Este artículo presenta la primera evidencia de un sustrato T2S de L.
pneumophila en el citosol de la célula huésped.
● La LCV no está completamente intacta, sino que es semipermeable en los
macrófagos humanos, pero no en los murinos.
 Importancia

● Hipótesis: otros sustratos de T2S y los contenidos del lumen de la LCV

pueden escapar al citosol de la célula huésped. Así, estos sustratos pueden
representar una batería de efectores no identificados previamente que pueden
interactuar con factores del huésped y contribuir a la infección intracelular
por L. pneumophila.
 Introducción

● Legionella pneumophila es una bacteria

intracelular facultativa Gram negativa.
● Prospera en entornos de agua dulce donde
sobrevive libre, siendo parte de
biopelículas multiespecíficas.
● Principal nicho de replicación ambiental:
las amebas.
Infecciones por Legionella pneumophila en amebas ambientales y macrófagos humanos (A)
Micrografías electrónicas de macrófagos U937 y (B) A. polyphaga infectados por L. pneumophila
(cepa AA100) a las 24 h (Rivera-Pérez et. al., 2017).
 Introducción
● Los seres humanos se infectan con L. pneumophila tras la inhalación de
aerosoles contaminados producidos en sistemas de agua artificiales.
● Dentro del pulmón infectado, la bacteria se replica en los macrófagos
alveolares.
● L. pneumophila causa una neumonía potencialmente mortal conocida como
enfermedad del legionario.
● En Estados Unidos se producen 18.000 casos al año.
● Informes recientes señalan un aumento de la incidencia de la enfermedad,
especialmente entre los inmunodeprimidos.
Las fuentes de transmisión, el ciclo de vida dentro de los sistemas de agua y el macrófago humano, las
herramientas de diagnóstico y el tratamiento antibiótico para la neumonía por Legionella (Teng et. al.,
2021).
 Introducción
● Tras entrar en las células del huésped, L. pneumophila evita la fusión con los
lisosomas degradativos y remodela su fagosoma en un nicho replicativo
conocido como vacuola que contiene Legionella (LCV).
● Las vesículas lisas, el retículo endoplásmico (RE) rugoso y las mitocondrias
son reclutadas en la LCV a partir de las 2 horas posteriores a la infección
(p.i.).
● Poco después, las bacterias comienzan a replicarse dentro de la LCV y
acaban aumentando su número entre 50 y 100 veces.
● La lisis de los macrófagos es evidente después de 24 horas, momento en el
que las legionelas escapan e inician nuevas rondas de infección.
 Introducción
● El sistema de secreción Dot/Icm tipo IV (T4S) transporta 320 efectores
desde el citosol bacteriano directamente al citosol del hospedador a través de
un aparato que se extiende a través de la pared celular bacteriana y de la
membrana de la LCV (LCVM).
● Estos efectores contribuyen a la formación de las LCV altamente
especializadas.
● Los mutantes de T4S que no pueden liberar efectores no crecen
intracelularmente.
● La secreción de tipo II (T2S) tiene un papel importante en la patogénesis de
L. pneumophila.
 Introducción

● La T2S es un proceso de dos pasos:

1. Las proteínas destinadas a la secreción atraviesan primero la membrana
interna bacteriana y llegan al periplasma a través de la vía Sec o la vía Tat.
2. Las proteínas son reconocidas por el aparato T2S y salen de la célula a través
de un poro específico de la membrana externa.
● Los sustratos de T2S son más de 25 e incluyen enzimas degradativas como
proteasas, lipasas, una quitinasa y proteínas.
 Introducción
● A diferencia de los efectores T4S, se desconoce la localización de los
sustratos T2S durante la infección intracelular.
● El LCV es un compartimento cerrado desde el que sólo los efectores T4S se
translocan al citosol de la célula huésped.
● Observaciones recientes sugieren que los sustratos de T2S podrían no estar
restringidos al LCV.
● En primer lugar, los mutantes de T2S no son capaces de retener a Rab1B en
la cara citoplasmática de la LCV, lo que sugiere que un sustrato de T2S
podría salir de la LCV e implicar a las GTPasas citosólicas del huésped.
 Introducción
● En segundo lugar, los mismos mutantes de T2S desencadenan niveles
elevados de citoquinas a través de las vías de señalización MyD88 y Toll-
like receptor 2 en macrófagos humanos infectados.
● Esto sugiere que otros sustratos de T2S podrían translocarse y amortiguar los
sensores citosólicos de la inmunidad innata.
● Los sustratos ProA y ChiA, de hecho, se translocan al citosol de los
macrófagos y se asocian con la cara citoplasmática del LCVM.
● Este proceso se produce en dos pasos en los que los sustratos son primero
entregados en el lumen de la LCV a través del sistema T2S y luego acceden
al citosol del macrófago a través de una membrana vacuolar semipermeable.
 Resultados
● ProA está presente en la periferia de la LCV.
▪ ProA es una metaloproteasa de zinc de 38 kDa que media el daño en modelos
animales de neumonía y tiene actividad citotóxica contra una variedad de células
de cultivo de tejidos.
● ProA se localiza en la cara citoplasmática de la LCVM.
● ProA se localiza en la LCVM a partir de las 6 horas posteriores a la
inoculación.
● La translocación y la localización de ProA en la LCVM se conservan en los
macrófagos y amebas humanas y en otras cepas de L. pneumophila.
● La translocación de ProA al citosol de los macrófagos depende de la
secreción de tipo II.
 Resultados
● El sustrato de secreción de tipo II ChiA también se localiza en la cara
citoplasmática de la LCVM.
▪ ChiA es una enzima de 81 kDa que degrada la quitina, un polímero insoluble que
se encuentra en las paredes celulares del moho, los hongos y las algas.
● La galectina se localiza en el LCV de los macrófagos humanos a partir de las
6 horas posteriores a la inoculación.
▪ La galectina-3 es una proteína eucariótica cuya localización cambia en respuesta
a la presencia de membranas dañadas del huésped.
 Discusión

o Los sustratos de T2S ProA y ChiA se translocan fuera de la LCV y en el

citosol del macrófago, donde aparecen en un patrón de anillo alrededor de la
LCVM.
o Los sustratos de la T2S acceden al citosol del huésped a través de una LCV
permeable.
o Las observaciones que indican que la translocación y la permeabilidad de la
membrana se producen en los macrófagos humanos, pero no en los murinos,
sugieren que hay más diferencias durante la infección intracelular de estos
dos huéspedes de las que se apreciaban anteriormente
 Bibliografía
o Truchan, H. K., H. D. Christman, R. C. White, N. S. Rutledge y N. P.
Cianciottoa. 2017. Type II Secretion Substrates of Legionella pneumophila
Translocate Out of the Pathogen-Occupied Vacuole via a Semipermeable
Membrane. mBio 8(3): 1-18.
o Rivera-Pérez, J. I, A. A. González y G. A. Toranzos. 2017. From
evolutionary advantage to disease agents: forensic reevaluation of host-
microbe interactions and pathogenicity. Microbiology Spectrum 5(1): 1-26.
o Teng, T., W. Y. Tee, T. M. Khan, L. C. Ming y V. Letchumanan. 2021.
Legionella pneumophila: The causative agent of Legionnaires’ disease.
Progress In Microbes and Molecular Biology 4:1-12.
Gracias por su
atención