EXPOSICIÓN FISH

1. ¿Qué es? ¿cómo se realiza?¿para qué se realiza?

¿Qué es?
La hibridación fluorescente in situ (FISH) es una técnica de laboratorio que
se usa para detectar y localizar una secuencia de ADN específica en un
cromosoma. (1) Hibridación fluorescente in situ (FISH) (genome.gov)
¿cómo se realiza?

TERMINOS CLAVES:
- DISOMIA: ¿Qué es impronta genómica y disomía uniparental?:
MedlinePlus Genetics
- DPG: El diagnóstico de preimplantación genética.
Perspectivas científicas y dilemas bioéticos
(scielo.org.co)
- polisomia: ¿Qué significa la palabra polisomia ? - BioDic
- kb, mb: Resumen de la evolución de las técnicas de citogenética y
genética molecular para la identificación de las alteraciones
genéticas del desarrollo embrionario | Medicina de Familia.
SEMERGEN (elsevier.es)
- sonda: 0123-9015-rcc-23-01-3.pdf (scielo.org.co)
-
FISH: monogenéticas, aneuploidias, mosaico cromosomal
y diagnóstico del sexo. El diagnóstico de preimplantación
genética. Perspectivas científicas y dilemas bioéticos
(scielo.org.co)

La FISH es una técnica basada en la estructura de doble cadena del

ADN, concretamente en el hecho de que las bases nitrogenadas del
ADN son complementarias: la adenina se une preferentemente con la
timina y la citosina con la guanina. La técnica de FISH consiste en
diseñar un fragmento de ADN, denominado sonda, que es
complementario a una región candidata en el genoma objeto de estudio.
Esta sonda se marca con una sustancia fluorescente (un fluorocromo) y
se añade a la preparación de células que se quieren analizar. Mediante
calor el ADN se desnaturaliza, separándose las dos cadenas, y la
secuencia génica en el ADN en estudio que es complementaria a la de
la sonda fluorescente se une (híbrida) con esta y queda marcada con
una señal fluorescente que puede visualizarse en un microscopio de
fluorescencia. La resolución de las técnicas de citogenética molecular se
define como el tamaño mínimo que debe tener una alteración para ser
detectada y se mide en nucleótidos o pares de bases.
https://www.elsevier.es/es-revista-medicina-familia-semergen-40-articulo
-resumen-evolucion-tecnicas-citogenetica-genetica-S113835931000319
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La técnica de FISH utiliza fragmentos de secuencias de ADN, sonda marcada con fluorescencia,
con el fin de localizar una secuencia complementaria en el ADN de la muestra. Existen varios
tipos de sondas, cada una con una función específica según lo que se desea detectar. Se
describen las sondas centroméricas (que marcan toda la región del centrómero), las sondas de
pintado cromosómico (constituidas por una
librería de sondas que abarcan todo el cromosoma) y las sondas de secuencia única (locus
específico) que marcan regiones cromosómicas muy concretas. (2)
¿para qué se utiliza?
Esta técnica presenta alta sensibilidad y especificidad y posibilita el
análisis de células, tanto en metafase como en interfase. Esta última
ventaja supera una limitación importante de la citogenética convencional,
la necesidad de obtener las células en metafase. Además, permite el
análisis de un gran número de células de forma rápida y la identificación de
cambios estructurales más sutiles por debajo de la resolución de la
citogenética convencional.

2. Comparación con la tradicional

(1)
- Los resultados para La citogenética convencional se demoran
aproximadamente en 1 o 2 semanas, mientras que en el método fish los
resultados están en 2 días
- Precio cariotipo: $336.000
- Precio fish: 200-300 euros 830k-1´200k
- Cariotipo: requiere células en división
- Fish: no requiere células en división
- Cariotipo: permite detectar alteraciones de todo el genoma
- Fish: solo aporta información de la sonda que se utiliza
- Cada LOCUS o regiones tienen colores distintos permitiendo una mejor
visualización
- Esta técnica presenta alta sensibilidad y especificidad y posibilita el
análisis de células, tanto en metafase como en interfase. Esta última
ventaja supera una limitación importante de la citogenética
convencioresolución de la citogenética convencionalnal, la necesidad de
obtener las células en metafase
ARTÍCULO DE SCIELO: Múltiple FISH y múltiple BAND: técnicas de
citogenética molecular en cinco casos (scielo.cl)
 cromosoma anormal
Figura 4. Caso 4-3854 Cariotipo parcial: cromosoma 7 normal, dup 7p15 Múltiple BAND cromosoma 7.
Se aprecia que el cromosoma con la duplicación (derecha), tiene repetidas las bandas verde y roja en su
brazo corto.
(CROMOSOMA 7, BRAZO CORTO REGIÓN 1, BANDA 5)

● mayor diferencia de FISH con el cariotipo convencional

● ¿cómo se realiza? (mencionar un paso):
● La hibridación fluorescente in situ (FISH) es una técnica de
laboratorio que se usa para detectar y localizar una secuencia de
ARN específica en un cromosoma.
¿VERDADERO O FALSO?

BIBLIOGRAFÍA

1. Hibridación fluorescente in situ (FISH) [Internet]. Genome.gov. [citado el 17

de septiembre de 2023]. Disponible en:
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Hibridacion-fluorescente-in-situ
2. Lavaut Sánchez K, Hernández Aguilar N, Ruiz Moleón V. Hibridación in situ
fluorescente: herramienta en el diagnóstico de las hemopatías malignas. Rev
Cuba Hematol Immunol Hemoter [Internet]. 2016;32(1):99–109. Available
from:
https://search.ebscohost.com/login.aspx?direct=true&db=lth&AN=134769918
&lang=es&site=ehost-live
3. Méndez Rosado LA, Nodarse Rodríguez A, Morales Rodríguez E, Barrios
Martínez A, Soriano Torres M, Castelvi López A. Diagnóstico prenatal
citogenético mediante la hibridación in situ con fluorescencia. Rev Cuba
Obstet Ginecol [Internet]. 2012 [citado el 13 de septiembre de
2023];38(1):1–10. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0138-600X2012000100
001&lang=es
Hibridación del ADN
Complementariedad de la bases
microscopio fluorescencia
las secuencias que no se detecta
dos secuencia: madre y padre
limitante: requiere que se oriente al laboratorio por parte del médico
tamaño del error