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BALOTARIO PARA SEGUNDO EXAMEN SEGUNDA ESPECIALIDAD EN

ANALISIS CLINICOS Y BIOLOGICOS


1. Diferencias entre citogentica convencional y citogentica
molecular
CONVENCIONAL
MOLECULAR
-

Anlisis visual del juego


completo de cromosomas
obtenidos en metafase tras
un cultivo celular

Usa tinciones de Bandeo


cromosmicos

analizar todos los cromosomas en


una sola prueba pero queda
limitada por la resolucin del
bandeo cromosmico:

no detectando alteraciones
inferiores a 10Mb

Anlisis mediante sondas


fluorescentes (FISH) de zonas o
regiones concretas de uno o varios
cromosomas ( INTERFASE) y
AUTOMATIZADO

Usa Fluorocromos

Facilita su anlisis sobre un mayor


nmero de clulas

Detectando alteraciones inferiores a


10Mb( 1Mb -100kb )

Sirven para resolver anomalas


complejas y/o cromosomas
marcador, no identificables por las
tcnicas citogenticas
convencionales.

La citogentica convencional consiste en el anlisis visual del juego completo de


cromosomas obtenidos en metafase tras un cultivo celular (requiere clulas en divisin).
Permite analizar todos los cromosomas en una sola prueba pero queda limitada por la
resolucin del bandeo cromosmico: no detectando alteraciones inferiores a 10Mb. Con
el cariotipo de alta resolucin es posible detectar alteraciones de tamao superior a 510Mb.
La citogentica molecular consiste en el anlisis mediante sondas fluorescentes
(FISH) de zonas o regiones concretas de uno o varios cromosomas. Su principal ventaja
es que puede aplicarse sobre clulas en interfase (no requiere clulas en divisin) y
facilita su anlisis sobre un mayor nmero de clulas. Segn el diseo de la sonda de
hibridacin especfica, la FISH puede ser: centromrica, de locus especfico,
subtelomrica, de brazos cortos y/o largos, de pintado cromosmico. Existen unas
tcnicas de FISH ms complejas que por combinacin de sondas marcadas con
diferentes fluorocromos se combinan permitiendo identificar cada cromosoma de un
color distinto (Cariotipo espectral) o bien cada banda de un solo cromosoma
(Multibanding). Estas tcnicas sirven para resolver anomalas complejas y/o cromosomas
marcador, no identificables por las tcnicas citogenticas convencionales.

2. Formas de los cromosomas segn ubicacin de centrmero


Segn el diseo de la sonda de hibridacin especfica, la FISH puede ser:
a- centromrica, de locus especfico,
b-

subtelomrica, de brazos cortos y/o largos, de pintado cromosmico. Existen unas


tcnicas de FISH ms complejas que por combinacin de sondas marcadas con
diferentes fluorocromos se combinan permitiendo identificar cada cromosoma de un
color distinto (Cariotipo espectral) o bien cada banda de un solo cromosoma
(Multibanding).

c-

Metacntrico[editar]
Un cromosoma metacntrico es un cromosoma cuyo centrmero se encuentra en
la mitad del cromosoma, dando lugar a brazos de igual longitud.

d-

Submetacntrico[editar]
Un cromosoma submetacntrico es un cromosoma en el cual el centrmero se
ubica de tal manera que un brazo es ligeramente ms corto que el otro.
.

e-

Acrocntrico[editar]
Un cromosoma acrocntrico es aquel cromosoma en el que el centrmero se
encuentra ms cercano a uno de los telmeros, dando como resultado un brazo
muy corto (p) y el otro largo (q).

f-

Subtelocntrico[editar]
Aun cuando el concepto es ampliamente aceptado y distribuido entre la comunidad
cientfica,5 realmente, un cromosoma telocntrico como tal no existe.
Supuestamente en este tipo de cromosomas el centrmero est localizado en un
extremo del mismo, pero la regin telocntrica no permite que molecularmente
haya otra estructura finalizando al cromosoma. De hecho, el acortamiento del
telomero o su ausencia total causa inestabilidad en los cromosomas y
consecuentes Translocacin robertsoniana.6 Por tanto, el trmino telocntrico es
incorrecto y debe considerarse el trmino subtelocntrico, el cual implica que el
telmero se ubica al final as no sea visible y que el centrmero esta despus
invariablemente.

3. Tipos de bandeo de cromosomas

4. Definicin de translocacin cromosmica


Es un tipo de anomala cromosmica estructural. Implica un intercambio
entre dos fragmentos de dos cromosomas. Este intercambio puede ser
de dos tipos:

Translocacin equilibrada: no se produce ni aumento ni prdida de


material cromosmico. Fenotpicamente normales pero pueden tener
problemas de esterilidad.

Translocacin desequilibrada: se produce aumento o prdida de material


cromosmico. Este tipo de translocaciones si que tiene efectos
fenotpicos en el individuo.

5. Ventajas en el uso del cariotipador en citogentica


-

Sistema completamente automtico, que permite obtener su cariotipo a partir de la captura de la


metafase, con una buena morfologa y calidad en las bandas de los cromosomas.

Automticamente clasifica los cromosomas.

Tambin dispone de potentes herramientas informticas para la separacin de los cromosomas.

6. La era de la citogentica molecular


Se define como el uso simultneo de al menos tres ligandos diferentes o
fluorocromos para el marcaje especfico de ADN.El primer experimento
de mFISH fue realizado en 1989 por Nederlof et al. observando 3
regiones de ADN de colores azul, rojo y verde.
Whole chromosome painting mFISH probe sets

M-FISH (= Multiplex-FISH) (Speicher et al.,1996);

SKY (= spectral karyotyping) (Schrck et al.,1996);

multicolor FISH (Senger et al., 1998; Tanke et al., 1998);

COBRA-FISH (= COmbined Binary Ratio labelling-FISH) (Tanke et


al., 1999); or

24-color-FISH (Azofeifa et al., 2000).

7. Tecnicas utilizadas en el diagnstico prenatal

8. Aplicaciones del diagnstico gentico prenatal

9. Diferencias entre cariotipo convencional y microarreglos


CONVENCIONAL
MICROARREGLOS

10.
Uso de las plataformas de biologa molecular y
citogentica segn tamao genmico
BAC array CGH ( 100 Mb- 100 kb)
Karipotyping (10 Mb -100 MB)
FISH ( 1 Mb 100 Kb)
MLPA /RT-PCR ( 100 Kb 10 Bp )
Sequencing ( 10 Kb 1 Bp )

11.

Definicion de diagnostico prenatal no invasivo

Prueba que consiste en la deteccin de ADN fetal en sangre materna que ofrece una
informacin de gran fiabilidad sobre el riesgo de anomalas cromosmicas. Este test se
basa en que durante el embarazo, parte del ADN fetal se encuentra en la sangre materna.

12.
Plataformas utlizadas en el diagnostico prenatal no
invasivo
a.- secuenciacin paralela por disparo masivo (massively parallel
shotgun. (MPSS)
b.- Secuenciacion de Nueva Generacio (NGS).
A diferencia de los sistemas de secuenciacin tradicionales, estas plataformas son capaces de
generar paralelamente, y de forma masiva, millones de fragmentos de ADN en un nico proceso de
secuenciacin en un tiempo rcord y por coste cada vez ms reducido

13.

Principio de cell-free DNA analysis en plasma materna

Se basa en que en la sangre materna, a las pocas semanas de gestacin


(5-7), se puede encontrar ADN FETAL LIBRE DE CELULAS ( a partir de los
trofoblastos 13 % ADN FETAL y 87 % ADN MATERNO, POR LO QUE CON
UNA MUESTRA DE SANGRE MATERNA y empleando LA PLATAFORMA
MPSS( SECUENCIA PARALELA POR DISPARO MASIVO) Y POSTERIOR
ALINEAMIENTO DE LOS READS , SE PODRA ESTABLECER LA
REPRESENTACION CROMOSICA RELATIVA, IDENTIFICANDO POSIBLE DAO
O ALTERACION CROMOSOMICO
14.
Beneficios del secuenciamiento del exoma completo en
diagnstico prenatal
-

Secuencia solo ADN CODIFICANTE

Ms barata que secuenciar un genoma completo

Constituye una prueba nica y similar para todos los pacientes, y que no necesitara ser
actualizada cada vez que se descubriera un nuevo gen como causa de una enfermedad concreta.

Aproximacin sin sesgos al diagnstico gentico que podra revelar muchos casos en los que el
fenotipo no se corresponde al fenotipo clnico estndar asociado a la enfermedad

15.

Cual es el futuro del diagnostico prenatal

El futuro del diagnostico prenatal es el uso de mtodos no invasivos ,


puntualmente SECUENCIACION DE ADN FETAL LIBRE DE CELULAS,
PERMITIENDO EN LA CONSULTORIA GENETICA, DISCRIMINAR ENTRE
TERMINAR O CONTINUAR EL EMBARAZO , PREPARARSE PREPARARSE
PARA LAS AFECCIONES S DEL INFANTE,NUEVOS SERVICIOS ,ETC
16.
Definicion de protooncogenes y tipos de anormalidades
moleculares

Los protooncogenes son genes cuyos productos promueven el crecimiento y la


divisin de la clula. Codifican factores de transcripcin que estimulan la expresin de
otros genes( ONCOGENES), molculas de transduccin de seales que estimulan la
divisin celular y reguladores del ciclo celular que hacen que la clula progrese a
travs de este ciclo

17.

Alteraciones del ADN en cncer

A.- CAMBIOS EN LA SECUENCIA DE ADN /( Mutacion en GENE


TGBF2)
B.- TRANSLOCACION CROMOSOMAL ( Cromosoma 1-17)
C.- REARREGLOS /CAMBIOS EN EL CRECIMIENTO
CROMOSOMAL( perdida del cromosoma 3 y arreglos en el 12 =
cncer de COLON)
D.- AMPLIFICACION DE GENES ( N-myc Cromosoma 1)

18.

Genes hereditarios y cncer

HNPCC (Cncer colonrectal hereditario no asociado a poliposis

19.

Resumen del articulo de exposicion.

ARTICULO :
Genotipificacion del Virus Papiloma Humano de Alto Riesgo en pacientes
embarazadas
Siendo el VPH la ETS mas frecuente a nivel mundial, y siendo el VPH-AR factor
determinante de cncer cervicouterino en pacientes embarazadas, en el
hospital Lopez Mateos . Mexico, se determino lo siguiente:
Objetivo : Determinar Prevalencia de los genotipos VPH-AR en pacientes
embarazadas
Material y Metodos :
Estudio Descriptivo,transversal de 61 pacientes embarazadas, realizndose
citologa cervical, colposcopia y genotipificacin de virus de papiloma humano
del alto riesgo. Las muestras de PCR se procesaron con el equipo Cobas4800.
CONCLUSIONES :
-La prevalencia de VPH-AR en embarazadas es elevada.
- El genotipo ms frecuente en nuestra poblacin es el subgrupo de 12
genotipos los cuales se asocian a un menor riesgo de cncer cervicouterino con
respecto al tipo 16 y 18.
Es necesario fomentar la deteccin oportuna durante el embarazo ya que es
una gran oportunidad para detectar una alteracin de manera precoz.