PRÁCTICA 1.

CURVA DE CALIBRACIÓN
PRÁCTICA
CUANTIFICACIÓN DE AZUL7DE METILENO
DETERMINACIÓN TURBIDIMÉTRICA DE SULFATOS EN AGUA

1.1. OBJETIVOS

 Generar una curva de calibración para la cuantificación de una sustancia.

 Iniciar con el manejo de un espectrofotómetro.
 Cuantificar el colorante orgánico (azul de metileno) contenido en una muestra de
ensayo.

1.2. INTRODUCCIÓN

Un procedimiento analítico utilizado en análisis cuantitativo es la calibración, que

conlleva la construcción de una curva de calibración, la cual es una representación gráfica
de una propiedad cuantitativa en función de otra, generalmente la concentración del
analito. La calibración tiene como objetivo elegir los parámetros que permitan obtener una
linealidad en la curva, respecto a las 2 propiedades en estudio del analito, con el fin de
obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de dicho
compuesto en una muestra, generalmente en un intervalo de tiempo determinado.
El azul de metileno es un compuesto químico heterocíclico aromático con fórmula
molecular: C16H18ClN3S. Esta sustancia tiene forma de cristales o polvo cristalino y
presenta un color verde oscuro, con brillo bronceado. Es inodoro y estable al aire.
Sus disoluciones en agua o en alcohol son de color azul intenso. Es fácilmente soluble en
el agua y en cloroformo; también es moderadamente soluble en alcohol.

1.3. COMPETENCIAS PREVIAS

 Entender los conceptos de curva de calibración, solución patrón, estándar y

blanco.
 Conocer el manejo y los cuidados del espectrofotómetro HACH DR/4000U.
1.4. MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Material Equipo
 Vaso de precipitados  Espectrofotómetro HACH
 Vidrio de reloj DR/4000U
 Espátula  Balanza analítica Ohaus
 Perilla de succión
 Pipetas volumétricas
 Piseta
 Matraz aforado de 1000 ml
 Matraz aforado de 500 ml
 Matraces aforados de 50 ml
 Agitador
 Cubetas espectrofotométricas

Reactivos Muestra problema

 Azul de metileno  Muestra de ensayo

1.5. METODOLOGÍA

Preparación de estándares de colorante

1. A partir del reactivo puro (azul de metileno) pesar 0.1g y aforar en matraz a
100mL (solución madre de 1000ppm).
2. De la solución madre preparar 500mL de una solución de 15 ppm del analito
(dilución intermedia).
3. Con la solución de 15 ppm obtener 50mL de estándares diluídos de las
siguientes concentraciones: 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 y 1.8 ppm.

Proceso de medida de estándares y muestra problema

1. Encender el espectrofotómetro para estabilizar el sistema.
2. Pasar los estándares y la muestra problema a celdas limpias.
3. Calibrar el equipo con agua destilada (BLANCO).
4. Leer inmediatamente en el espectrofotómetro a 652nm (corregir las lecturas con el
blanco en caso de ser necesario).

1.6. RESULTADOS

1. Reportar los cálculos realizados para preparar la solución madre y las soluciones
estándar. Reportar la tabla de valores de absorbancia y la curva de calibración.
2. Calcular la concentración de colorante en la muestra problema.