UNIVERSIDAD GALILEO NOMBRE: Ximena Solórzano

LICENCIATURA EN QUÍMICA BIOLÓGICA CARNÉ: 18002530

HEMATOLOGÍA CLINICA TEMA: Tinciones Hematológicas
FECHA DE ENTREGA:

Tinción de Wright Tinción de Romanowsky Tinción Giemsa

Colorante de Wright. Para
100 mL se requiere:
Pesar 0.3 gr de colorante
de Wright, medir 97 ml de
metanol y 3 ml de glicerol.
Solución amortiguadora
tamponada (buffer de
fosfatos )
En un litro de agua
destilada se agrega 3,76 g
de hidrofosfato disódico
(Na2HPO4 2H20) más 2,1
gr de fosfato de potasio
dihidrogenado (KH2PO4).
Mezclar muy bien hasta
disolver todos los reactivos
incorporados. Ajustar el pH
a 7,2. Verter en un frasco
de vidrio y mantener a
temperatura ambiente.
Todas estas tinciones se
pueden realizar con
técnicas de inundación-
decantación o por
inmersión. En las primeras
los reactivos se echan
directamente sobre la
preparación.
Posteriormente se
decantan los reactivos
inclinando el portaobjetos
para que los líquidos
caigan. En cambio, en las
técnicas de inmersión, las
preparaciones se
sumergen en recipientes
donde se encuentran los
reactivos. Los portaobjetos,
con sus extensiones
sanguíneas, se sumergen
en cubetas haciendo uso
de cestillos especialmente
preparados para albergar
las preparaciones.
La preparación de la
solución madre requiere
pesar 600 mg de colorante
Giemsa en polvo, medir
500 cc de alcohol metílico
libre de acetona y 50 cc de
glicerina neutra.
Materiales para preparar la
solución Buffer
Por otra parte, se prepara
una solución buffer a pH
7,2 de la siguiente manera:
Se pesan 6,77 gr de fosfato
de sodio (anhidro)
(NaHPO4), 2,59 gr de
fosfato dihidrógeno de
potasio (KH2PO4) y agua
destilada hasta 1000 cc.

PREPARACIÓN DEL TAMPÓN FOSFATO 60mM pH=7,5

A continuación se describen los pasos a seguir para preparar 1 litro de tampón fosfato
60mM con pH 7,5:

1- Pesar 9,08g de 2- Pesar 11,48g de 3- Tomar 196 ml de 4- Tomar 900,9 ml

KH2PO4 y añadir 1l Na2HPO4 y añadir 1l KH2PO4 disuelto y de la disolución
de agua destilada. de agua destilada. mezclar con 804 ml anterior y añadir
de agua destilada hasta
Na2HPO4 disuelto. 1000ml.

Una vez preparada la disolución se ajusta el pH a 7,5 y se lleva a autoclave para

esterilizarlo.