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Procedimientos de Microbiología Médica Diagnóstica

A: Anexos

ANEXO 1. PROCEDIMIENTO DE TINCIÓN DE GRAM

ANEXO 2. MORFOLOGÍA DE MICROORGANISMOS CON LA TINCIÓN DE GRAM POSITIVA

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ANEXO 2. MORFOLOGÍA DE MICROORGANISMOS CON LA TINCIÓN DE GRAM POSITIVA

ANEXO 2 (Cont.) MORFOLOGÍA DE MICROORGANISMOS CON LA TINCIÓN DE GRAM NEGATIVA

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ANEXO 2 (Cont.) MORFOLOGÍA DE MICROORGANISMOS CON LA TINCIÓN DE GRAM NEGATIVA

ANEXO 3. MEDIOS DE CULTIVO DE LAS PRINCIPALES MUESTRAS Y ESPECÍMENES EN EL

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Muestra / Espécimen AS EMB CH Az Caldo ThM

Abscesos X X X X X

Aspirado bronquial (Cc) X X X X

Biopsia X X X X

Cavidad uterina X X X X

Colostomía X X X X

Cordón umbilical X X X X

Exudado faríngeos de clínica de fibrosis quística o población especial X X X

Exudado faríngeo (fuera de brotes o población sin fibrosis quística) X

Exudado rectal X X X X
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Exucado cérvico­vaginal X X X X
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Exudado ótico X X X X
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Exudado faríngeos de clínica de fibrosis quística o población especial X X X
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Exudado faríngeo (fuera de brotes o población sin fibrosis quística) X

Exudado rectal X X X X

Exucado cérvico­vaginal X X X X

Exudado ótico X X X X

Exudado uretral X X X X

Fístula X X X X

Herida X X X X

Herida quirúrgica X X X

Lavado bronquioalveolar (Cc) X X X X

Lavado o secreción bronquial (Cc) X X X X

Líquido alveolar (Cc) X X X X

Líquidos corporales normalmente estériles transparente X X

Líquidos corporales normalmente estériles turbios X X X X X

Nasal (S. aureus) X

Quemadura X X X

Resiembra de hemocultivo positivo X X X

Secreción ocular X X X X

Superficie inanimada X

Tejido necrótico X X X X

Úlcera de piel X X X X

Urocultivo (Cc) X X

Cc, cultivo cuantitativo; AS, Agar sangre; EMB Agar eosina y azul de metileno; CH, Agar chocolate; Az, Agar sangre base azida; ThM, Agar Thayer Martin.

ANEXO 4. MORFOLOGÍA COLONIAL

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 Cc, cultivo cuantitativo; AS, Agar sangre; EMB Agar eosina y azul de metileno; CH, Agar chocolate; Az, Agar sangre base azida; ThM, Agar Thayer Martin.
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ANEXO 4. MORFOLOGÍA COLONIAL

ANEXO 5. ALGORITMO DE IDENTIFICACIÓN PARA COCOS GRAM POSITIVOS

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ANEXO 6. ALGORITMO DE IDENTIFICACIÓN PARA BACILOS GRAM POSITIVOS

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ANEXO 7. ALGORITMO
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Hill. All Rights Reserved. PARA
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• Notice Y COCOBACILOS
• Accessibility GRAM
NEGATIVOS
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ANEXO 6. ALGORITMO DE IDENTIFICACIÓN PARA BACILOS GRAM POSITIVOS

ANEXO 7. ALGORITMO DE IDENTIFICACIÓN PARA BACILOS Y COCOBACILOS GRAM

NEGATIVOS

ANEXO 8. INTERPRETACIÓN DE PRUEBAS BIOQUÍMICAS DE LOS PRINCIPALES

MICROORGANISMOS AISLADOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA.

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ANEXO 8. INTERPRETACIÓN DE PRUEBAS BIOQUÍMICAS DE LOS PRINCIPALES Access Provided by:

MICROORGANISMOS AISLADOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA.

ANEXO 9. MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA, MACROSCÓPICA Y PRUEBAS PRIMARIAS PARA LA

IDENTIFICACIÓN DE LAS PRINCIPALES BACTERIAS.

Microorganismo Morfología Morfología macroscópica Identificación

microscópica

Escherichia coli Bacilo Gram Agar sangre: colonias medianas circulares planas de Indol: (+)
negativo borde redondeado, liso y opaco de color gris β­ Rojo de metilo: (+)
No forma hemolíticas. Citrato: (–)
esporas Agar EMB: colonias medianas circulares convexas, de Lactosa: (+)
Móviles borde redondeado, de color morado con contorno VP: (–)
(flagelos) verde­metálico.
Miden 0.5 µm de
ancho por 3 µm
de largo

Grupo Cocobacilo Agar sangre: colonias pequeñas, lisas, opacas, Glucosa: (+)
Acinetobacter Gram negativo sobreelevadas, cremosas, β­hemolíticas. Crecimiento a 42 °C: (+)
baumannii No móviles Agar McConkey: no fermentadoras de lactosa, Citrato: (+)
Miden hasta 2 colonias con tono violeta o rosado.
µm de largo

Staphylococcus Cocos Gram Agar sangre: colonias medianas de forma circular, Catalasa: (+)
aureus positivos convexas, lisas, borde redondeado, color blanco­ Coagulasa: (+)
Poseen amarillo, β­hemolíticas. Sensible a cefoxitina
tendencia a Agar chocolate: colonias grandes, convexas, lisas, Prueba VP: (+)
agruparse en borde redondeado, color blanco­amarillo.
racimos.
Forma esférica
Diámetro de
alrededor de
una micra.

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Staphylococcus
A: Anexos, Coco Gram Agar sangre: colonias de pequeñas a medianas, Catalasa: (+) Page 8 / 13
©2023 McGraw Hill. All Rights Reserved. Terms oftranslúcidas,
coagulasa positivo blanco
Use • Privacy grisáceas,
Policy la mayoría
• Notice gamma
• Accessibility Coagulasa: (–)
negativos Arreglados en hemolíticas. Sensible a novobiocina
grupos
 Forma esférica
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Diámetro de
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alrededor de
una micra.

Staphylococcus Coco Gram Agar sangre: colonias de pequeñas a medianas, Catalasa: (+)
coagulasa positivo translúcidas, blanco grisáceas, la mayoría gamma Coagulasa: (–)
negativos Arreglados en hemolíticas. Sensible a novobiocina
grupos

Streptococcus Cocos Gram Agar sangre: colonias grandes blanco grisáceas, Catalasa: (–)
pyogenes positivos transparentes a translúcidas, β­hemolíticas. Prueba PYR: (+)
(Grupo A) Se dispone en Sensible a bacitracina
cadenas cortas
Diámetro entre
1 y 2 µm de
largo

Streptococcus Cocos Gram Agar sangre: colonias grandes, translúcidas a opacas, Catalasa: (–)
agalactiae positivos planas, de más superficie brillante, β­hemolíticas. Prueba de CAMP: (+)
(Grupo B) Se dispone en Hidrolisis de hipurato: (+)
cadenas de
longitud
variable
Anaerobio
facultativo

Streptococcus Cocos Gram Agar sangre: colonias pequeñas, grisáceas, brillantes, Catalasa: (–)
pneumoniae positivos puedes ser mucosas α­hemolíticas. o con el centro Sensible a optoquina
No móvil reprimido. Solubilidad en bilis: (+)
Se dispone en
diplococos o en
pequeñas
cadenas

Estreptococos Cocos Gram Agar sangre: colonias pequeñas, grisáceas, lisas o Catalasa: (–)
grupo Viridans positivos mate, α hemolíticas. Bilis: (–)
Dispuestos en
pareja

Enterococcus Cocos Gram Agar sangre: colonias pequeñas, lisas de borde NaCl: (+)
spp. positivos uniforme, de color crema o blanco, presentan α, β o Bilis/Esculina: (+)
Se dispone en ausencia de hemólisis. Crecimiento a 42°C: (+)
diplococos o en Telurito: (+) E. faecalis, (–) E. faecium
pequeñas
cadenas
Capnofílicos

Moraxella Diplococos Agar chocolate: colonias grandes, opacas, lisas, color Glucosa: (–)
catarrhalis Gram negativos grisáceo. Maltosa: (–)
Sacarosa: (–)
Downloaded 2023­8­27 9:37 P Your IP is 190.14.129.197 Lactosa: (–)
A: Anexos, Reducción de nitratos: (+) Page 9 / 13
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Neisseria Diplococos Agar chocolate: colonias pequeñas, convexas, Glucosa: (+)

 Capnofílicos
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Moraxella Diplococos Agar chocolate: colonias grandes, opacas, lisas, color Glucosa: (–)
catarrhalis Gram negativos grisáceo. Maltosa: (–)
Sacarosa: (–)
Lactosa: (–)
Reducción de nitratos: (+)

Neisseria Diplococos Agar chocolate: colonias pequeñas, convexas, Glucosa: (+)

gonorrhoeae Gram negativos translúcidas, bordes lisos o irregulares de superficie Maltosa: (–)
con lados brillante de color blancogrisáceo. Sacarosa: (–)
adyacentes Agar Thayer Martin: colonias pequeñas convexas, Lactosa: (–)
aplanados, y brillantes, y mucoides. Reducción de nitratos: (–)
apariencia de
granos de café

Neisseria Diplococos Agar chocolate: colonias medianas, lisas, redondas, Glucosa: (+)
meningitidis Gram negativos húmedas, de color gris a blanco. Maltosa: (+)
Agar sangre: colonias medianas, convexas, brillantes y Sacarosa: (–)
elevadas, transparentes u opacas. Lactosa: (–)
Reducción de nitratos: (–)

Haemophilus Cocobacilo Agar chocolate: colonias no encapsuladas son Catalasa: (+)

influenzae Gram negativo pequeñas, lisas y translúcidas, colonias encapsuladas Oxidasa: (+)
No móviles son grandes, mucosas con olor característico. Factor X: (+)
Mide 0.2–0.3 por Factor V: (+)
0.5–0.8 µm Fermentación de lactosa: (–)
No formador de Prueba de aglutinación en látex
esporas Satelitismo: (+)

Proteus mirabilis Bacilo Gram Agar McConkey: colonias medianas, no fermentadoras Indol: (–)
negativo de lactosa, olor característico. Ureasa: (+)
Móvil Agar XLD: colonias medianas, color amarillo o Ornitina descarboxilasa: (+)
incoloro, con centros negros o sin ellos. Gas a partir de glucosa: (+)
Efecto swarming: (+)

Proteus vulgaris Bacilo Gram Agar McConkey: Colonias medianas, no fermentadoras Indol: (+)
negativo de lactosa, olor característico. Ureasa: (+)
Móvil Agar XLD: colonias medianas, color amarillo o Ornitina descarboxilasa: (–)
incoloro, con centros negros o sin ellos. Gas a partir de glucosa: (V)

Pseudomonas Bacilos Gram Agar sangre: colonias medianas, esparcidas y planas, Crecimiento a 42 °C: (+)
aeruginosa negativos con bordes dentados, muestras brillo metálico con Reducción de nitrato: (+)
Curvos y cortos pigmentación verde­azulada, β­hemolíticas, olor a Gas del nitrato: (+)
Móvil uvas o harina de maíz. Glucosa: (+)
Agar cetrimida: colonias medianas, de color amarillo­ Maltosa: (–)
verde a azul, produciendo olor a aminoacetofenona.

Especies de Bacilo Gran Agar sangre: colonias medianas a grandes, lisas, Oxidasa: (+)
Vibrio spp. negativo opacas, con un tinte verdoso y pueden ser β­ Crecimiento en TCBS: (+) colonias
Entre 2 y 3 µm hemolíticas. amarillas V. cholerae
de largo Agar TCBS: colonias medianas, planas de
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A: Anexos, Forma curva aproximadamente 2 mm de diamétro, color amarillo Page 10 / 13
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 verde a azul, produciendo olor a aminoacetofenona.

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Especies de Bacilo Gran Agar sangre: colonias medianas a grandes, lisas, Oxidasa: (+) Access Provided by:

Vibrio spp. negativo opacas, con un tinte verdoso y pueden ser β­ Crecimiento en TCBS: (+) colonias
Entre 2 y 3 µm hemolíticas. amarillas V. cholerae
de largo Agar TCBS: colonias medianas, planas de
Forma curva aproximadamente 2 mm de diamétro, color amarillo
Móvil (V. cholerae)

Especies de Bacilo Gran Agar sangre: colonias grandes, redondas, Oxidasa: (+)
Aeromonas spp. negativo sobreelevadas, opacas, la mayoría β­hemolíticas. Crecimiento en TCBS: (–)
Móvil Agar aeromonas: colonias de incoloras a rosadas,
Forma curva pequeñas, opacas y redondas.

Eiknella Bacilo Gran Agar sangre: colonias pequeñas, disminuidas a las 24 Catalasa: (–)
corrodens negativo horas, las colonias maduras poseen centros húmedos Oxidación de xilosa: (–)
y claros rodeados por crecimiento plano, Indol: (–)
pigmentación amarilla pálida, olor característico.

Corynebacterium Bacilo Gram Agar sangre: colonias que varían desde pequeñas, Metabolismo: F/O
diphtheriae positivo grises y translúcidas (biotipo intermedius) a mediana, Movilidad: (–)
pleomórfico blancas y opacas (biotipo mitis y gravis), biotipo mitis Esculina: (–)
que se tiñen de puede ser β­hemolítica. CAMP: (V)
manera Agar chocolate: colonias blancas, secas, mucosas. Nitrato: (+)
irregular
Disposición en
letras chinas
No forma
endosporas

Listeria Bacilo Gram Agar sangre: colonias pequeñas, lisas, translúcida, Metabolismo: F
monocytogenes positivo cortos húmeda, color blanco y β­hemolítica. Movilidad: (+) forma de “paraguas”
Móvil a 30 °C, Agar chocolate: colonias pequeñas, grisáceas, planas. Esculina: (+)
inmóvil a 37 °C CAMP: (+)
Fermentación de glucosa: (+)

Lactobacillus Bacilo Gram Agar sangre: colonias con morfología múltiple, que Glucosa: (+)
spp. positivo varían desde colonias α­hemolíticas puntiformes, Manitol: (+)
Largos y hasta colonias rugosas de color gris. Sacarosa: (V)
delgados
No produce
esporas

Gardnerella Bacilo Gram Agar sangre: colonias pequeñas, translúcidas u Glucosa: (+)
vaginalis positivo opacas, en forma de cabeza de alfiler (puntiformes), Manitol: (+)
variable y redondas, lisas y con β­hemólisis. Sacarosa: (–)
pleomorfico
0.5–1.5 micras

Nocardia spp. Bacilo Gram Agar sangre: colonias variables, algunos son β­ Parcialmente acido alcohol resistente:
positivo hemolíticos, colonias plegadas, secas, aspecto de (+)
Filamentos polvo con un pigmento color naranja. Urea: (+)
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A: Anexos, finos, delicados, Resistencia a lisozima: (+) Page 11 / 13
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fragmentación
 0.5–1.5 micras
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Nocardia spp. Bacilo Gram Agar sangre: colonias variables, algunos son β­ Parcialmente acido alcohol resistente:
positivo hemolíticos, colonias plegadas, secas, aspecto de (+)
Filamentos polvo con un pigmento color naranja. Urea: (+)
finos, delicados, Resistencia a lisozima: (+)
ramificados, con Reducción de nitrato: (V)
fragmentación

Pasteurella Cocobacilo Agar sangre: colonias convexas, lisas, no hemolíticas, Indol: (+)
multocida pleomórfico existen variantes rugosas y mucoides, con un olor a Urea: (–)
Gram negativo hongo, color gris azulado. Reducción de nitrato: (+)
No móvil Agar chocolate: colonias convexas, lisas, grises, existen Catalasa: (+)
variantes rugosas y mucoides, con un olor a hongo. Ornitina descarboxilasa: (+)
Manitol: (+)
Sacarosa: (+)
Maltosa: (–)

Campylobacter Bacilo Gram Agar sangre: colonias puntiformes, transparentes Crecimiento a 42 °C: (+) subesp jejuni, (–)
spp. negativo con como gotas de agua que crecen a 42 °C en atmosfera subesp doylei
forma de coma micro aerofílica. Reducción de nitratos: (+) subesp jejuni,
Móvil Agar Butzler y Skirrow: colonias pequeñas, blancas­ (–) subesp doylei
grises, brillantes, planas y de borde irregular. Sensible a cefalotina: (–) subesp jejuni,
(+) subesp doylei
Hidrólisis de hipurato: (+) C. jejuni, (–) C.
coli

Shigella spp Bacilo Gram Agar Salmonella­Shigella: colonias medianas Indol: (V)
negativo incoloras, ligeramente color beige. VP: (–)
No móvil Agar Hektoen: colonias color verde que se debilita en TSI: (–)
No esporulado la periferia. Movilidad: (–)
Lisina (–)

Helicobacter Bacilo Gram Agar Columbia: colonias de pequeñas a medianas, Crecimiento a 25 °C: (–)
pylori negativo transparentes. Crecimiento a 42 °C: (+)
Móvil Agar Mueller­Hinton: colonias de pequeñas a Catalasa: (+)
medianas, color blanco. Hidrólisis de hipurato: (–)

Bordetella spp. Cocobacilos Agar Bordet­Gengou: colonias lisas, convexas, Movilidad: (+) B. bronchiseptica, (–) B.
Gram negativos aperladas casi transparentes, brillantes y rodeadas de parapertussis y B. pertussis
Tienen flagelos hemólisis difusa. (B. parapertussis produce pigmento Ureasa: (+) B. bronchiseptica y B.
peritricos, marrón). parapertussis, (–) B. pertussis
aunque algunos Agar Regan­Lowe: colonias lisas, convexas, aperladas Citrato: (+) B. parapertussis, (–) B.
son inmóviles. casi transparentes, brillantes y rodeadas de hemólisis pertussis
difusa.

Mycobacterium Bacteria ácido Löwestein Jensen: colonias típicas, no pigmentadas, Tinción de Ziehl Neelsen o Kinyoun M.
tuberculosis alcohol ásperas y secas. El color verde del medio se debe a la tuberculosis se muestra como bacilos
resistente presencia de verde malaquita, que es uno de los ácido alcohol resistentes, delgados, en
agentes selectivos para prevenir el crecimiento de la forma de varilla, rectos o ligeramente
mayoría de los otros contaminantes. curvados, aislados o agrupados.
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A: Anexos, Page 12 / 13
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Morganella Bacilo Gram Agar McConkey: colonias no fermentadoras de lactosa Indol: (+)
morganii negativo corto Agar Hektoen y XLD: colonias incoloras o de color rojo. Rojo de metilo: (+)
 Mycobacterium Bacteria ácido Löwestein Jensen: colonias típicas, no pigmentadas, Tinción de Ziehl NeelsenUniversidad
o Kinyoun M. Galileo
tuberculosis alcohol ásperas y secas. El color verde del medio se debe a la tuberculosis se muestra Access
como Provided
bacilosby:
resistente presencia de verde malaquita, que es uno de los ácido alcohol resistentes, delgados, en
agentes selectivos para prevenir el crecimiento de la forma de varilla, rectos o ligeramente
mayoría de los otros contaminantes. curvados, aislados o agrupados.
PCR

Morganella Bacilo Gram Agar McConkey: colonias no fermentadoras de lactosa Indol: (+)
morganii negativo corto Agar Hektoen y XLD: colonias incoloras o de color rojo. Rojo de metilo: (+)
Citrato: (–)
H2S: (–)

Movilidad: (V)
Descarboxilación de lisina: (–)
Descarboxilación de ornitina: (+)
Malonato: (–)
Urea: (+)

Salmonella spp. Bacilo Gram Agar Salmonella­Shigella: colonias incoloras a Indol: (–)
negativo ligeramente beige con centro color negro por la VP: (–)
Móvil producción de H2S. TSI: (+)
No encapsulado Agar Hektoen: colonias color azul verdoso con típicos Movilidad: (+)

centros negros por el gas de H2S. Lisina: (+)

Agar XLD: colonias color rojo con centro color negro

por H2S.

Brucella spp. Bacilos cortos o Agar sangre: colonias pequeñas, brillantes, algunas de Requerimiento de CO2: B. melitensis y B.
cocobacilos diferente tamaño, color miel claro. suis (–), B. abortus (+)
Gram negativo Agar chocolate: colonias pequeñas, brillantes, algunas Producción de H2S: B. abortus y B. suis
Pequeños de diferente tamaño, color miel claro.
(+), B. melitensis (–)
No móvil
Producción de ureasa: B. melitensis y B.
abortus (débil), B. suis (fuerte)

Klebsiella Bacilo Gram Agar McConkey: colonias medianas, fermentadoras de Indol: (V)
pneumoniae negativo lactosa, mucoides, con bordes irregulares, de color Rojo de metilo: (–)
rosado. VP: (+)
Agar Hektoen y XLD: Colonias medianas, irregulares de Movilidad: (–)
color amarillo. Lisina: (+)
Ornitina: (–)

Serratia Bacilo Gram Agar McConkey: colonias fermentadoras de lactosa Indol: (–)
negativo lenta, S. marcescens pueden mostrar colonias rojas VP: (+)
Móvil con una incubación a 25 °C. Citrato de Simmons: (+)
Agar Hektoen y XLD: colonias medianas, color amarillo Movilidad: (+)
o incoloro. Lisina: (+)
Ornitina: (+)

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