DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Staphylococcus

Realizar Pruebas Bioquímicas R3

Primarias de colonias sospechosas Sembrar e Incubar de
de acuerdo al Anexo A acuerdo al Anexo K los
siguientes medios
R1

*Tinción Gram: Cocos Gram (+) en

racimos
*Catalasa: Positiva Agar Sangre
*Oxidasa: Negativa
*Motilidad: Negativa
*OF: Fermentador facultativo

R2 R4 Agar Sales y Manitol

Observar y
Agar Mueller Hinton describir
crecimiento
y adicionar disco de
Novobiocina 5g bacteriano

Realizar Pruebas
Bioquímicas Secundarias R1
de acuerdo al Anexo L

Sensibilidad a la Reducción de
Coagulasa DNAsa Urea
Novobiocina Nitratos

R4 R4 R4 R4 R4

6
RESULTADOS.

Identificación del género Staphylococcus*

Prueba Resultados en las cepas problema

S. S. S.
aureus saprophyticus epidermidis

Tinción Gram

Bioquímicas Catalasa
Primarias
Oxidasa
Motilidad
OF
Coagulasa
Sensibilidad a
la
Bioquímicas
Novobiocina
Secundarias
DNAsa
Reducción de
Nitratos
Urea
Crecimiento en Agar Sangre
Medios de
Cultivo Agar Sales y
Manitol
*Revisar Anexo B (Tabla de identificación del género Staphylococcus).

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

7
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Streptococcus

Realizar Pruebas Bioquímicas R1

Primarias de colonias Sembrar e Incubar de
sospechosas de acuerdo al acuerdo al Anexo K el
Anexo A siguiente medio
R3

*Tinción Gram: Cocos Gram (+) Observar y

*Catalasa: Negativa describir
Agar Sangre
*Oxidasa: Negativa crecimiento
bacteriano
*Motilidad: Negativa
*OF: Fermentador facultativo

R2 R4

Realizar Pruebas
Bioquímicas Secundarias R1
de acuerdo al Anexo L

Sensibilidad a la Hidrólisis del Tolerancia a la Sensibilidad a la

CAMP Bilis Esculina
Bacitracina Hipurato Sal (NaCl) Optoquina

R4 R4 R4 R4 R4 R4

12
 Número de
Residuo
Residuo Disposición NORMA
vinculada

R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero

gasas, Servitoallas sucias municipal

R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído

para su posterior tratamiento

R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior NOM-087-ECOL-

usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante SSA1-2002
agentes infecciosos 30 min.)

R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con agua y jabón

en laboratorio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

RESULTADOS.

Identificación del género Streptococcus*

Prueba Resultados en la cepa
problema

Grupo Grupo Grupo Grupo

A B D O
Tinción Gram

Bioquímicas Catalasa
Primarias Oxidasa
Motilidad Negativo (Literatura)*
OF OF (Literatura)*
Sensibilidad a    
la Bacitracina
CAMP
Hidrólisis del
Bioquímicas Hipurato
Secundarias
Bilis esculina
Tolerancia a la
Sal (NaCl)
Sensibilidad a
la Optoquina
Crecimiento en Hemólisis   
Medios de presente en
Cultivo Agar Sangre
*Revisar Anexo C (Tabla de identificación del género Streptococcus).

**NOTA: Las bacterias del género Streptococcus son inmóviles y tienen variables y complejos
requerimientos nutricionales por lo que no crecen en cualquier tipo de medio5.

RESULTADO BACTERIANO.
_________________________________________________

13
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Listeria

Realizar Pruebas Bioquímicas R1

Primarias de colonias Sembrar e Incubar de
sospechosas de acuerdo al acuerdo al Anexo K el
Anexo A siguiente medio
R3

*Tinción Gram: Bacilos Gram (+)

aislados Observar y
describir
*Catalasa: Positiva Agar Sangre
crecimiento
*Oxidasa: Negativa bacteriano
*Motilidad: Positiva a los 20°C
*OF: Fermentador facultativo

R2 R4

Realizar Pruebas
Bioquímicas R1
Secundarias de
acuerdo al Anexo L

Bilis Esculina CAMP KIA MR VP SIM R4

R4 R4 R4 R4 R4 Incubar durante
24 horas a 20°C
para poder
observar la
movilidad de la
-Dulcitol -Salicim bacteria
Fermentación de
R4 -Fructosa -Sorbitol
Carbohidratos
-Maltosa -Trealosa

Número de
Residuo Residuo Disposición NORMA
vinculada
R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero
gasas, Servitoallas sucias municipal
R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído
para su posterior tratamiento NOM-087-ECOL-
R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior SSA1-2002
usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante
agentes infecciosos 30 min.)
R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con agua y jabón
en laboratorio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

18
RESULTADOS.

Identificación del género Listeria*

Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Bioquímicas Catalasa
Primarias
Oxidasa
Motilidad
OF
Bilis Esculina
CAMP
KIA
Bioquímicas MR
Secundarias
VP
S
I
A los 20°C
M
Dulcitol
Fructosa
Fermentación de Maltosa
Carbohidratos Salicim
Sorbitol
Trealosa
Crecimiento en Agar Sangre
Medios de Cultivo
*Revisar Anexo D (Tabla de identificación del género Listeria).

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

19
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Esporulados

Clostridium
Bacillus

Realizar Pruebas Bioquímicas

Primarias de colonias sospechosas Sembrar e Incubar de
de acuerdo al Anexo A R1 acuerdo al Anexo K el R3
siguiente medio

*Tinción Gram: Bacilos Gram (+) en

cadenas cortas Observar y
*Catalasa: Positiva Agar Sangre describir
*Oxidasa: Negativa
crecimiento
bacteriano
*Motilidad: Positiva
*OF: Fermentador facultativo

R2 R4

Realizar Pruebas
Bioquímicas
Secundarias de R1
acuerdo al Anexo L
para Bacillus

Degradación Hidrólisis del Hidrólisis del Hidrólisis de la

MR-VP Urea
de la Caseína Almidón Hipurato Gelatina

R4 R4 R4 R4 R4 R4

Realizar Pruebas
Bioquímicas Especiales
de acuerdo al Anexo M
para Clostridium

Carne Cocida Leche Tinción de

R3 (Cooked Meat) Tornasolada Esporas

R4 R4 Técnica
Schaeffer y R3
Fulton

R4

28
 Número de
Residuo Residuo Disposición NORMA
vinculada
R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero
gasas, Servitoallas sucias municipal
R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído
para su posterior tratamiento NOM-087-ECOL-
R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior SSA1-2002
usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante
agentes infecciosos 30 min.)
R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con agua y jabón
en laboratorio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)
RESULTADOS.

Identificación de los géneros Esporulados*

Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Catalasa

Bacillus Bioquímicas Oxidasa

Primarias
Motilidad

Clostridium OF

Degradación de
la Caseína

Hidrólisis de la
Gelatina
Bioquímicas
S
Secundarias
I

Hidrólisis del
Almidón

Bacillus Hidrólisis de
Hipurato
Bioquímicas
MR
Secundarias
VP
Adicionales
Urea

Carne cocida
(Cooked Meat)

29
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Brucella

Realizar Pruebas Bioquímicas

Primarias de colonias Sembrar e Incubar de
sospechosas de acuerdo al R1 acuerdo al Anexo K R3
Anexo A el siguiente medio

*Tinción Gram: Cocobacilos Gram (-) Observar y

*Catalasa: Positiva
Agar Sangre describir
"DEBE REALIZARSE EN TUBO"
*Oxidasa: Positiva
crecimiento
*Motilidad: Negativa bacteriano
*OF: Oxidativo

R2 R4

Realizar Pruebas Bioquímicas R1

Secundarias de acuerdo al Anexo L

Hidrólisis de la Gelatina MR-VP Reducción de Nitratos Urea de Christensen

R4 R4 R4 R4

Número de
Residuo Residuo Disposición NORMA
vinculada
R1 Guantes, cubrebocas, Envolverlos en papel estraza y colocar los en
gasas, Servitoallas sucias una Bolsa de basura negra para el basurero
municipal
R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído
para su posterior tratamiento
R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior NOM-087-ECOL-
usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante SSA1-2002
agentes infecciosos 30 min.)
R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con hipoclorito de
en laboratorio sodio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

34
RESULTADOS.

Identificación del género Brucella*

Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Catalasa
Oxidasa
Bioquímicas
Primarias Motilidad
OF
*Explica que sucede
con esta prueba.
Hidrólisis de la
Gelatina
MR
Bioquímicas VP
Secundarias
Reducción de
Nitratos
Urea de
Christensen
Crecimiento en
Medios de Agar Sangre
Cultivo
*Revisar Anexo F (Tabla de identificación del género Brucella).

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

35
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Haemophilus

Realizar Pruebas Bioquímicas

Primarias de colonias Sembrar e Incubar
sospechosas de acuerdo al de acuerdo al
R1 Anexo K el siguiente R3
Anexo A
medio

*Tinción Gram: Cocobacilos Gram (-) Observar y

*Catalasa: Positiva Agar Gelosa-Chocolate describir
*Oxidasa: Positiva crecimiento
*Motilidad: Negativa bacteriano
*OF: Fermentador facultativo

Seguir metodolgía
R2 R4 planteada para siembra
en Agar Sangre

Realizar Pruebas Bioquímicas

Secundarias de acuerdo al Anexo L R1

R4 MIO SIM Urea R4

R4

Realizar Pruebas Bioquímicas Especiales de

acuerdo al Anexo M

R4 R3
Satelitismo

40
 Número de
Residuo
Residuo Disposición NORMA
vinculada

R1 Guantes, cubrebocas, Envolverlos en papel estraza y colocar los en

gasas, Servitoallas sucias una Bolsa de basura negra para el basurero
municipal

R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído

para su posterior tratamiento

R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior

usados para el cultivo de
agentes infecciosos
R4 Material de vidrio utilizado
en laboratorio
tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante
30 min.)
NOM-087-ECOL-
SSA1-2002
Colocar en una palangana con hipoclorito de
sodio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

RESULTADOS.
Identificación del género Haemophilus*
Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Catalasa
Bioquímicas
Oxidasa
Primarias
Motilidad
OF
M
I
O
Bioquímicas S
Secundarias I
M
Urea
Prueba Especial Satelitismo
Crecimiento en Agar Sangre
Medios de Cultivo Agar Gelosa-Chocolate
*Revisar Anexo G (Tabla de identificación del género Haemophilus).

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

41
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Vibrio

Realizar Pruebas Bioquímicas Primarias R3

de colonias sospechosas de acuerdo al Sembrar e Incubar de
Anexo A acuerdo al Anexo K los
siguientes medios
R1

*Tinción Gram: Bacilos Gram (-) curvos

*Catalasa: Positiva
Agar MacConkey
*Oxidasa: Positiva
*Motilidad: Positiva
*OF: Fermentador facultativo

R2 R4
Agar Sales y Manitol

Observar y
describir
crecimiento
Agar Tiosulfato Citrato Bilis
Sacarosa (TCBS) bacteriano

47
 Realizar Pruebas Bioquímicas
Secundarias de acuerdo al R1
Anexo L

SIM MR VP Citrato de Simmons

R4 R4 R4
R4

Descarboxilación de la LIA
Hidrólisis de la Gelatina KIA
Arginina

R4 R4 R4 R4

Reducción de Tolerancia a la Sal

MIO Nitratos TSI Urea
(NaCl)

R4 R4 R4 R4
R4

Realizar Pruebas Bioquímicas

Especiales de acuerdo al Anexo M

R2 Hilo Perlado R4

48
 Número de
Residuo
Residuo Disposición NORMA
vinculada

R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero

gasas, Servitoallas sucias municipal

R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con hipoclorito de

sodio para su posterior tratamiento

R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior NOM-087-ECOL-

usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante SSA1-2002
agentes infecciosos 30 min.)

R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con hipoclorito de

en laboratorio sodio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

RESULTADOS.

Identificación del género Vibrio*

Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Catalasa

Bioquímicas Oxidasa
Primarias
Motilidad

OF

MR

VP

Citrato de Simmons

Descarboxilación
de la Arginina

Hidrólisis de la
Gelatina

KIA

LIA

49
 Bioquímicas M
Secundarias
I

Reducción de
Nitratos

TSI

Tolerancia a la Sal
(NaCl)

Urea

Prueba Especial Hilo perlado

*Revisar Anexo H (Tabla de identificación del género Vibrio).

Identificación del género Vibrio

Agar MacConkey

Crecimiento en Agar Tiosulfato

Medios de Cultivo Citrato Bilis
Sacarosa (TCBS)

Agar Sales y
Manitol

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

50
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Enterobacterias

R3
Realizar Pruebas Bioquímicas
Primarias de colonias sospechosas Sembrar e Incubar de
de acuerdo al Anexo A acuerdo al Anexo K los
siguientes medios
R1

*Tinción Gram: Bacilos Gram (-)

*Catalasa: Positiva
*Oxidasa: Negativa Agar MacConkey
*Motilidad: Variable (depende
género y especie)
*OF: Fermentativo

R2 R4 Agar Salmonella-Shigella
(SS)

Agar Xilosa Lisina

Desoxicolato (XLD)

Agar Eosina y Azul de

Metileno (EMB) Observar y
describir
crecimiento
bacteriano

Agar Sulfito Bismuto (SB)

Chromoagar para la
Identificación de
Enterobacterias

57
 Realizar Pruebas Bioquímicas
Secundarias de acuerdo al R1
Anexo L

SIM MR VP Citrato de Simmons

R4 R4 R4 R4

Desaminación de Descarboxilación Hidrólisis de la

KIA LIA
la Fenilalanina de la Arginina Gelatina

R4 R4 R4 R4 R4

Reducción de
Malonatos MIO TSI Urea
Nitratos

R4 R4 R4 R4 R4

58
 Número de
Residuo Residuo Disposición NORMA
vinculada
R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero
gasas, Servitoallas sucias municipal
R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído
para su posterior tratamiento NOM-087-ECOL-
R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior SSA1-2002
usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante
agentes infecciosos 30 min.)
R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con agua y jabón
en laboratorio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

RESULTADOS.

Identificación del género Enterobacteriaceae*

Resultados en la
Prueba cepa problema

Tinción Gram

Bioquímicas Catalasa
Primarias Oxidasa
Motilidad
OF
I SIM
M Rojo de Metilo
Vi Voges-Proskauer
C Citrato de Simmons
Desaminación de la
Fenilalanina
Descarboxilación de
la Arginina
Hidrólisis de la
Gelatina
Bioquímicas KIA
Secundarias LIA
Malonatos
M
I
O
Reducción de Nitratos
TSI
Urea de Stuart
*Revisar Anexo I (Tabla de identificación de la familia Enterobacteriaceae).

59
 Identificación de la familia Enterobacteriaceae

Agar MacConkey

Agar Salmonella-
Shigella (SS)

Agar Xilosa Lisina

Desoxicolato (XLD)
Crecimiento en
Agar Eosina y Azul
Medios de Cultivo
de Metileno (EMB)

Agar Sulfito
Bismuto (SB)

Chromagar para la
Identificación de
Enterobacterias.

RESULTADO BACTERIANO.
_________________________________________________

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.

1. Asensio A, Oliver A, González-Diego P, Baquero F, Pérez-Díaz JC, Ros P, et al. (2010).

Outbreak of a multiresistant Klebsiella pneumoniae strain in an intensive care unit:
antibiotic use as risk factor for colonization and infection. Clin Infect Dis; 30-55.
2. Bhan M, Bahl R, Bhatnagar S. (2005). Typhoid and paratyphoid fever. Lancet;366: 749.
3. Bolaños, N., Lutz, G. & Herrera, C. (2010). Química de Alimentos: Manual de
laboratorio. 3ª ed. Costa Rica: Universidad de Costa Rica.
4. Farmer, J., Davis, B., Hickman-Brenner, F., Mcwhorter, A., Huntleycarter, G., Asbury,
G., Conradine, R., Wathen-Grady, H., Fanning, C., Steigerwalt, A., O'hara, C., Morris,
S. & Brenner, D. (1985). Biochemical Identification of New Species and Biogroups of
Enterobacteriaceae Isolated from Clinical Specimenstt. Journal of Clinical
Microbiology, pp. 46-76.
5. Gayraud M, Scavizzi MR, Mollaret HH, Guillevin L, Hornstein MJ. (2005). Antibiotic
treatment of Yersinia enterocolitica septicaemia: a retrospective review of 43 cases.
Clin Infect Dis; 17: 405.
6. Harrison. (2006). Principios de Medicina Interna. 16va ed. México DF: McGraw Hill
Interamericana.
7. Ko WC, Paterson DL, Sagnimeni AJ, Hansen DS, Von Gottberg A, Mohapatra S, et al.
(2012). Community-acquired Klebsiella pneumoniae bacteremia: global differences
in clinical patterns. Emerg Infect Dis; 8:160.
8. Koneman. (2006). Diagnóstico bacteriológico: texto y atlas a color. 6ta ed. Buenos
Aires, Argentina: Médica Panamericana.

60
DIAGRAMA ECOLÓGICO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS.

Pseudomonas

Realizar Pruebas Bioquímicas R3

Primarias de colonias sospechosas Sembrar e Incubar de
de acuerdo al Anexo A acuerdo al Anexo K los
siguientes medios
R1

*Tinción Gram: Bacilos Gram (-)

ligeramente curvos en pares
*Catalasa: Positiva Agar MacConkey
*Oxidasa: Negativa
*Motilidad: Variable (depende
género y especie)
*OF: Fermentativo

Agar Cetrimida
R2 R4

Agar Pseudomonas F Observar y

describir
crecimiento
bacteriano

Agar Pseudomonas P

66
 Realizar Pruebas Bioquímicas
Secundarias de acuerdo al R1
Anexo L

SIM MR VP Citrato de Simmons

R4 R4 R4 R4

Hidrólisis de la Gelatina KIA LIA Malonatos

R4 R4 R4 R4

MIO Reducción de Nitratos TSI Urea

R4
R4 R4 R4

Número de
Residuo Residuo Disposición NORMA
vinculada
R1 Guantes, cubrebocas, Bolsa de basura negra para el basurero
gasas, Servitoallas sucias municipal
R2 Portaobjetos y palillos Colocar en frasco de vidrio con benzaldehído
para su posterior tratamiento NOM-087-ECOL-
R3 Materiales desechables Bolsa de plástico de color rojo para su posterior SSA1-2002
usados para el cultivo de tratamiento (autoclave a 121°C a15 lb durante
agentes infecciosos 30 min.)
R4 Material de vidrio utilizado Colocar en una palangana con agua y jabón
en laboratorio para su lavado y su posterior esterilización
(autoclave a 121°C a15 lb durante 30 min.)

67
RESULTADOS.

Identificación del género Pseudomonas*

Prueba Resultados en la
cepa problema

Tinción Gram

Bioquímicas Catalasa
Primarias
Oxidasa

Motilidad

OF

MR

VP

Citrato de Simmons

Hidrólisis de la
Gelatina

KIA

LIA
Bioquímicas Malonatos
Secundarias
M

Reducción de
Nitratos

TSI

Urea

Pigmentación

*Revisar Anexo J (Tabla de identificación del género Pseudomonas).

68
 Identificación del género Pseudomonas

Agar MacConkey

Agar Cetrimida

Crecimiento en
Medios de Cultivo
Agar
Pseudomonas P

Agar
Pseudomonas F

RESULTADO BACTERIANO.

_________________________________________________

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.

1. Bolaños, N., Lutz, G. & Herrera, C. (2010). Química de Alimentos: Manual de

laboratorio. 3ª ed. Costa Rica: Universidad de Costa Rica.
2. Brooks, G., Carrol, K., Butel, J., Morse, S. & Mietzner, T. (2013). Jawetz, Melnick &
Adelberg: Microbiología médica. 26ta ed. D.F., México: McGraw-Hill.
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http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimicas_17461.PDF

69