EVALUACIN DEL CONTENIDO DE VITAMINA C, FENOLES TOTALES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EN PULPA DE GUAYABA (Psidium guajava L.

) DE LAS VARIEDADES PERA, REGIONAL ROJA Y REGIONAL BLANCA

Rojas Barquera D. R1, Narvez Cuenca E. C2, Restrepo Snchez L. P.3
Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia. Ciudad Universitaria. Bogot. D. C., Colombia..
Palabras claves: Guayaba, Psidium guajava L., actividad antioxidante, fenoles totales, vitamina C.

INTRODUCCION

La guayaba es una especie nativa de Amrica tropical, de la familia Mirtcea y su origen probablemente est entre Mxico y Per (CORPOICA). Actualmente la guayaba se encuentra muy difundida en todo el mundo, pero los principales pases productores son Pakistn, Egipto, Mxico, Bangladesh, Estados Unidos, Brasil, Colombia, Malasia, Tailandia, Per, Sudfrica, Venezuela, Indonesia y Repblica Dominicana (SAGARPA, 2006). En Colombia se producen mas de 300000 ton/ao (FNFH, 2003), su produccin se concentra en los departamentos de Santander y Boyac (60% del rea del pas), Tolima (10%), Cundinamarca (9%), Huila, Antioquia, Cauca, Nario y Atlntico, principalmente (CORPOICA). Existen ms de 9.000 fruticultores que en diferentes regiones manejan ms de 15.000 hectreas y generan una produccin cuyo valor anual se puede estimar entre US$14 a US$20 millones. En Colombia esta fruta sustenta una importante agroindustria rural, y solo en la Hoya del ro Surez (Santander) existen aproximadamente 130 fbricas de bocadillo, cuya produccin anual se valora en ms de US$24 millones (CORPOICA). La superficie estimada sembrada en Santander es de 10.000 ha, con un rendimiento potencial de 60 a 80 toneladas por hectrea para cultivos tecnificados. La diversidad de guayaba permite su utilizacin en mercado en fresco, como para la industria en la produccin de bocadillos, jaleas, nctares y pulpas, que es un rengln importante en la economa regional (CORPOICA). El consumo de frutos y verduras esta asociado al bajo riesgo de incidencias y mortalidad de cncer, y a menores ndices de mortalidad por enfermedad coronaria, segn se desprende de diversos estudios epidemiolgicos. Los fenoles, especialmente los flavonoides y los antocianos, muestran una gran capacidad para captar radicales libres causantes del estrs oxidativo, atribuyndoseles a su vez un efecto beneficioso en la prevencin de enfermedades tales como: cardiovasculares, circulatorias, cancergenas y neurolgicas. Poseen actividades anti-inflamatoria, antialrgica, antitrombtica, antimicrobiana y antineoplsica (Kuskoski et al., 2005). Dentro de los radicales libres se encuentran las especies reactivas de oxgeno (ROS) que debido a su inestabilidad se comportan como agentes oxidantes. El dao oxidativo se relaciona con el origen y desarrollo de ciertas enfermedades multifactoriales de carcter crnico, como la oxidacin de las LDL y la enfermedad cardiovascular, el dao oxidativo al ADN y el cncer y la oxidacin de las protenas de las lentes oculares y la alteracin de la visin.
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La ingesta de alimentos ricos en sustancias antioxidantes como vitaminas C y E, carotenoides o compuestos fenlicos, previene o disminuye el desarrollo de estas enfermedades. Se cree que la dieta aumenta la defensa antioxidante del organismo evitando el dao oxidativo (Kuskoski et al., 2005). La guayaba destaca su contenido en vitamina C; concentra unas siete veces ms que la naranja. Aporta en menor medida otras vitaminas del grupo B (sobre todo niacina o B3). Si la pulpa es anaranjada, es ms rica en provitamina A (carotenos). Ambas vitaminas, cumplen adems una funcin antioxidante. Respecto a los minerales, destaca su aporte de potasio. Los frutos muy maduros pierden vitamina C. Su aporte de fibra es elevado por lo que posee un suave efecto laxante y previene o reduce el riesgo de ciertas alteraciones y enfermedades. Es de bajo valor calrico, por su escaso aporte de hidratos de carbono y menor an de protenas y grasas (FNFH, 2003). Los compuestos fenlicos son sustancias orgnicas ampliamente distribuidas en el reino vegetal. Se sintetizan como metabolitos secundarios con funciones de defensa, y son en gran medida responsables de las propiedades del color, la astringencia y el flavor (sabor y aroma) de los vegetales. Se encuentran en las verduras y frutas. Su estructura qumica es propicia para secuestrar radicales libres (Kuskoski et al., 2005). La vitamina C ha sido reconocida como un nutriente importante en varios productos alimentarios. La accin de la vitamina C es suministrada por el cido L-ascrbico (AA) y su forma oxidada, el cido deshidroascrbico (DHAA). En humanos ambas formas son biolgicamente activas, definindose as la vitamina C total como la suma de las dos (Ledezma-Gairaud). Existen diversos mtodos para evaluar la actividad antioxidante, ya sea in vitro o in vivo. Una de las estrategias ms aplicadas en las medidas in vitro de la capacidad antioxidante total de un compuesto, mezcla o alimento, consiste en determinar la actividad del antioxidante frente a sustancias cromgenas de naturaleza radical; la prdida de color ocurre de forma proporcional con la concentracin. Alternativamente, diversos compuestos cromgenos como ABTS (llamado as por el reacctivo 2,2-azinobis (3-ethilbenzotiazolina-6-acido sulfonicoic)), DPPH (llamado as por el reactivo 2,2-difenil-1-picrylhydrazyl), DMPD (dicloridrato de N,N-Dimetilpfenilendiamina) y FRAP (Poder Antioxidante de Reduccin Ferrica) son utilizados para determinar la capacidad de los compuestos fenlicos que contienen los frutos para captar los radicales libres generados, operando as en contra los efectos perjudiciales de los procesos de oxidacin, que implican a especies reactivas de oxgeno (EROS). Los mtodos ms aplicados son ABTS y DPPH. Ambos presentan una excelente estabilidad en ciertas condiciones, aunque tambin muestran diferencias. El DPPH es un radical libre que puede obtenerse directamente sin una preparacin previa, mientras que el ABTS tiene que ser generado tras una reaccin que puede ser qumica (dixido de manganeso, persulfato potasio, ABAP), enzimtica (peroxidase, mioglobulina), o tambin eletroqumica. Con el ABTS se puede medir la actividad de compuestos de naturaleza hidroflica y lipoflica, mientras que el DPPH solo puede disolverse en medio orgnico. El radical ABTS+ tiene, adems, la ventaja de que su espectro presenta mximos de absorbancia a 414, 654, 754 y 815 nm en medio alcohlico, mientras que el DPPH presenta un pico de absorbancia a 515 nm (Kuskoski et al., 2005).

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El mtodo de FRAP ocurre por reduccin directa, es un mtodo rpido, simple operacionalmente y reproducible. Consiste en la formacin de un complejo frrico con el reactivo TPTZ, el cual en presencia de antioxidantes forma un complejo azul de mxima absorcin a 593 nm (Restrepo et al., 2007). Existen diferentes mtodos analticos utilizados para la determinacin de la vitamina C, dentro de los cuales tenemos los siguientes: el de valoracin con el 2, 6dicloroindofenol; el colorimtrico utilizando 2, 4- dinitrofenilhidrazina; el microfluoromtrico y varios mtodos por cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC). Los primeros dos mtodos carecen de especificidad y estn sujetos a interferencias de la matriz, produciendo as alteracin de la exactitud, y el tercero es especfico para vitamina C total y se utiliza en productos considerados como buenas fuentes de esa sustancia (Ledezma-Gairaud). Se han realizado estudios en guayabas de Thailandia, en donde se determino la actividad antioxidante por algunos mtodos mencionados. En donde reportan que fenoles con actividad antioxidante en pulpa y piel de guayaba por medio de dos extracciones, primeramente con metanol y luego una extraccin sucesiva con diclorometano. En donde encontraron valores de 22,3-37,9, 16,2-32,0, 15,5-33,3 y 18,225,5 L TE/g de masa fresca, por medio de los mtodos ABTS, DPPH, FRAP y ORAC respectivamente para la extraccin con metanol (Thaipong et al., 2006). Este trabajo se efectu con el objetivo de evaluar el contenido de vitamina C, fenoles totales y actividad antioxidante en la fraccin comestible de guayaba (Psidium guajava L.) de las variedades pera, regional roja y regional blanca. Se aplicaron con este fin los siguientes mtodos qumicos: mtodo HPLC para el contenido de vitamina C, el mtodo colorimtrico que utiliza el reactivo de Folin Ciocalteu en fenoles totales y los mtodos ABTS y FRAP para actividad antioxidante.
MATERIALES Y METODOS

El presente estudio se realiz en las instalaciones de la Universidad Nacional de Colombia. El material experimental consisti en tres variedades de guayaba que fueron cosechadas a mediados de agosto del 2008. La guayaba Roja y Blanca provino de Vlez (Santander) a una altura de 2.150 m de altitud donde la temperatura media es de 16,7 C con una precipitacin anual de 1.886 mm y la guayaba de la variedad Pera obtenido de los supermercados de Bogota. Para el estudio de estas tres variedades de guayaba primero en el momento de la recepcin, fueron seleccionadas, quedando para el estudio las guayabas en estado maduro, para observar el efecto de la actividad antioxidante y los fenoles sobre la fraccin comestible de guayaba se separaron en 4 lotes de guayaba Pera y Roja y en 3 lotes de guayaba Blanca. A las muestras enteras se les midi el dimetro longitudinal y transversal con un calibrador, el peso en balanza analtica, la dureza mediante el penetrmetro Fruit Peeler (0-12 Kgf/cm2). Posteriormente, las muestras fueron despulpadas y el conjunto corteza ms pulpa fue analizado. El cido ascrbico y el dehidroascrbico fueron analizados el mismo da en que se efectu el despulpado. Los anlisis de acidez titulable, slidos solubles, pH, humedad y la obtencin de los extractos para la medicin de fenoles
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totales y actividad antioxidante fueron realizados luego de un da de almacenamiento a -20 C en bolsas biodegradables. Reactivos. Los reactivos TPTZ (2, 4, 6-(tri-(2- piridil- s- triazina), ABTS (2,2-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-cido sulfonico)) fueron adquiridas de SIGMA. Trolox (cido6- hidroxi- 2, 5, 7, 8 tetrametilcromano- 2 carboxlico) fue de ALDRICH. cido ascrbico (C6H8O6), DL-Dithiothreitol y fosfato monobasico de potasio (KH2PO4) de MERCK, cido glico monohidratado (C6H2(OH)3COOH.H2O), adquirido de J.T.Baker y el reactivo de Folin-Ciocalteu adquirido de DC PANREAC. Todos fueron de grado analtico. Anlisis qumico En los anlisis fsico-qumicos fueron acidez titulable, humedad, slidos solubles totales y pH. La fraccin comestible de guayabas frescas se homogeneizaron y se conservaron congeladas en un envase hermtico hasta su anlisis. La acidez titulable se evalu en una solucin preparada con 2,5 0,1 g de guayaba con 50 mL de agua destilada, titulados con una solucin de NaOH 0,1 N con fenoftalena como indicador visual. El contenido humedad se midieron por mtodos gravimtricos en una estufa; para ello se pesaron 2,0 0,1 g de fraccin comestible, se secaron en la estufa a 70C durante 24 h, se enfriaron en un desecador hasta temperatura ambiente y se pesaron de nuevo para calcular por diferencia gravimtrica el agua evaporada durante el secado. El pH se midieron con un pH-metro Orion Research previamente calibrado con buffer pH 4,01 y 7,00; se pesaron 10,0 0.1 g de fraccin comestible de guayaba y se determin el pH introduciendo el electrodo en la solucin. Para el contenido de slidos solubles se midieron con un refractmetro Atago 8682, el resultado se expreso como grados Brix. Extraccin de compuestos con actividad antioxidante. Se pes 0,5 g de muestra y se agregaron 10,0 ml de metanol:agua (50:50). La mezcla fue puesta en agitacin por 30 minutos a 50 C. Posteriormente se centrifug a 6000 r.p.m durante 15 min a 4C. El sobrenadante se almacen en la oscuridad a -20 C. El residuo fue sometido a una segunda extraccin con 10,0 ml de acetona:agua (70:30) a temperatura 50 C por 30 minutos y se centrifug a 6000 r.p.m. por 15 min a 4C. En total se efectuaron cuatro extracciones con acetona:agua (70:30). Los cinco sobrenadantes fueron reunidos y almacenados a -20 C en oscuridad, estos fueron centrifugados a 5000 r.p.m. por 45 minutos a 4C. Sobre los sobrenadantes se efectu la cuantificacin de fenoles y las medidas de actividad antioxidante. Fenoles totales. Se evalu por duplicado, la concentracin de polifenoles totales se midi con el mtodo colorimtrico que utiliza el reactivo de Folin Ciocalteu, con algunas modificaciones, se prepar una curva de calibracin con cido glico (0, 50, 100, 250, 500 mg/L). El extracto de guayaba (20 L) se mezcl con 1,58 mL de agua y 100 L de una solucin al 10% de Folin Ciocalteu. La mezcla se dejo en reposo por 5 minutos. Seguidamente se adicion 300 L de una solucin al 20% de bicarbonato de sodio, se agito y se permitieron 2 horas en reaccin a temperatura ambiente. Se midi la absorbancia a 765 nm, con un espectrofotmetro Genesys 10 UV (Madison WI 53711, USA). Los resultados se expresaron como equivalentes de cido glico (EGA)/g fraccin comestible, tanto en base hmeda como base seca.

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Capacidad antioxidante La capacidad antioxidante se evalu por duplicado, se emplearon los mtodos de ABTS segn Re et al., 1999, FRAP segn Benzie y Strin, 1996 y DPPH segn Thaipong et al., 2006. Con algunas modificaciones. Para el mtodo de ABTS con la decoloracin del catin radical ABTS.+ conocida como actividad antioxidante total (AAT). Se prepar ABTS 7 mM y persulfato de potasio 0,45 mM, se mezclaron. Se dej reposar en oscuridad durante 16 horas a temperatura ambiente. Se diluy en etanol hasta alcanzar una absorbancia de 0,7 0,2 a 734 nm; esto es aproximadamente 700 L de reactivo + 20 ml de etanol. Se prepar una curva de calibracin con Trolox 5mM (0, 0.25, 0.5, 1.0, 1.5 M), se tomaron 1000 L del reactivo catin radical ABTS.+ y se adicionaron 10 l de soluciones de Trolox 5 mM. La mezcla se dejo reaccionar 6 minutos a 30C. Se midi la absorbancia a 734 nm con un espectrofotmetro Genesys 10 UV (Madison WI 53711, USA). Para las muestras se realizaron diluciones del 40% del extracto obtenido se midi de igual forma que los patrones, solo que el tiempo de incubacin fue de 45 minutos. Los resultados fueron expresados en mol Trolox/g fraccin comestible en base hmeda como en base seca. Mtodo FRAP, las soluciones stock incluyeron 300 mM de buffer acetato de sodio (0,164 g C2H3NaO23H2O y 1,68 mL C2H4O2), pH 3.6, 10mM TPTZ 2, 4, 6-(tri-(2piridil- s- triazina) en 40 mM HCL, y en 20mM de solucin de FeCl36H2O. La solucin de trabajo fue preparada con la mezcla de 25 ml de buffer de acetato de sodio, 2,5 ml de solucin de TPTZ y 2,5 ml de solucin FeCl36H2O. Se prepar una curva de calibracin con Trolox 5mM (0, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 1.5 M), se tomaron 900 L del reactivo de FRAP, se adicionaron 90 L de agua y 30 L de solucin de Trolox, se dejo reaccionar 4 minutos a 37 C. Se midi la absorbancia a 593 nm espectrofotmetro Genesys 10 UV (Madison WI 53711, USA). Para las muestras se realizaron diluciones del 40% del extracto obtenido se midi de igual forma que los patrones, excepto que el tiempo de incubacin fue de 2 horas. Los resultados fueron expresados en mol Trolox/g fraccin comestible en base hmeda como en base seca. cido ascrbico y dehidroascrbico. Se cuantific mediante la tcnica HPLC segn Gkhmen et al., 2000. Para la tcnica se cont con un equipo Shimadzu. 20 L de muestra o de patrn fueron inyectados a una columna en acero inoxidable, RP-18, Licrhosorb, Largo, ancho, 5 microm, operada a temperatura ambiente. La fase mvil fue fosfato monobsico de potasio (KH2PO4) 0,2 M ajustado a pH 2,4 con H3PO4 al 10% a un flujo de 0,5 mL/min. El fluido se monitore mediante un detector UV-vis a 254 nm a 30C. La curva de calibracin se construy con cido ascrbico entre 10 a 50 mg/L. El tiempo de retencin fue de 8,6 min. Para la extraccin se pes 2,0 0,1 g del pur y se extrajeron con 8,0 mL de agua desionizada mediante agitacin magntica durante 5 min. Los extractos fueron centrifugados a 5000 r.p.m. a 4C durante 15 min. El sobrenadante fue filtrado a travs de un filtro Millipore de 0,45 m. Para analizar el cido ascrbico se inyect el extracto previamente diluido, 1:4 en la variedad guayaba pera y 1:10 en guayaba roja y blanca. Para cuantificar el cido dehidroascrbico se mezclaron 1 mL del extracto diluido con DTT a una concentracin de 1 mg/mL. La mezcla de dej reaccionar durante 2 h en la oscuridad. Al cabo de dicho tiempo, el extracto se inyect en el equipo. Obtenindose el cido ascrbico total. El dehidroascrbico se calcul por diferencia entre el AA total y el cido ascrbico inicial.

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Anlisis estadstico. El anlisis estadstico para las tres variedades de guayaba se realiz mediante anlisis de varianza ANOVA y las diferencias significativas entre ellas, fueron separadas a travs del mtodo de Fisher (LSD); se consider p-valor < 0,05 como estadsticamente significativo. Todas las determinaciones se realizaron por duplicado. Se utiliz el paquete estadstico STATGRAPHICS Plus Versin 5.1 para la generacin de las figuras (Statgraphics, 1992), una para cada mtodo empleado en las variedades de guayaba (pera, regional roja y regional blanca).
RESULTADOS Y DISCUSION

Las variedades de guayaba empleados para el estudio estuvieron en estado maduro mostrndose en la tabla 1 las caractersticas generales del fruto y una comparacin de los mismos para cada variedad.

Figura 2: Guayaba Pera

Figura 3: Guayaba Regional Roja

Figura 4: Guayaba Regional Blanca 6 [54]

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Tabla 1. Propiedades fisicoqumicas de la guayaba (Psidium guajaba L.) de las variedades Pera, Regional Roja y Regional Blanca. PERA Dimetro longitudinal (cm) Dimetro transversal (cm) Peso (g)/fruta Dureza (kg/cm ) Brix Humedad (%) pH Acidez (gAA/100g FC1) Brix/Acidez
2

REGIONAL ROJA (17) (17) (17) (17) 5,0 - 7,0 4,0 - 6,5 63,3 - 103,4 2,6 - 9,3 (13) (13) (13) (13)

REGIONAL BLANCA 3,4 - 4,1 2,8 - 3,9 36,2 - 84,5 2,0 - 7,0 (9) (9) (9) (9) (3)

3,8 - 7,5 3,4 - 5,4 100 - 257 3,9 - 11,5 5,2 - 10,4

(4) 8,1 - 9,4

(4) 9,2 - 10

81,05 - 90,26 (4) 3,77 - 4,28 0,28 - 1,33 (4)

85,21 - 86,15 (4) 84,74 - 85,74 (3) 3,65 - 3,68 (4)

b

3,60 - 3,79 0,80 - 1,20

(3) b (3) (3)

(4) 0,75 - 0,82

(4)

7,82 - 18,57 (4)

10,38 - 11,73 (4) 8,33 - 11,50

Los valores entre parntesis representan la cantidad de muestras analizas. Letras iguales dentro de una fila indica que no hay diferencias significativas ( = 0,05). 1 Fraccin comestible.

Los valores promedios encontrados para la acidez titulable en porcentaje de cido ascrbico es de 0.70, 0.79, 0.94 % en las variedades pera, regional roja y regional blanca respectivamente. Se reportan valores de acidez titulable en porcentaje de cido ascrbico de 0,93% en guayaba agria (Lara et al., 2007) y en guayaba regional roja y blanca de 2,06% y 2,43% respectivamente (Restrepo et al., 2007). El valor promedio de pH encontrado es de 8.98, 3.64 y 3.69 en guayaba pera, regional roja y regional blanca respectivamente. Presentando una diferencia estadsticamente significativa con un nivel de confianza del 95,0%, siendo la variedad pera diferente a regional roja y blanca, mientras que, entre las variedades regional roja y blanca no hay diferencias. Lara et al., reporta un valor de 2.86 en guayaba agria madura. El valor del pH varia en funcin de la clase de fruta, durante el proceso de maduracin el fruto produce varios cidos, entre ellos el ascrbico, afectando el del pH (Avellaneda, 2006). El porcentaje de humedad, el ndice de madurez y el contenido de slidos solubles totales no muestran diferencias significativas entre las tres variedades analizadas. Contenido de vitamina C, fenoles totales y actividad antioxidante Varios componentes de los alimentos como carotenoides, vitamina C, vitamina E, compuestos fenlicos y sus interacciones contribuyen a la actividad antioxidante de los alimentos, por lo que es difcil medir la actividad antioxidante total por componentes activos individuales (Pinelo et al., 2004). Por lo que en el estudio se determinaron los antioxidantes en forma de actividad total por medio de los mtodos ABTS y FRAP, que se basan en mecanismos diferentes para la medicin de actividad antioxidante. ABTS mide la habilidad de transferencia de tomos de H fenlicos mientras que FRAP mide la
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capacidad reductora del extracto. La determinacin del contenido de fenoles totales fue incluida en el estudio debido a que en estudios anteriores se encontraron una alta correlacin entre fenoles totales y actividad antioxidante en varias clases de frutas segn lo indica Gorinstein et al., 2004. (Tabla 2). Tabla 2. Contenido de Vitamina C, fenoles totales y actividad antioxidante en la fraccin comestible de guayaba (Psidium guajava L.) en las variedades Pera, Regional Roja y Regional Blanca. PERA 50,18,2 (436,9116,2) 28,316,5 3 DHAA (203,8141,3) Vitamina C 78,413,5 (mg/100gFC) (640,7120,9) 29,817,7 Fenoles Totales (mg AG4/100 gFC) (232,9122,2) 95,538,8 ABTS (molTrolox/gFC) (845,9482,4) 54,732,8 FRAP (molTrolox/gFC) (416,3180,9)
1 AA (mg/100gFC2)

Los valores mostrados estn expresados tanto en base hmeda como en base seca los que estn entre parntesis. MediaSD obtenido del anlisis por duplicado. Letras diferentes corresponden a diferencias significativas por la prueba de ANOVA simple ( = 0,05). 1 cido ascrbico. 2 Para el anlisis se emplearon la fraccin comestible del fruto. 3 cido dehidroascrbico. 4 cido glico.

REGIONAL ROJA b 206,659,9 (1444,2414,8) b 62,112,03 (435,878,5) b 268,768,2 (1879,9468,9) 50,84,7 (357,734,8) 107,334,6 (755,3247,8) 79,98,5 (562,4 60,4)

REGIONAL BLANCA 179,628,7 (1222,5210,0) 37,111,8 (253,241,3) 216,732,0 (1475,7232,6) 45,68,9 (312,167,6) 100,123,7 (682,1160,6) 77,7610,58 (528,355,7)

El contenido de fenoles totales determinados en las variedades de guayaba pera, regional roja y regional blanca fueron 29.8, 50.8 y 45.6 mg AG/100g de fraccin comestible respectivamente. En estudios realizados en guayaba reportan valores de 616 y 813 mg AG/100g fraccin comestible para las variedades regional roja y blanca respectivamente provenientes de la regin de Vlez Santander (Restrepo, et al., 2007). La vitamina C total es la suma del cido L-ascrbico (AA) y su forma oxidada, el cido deshidroascrbico (DHAA). En el estudio se obtuvieron contenidos de Vitamina C en promedio de 78.4, 268.7 y 216.7 mg/100 g de FC en las variedades pera, regional roja y regional blanca respectivamente. Lara et al., reporta un valor de 121mg/100 g fraccin comestible y piel en guayaba agria proveniente del departamento de CrdobaColombia, mientras que el ICBF reporta para guayaba blanca madura un valor de 240mg/100g de parte comestible, para guayaba roja madura no presenta registro. El valor encontrado es similar al registrado por la ICBF, sin embargo el contenido de vitamina C en los frutos es muy variable y depende fundamentalmente de la especie y variedad. La actividad antioxidante obtenida en la parte comestible de las tres variedades fue mayor con el mtodo ABTS. Thaipong, et al., en su estudio indica la actividad antioxidante por los mtodos DPPH, FRAP, ABTS y ORAC para cuatro variedades de guayaba (Allahabad Safeda-pulpa blanca, Fan Retief, Ruby Supreme y Advanced selection) obteniendo una mayor actividad en la variedad Allahabad Safeda con el mtodo ABTS (37,9 mol Trolox/g masa fresca). 8 [56]
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Se presentar una comparacin del contenido de fenoles totales, vitamina C y actividad antioxidante para las tres variedades de guayaba. Para el contenido de fenoles totales se encuentra diferencia estadstica significativa entre las variedades de guayaba para un nivel de confianza del 95,0%, puesto que el p-valor del test F es 0,0261. Mostrando una diferencia significativa la guayaba roja con guayaba pera, mientras que la guayaba pera y regional blanca no muestran diferencias significativas al igual que la regional blanca con la regional roja (ver figura 5).
Fenoles Totales
63 53 43 33 23

1 = Pera 2 = Regional Roja 3 = Regional Blanca

mgAG/100g

2
Variedad de guayaba

Figura 5: Comparacin de medias obtenidas en las tres variedades de guayaba para el contenido de fenoles totales. Mtodos ABTS Y FRAP
ABTS
127
micromol Trolox/g

FRAP

93
micromol Trolox/g

117 107 97 87 77 1 2
Variedad de guayaba

83 73 63 53 43
1 2 3

Variedad de guayaba
1 = Pera 2 = Regional Roja 3 = Regional Blanca

Figura 6: Comparacin de medias en las tres variedades de guayaba para la actividad antioxidante por los mtodos ABTS y FRAP. Los valores de actividad antioxidante por los mtodos ABTS y FRAP estadsticamente no muestran diferencias significativas en las tres variedades de guayaba. Puesto que el

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p-valor del test F es 0,7838 y 0,0563 respectivamente, con un nivel de confianza del 95,0%. En el contenido de vitamina C el p-valor es 0,000 por lo que existe una diferencia significativa entre las tres variedades de guayaba con un nivel de confianza del 95%.
VITAMINA C
300 250
mg/100g

200 150 100 50 0 1 2

Variedad de guayaba

Figura 7: Comparacin mltiple de medias en tres variedades de guayaba para el contenido de Vitamina C. Siendo el contenido de vitamina C total en guayaba pera diferente a regional roja y regional blanca, mientras que la guayaba regional blanca no muestra diferencia respecto a la regional roja. Siendo mayor en regional roja con un contenido de 268,7 mg/100g fraccin comestible. Contenido de cido ascrbico en las variedades evaluadas de guayaba muestra diferencia estadsticamente significativa con un nivel de confianza del 95,0%, siendo el p-valor igual a 0,000.
AA
240 200
mg/100g

160 120 80 40 0 1 2
Variedad de guayaba

1 = Pera 2 = Regional Roja 3 = Regional Blanca

Figura 7: Comparacin de medias en tres variedades de guayaba para el contenido de cido ascrbico.

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Por una comparacin mltiple se determinaron que las medias son significativamente diferentes, siendo la variedad pera diferente a las variedades regional roja y regional blanca, mientras que la regional roja es igual a la regional blanca. Presentando un mayor contenido guayaba regional roja (206, 6 mg/100g fraccin comestible). La tabla ANOVA, muestra que el p-valor es 0,007, hay diferencia estadstica significativa entre los valores de DHAA y las variedades de guayaba con un nivel de confianza del 95,0%.

DHAA
79 69
mg/100g

59 49 39 29 19 1 2
Variedad de guayaba

1 = Pera 2 = Regional roja 3 = Regional blanca

Figura 8: Comparacin mltiple de medias en las tres variedades de guayaba para el contenido de cido dehidroascrbico. El contenido de cido dehidroascrbico es diferente entre guayaba pera y regional roja, en cuanto a guayaba pera y regional blanca no hay diferencias significativas, tambin existen diferencia entre la regional roja y blanca. Siendo mayor el contenido en guayaba regional roja (62,1 mg/100 g fraccin comestible).
CONCLUSIONES

Con base en los resultados obtenidos y bajo las condiciones utilizadas, se concluye que: El contenido de fenoles totales en fraccin comestible de guayaba vara de acuerdo a la variedad, siendo ms alta en guayaba regional roja con un 50,84 mol TROLOX/G de fraccin comestible. Los mtodos ABTS, FRAP dieron resultados similares para la actividad antioxidante medida en las tres variedades de guayaba (pera, regional roja y regional blanca). Existe una correlacin de estos mtodos con el contenido de fenoles totales, siendo mayor la actividad antioxidante en guayaba regional roja, seguida de regional blanca y pera, obtenindose 107.31, 100.15 y 95.53 mol TROLOX/G de fraccin comestible respectivamente con el ABTS, y de 79.95, 77.78 y 54,68 mol TROLOX/G fraccin comestible respectivamente con el mtodo FRAP. El contenido Vitamina C total es mayor en guayaba regional roja un valor de 268,7mg/100g fraccin comestible. Este contenido es alto y beneficioso para la salud ya que la dosis diaria recomendada es de 60 mg, que es suficiente para prevenir el
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memorias * red-alfa lagrotech * comunidad europea * cartagena 2008

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