PRACTICA N° 1

NORMAS BASICAS DE SEGURIDAD BIOLÓGICA Y CALIDAD QUÍMICA

EN EL LABORATORIO DE INGENIERIA GENETICA

INTRODUCCIÓN

SEGURIDAD BIOLOGICA

Las reglas de seguridad, en general comprenden un conjunto de medidas preventivas,

destinadas a mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes
biológicos, físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos, asegurando que
el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra la salud y
seguridad de los estudiantes y todo el personal que realice practicas en el laboratorio. Es
decir, que “toda muestra, reactivo o material que este en contacto directo con el personal
deben ser considerados como potencialmente infectantes y nocivos y se deben tomar las
precauciones necesarias para prevenir que ocurra algún tipo de accidente”.

El riesgo biológico, puede estar dado por agentes biológicos, el cual es definido, como,
“cualquier microorganismo (virus, bacterias, hongos o parásitos), con inclusión de los
organismos genéticamente modificados, los cultivos celulares o endoparásitos humanos,
susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad” en alumnos y
trabajadores expuestos.

El riesgo de la actividad, está relacionado con el tipo de manipulaciones realizadas con el

microorganismo. Las personas que trabajan en esta área manejan diferentes tipos de
muestras (fluidos biológicos, orina, sangre, suero, tejidos) que pueden estar contaminados
con agentes biológicos, cultivos de células, líquidos bacterianos o cultivos agar y virus. El
nivel de riesgo al que estas personas están expuestas, depende de la naturaleza de la
muestra. La sangre, el suero o las muestras de tejidos, probablemente, contienen una
concentración baja de agente infeccioso, y por consiguiente, representan un riesgo pequeño.

Los cultivos de bacterias purificados, o los concentrados de células con virus en soluciones
líquidas, tienen un riesgo mucho más alto. Dentro del laboratorio puede darse la
contaminación debido a la formación de aerosoles, la ingestión, la exposición de las
membranas mucosas o la inoculación accidental. Los aerosoles son considerados el modo
de transmisión más peligroso de un agente infeccioso. Los aerosoles pueden generarse por
la manipulación de líquidos, la fragmentación de tejidos, la preparación de placas con
bacterias o el empleo inapropiado de los equipos de laboratorio, que incluye a las
centrifugadoras, o rotura de tubos con cultivos celulares (Collins, 1983).

El control del riesgo se lleva a cabo mediante la adopción de medidas de prevención

adecuadas, tales como:

 Medidas de confinamiento adecuadas.

 Equipos adecuados.

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 Reglas de conducta en el laboratorio adecuadas.
 Medidas de protección general y personal capacitado.

La acciones de reducir o eliminar el riesgo de contaminación son de vital importancia, al

igual que la profesionalidad, el entrenamiento, la experiencia y el sentido común; por tanto
la formación y puesta al día del personal, así como la elaboración de un manual de
procedimientos con las indicaciones a seguir durante un incidente o accidente durante el
proceso, forman parte indispensable del programa de prevención. El manual de
bioseguridad debe estar presente en el lugar de trabajo, y ser entregado a los trabajadores, al
inicio de su actividad con agentes biológicos.

Los niveles de contención, representan los requerimientos necesarios para realizar una
protección adecuada del personal que trabaja con agentes biológicos, para prevenir la
contaminación ambiental. Para ello se deben seguir algunas pautas como:

 El laboratorio debe contar con el suficiente espacio para trabajar sin que exista la
posibilidad de chocar con los equipos o las personas.
 Las superficies de paredes, techos y suelos deben ser impermeables y de fácil limpieza.
 Las mesas de trabajo serán impermeables y resistentes a ácidos, álcalis, disolventes
orgánicos y calor moderado.
 Los armarios deben contener objetos de uso inmediato y se debe tratar de evitar el
desorden en los bancos de trabajo y áreas de paso.
 Se deberá disponer de ducha de accionamiento por pedal o el codo, preferentemente
situada en la zona de salida.
 Se debe disponer de lavaojos en una zona fácilmente accesible.
 Las puertas deben ser resistentes al fuego, de autocierre y con paneles trasparentes.
 Se debe disponer de un autoclave para descontaminar los residuos que genere el
laboratorio.
 La ropa del personal debe guardarse en áreas separadas de la de trabajo.

Las cabinas de seguridad biológica son un sistema de contención primario, ya que impiden
la difusión del material biológico potencialmente peligroso. Las cabinas se clasifican en
tres categorías de acuerdo al nivel de protección garantizado para el operario y el ambiente.
La elección de una cabina de seguridad biológica viene determinada por el riesgo asociado
al agente biológico o al MMG manipulado. La instrumentación presente en el área de
trabajo o cercana a la cabina, si genera fuentes de calor o corrientes de aire puede alterar el
funcionamiento de la cabina disminuyendo la protección. Si tiene lámparas UV, éstas deben
limpiarse semanalmente, para eliminar el polvo o la suciedad que disminuyen el efecto
germicida de los rayos UV. Las lámparas deben estar apagadas durante la actividad,
encenderse 15 minutos antes de iniciarla y 15 min, después de acabar el trabajo. La
eficiencia de las lámparas debe examinarse periódicamente.

Las cabinas de seguridad biológica de Clase I, se emplean con agentes biológicos de bajo
riesgo; protegen al trabajador y al ambiente de contaminaciones eventuales, pero no a la
muestra. El aire externo es aspirado dentro de la cabina y se expulsa al exterior tras ser

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filtrado por un filtro HEPA, y si se emplean disolventes orgánicos, a través de un filtro de
carbón activo.
Las cabinas de seguridad biológica de Clase II, se emplean con agentes biológicos de
riesgo moderado; protegen al trabajador, al ambiente y a la muestra de una contaminación
eventual. El aire exterior es aspirado y transportado a la zona de trabajo tras ser purificado
por un filtro HEPA. El aire extraído también es filtrado por un filtro HEPA antes de ser
expulsado al exterior.
Las cabinas de seguridad biológica de Clase III, se emplean con agentes biológicos de
alto riesgo; están herméticamente selladas y el ambiente interno es mantenido bajo presión
negativa. Todas las operaciones en el área de trabajo de la cabina son realizadas a través de
unos guantes frontales. Este tipo de cabinas garantizan la protección casi total del
trabajador, el ambiente y la muestra. El aire que entra pasa a través de un filtro HEPA,
cruza la superficie de trabajo y pasa a través de dos filtros HEPA o a través de un filtro
HEPA y un incinerador, antes de ser expulsado al exterior. Las cabinas de Clase III se
encuentran normalmente en laboratorios con muestras de alto nivel de contaminación y de
acceso estrictamente controlado.

Centrifugas: para realizar un buen centrifugado es necesario seguir estas indicaciones:

 Colocarla de forma que sea accesible a todo el personal.
 Seguir las instrucciones del manual de instrucciones y realizar un mantenimiento
periódico.
 Equilibrar los recipientes y los accesorios de la centrífuga con líquidos no corrosivos.
 Utilizar tubos de centrífuga de cristal grueso o de plástico, si los agentes biológicos que
han de ser centrifugados presentan un riesgo de contaminación alto o moderado se
recomienda el uso de tubos cerrados y con código de barras.
 Sellar los tubos adecuadamente para impedir la difusión eventual de aerosoles
contaminantes.

Las refrigeradoras, congeladoras y contenedores de nitrógeno liquido: se utilizan para el

almacenamiento de muestras biológicas, reactivos y soluciones, etc. Para su correcto uso
deben seguirse las siguientes indicaciones:

 Instalar las refrigeradoras y congeladoras a distancia de las fuentes de calor y separados

de las paredes.
 Utilizar contenedores apropiados para bajas temperaturas de almacenamiento.
 No llenar excesivamente los contenedores del material que vaya a congelarse para
evitar su derrame.
 Etiquetar claramente todos los contenedores con la información del contenido,
trabajador y fecha.
 Utilizar guantes de protección frente a agentes biológicos también deben usarse guantes
contra las bajas temperaturas para la extracción de muestras a -80ºC y en nitrógeno
líquido, mascara facial y delantal para evitar quemaduras por el frío. Además los
contenedores de nitrógeno líquido deben guardarse en un ambiente bien ventilado, con
el fin de prevenir posibles incidentes de asfixia.
 Los líquidos inflamables deben almacenarse en neveras y congeladores sin luz interna.

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 Limpiar periódicamente las neveras o congeladores asegurándose previamente que
están desenchufados de la corriente. Durante la operación el trabajador deberá llevar
mascarilla y guantes de goma; el material sin etiquetar deberá ser eliminado tras su
esterilización.
 Desinfectar las superficies internas de las neveras o congeladores con etanol al 70%.

Las incubadoras por vía húmeda son una gran fuente de contaminación para muestras
biológicas, así como para el ambiente. Deben limpiarse con regularidad. Antes de
limpiarlas hay que vaciar todos sus contenidos (bandejas, matraces, gradillas, etc.),
entonces se limpia la parte interna con un detergente no tóxico y se eliminan los restos de
detergente con alcohol al 70%, volviendo a colocar el material en su interior. Si por
casualidad un cultivo celular se vuelca en la incubadora el agua de su interior debe ser
eliminada tras pasar por el autoclave.

La reglas para trabajar en el laboratorio: La mayor parte de la contaminación debida a los

agentes infecciosos ocurre como consecuencia de los errores humanos. Para eliminar o
limitar el riesgo de contaminación se van a definir una serie de reglas de trabajo e higiene
que tienen en cuenta todos los aspectos de este trabajo, desde la organización del
laboratorio a la conducta que debe adoptar cada trabajador durante sus actividades (CDC y
NIH guidelines, 1976; 1999; Manuale de biosiccurezza in laboratorio, 1995). Como regla
general de conducta para las Buenas Prácticas de Laboratorio hay una serie de normas que
cada persona debe seguir, con el fin de eliminar o limitar el riesgo presente en el ambiente
de trabajo, y garantizar la calidad de cada trabajo.

Las normas son las siguientes:

 El acceso al laboratorio (incluyendo animales) debe estar estrictamente controlado.
 Mantener las puertas cerradas durante la experimentación.
 Mantener el laboratorio limpio, en orden y libres de cualquier objeto que no sea
necesario para el trabajo.
 Cubrir las superficies de trabajo con plástico absorbente cubierto con papel.
 Descontaminar las superficies de trabajo, al menos una vez al día, y cada vez que un
material potencialmente contaminante se derrame, retirar con papel absorbente y
colocar en el contenedor adecuado de residuo biológico.
 No se permitirá pipetear con la boca.
 Todos los procedimientos técnicos se practicarán de forma que eviten, en lo posible, la
formación de aerosoles.
 Colocar las pipetas contaminadas en un contenedor con desinfectante o directamente en
el contenedor de residuos biológicos.
 En el laboratorio se utilizarán batas, uniformes y otras prendas apropiadas; no se llevará
ropa de laboratorio fuera de éste; se desinfectarán las prendas contaminadas por
procedimientos apropiados.
 Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos se
utilizarán gafas de seguridad, viseras o pantallas faciales y otros dispositivos de
protección.
 Inicie su práctica mediante la limpieza del área de trabajo, Sature el área de trabajo con
una disolución desinfectante, limpie toda la superficie con un papel limpio y deje secar.

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 De esta forma se asegura que el área de trabajo esta limpia. Repetir la operación al
finalizar la práctica.
 Todos los cultivos, reactivos y disoluciones preparadas por usted o su equipo deberán
estar adecuadamente etiquetadas con su nombre, clase, fecha y práctica. El etiquetado
es crítico para el uso adecuado y eliminación de los reactivos.
 Antes de encender un mechero asegúrese que no haya fugas de gas en otras mesas,
igualmente al apagar su mechero asegurese que la llave esta bien cerrada. Ubique los
lavabos, lavaojos, extinguidores, salidas de emergencia o rutas de evacuación.
 Toda la cristalería contaminada con materiales biológicos o tóxicos, deberá ser
desinfectada o neutralizada antes de su eliminación o reuso. Coloque todo el material
para esterilización en un contenedor para tal fin. Las pipetas deberán ser colocadas en
disoluciones desinfectantes (mezcla crómica).
 Está prohibido comer, beber y fumar en las áreas del laboratorio.
 Considerar que un resultado de calidad requiere de toda la atención, enfóquese en su
trabajo, por lo que se recomienda no charlar ni hacer bromas, ya que podrían causar
daños a terceros además de estropear el ensayo, durante el sembrado bacteriológico y
extracción de DNA y RNA, está estrictamente prohibido hablar para evitar
contaminación y degradación de los ácidos nucleicos.
 Las manos tienen nucleasas que degradan los ácidos nucleicos, hay que lavarse las
manos y ponerse guantes antes de cada práctica. Por otro lado, cualquier reactivo del
laboratorio debe ser considerado como potencialmente tóxico ya que existen muchos
factores que influyen en la toxicidad de los agentes nocivos (observará que en las
etiquetas de todos los reactivos se especifica que éstos son “para uso exclusivamente
experimental”).

Los guantes sirven para la protección del trabajador frente a una gran variedad de peligros:
sustancias químicas, altas y bajas temperaturas, microorganismos, toxinas, material
radiactivo, mordeduras y arañazos de animales.

El riesgo químico: las sustancias químicas son una fuente de riesgo, por lo que éstos han de
ser controlados. Con el fin de evaluar los riesgos deben tenerse en cuenta diversos
parámetros: las propiedades físico-químicas, la reactividad, el daño a la salud a personas o
animales y al medio ambiente.

En un laboratorio donde se manipulan productos químicos inflamables el riesgo de incendio

ha de tenerse muy en cuenta para su manejo y almacenamiento. Una serie de principios
básicos deben ser aplicados:
 No manipular sustancias inflamables cerca de la llama o un punto de calor. Utilizar un
secador de pelo no evita este peligro. Las sustancias químicas muy inflamables deben
ser manejadas en muy pequeñas cantidades y si es posible en campanas de gases.
 No almacenar contenedores de disolventes inflamables en estanterías sobre los equipos
de trabajo. Deben almacenarse en armarios ventilados o en cabinas convenientemente
emplazadas lejos de las salidas de emergencia.
 No almacenar grandes cantidades de productos químicos en el laboratorio. El stock de
productos químicos no deberá ser superior a las necesidades de consumo de 1 ó 2 días,
para reducir el riesgo en caso de incendio.

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 No almacenar líquidos volátiles inflamables en el refrigerador. Todas las neveras del
laboratorio deben contar con termostato externo y no deben tener ninguna bombilla en
su interior. En caso de incendio deben emplearse extintores adecuados. Es necesario
conocer su localización y el tipo de extintor a emplear (de acuerdo al producto químico
en llamas).

Uno de los principales objetivos de la prevención frente al riesgo químico es evitar la

interacción de unos agentes químicos con otros (agua, oxígeno, sustancias incompatibles...)
o con elementos vitales constitutivos del organismo. Por norma, los agentes químicos deben
ser considerados como sustancias potencialmente peligrosas. Se debe identificar los
peligros y evaluar los riesgos, leyendo las fichas de seguridad de los productos y sustancias
químicas.

El manejo de compuestos carcinogenos, mutagenicos y toxicos, son aquellas sustancias

que están clasificadas como carcinógenos a los humanos o razonablemente sospechoso
como cancerígenos a los humanos; teratógenos o mutagénicas en las monografías de la
Agencia Internacional del Cáncer (IARC) o estén catalogadas como tal por el proveedor de
la sustancia. Los procedimientos de manipulación de los cancerígenos químicos deben estar
adaptados a las propiedades fisicoquímicas de los compuestos, teniendo en cuenta, las tres
presentaciones si son compuestos volátiles (trabajo bajo campana o cabina), compuestos no
volátiles o polvos electrostáticos.

Algunas de las señalizaciones más utilizadas en el laboratorio son las siguientes:

 Carcinógeno: agente que se sabe o se sospecha que causa cáncer por exposición directa
 Corrosivo: agente químico que destruye tejido y materiales por contacto directo
 Inflamable: sustancia volátil con capacidad de autoignición
 Mutágeno: que causa alteraciones en el material genético
 Teratógeno: que causa daño al feto
 Tóxico: que causa daño a la salud
 Veneno: sustancia que ingerida, inhalada o absorbida por la piel y/o mucosas puede
producir efectos dañinos al organismo, frecuentemente irreversibles y puede ser fatal.

Se debe almacenar las sustancias carcinógenas, mutagénicas y teratógenas separadas de

otras sustancias. Se identifica en un croquis o un plano de laboratorio la localización de
estas sustancias. Se limita la cantidad almacenada de estas sustancias a lo estrictamente
necesario para una semana de trabajo. Se debe mantener un inventario de las sustancias
carcinógenas en el laboratorio. Cuando se manipulan se debe mantener al personal
femenino en estado de gestación totalmente aislado de las áreas donde se utilicen estas
sustancias.

CALIDAD QUÍMICA

La Biología Molecular y consecuentemente la Ingeniería Genética, en la actualidad han

tomado un auge tan grande que le merece una categoría especial en la preparación de los
reactivos, por ello, es común ver catálogos genéricos donde los reactivos a la venta tienen
una certificación “grado biología molecular” y por su alta demanda es posible encontrar las

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disoluciones ya preparadas (normalmente en forma de disoluciones madre concentradas) y
listas para su uso.

El Grado Biología Molecular: se refiere a que dicho producto ha sido probado en ensayos
de biología molecular y el producto en cuestión esta libre de nucleasas y proteasas, así
como de altas concentraciones de sales, que de otra manera podrían dañar a los ácidos
nucleicos. Dicho control de calidad asegura que los métodos de producción,
almacenamiento y envío de estos productos reúnen las necesidades de los laboratorios
dedicados al estudio de esta área del conocimiento o bien, que la usan como herramienta
experimental.
Las Disoluciones Concentradas: son disoluciones que se preparan previamente a los
ensayos donde se les utiliza, las finalidades de las disoluciones concentradas es uniformizar
los ensayos, optimizar el tiempo de preparación y minimizar el error de la pesada al
momento de preparar la disolución. Normalmente se preparan disoluciones diez veces
concentradas (10X), aunque también las hay cinco (5X) y dos (2X) veces concentradas.
Pueden ser compradas o bien preparadas por el laboratorista, en cualquier caso, así como
ahorran tiempo, también pueden ser fuente de errores y confusiones, por lo que hay que
tener las siguientes precauciones:

1) Homogenizar muy bien la disolución concentrada antes de diluirla, ya que el

almacenamiento puede producir gradientes de densidad de algunos de los componentes
(cuando se almacenan en congelación o refrigeración), los periodos grandes de
almacenamiento pueden provocar la precipitación de sales, en tales casos, es
recomendable primero calentar la disolución concentrada, luego homogenizarla y
finalmente tomar la cantidad necesaria para la disolución de trabajo. El no tomar la
consideración previa altera el ensayo actual y futuro debido a que no todos los
componentes están presentes en las concentraciones adecuadas y además altera la
concentración de la disolución madre, ya que a partir de ese momento estará más
concentrada por un factor desconocido.
2) Es muy recomendable alicuotar (fraccionar) las disoluciones concentradas en
volúmenes de trabajo para hacer la dilución directa.

Los reactivos de Biología Molecular deben estar libres de nucleasas y otros contaminantes
como sales y/o detergentes. En tal perspectiva, la cristalería debe ser lavada con detergentes
libres de fosfatos y lavada con mezcla crómica (24 horas), después habrá que enjuagar
abundantemente con agua corriente, y posteriormente tres enjuagues con desionizada o
bidestilada. Dejar secar al aire y posteriormente tapar con papel aluminio; la cristalería
deberá hornearse a >200°C por lo menos durante 2 horas. Dejar enfriar antes de su uso. El
agua utilizada para la preparación de los reactivos es grado desionizada y estéril. Algunas
compañías venden utilería de plástico para alicuotar las disoluciones una vez preparadas,
ésta utilería (tubos de ensaye, puntas, pipetas, tubos de centrifuga, etc.) viene etiquetada por
el proveedor como “Dnase-, RNase-free”.

Los reactivos como enzimas, deben ser mantenidos en baño de hielo. Los productos de
PCR y las plásmidos, son fuente de contaminación, evite destaparlos innecesariamente y
utilice pipetas exclusivas para su manejo. La observación de geles en el tras iluminador

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debe hacerse con careta. Lavarse las manos antes y después de trabajar en el laboratorio.
No tocar con las manos enguantadas ojos, nariz u otras mucosas expuestas. Desinfectar el
área de trabajo antes y después de cada trabajo utilizando hipoclorito al 1% por 15 minutos,
también se puede utilizar alcohol antiséptico.

En el uso de micropipetas, son muchas las compañías que las fabrican y aunque varían los
diseños, el método adecuado de pipeteo es uniforme. Aunque cada pipeta es adquirida con
su manual de uso, la práctica siguiente tiene como finalidad adiestrar al estudiante en el
manejo de las micropipetas.

Operación:
1) Ajuste al volumen deseado mediante el tornillo de ajuste, para mejor precisión ajuste de
un mayor volumen a un menos volumen, por ejemplo: si el volumen esta en 10 uL y
usted desea 20 uL, llevar el tornillo hasta unos 25 uL y posteriormente baje lentamente
hasta los 20 uL de volumen deseado.
2) Inserte la micropipeta en una punta limpia y presione firmemente, en la medida de lo
posible, no toque la punta con las manos, si por alguna razón lo tiene que hacer, hágalo
en la base y nunca en la punta.
Puntas azules: rango de operación de 200 a 1000 µL
Puntas amarillas: rango de operación de 20 a 200 µL
Puntas blancas: rango de operación de 0.5 a 20 µL
3) Presione con el pulgar el botón superior hasta el primer tope y mantenga presionado. El
embolo hará un vacío equivalente al volumen ajustado.
4) Manteniendo presionado el botón, inserte la punta verticalmente en la superficie del
líquido que desea tomar, NO inmersa toda la punta, solo unos 2 mm.
5) Succione lentamente dejando retornar suavemente el botón superior a su posición
original. Nunca deje de presionar al botón de manera brusca.
6) Espere unos 2 segundos aún con la punta inmersa para que la succión del líquido sea
total.
7) Retire la micropipeta y observe que no quede líquido adsorbido a la superficie exterior
de la micropunta. Lleve la punta al contenedor deseado y lleve la punta hasta la
superficie del tubo. Debido a que se manejan volúmenes muy pequeños, en este tipo de
pipeteos no es aconsejable dejar resbalar por la pared del tubo, al contrario, se
recomienda depositar en el tubo y si es sobre una disolución, habrá que tocar la
superficie de la disolución para depositar los µL pipeteados.
8) Para expulsar el volumen tomado, presione suavemente el botón superior de la
micropipeta hasta el primer tope, espere unos 2 segundos y cuando observe que ya no
expulsa mas líquido, presione hasta el segundo tope, ello es un volumen residual de aire
que asegura la expulsión total del líquido.
9) Con el botón superior presionado, retire la micropunta y deséchela presionando el botón
de expulsión en el recipiente adecuado para el mismo fin.

Precauciones: La consistencia en el pipeteo asegura la reproducibilidad del mismo. Por

ello ponga atención a los siguientes puntos: a) la velocidad y suavidad durante la presión y
liberación del botón superior de la micropipeta; b) la presión aplicada al primer tope; c) la
profundidad de inmersión en el líquido; d) el ángulo de pipeteo; e) si aparece una burbuja
de aire en la micropipeta, retorne el líquido, verifique el ajuste de la punta a la pipeta, y

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vuelva a pipetear mas suavemente, si se repite la aparición de la burbuja, deseche la punta y
repita el proceso con una punta nueva. Utilizar las micropipetas dentro de los valores
establecidos y al finalizar déjelas en el máximo permitido, a fin de prevenir la
descalibración.

OBJETIVOS

 Establecer las pautas y recomendaciones necesarias para tener un ambiente controlado y

libre de peligros durante la ejecución de prácticas y de experimentos en el laboratorio
de Ingeniería Genética.
 Familiarizar al estudiante en las normas de calidad de los reactivos y materiales más
usados en Ingeniería Genética.

METODOLOGIA DE TRABAJO
 En pequeños grupos de trabajo, los alumnos deberán identificar los posibles riesgos en
el laboratorio de ingeniería genética y las medidas necesarias que se pueden llevar a
cabo para minimizarlos.
 También enumerarán y describirán los equipos en el laboratorio de ingeniería genética.
Entender los procedimientos de seguridad para la utilización satisfactoria de estos
equipos.

CUESTIONARIO
1. ¿Qué es Bioseguridad?
2. ¿Porque es importante seguir los procedimientos de Bioseguridad en el laboratorio?
3. ¿Qué clase de materiales y reactivos presentan riesgo de alteración en la salud?
4. ¿Cuál es el procedimiento a seguir cuando se presenta un accidente?

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Manual de seguridad para investigadores en laboratorios en Biotecnología,
http://www.juntadeandalucia.es/empleo/anexos/23_1_1.pdf
2. Safety in health-care laboratories. Geneva, World Health Organization, 1997,
(http://whqlibdoc.who.int/hq/1997/WHO_LAB_97.1.pdf).
3. Garner JS, Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Guideline for
isolation precautions in hospitals. American Journal of Infection Control, 1996, 24:24–
52, (http://www.cdc.gov/ncidod/hip/isolat/isolat.htm).
4. Class II (laminar flow) biohazard cabinetry. Ann Arbor, MI, National Sanitation
Foundation, 2002 (NSF/ANSI 49–2002).
5. Ley 27104 de mayo 1999 – Ley de prevención de riesgos derivados del uso de la
biotecnología.
6. D.S. 108-2002-PCM de octubre 2002 - Reglamento de ley de prevención de derivados
del uso de la biotecnología.
7. http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11SP.pdf.
8. http://biologiacomparadainteractiva.files.wordpress.com/2011/08/laboratorio-no-1-
bioseguridad.pdf

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