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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS


CARRERA DE MEDICINA
Abril Agosto 2016

ASIGNATURA: LABORATORIO DE MICROBIOLOGA


PRACTICA 1: Introduccin al Laboratorio y Bioseguridad en
microbiologa
RESULTADOS DEL APRENDIZAJE:
Aplica las normas de bioseguridad en los Laboratorios Docentes de Microbiologa

INTRODUCCION
Los estudiantes estn expuestos de diversas formas a la adquisicin de infecciones en el
laboratorio de microbiologa. Entre esas formas figuran las siguientes:
-

Frotarse los ojos o la nariz con las manos contaminadas


Inhalar aerosoles producidos durante los procedimientos de centrifugacin, la
utilizacin de agitadores vorticiales o la manipulacin de lquidos con cultivos que se
derramaron
Ingerir microorganismos por accidente, al llevarse los dedos o un lapicero a la boca
Sufrir inoculacin percutnea, por ejemplo, al pincharse con una aguja o vidrios rotos

Los riesgos existentes en un laboratorio de microbiologa se pueden extender a los


laboratorios adyacentes y a las familias de los que trabajan en el laboratorio, es interesante
destacar que las personas de entre 17 y 24 aos son afectados con mayor frecuencia 1.
A partir del ao 1913, se incluyen por primera vez prcticas de seguridad para el laboratorio
de microbiologa. Estas pautas, se ampliaron en el siglo XXI, hasta incluir no slo la
manipulacin adecuada de los materiales biolgicos peligrosos hallados al procesar las
muestras o manipular microorganismos infecciosos, sino tambin seguridad en caso de
incendio o problemas elctricos, la manipulacin, el almacenamiento y la eliminacin de
compuestos qumicos y sustancias radiactivas.
En el ao 1983, la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), public la primera edicin del
Manual de seguridad en el laboratorio, en el que alentaba a los pases a aceptar y aplicar
conceptos bsicos en materia de seguridad biolgica y a elaborar cdigos nacionales de
prcticas para la manipulacin sin riesgo de microorganismos patgenos en los laboratorios
que se encuentran dentro de sus fronteras nacionales.
Bioseguridad: Se define como una conducta que aplica un conjunto de medidas preventivas,
destinadas a mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes
biolgicos, fsicos o qumicos, logrando la prevencin de impactos nocivos, asegurando que el
desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra la salud y seguridad
de trabajadores de la salud, estudiantes, pacientes, visitantes y el medio ambiente. En
cambio, la proteccin biolgica se refiere a las medidas de proteccin de la institucin y del
personal destinadas a reducir el riesgo de prdida, robo, uso incorrecto, desviaciones o
liberacin intencional de patgenos o toxinas.
Precauciones estndares: En 1987 los CDC (Centers for Disease Control) publico Universal
Precautions y que desde 1996 se conocen como Precauciones estndares (Standard
Precautions), sin ellas las prcticas seguras en laboratorio no se pueden realizar.

a).- USO DE BARRERAS O EQUIPO DE PROTECCIN


Las barreras fsicas paras las infecciones en el laboratorio pueden clasificarse en personales o
institucionales. Las barreras personales son: la higiene personal y el equipo de proteccin con
guantes, proteccin ocular y mascarilla, proteccin corporal con mandil, mandiln, gorras y
zapatos. Mientras que las barreras institucionales comprenden al equipamiento que mitigue el
contacto directo con los patgenos Ej.: cmara de flujo laminar, cabina de bioseguridad.

b).- ELIMINACIN DE DESECHOS


Elementos, sustancias, compuestos, residuos o mezclas de ellos que, independientemente de
su estado fsico, representen un riesgo para el ambiente, la salud o los recursos naturales, por
sus caractersticas corrosivas, reactivas, explosivas, txicas, inflamables y biolgico
infecciosas (CRETIB). Se conciben los residuos como: Residuos No Peligrosos, Residuos
Peligrosos, y stos a su vez tienen un impacto ambiental: Calidad del agua, Calidad del suelo
y Calidad del aire.
Residuos no peligrosos: Son aquellos producidos por el generador en cualquier lugar y en
desarrollo de su actividad, que no presenta ningn riesgo para la salud humana y/o el medio
ambiente; se consideran en este grupo los residuos biodegradables, reciclables, inertes y
ordinarios o comunes.
Residuos peligrosos: Son aquellos residuos producidos por el generador con algunas de las
siguientes caractersticas: infecciosas, combustibles, inflamables, explosivas, reactivas,
radioactivas, voltiles, corrosivas y/o txicas, que pueden causar dao a la salud humana y/o
al medio ambiente. As mismo se consideran peligrosos los envases, empaques y embalajes
que hayan estado en contacto con ellos.
c).- AGENTES BIOLGICOS
Los CDC y el National Institute of Health clasificaron los organismos infecciosos dentro de
grupos de riesgo. El documento se puede obtener en el sitio de internet:
http//www.cdc.gov/od/ohs/biosfty/bmb14/bmb14toc.htm.
INDICACIONES PARA PROTECCIN POR NIVELES DE LABORATORIO. En este sentido, el
diseo y medios de contencin biolgica de los laboratorios se orientarn en funcin de los
cuatro grupos de riesgo citados en el punto anterior, es decir:
1. Bsico Enseanza bsica, mesa de laboratorio al descubierto y lavabo superior.
2. Bsico Servicios de nivel de seguridad, ropa Trabajo en mesa al Nivel 2 atencin primaria;
protectora; descubierto y CSB* diagnstico, seal de riesgo para posibles investigacin
biolgico aerosoles. *CSB: Cabinas de seguridad
3. Contencin Diagnstico Prcticas de nivel 2 CSB I o II adems de otros Nivel 3 especial,
ms ropa especial, medios de contencin investigacin acceso controlado primaria para todas
y flujo direccional las actividades del aire
4. Contencin Unidades de Prcticas de nivel 3 CSB de clase III o trajes mxima patgenos
ms cmara de presurizados junto Nivel 4 peligrosos entrada con cierre con CSB de clase II,
hermtico, salida con autoclave de doble ducha y eliminacin puerta (a travs de la especial
de residuos
En el laboratorio de Microbiologa disponemos de varios implementos, los cuales van hacer
utilizados en el presente ciclo, que son detallados a continuacin:

Frascos de plstico tapa rosca, que contienen los medios de cultivo en polvo para
preparar
Cajas petri
estriles, tienen la capacidad para 15 ml de medio de cultivo
aproximadamente, en el cual al ser sembrado crecen los microorganismos, se incuba
en posicin invertida.
Asas de inoculacin, compuestas de mango y filamento de platino o nicromo que
terminan en aguja o aro calibrado para tomar volmenes de 0,01 y 0,001 ml.
Aplicadores de algodn estriles, que sirven para tomar la muestra.
Mechero Bunsen, encargado de suministrar la fuente de calor durante las siembras,
adems de esterilizar
las asas para transferir cultivos vivos de un recipiente a otro.
Placas portaobjetos y laminillas cubreobjetos, para llevar a cabo los frotis y su
observacin microscpica.
Equipos: Cabina de bioseguridad, autoclave e incubadora

MEDIDAS DE PREVENCIN Y BIOSEGURIDAD EN LAS PRCTICAS.


El conocimiento y la aplicacin adecuada de estas normas antes, durante y despus de cada
prctica es un deber de cada estudiante en el laboratorio.
LAVADO DE MANOS
Existen dos tipos de lavado de manos, el clnico y el quirrgico. Esta vez nos enfocaremos en
el clnico que ser el que se realice en el Laboratorio Docente con ms frecuencia
Es la medida ms econmica sencilla y eficaz, para prevenir infecciones intrahospitalarias, ya
que en las manos se transportan todo tipo de bacterias, tanto flora residente como
transitoria. La tcnica para el lavado de manos es:
Abrir el chorro de agua y humedecer las manos hasta las muecas, Tomar el jabn lquido o
en barra y frotarlo hasta generar espuma primero en las palmas de distal a proximal, luego en
los espacios interdigitales de arriba abajo la palma derecha con dorso izquierdo y vsceras,
despus espacio interdigital palma con palma y frotar pulgar Luego las yemas de los dedos de
mano izquierda en palma derecha y viceversa, por ultimo frotar las muecas.
Secarse con papel desechable y luego con el mismo cerrar la llave y eliminar en el tacho
correspondiente

segundos

Todo esto en aproximadamente 60

Uso de guantes: Reduce el riesgo de contaminacin de microorganismos en estudiantes,


trabajadores e instructores.
El uso de guantes nunca debe sustituir el lavado de manos
Uso de mascarilla y lentes de proteccin: Es importante colocar la mscara antes de
calzar los guantes. Asegurar bien la mscara colocando las tiras elsticas alrededor de las
orejas, atando las tiras elsticas alrededor de la cabeza o atndola firmemente a la cara
utilizando los cabos que pasan alrededor de la cabeza y el cuello. Doblar el accesorio metlico
de la nariz sobre el puente de la misma para que exista una unin ms firme y minimizar el
espacio entre la mscara y la nariz.

Manejo de material cortopunzante: Se debe contar con contenedores de material


irrompible e imperforable, donde se debern desechar todas las agujas, hojas de bistur,
restos de ampolletas de cristal, bajalenguas, etc.
AGENTES DESINFECTANTES Y ESTERILIZANTES:
La esterilizacin es un procedimiento con el que se eliminan todas las formas de vida
microbiana, incluidas las esporas bacterianas, se logra por medios fsicos y qumicos. La
desinfeccin es un proceso con el que se destruyen los microorganismos patgenos, aunque
no necesariamente todos los microorganismos ni todas las esporas. Se puede lograr por
medios fsicos y qumicos.
METODOS DE ESTERILIZACION:
MTODOS FSICOS - CALOR HMEDO. Autoclave. Se emplea en objetos termoestables;
bsicamente es una gran olla de presin. Produce desnaturalizacin y coagulacin de
protenas.

Ventajas

Desventajas

Rpido calentamiento y penetracin


-Destruccin de bacterias y esporas en corto
tiempo
-No deja residuos txicos
-Hay un bajo deterioro del material expuesto
-Econmico (7)

-No permite esterilizar soluciones que


formen emulsiones con el agua
-Es corrosivo sobre ciertos instrumentos
metlicos (7)

Ebullicin: Permite que el agua llegue a una temperatura de 100C. Permite esterilizar
inyectadoras, agujas e instrumentos de ciruga menor. No elimina esporas
Pasteurizacin: Es la aplicacin de una temperatura inferior a 110C durante 30 minutos. La
aplicacin del calor va seguida de un rpido enfriamiento. Se usa para prevenir las
infecciones de origen lcteo y retasar la descomposicin de la leche, ya que las bacterias de
la leche no forman esporas (bacilo tuberculoso, salmonella, estreptococo y brucella)
CALOR SECO.
El calor seco deseca a la clula, lo que incrementa los niveles de electrolitos, y provocan
fusin de membranas. La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos requiere mayor
temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es baja. (1,7)
Ventajas del calor seco

Desventajas

-No es corrosivo para metales e


instrumentos.
-Permite la esterilizacin de sustancias
en polvo y no acuosas

-Requiere
mayor
tiempo
de
esterilizacin, respecto al calor hmedo,
debido a la baja penetracin del calor.

Entre los mtodos que utilizan el calor seco como medio de esterilizacin se destacan:
a). Flameado: Al usar mechero de Bunsen

b). Estufa (Horno Pasteur de aire caliente) El aire caliente generado por una resistencia,
circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cmaras, a diversas
temperaturas.
AUTOEVALUACION E INVESTIGACION
1. Defina los Conceptos de Esterilizacin, Asepsia, Antisepsia y Desinfeccin.
2. Qu materiales qumicos son utilizados para la Desinfeccin.
3. Cul es la diferencia entre patgeno oportunista y patgeno nosocomial.
4. Qu hara usted en caso de sufrir un pinchazo accidentalmente mientras toma
muestras de sangre de
un paciente HOSPITALIZADO?
BIBLIOGRAFA
1. Bailey y Scott, Diagnstico Microbiolgico, 12 edicin, Editorial mdico panamericana,
Madrid, Espaa 2006
2. Koneman, E. Diagnostico microbiolgico, 6a Edicin, Editorial mdico panamericana,
Madrid, Espaa 2006

Universidad Central del Ecuador


Facultad de Ciencias Mdicas
Carrera de medicina
PRE-REQUISITOS DE MICROBIOLOGIA
NOMBRE:
FECHA:
PARALELO:

PREGUNTA 1.

PREGUNTA 2

DOCENTE:
AYUDANTE:
GRUPO:

Universidad Central del Ecuador


Facultad de Ciencias Mdicas
Carrera de medicina
POST-REQUISITOS DE MICROBIOLOGIA
NOMBRE:
FECHA:
PARALELO:

PREGUNTA 1.

PREGUNTA 2

DOCENTE:
AYUDANTE:
GRUPO:

PREGUNTA 3