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  • Práctica 10 - Diagrama

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    Este documento proporciona instrucciones para determinar el nivel de lactato deshidrogenasa (LDH) en suero sanguíneo. Describe los materiales necesarios, las interferencias potenciales, los valores de referencia, la fórmula para calcular los niveles de LDH y los pasos del procedimiento, que incluyen mezclar reactivos, incubar la muestra y medir la absorbancia en un espectrofotómetro.

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    Determinación de lactato Referencias Se colocan los recipientes de

    deshidrogenasa Debido a que durante el


    desecho en una bolsa roja y un bote
    rojo los objetos punzocortantes
    procedimiento se va a utilizar suero
    sanguíneo, se deben seguir los
    Rosales Nuñez Israel LDH piruvato. Cinética UV. DGKC. (s.
    siguientes pasos:
    Matricula:1279269 INICIO f.). SPINREACT.
    Grupo: 423 - 1 https://www.spinreact.com.mx/public
    /lineas/LDH.pdf FIN

    Conseguir material necesario


    RPBI
    generados
    Muestra biológica: suero sanguíneo o en su caso material
    necesario para la toma de muestra sanguínea.
    Espectrofotómetro / Analizador espectrofotométrico
    Kit de reactivos para LDH disponibles en el laboratorio
    Interferencias: La presencia de hemólisis interfiere con los resultados. Algunos
    Micro tubos
    anticoagulantes como los oxalatos interfieren en la reacción1 . Se han descrito varias
    Gradilla para tubos de ensayo
    drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la LDH
    Gradilla para micro tubos
    Pipetas y micropipetas
    Puntillas
    Plumón indeleble
    Valores de referencia:
    25ºC 30ºC 37ºC 120-240 U/L 160-320 U/L 230-460 U/L Estos valores son orientativos. Es
    recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

    La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima, distribuida por todo el


    organismo humano. Las mayores concentraciones de LDH se encuentran en el Formula:
    hígado, corazón, riñón, músculo esquelético y eritrocitos. ∆
    25º- 30ºC A/min x 4925 = U/L LDH
    ∆
    37ºC A/min x 9690 = U/L LDH

    El nivel de LDH en suero esta elevado en pacientes con enfermedades del hígado,
    infartos de miocardio, alteraciones renales, distrofias musculares y anemias1,4,5 . El 1. Condiciones del ensayo:
    diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de 2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
    laboratorio. 3. Pipetear en una celda para Espectrofotometro

    4. Mezclar, incubar 1 minuto.


    5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la
    absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
    Reactivos: ∆
    6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto ( A/min).

    Preparación:
    Reactivo de trabajo (RT):
    Mezclar: 4 vol. (R1) Tampón + 1 vol. de (R2) Sustrato.
    Estabilidad: 15 días a 2-8ºC o 5 días a 15-25ºC.

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