 OBJETIVO

Cuantificar la concentración de azúcares en una muestra líquida utilizando el

método Fenol-Sulfúrico.

 REACTIVO, MATERIAL, EQUIPO

REACTIVO MATERIAL EQUIPO

Fenol al 5% 20 microtubos Vortex
Ácido Sulfúrico Micro pipetas Espectrofotómetro
Dextrosa Anhidra Puntas para micro
Metanol de reúso pipetas

 METODOLOGÍA
1. Se seleccionaron 20 microtubos y se limpiaron con metanol de reúso.
2. Se rotularon 10 microtubos de la siguiente manera (2 de cada uno) (0,0.4, 0.8,
1.2, 1.6, 2)
3. En otro microtubo, se pesó 20 miligramos de dextrosa anhidra (SC).
4. En el microtubo (SC) se le agrego 1ml de agua destilada.
5. Se llevó al vortex durante 30 segundos el microtubo (SC)
6. Se llenaron los microtubos y sus duplicados de la siguiente manera:

MICROTUBO H2O2
0 1 ml
0.4 980 ml
0.8 960 ml
1.2 940 ml
1.6 920 ml
2 900 ml
7. Se colocó la solución faltante (SC) hasta llegar a 1 ml en cada microtubo.
8. Se preparó 5ml de fenol al 5%.
9. Se enumeraron los microtubos para preparar los tubos de reacción.
10. Se agregó 125microlitros de solución estándar a los tubos de reacción.
11. A cada tubo de reacción, se le añadió 250 Microlitro de fenol y 625 Microlitro
de Ácido sulfúrico a cada uno.
12. Medir absorbancia en el espectrofotómetro.