PNT Miel1

IES VICENT
CASTELL I
DOMENECH
ANLISIS INSTRUMENTAL II
PRCTICA 3
DETERMINACIN DE
CFGS ANLISIS Y HIDROXIMETILFURFURAL EN
CONTROL DE
MIELES
CALIDAD
Mtodo de
espectofotometra UV
27.10.2014
1. OBJETIVO
El
objetivo
de
esta
prctica
es
determinar
el
contenido
de
Hidroximetilfurfural (HMF) en la miel de abejas.
2. CAMPO DE APLICACIN
Este mtodo permite determinar el HMF, el cual es un producto de la
deshidratacin de monosacridos presentes en la miel, que sirve como
indicador de la longevidad de la miel y para determinar si las condiciones de
procesado y almacenamiento de este producto ha sido el adecuado.
Este mtodo de anlisis de calidad tambin se puede llevar a cabo en
productos como leche, jugos de fruta y bebidas alcohlicas.
3. FUNDAMENTO DEL MTODO

La miel es un producto azucarado que no tiene fecha de caducidad,
pero que, sin embargo, hay que someterlo a exmenes de calidad para
saber si su procesado y almacenamiento antes de su salida al mercado ha
sido bajo condiciones adecuadas. Uno de los parmetros de anlisis de la
calidad es el de determinar la concentracin del hidroximetilfurfural, HMF,
un
aldehdo
que
se
forma
espontneamente
en
un
proceso
de
deshidratacin.
La determinacin de la concentracin de este aldehdo se puede
llevar
cabo
por
espectrofotometra
en
la
regin
de
UV.
La
espectrofotometra es un mtodo cuantitativo que mide la absorbancia de

las sustancias, es decir, la cantidad de luz absorbida por un cuerpo y de
Profesor: Luis lvarez
Alumnas: Vernica Guillamn Ruiz

Valentina Dvila Buriello
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esta forma se puede determinar su concentracin. La absorbancia depende

de la concentracin del analito de la muestra, en este caso, de la
concentracin de HMF y de la distancia recorrida por la luz a travs de
espectrofotmetro.
En este anlisis de la calidad de la miel, se toman dos muestras de la
misma miel. A una de ellas se le aade bisulfito de sodio para romper las
molculas de HMF, muestra que en la lectura en el espectrofotmetro se
utiliza
como
blanco;
sobre
la
segunda
muestra
no
se
le
aplican
modificaciones, por lo que los valores de su absorbancia sern los que

permiten conocer la concentracin del HMF.
La Comisin Internacional de la Calidad de las Mieles establece los
lmites de HMF permitidos entre 15 y 40 mg/kg , ya que las mieles recin
extradas contienen nicamente entre 2 y 4 mg/kg. As valores superiores a
los establecidos son un indicador de que la miel ha sido sometida a
temperaturas elevadas y por tanto su comercializacin no ser posible.
4. REFERENCIAS
http://www.ispch.cl/sites/default/files/documento_tecnico/2012/03/PRT
-711.02-207%20V0%20Determinaci%C3%B3n%20hidroximetilfurfural
%20x%20HPLC.pdf
http://www.apiservices.com/articulos/mieles_parque_chaqueno.htm
http://www.marioapicultor.com/news/la-miel/
https://es.scribd.com/doc/22279823/Parametro-indicador-de-lacalidad-en-Miel-HMF-2009

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http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2018415/und2/html_1/
2_6_1_1hidroximetilfurfural.html

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5. DESARROLLO
5.1 MATERIAL
2 matraces aforados de 100ml
2 embudos
Papel de filtro Whatman
Vidrio de reloj
Esptula
Frasco lavador
2 vasos de precipitados de 100ml
2 pipetas de 5ml
2 tubos de ensayos
Gradilla
5.2 REACTIVOS

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Etanol (C2H6O) al 95%
Agua Destilada
Carrez I: Hexacianoferrato de Potasio Trihidratado (K4Fe(CN)6 x 3

H2O) al 15%. Preparar 15 gramos del reactivo, disolver con agua
destilada y enrasar en matraz de 100mL
Carrez II: Acetato de Zinc Dihidratado (Zn(CH3COO)2 x 2H2O) al 30%.

Pesar 30 gramos del reactivo, disolver con agua destilada y enrasar
en matraz de 100mL
Bisulfito de Sodio (NaHSO3) al 0,2 y 0,1%. Pesar 0,2 gramos del

reactivo, disolver con agua destilada y enrasar en matraz de 100mL
5.3 EQUIPOS
Balanza de precisin 0,001g
Espectrofotmetro UV-visible.

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5.5 PREINSCRIPCIONES PREVIAS Y CONDICIONES DE ENSAYO
No calentar la muestra en ninguna etapa del procedimiento

experimental ya que se altera la concentracin del HMF en la miel.
Utilizar el material ms preciso como matraces y pipetas aforadas, ya

que cualquier cambio de volumen afectara a la lectura del
espectrofotmetro.
Una vez preparada la muestra, medir en el espectrofotmetro en el

menor plazo de tiempo posible.
En el espectrofotmetro utilizar cubetas de cuarzo en vez de las de

plstico ya que la muestra contiene etanol al 95% que deteriora este
material.
Antes
de
iniciar
la
preparacin
de
la
muestra
encender
el
espectrofotmetro para que el equipo se calibre y la bombilla se

caliente.

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5.6 PROCEDIMIENTO OPERATIVO

Preparacin de la muestra:
1. Antes de tomar la muestra de miel ver si presenta partculas
(grumos). En este caso es necesario homogeneizarla para que sea
representativa.
2. Pesar 5 gramos de la muestra, por duplicado, en la balanza de
precisin y aadir 25mL de agua destilada en cada vaso de
precipitado. Agitar bien cada muestra hasta conseguir su completa
disolucin.
3. Una vez disuelto aadir en cada vaso de precipitados:
1. 3 gotas de etanol para eliminar la espuma que se pueda haber
formado.
2. 0,5 mL de Carrez 1 y 0,5 mL de Carrez 2. Estos dos reactivos
se encargan de disminuir la turbidez de la muestra.
4. Transferir cada muestra a un matraz aforado de 50mL y aforar con
agua destilada.
5. Coger dos tubos de ensayos y rotularlos como A y B.
6. Preparar el material correspondiente para efectuar dos filtraciones.

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7. Iniciar el filtrado, rechazando los 10 primeros mililitros de cada

muestra.
8. De cada filtrado tomar dos alcuotas de 5mL con pipeta aforada y
transferir a los dos tubos de ensayos.
9. Al tubo A aadir 5mL de Bisulfito de sodio 0,2% y al tubo B aadir
5mL de agua destilada.
10.
Agitar bien cada tubo de ensayo en el agitatubos durante 1
minuto.
Lectura del espectrofotmetro:

1. El tubo A se utiliza como referencia (blanco) y el tubo B ser el
medido. Llenar una de las cubetas de cuarzo con la solucin A y
colocarla en la celda 1 (posicin de blanco); llenar otra cubeta de
cuarzo con la solucin B y colocarla en la celda 2.
2. Ajustar la longitud de onda a 284 nm y establecer el 0 en el equipo.
3. Si la absorbancia es mayor de 0,6, diluir el tubo A con bisulfito de
sodio 0,1% (a partir del bisulfito sdico 0,2%) y el tubo B con agua
destilada en la misma proporcin.

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4. Ajustar nuevamente el equipo a 284 nm y medir la absorbancia.

5. Reajustar, ahora a 336 nm y medir de igual manera su absorbancia.
5.7 DIAGRAMA DE FLUJO

Preparacin de la muestra:

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Lectura del espectrofotmetro:

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5.8 CLCULO Y EXPRESION DE LOS RESULTADOS.

La concentracin del hidroximetilfurfural se halla a partir de la siguiente
expresin:
Absorbancia
Absorbancia
Concentraci
Concentraci
284nm
336nm
n HMF
n HMF
0.286 nm
0.102 nm
(mg/100g)
2,75
(mg/kg)
Tubo A
(blanco)
Tubo B
0.346 nm
0.113 nm
mg/100g
3,48
34,81 mg/kg
mg/100g
6. CONCLUSIONES
Las mieles durante el proceso previo de envasado suelen ser calentadas
para facilitar su manejo, ya que en ocasiones se pueden formar cristales de
azcar que podran iniciar un proceso no deseado de granulacin. Para
evitar esto, en las plantas de extraccin las mieles se calientan durante un
tiempo y temperatura concreta. Se recomienda que este calentamiento se
haga a 65C durante 30 minutos, ya que de esta forma el aumento de la
concentracin de HMF no superara los lmites establecidos, es decir, entre
15 y 40
la
mg
/Kg de HMF en la miel. Someter las mieles a ms temperatura o a
misma
pero
durante
ms
tiempo,
aumenta
excesivamente
la

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concentracin del HMF, por esta razn se lleva a cabo un anlisis de la

calidad de este producto.
Nuestra miel result tener un valor de 34,81 mg/Kg, es decir, est dentro
de los parmetros establecidos. Con esto, podemos asegurar que se trata
de una miel fresca, que durante su tratamiento no se excedi ni el tiempo ni
la temperatura de calentamiento y que su conservacin en el mercado fue
el correcto.

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Hidroximetilfurfural (HMF) en la miel de abejas.

3. FUNDAMENTO DEL MTODO

espectrofotometra es un mtodo cuantitativo que mide la absorbancia de

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esta forma se puede determinar su concentracin. La absorbancia depende

modificaciones, por lo que los valores de su absorbancia sern los que

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Etanol (C2H6O) al 95%

Carrez I: Hexacianoferrato de Potasio Trihidratado (K4Fe(CN)6 x 3

Carrez II: Acetato de Zinc Dihidratado (Zn(CH3COO)2 x 2H2O) al 30%.

Bisulfito de Sodio (NaHSO3) al 0,2 y 0,1%. Pesar 0,2 gramos del

Balanza de precisin 0,001g

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No calentar la muestra en ninguna etapa del procedimiento

Utilizar el material ms preciso como matraces y pipetas aforadas, ya

Una vez preparada la muestra, medir en el espectrofotmetro en el

En el espectrofotmetro utilizar cubetas de cuarzo en vez de las de

espectrofotmetro para que el equipo se calibre y la bombilla se

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5.6 PROCEDIMIENTO OPERATIVO

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7. Iniciar el filtrado, rechazando los 10 primeros mililitros de cada

Agitar bien cada tubo de ensayo en el agitatubos durante 1

Lectura del espectrofotmetro:

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5.7 DIAGRAMA DE FLUJO

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5.8 CLCULO Y EXPRESION DE LOS RESULTADOS.

/Kg de HMF en la miel. Someter las mieles a ms temperatura o a

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concentracin del HMF, por esta razn se lleva a cabo un anlisis de la

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