UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL MEDICINA HUMANA

PRÁCTICA 4: “INTERACCIONES DE
FÁRMACOS IN VITRO Y CURVA DE DOSIS
RESPUESTA”

CURSO : FARMACOLOGÍA BÁSICA

DOCENTE : ALTAMIRANO SARMIENTO, DAN

ALUMNO : CORREA CACEDA, BRYAN

TURNO : JUEVES 7:00 a.m. - 10:35 a.m.

CICLO : V
SEMESTRE : 2020-10
INTRODUCCIÓN

Las autoridades reguladoras farmacéuticas deben garantizar que todos los

productos farmacéuticos, incluyendo los medicamentos multifuentes (genéricos),
cumplan con las mismas normas de calidad, eficacia y seguridad exigidas a los
productos farmacéuticos innovadores. Por consiguiente, deben establecerse los
marcos normativos para demostrar que los medicamentos multifuentes (genéricos)
son terapéuticamente equivalentes e intercambiables con sus productos
innovadores asociados.
OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

 Identificar e interpretar aspectos relacionados con las interacciones

de fármacos in vitro y curva de dosis de respuesta.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Demostrar la importancia de las interacciones de fármacos in vitro en

la investigación y desarrollo de medicamentos.
 Explican la importancia de la curva de dosis de respuesta.
MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

 Los alumnos se agrupan para desarrollar la práctica, utilizando la

plataforma virtual “Zoom”, considerando:

 Interpretación, aplicaciones de los ejercicios propuestos en la

práctica
 Presentación y explicación de un caso, donde se pueda evaluar
interacciones farmacológicas (presentarlo en PowerPoint)
 También puede considerar, otros ejemplos que permitan profundizar o
aclarar el tema que se está tratando se recomienda utilizar información o
bibliografía actualizada.
 El docente tutor utiliza durante la práctica simulación virtual para explicar
aspectos relacionados con el tema.
 Realizarán la discusión de la práctica en diapositivas e infogramas. Los
demás participaran con preguntas o aportes sobre el tema.

INTERACCION DE FÁRMACOS

I. Sinergias de Fármacos:
a. Sinergia Aditiva: Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y
Pilocarpina en Yeyuno-íleon de cerdo simulado
1. Instalar simulación de Yeyuno íleon en Vaso de Órgano
Aislado: Segmento de 4 cm., Temperatura.: 37 °C., en
liquido Nutrición: sol. krebs henseleit, Gasificación constante
- O2: 95 %V, C02: 5%V.
2. Control Basal: Hacer un trazado normal.
3. Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/000, dosis de 5M.
4. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.
5. Pilocarpina: Sol. 0.5%, dosis de 5M.
6. Control Post Fármaco: Hacer un trazado. Lavar 2 veces
7. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.
II. Antagonismo de Fármacos:
b. Antagonismo por Competencia de Receptores celulares:
Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y Atropina Sulfato en
Yeyuno – ileon de cerdo simulado
1. Control Basal: Hacer un trazado normal.
2. Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/ooo, dosis de 5 gamas/ml.
3. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.
 4. Atropina Sulfato: Sol. 0.5%, dosis de 8M
5. Control Post Fármaco: Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

CURVA DE DOSIS EFECTO:

Experiencia 1: Dosis Efectiva Media de Acetilcolina Clorhidrato en Yevuno-

ileon de cerdo simulado

1. Instalar el Yeyuno íleon en Vaso de Organo Aislado: Segmento de 4

cm., Temperatura.: 37 °C., en líquido Nutrición: sol. Tyrode, Gasificación
constante - O2: 95 %V, C02: 5%V.
2. Control Basal: Hacer un trazado normal.
3. Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/0000.

1° Dosis: 0.025 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

2° Dosis: 0.050 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

3° Dosis: 0.100 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

4° Dosis: 0.200 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

5° Dosis: 0.400 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

4. Determinar la Dosis Efectiva 50, empleando el método de Trevan.

RESUILTADOS
INTERACCIÓN DE FÁRMACOS

I. Sinergia aditiva

II. Antagonismo competitivo

CURVA DE DOSIS EFECTO
Dosis peso Dosis vol.
Dosis ensayada mm Respuesta %Respuesta
(µg) (ml)
0 µg/ml 0 0 14.6 0.0

0.025 µg/ml 1 0.1 12.5 19.4

0.05 µg/ml 2 0.2 9.8 44.4

0.1 µg/ml 4 0.4 7.8 63.0

0.2 µg/ml 8 0.8 5.7 82.4

0.4 µg/ml 16 1.6 3.8 100

En primer lugar, se completó los datos de las dosis peso y volumen a través del
método de Turner, luego se hizo lo mismo con el %Respuesta estableciendo la
siguiente definición:

Δ mm Individual
%Respuesta= ×100
Δmm Máxima

mm ( má x )−mm(individual)
%Respuesta= × 100
mm ( máx )−mm(mín)

Dando como resultado:

14.6−14.6
%Respuesta1 = × 100=0
14.6−3.8

14.6−12.5
%Respuesta2 = × 100=19.4
14.6−3.8

14.6−9.8
%Respuesta3 = ×100=44.4
14.6−3.8

14.6−7.8
%Respuesta 4= ×100=63
14.6−3.8

14.6−5.7
%Respuesta5 = ×100=82.4
14.6−3.8

14.6−3.8
%Respuesta6 = ×100=100
14.6−3.8
Con estos datos, se elaboró el gráfico “Dosis/Respuesta”

Dosis/Respuesta
120.0

100.0 f(x) = 4.71799084030267 x + 32.6003086419753

R² = 0.832117495374964

80.0
Respuesta

60.0

40.0 DE50

20.0

0.0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Dosis (ug)

A este gráfico le fue añadida la línea de tendencia con su respectiva fórmula y

la recta horizontal correspondiente a una respuesta al 50% para poder hallar la
DE50.

La DE50 se halló de la siguiente manera:

 Se definió a la línea de tendencia como:

y=4.716 x+ 32.6

 Se definió a la línea horizontal al 50% de respuesta:

y=50

 DE50 es equivalente al intercepto de estas dos rectas, por lo cual se

procedió a igualarlas y hallar su valor.

50=4.716( DE 50)+32.6

17.4
DE 50=
4.716

DE 50 ≅ 3.69
DISCUSIÓN

Sinergismo de suma
Al administrar Acetilcolina, inmediatamente se incrementó la respuesta del
músculo liso, pero al administrarse la pilocarpina, no se observó ningún cambio
en los efectos a pesar que este fármaco también tiene un efecto similar a la
ACh.
En el músculo liso, tanto la ACh como la pilocarpina, actúan a través de
receptores M2, los cuales son receptores asociados a proteína Gi, el cual
conduce a la inhibición de la enzima Adenil ciclasa, generando una disminución
en la síntesis de AMPc.
A través de esta simulación comprobamos que en una situación en la que se
utilizan dos fármacos que realizan el mismo efecto a través del mismo
mecanismo de acción (uso de receptores en este caso), la acción del segundo
fármaco se verá limitada por el efecto causado por el primero, debido a que
existe una cantidad limitada de receptores y estos son saturables, a lo cual se
infiere que si el segundo fármaco busca un sitio de acción, encontrará a todos
saturados y no tendrá ningún efecto notable.

Antagonismo competitivo
Primero se le administró ACh y se observó un aumento en las contracciones
musculares.
En el músculo liso, tanto la ACh actúa a través de receptores M2, los cuales
son receptores asociados a proteína Gi, el cual conduce a la inhibición de la
enzima Adenil ciclasa, generando una disminución en la síntesis de AMPc.
Luego se administró Atropina. Este es un fármaco antagonista muscarínico
(anticolinérgico) extraído de la belladona y otras plantas de la familia
Solanaceae. Es un alcaloide, producto del metabolismo secundario de estas
plantas y tiene, como medicamento, una amplia variedad de efectos. Es un
antagonista competitivo del receptor muscarínico de acetilcolina, que contiene
en su estructura química grupos entéricos y básicos en la misma proporción
que la acetilcolina, pero en lugar de tener un grupo acetilo, posee un grupo
aromático voluminoso. La atropina se usa para inhibir la estimulación
muscarínica, que puede ser incrementada por ciertas condiciones o fármacos.
Sin embargo, la atropina que en teoría debería disminuir la actividad
colinérgica, no generó ningún cambio en la respuesta muscular.
No fue hasta que se administró Hioscina (escopolamina), que es otro
antagonista muscarínico, que se logró disminuir la actividad colinérgica en el
músculo liso.
Con esto se comprueba que la hioscina tiene un efecto más potente en
comparación a la atropina, es decir, se necesita una menor dosis del primero
para realizar el mismo efecto que el segundo.

Curva de dosis efecto

Con los datos obtenidos en la gráfica, se pudo establecer la DE50, la cual
indica la dosis necesaria para obtener un efecto al 50% del efecto potencial de
un fármaco. En la gráfica se observa que conforme aumenta la dosis
administrada, también aumenta la respuesta observada (mm de contracción),
conforme aumenta la respuesta obtenida, se ve que cada vez se necesita una
mayor dosis de fármaco.
CONCLUSIONES

 La interacción de fármacos in vitro es el primer paso para el

desarrollo de medicamentos, permite simular (aunque de
manera limitada) las interacciones de fármacos in vivo.
 La curva dosis respuesta permite evaluar la concentración de
fármaco necesaria para realizar un efecto específico, lo cual a
su vez también permito realizar los cálculos de dosis para
experimentos in vivo y posteriormente individuos.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Katzung B, Masters S, Trevor A. Farmacología básica y

clínica. 13° ed. México: McGraw Hill Interamericana editores;
2012

2. Brunton. L, Hilal- Dandan. R, Knollmann. B. Goodman &

Gilman Bases farmacológicas de la terapéutica. 13° ed.
México DF: McGraw Hill Interamericana editores; 2019.

3. Flores M, Segura J. Estructura y función de los receptores

acetilcolina de tipo muscarínico y nicotínico. Rev Mex Neuroci
[seriada en línea] 2005 [citado 2020 May 21]; 6(4): 315-32.
Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/revmexneu/rmn-2005/rmn0
54f.pdf
ANEXOS

A. DISCUSIÓN DEL GRUPO PRE-PRÁCTICA

1. Mencione cuatro ejemplos de interacciones in vitro de tipo

sinergismo y antagonismo

Sinergismo Antagonismo
Acetilcolina- Carbacol Acetilcolina – Atropina
Neostigmina - Acetilcolina Adrenalina - Propranolol
Adrenalina - Noradrenalina Dopamina - Tioridazina

2. ¿Cuál es las diferencias entre interacciones in vitro e in vivo

considere sinergia de suma y potenciación, mencione 3
ejemplos?

La principal diferencia es que las interacciones in vitro, se realizan sobre

tejido aislado, órganos y/o células, mientras que las in vivo implican el uso
de organismos vivos (animales o humanos), otra de las diferencias es que
la técnica in vitro es más apropiada para deducir un mecanismo de acción,
con menos variables y con reacciones predecibles, en comparación a la
técnica in vivo que puede tener variaciones propias del organismo donde se
prueben los fármacos, como temperatura, vía de administración, capacidad
del medicamento para disolverse, riego sanguíneo del punto de
administración, área de superficie corporal y solubilidad lipídica
del medicamento.

- SINERGISMO DE SUMA

 Morfina + Haloperidol  Generan depresión del SNC.

 Acetaminofen + Aspirina  Disminuyen el umbral de dolor.
 Gentamincina + Tobramicina y cefalotina  Aumenta efectos
adversos (Aumenta nefrotoxicidad)
- SINERGISMO DE POTENCIACIÓN

 Salbutamol + Beclametasona  Potencian la broncodilatación.

 Warfarina + Clopidrogel  En conjunto potencian la inhibición
de la formación de coágulos.
 Trimetropim + sulfametoxazol  En conjunto se potencia el
efecto bactericida contra infección de vía urinaria.

3. ¿Cuál es la diferencia entre DE50 y CE50?

La DE50, es la dosis efectiva media, hace referencia a la dosis

necesaria de un fármaco para producir un efecto específico en 50%
de la población. Mediante las DE50 se pueden comparar las
potencias de 2 o más fármacos, también se puede obtener un índice
muy útil de la selectividad de la acción de un fármaco al comparar
sus DE50 para 2 efectos diferentes producidos por el medicamento
Así mismo, la DE50, se la ve generalmente utilizada cuando se
toman mediciones in vivo y sus unidades están expresadas en ug/kg.
La CE50, es la concentración efectiva media, esta se refiere a la
concentración de un fármaco que induce una respuesta a la mitad del
camino y se refiere a la concentración tanto en medio aéreo como
acuoso. Se las ve utilizada cuando se toman mediciones in vitro y sus
unidades están expresadas en ug/kg.

La DE50 y la CE50, tienen relación con la potencia y eficacia. La

potencia hace referencia a cuando un fármaco que presume de ser
potente, alcanza el efecto máximo que es capaz de generar a
menores concentraciones. Por otro lado, la eficacia hace referencia a
la respuesta máxima que el fármaco es capaz de generar. La
potencia de un fármaco depende en parte de la afinidad (Kd) de los
receptores para unirse con el fármaco y en parte de la eficiencia de la
interacción entre fármaco-receptor y la respuesta. Por ejemplo,
algunas dosis de un fármaco pueden producir efectos mayores que
cualquiera de las dosis de otro fármaco, a pesar de que el segundo
fármaco se describió como más potente. La razón de esto es que el
primer fármaco posee una eficacia máxima mayor. En la práctica
clínica es importante distinguir entre la potencia de un fármaco y su
eficacia. La efectividad clínica de un fármaco no depende de su
potencia (EC50), sino de su eficacia máxima. Esta capacidad guarda
relación con su vía de administración, absorción, distribución en el
cuerpo y eliminación del cuerpo o el sitio de acción. Para decidir cuál
de los dos fármacos administrar a un paciente, el médico casi
 siempre debe considerar su efectividad relativa y no su potencia
relativa.
4. ¿Cuál es la aplicación de las curvas dosis respuesta en el
ámbito clínico, mencione 4 ejemplos?

Llamamos de esta manera a la relación que se establece entre la

dosis de un fármaco y su respuesta clínica. Esta curva puede ser
lineal, es decir a más dosis más respuesta; sigmoidea, llega un
momento en que al aumentar la dosis no aumenta la respuesta y en
forma de ventana terapéutica o margen terapéutico, es decir que
llega un momento que al aumentar la dosis disminuye la respuesta.

 Permite comparar los perfiles farmacológicos de los

medicamentos.
 Permite calcular la eficacia máxima o efecto techo (mayor
respuesta posible).
 Permite determinar la dosis necesaria.
 Permite determinar la eficacia y la seguridad de un fármaco.

ANTAGONISMO
FÁRMACOS CONSECUENCIA CLÍNICA
Warfarina y Vitamina K Disminuye el efecto anticoagulante
Naloxona y Morfina La morfina inhibe la acción de la naloxona
Noradrenalina y La acetilcolina produce miosis, y la noradrenalina
Acetilcolina produce midriasis.
SINERGISMO
FÁRMACOS CONSECUENCIA CLÍNICA
Acetilcolina y pilocarpina Aumenta el peristaltismo

Trimetroptim y La actividad antimicrobiana es superior a la suma

sulfametoxazol de ambos por separado

Acetilcolina y Carbacol Aumenta la acción colinérgica (M y N)

DISCUSIÓN DE GRUPO POS PRÁCTICA
1. Elabora cuadro o tabla para presentar ejemplos de interacciones in
vitro de tipo sinergismo y antagonismo.

Interacción ACh – Carbacol - Atropina

La acetilcolina (Ach), y sus análogos sintéticos como el carbacol, la
metacolina o el betanecol son agonistas muscarínicos que
desencadenan la contracción de las vísceras y/o el aumento de las
secreciones porque estimulan a los receptores M3 y M1 en el músculo
liso. Estos receptores están acoplados a una proteína Gq y a la vía de la
PLC/DAG e IP3 que por activación de la PKC fosforila y activa canales
de Ca+2 tipo L.

Además, en músculos
con actividad eléctrica
propia (ej. tracto
gastrointestinal, útero,
vejiga) se produce
despolarización por el
agonista y
consecuente Carbacol
activación de los
mismos canales
dependiente del
voltaje. En esos
músculos lisos
viscerales no hay
Atropina
indicios de liberación
de Ca2+ intracelular vía IP3 por el receptor M3.

La Atropina es un alcaloide antimuscarínico (interacciona con los

receptores muscarínicos de las células efectoras evitando la fijación del
neurotransmisor, la acetilcolina, lo que atenúa las respuestas fisiológicas
a los impulsos nerviosos parasimpáticos) con estructura de amina
terciaria con acciones centrales y periféricas. Primero estimula el SNC y
después lo deprime; tiene acciones antiespasmódicas sobre el músculo
liso.
Dopamina - Tioridazina
La tioridazina pertenece a los llamados neurolépticos, que constituyen
un grupo de medicamentos de naturaleza química muy heterogénea,
pero con mecanismo de acción común. Actúan fundamentalmente por
bloqueo de los receptores dopaminérgicos D2, aunque muchos
antipsicóticos tienen actividad sobre los receptores de otros
neurotrasmisores.

En la actualidad se sabe que la eficacia antipsicótica está estrechamente

relacionada con la acción antidopaminérgica a nivel de las vías córtico-
meso-límbicas, por bloqueo de los receptores postsinápticos. A su vez la
mayoría de efectos adversos neurológicos y endocrinológicos dependen
del bloqueo dopaminérgico, aunque no podemos ignorar el
protagonismo de diferentes receptores en otros efectos secundarios.

Tioridazina
 2. Elabora cuadro o tabla para las diferencias entre interacciones in
vitro e in vivo considere sinergia de suma y potenciación, mencione
3 ejemplos

INTERACCIONES IN VITRO INTERACCIONES IN VIVO

- Se emplea solo una - Se emplea a un animal de

porción del órgano diana, experimentación, se requerirá
se tomará en cuenta datos de dosis y medidas adecuadas
estándar al animal de experimento.
- La acción sinérgica y
- Acción sinérgica y potenciadora de un fármaco
potenciación más puede verse alterada ante
perceptible y prolongada mecanismos compensatorios
del organismo

Ejemplos:
- Acetilcolina + Pilocarpina
- Adrenalina + Norepinefrina
- Adrenalina + fenilefrina
 3. Elabora un cuadro resumen para establecer la aplicación de las
curvas dosis respuesta en el ámbito clínico, mencione 4 ejemplos.

CURVA DOSIS - RESPUESTA

Es la relación que se establece entre la dosis de un fármaco y su

respuesta clínica

Esta curva puede ser lineal, es decir a más dosis más respuesta;
sigmoidea, al aumentar la dosis no aumenta la respuesta, y en forma
de ventana terapéutica, al aumentar la dosis disminuye la respuesta

 EJEMPLOS
 Determinar las dosis a las que responde la mayoría de la
población.
 Permite evaluar la efectividad de un fármaco.
 Permite evaluar la toxicidad de un fármaco.
 Evalúa el índice terapéutico del fármaco, por ejemplo, averiguar
dosis letal media.