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Hidrólisis de proteína
con agua subcrítica o
agua presurizada
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Máster en Química Avanzada
Trabajo Hidrólisis de proteína con agua subcrítica o agua presurizada
Ángela Melgosa Condado
ÍNDICE:
I. INTRODUCCIÓN ....................................................................................................... 3
II. FUNDAMENTOS TEÓRICOS....................................................................................... 3
2.1 Hidrólisis de proteínas: Definición, conceptos e importancia de la hidrólisis en la
obtención de péptidos y aminoácido ........................................................................... 3
2.2 Agua subcrítica o agua presurizada: Definición, características principales,
comparación con otros métodos hidrolíticos (batch, semicontinuo, etc.) y ventajas y
desventajas de utilizar agua subcrítica ........................................................................ 4
III. OBTENCIÓN DE PÉPTIDOS PEQUEÑOS ...................................................................... 5
3.1 Propiedades funcionales y beneficios de los péptidos pequeños: Actividad
antioxidante, actividad antimicrobiana y otros efectos biológicos relevantes............ 5
3.2 Hidrolizados de diferentes fuentes de proteínas ......................................................... 6
a) Fuentes vegetales. Proceso de hidrólisis con agua subcrítica, ejemplos de
hidrolizados de proteínas vegetales obtenidos y propiedades y aplicaciones de los
hidrolizados vegetales ............................................................................................... 6
b) Fuentes animales. Proceso de hidrólisis con agua subcrítica, ejemplos de
hidrolizados de proteínas animales obtenidos, propiedades y aplicaciones de los
hidrolizados animales ................................................................................................ 8
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I. INTRODUCCIÓN
La hidrólisis de proteínas utilizando agua subcrítica o agua presurizada ha surgido como un
método prometedor en la obtención de péptidos y aminoácidos de alto valor biológico. Este
enfoque innovador ha despertado un creciente interés en la comunidad científica y la industria
debido a sus numerosas ventajas y aplicaciones potenciales.
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Una de las características principales del agua subcrítica es su alta difusividad. Debido a su baja
viscosidad y alta movilidad molecular, el agua subcrítica tiene la capacidad de penetrar y acceder
fácilmente a las estructuras proteicas, lo que favorece la ruptura de los enlaces peptídicos.
Asimismo, la presencia de agua subcrítica puede aumentar la solubilidad de las proteínas y
mejorar la interacción entre las moléculas de agua y los residuos aminoacídicos expuestos,
facilitando así la hidrólisis.
En comparación con otros métodos hidrolíticos tradicionales, como el proceso en lote (batch) o
el semicontinuo, el uso de agua subcrítica presenta una serie de ventajas distintivas. Una de las
principales ventajas es su eficiencia energética y la reducción de los tiempos de procesamiento
requeridos. Debido a las propiedades físicas del agua subcrítica, la hidrólisis de proteínas puede
llevarse a cabo a temperaturas más bajas y en tiempos de reacción más cortos en comparación
con los métodos convencionales.
A pesar de las ventajas mencionadas, también es importante tener en cuenta las posibles
limitaciones y desventajas asociadas con el uso de agua subcrítica en la hidrólisis de proteínas.
Por ejemplo, la inversión inicial en equipos y tecnologías específicas para trabajar con agua
subcrítica puede ser considerable. Además, es esencial comprender y optimizar los parámetros
de hidrólisis para garantizar la máxima eficiencia y rendimiento en la obtención de los péptidos
y aminoácidos deseados.
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Los péptidos pequeños derivados de la hidrólisis de proteínas han adquirido una gran relevancia
en el campo de la química avanzada debido a sus propiedades funcionales y beneficios para la
salud. En esta sección, exploraremos en detalle las propiedades funcionales de los péptidos
pequeños, centrándonos en su actividad antioxidante, actividad antimicrobiana y otros efectos
biológicos relevantes.
• Actividad antioxidante
Los péptidos antioxidantes actúan como "cazaradicales", donando electrones a los radicales
libres y estabilizándolos. Esto ayuda a prevenir la oxidación de las moléculas biológicas y reduce
el daño celular. Numerosos estudios han demostrado la capacidad de los péptidos antioxidantes
para proteger contra el estrés oxidativo y sus consecuencias negativas.
Además de su actividad directa como antioxidantes, los péptidos pequeños también pueden
influir en las vías de señalización celular relacionadas con la respuesta antioxidante. Estos
péptidos pueden modular la expresión de enzimas antioxidantes endógenas, como el
superóxido dismutasa y la catalasa, que juegan un papel crucial en la defensa antioxidante del
organismo.
En resumen, los péptidos pequeños derivados de la hidrólisis de proteínas exhiben una actividad
antioxidante significativa. Su capacidad para neutralizar los radicales libres y proteger contra el
estrés oxidativo los convierte en candidatos prometedores para su uso en alimentos funcionales
y productos terapéuticos. La investigación continúa explorando nuevas fuentes de péptidos
antioxidantes y su aplicación en diversas industrias.
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En la búsqueda de fuentes naturales de péptidos bioactivos, las proteínas de origen vegetal han
sido ampliamente estudiadas debido a su potencial para la obtención de hidrolizados con
propiedades funcionales y beneficiosas para la salud.
El proceso de hidrólisis con agua subcrítica ha demostrado ser una estrategia efectiva para la
liberación de péptidos bioactivos a partir de fuentes vegetales. En el artículo titulado "Filtration
of subcritical water hydrolysates from red macroalgae byproducts with ultraporous ceramic
membranes for oligosaccharide and peptide fractionation" (Trigueros, E., Sanz, M.T., Beltran, S.,
& Ruiz, M.O.), se exploró el uso de membranas cerámicas ultraporosas para la fraccionación de
oligosacáridos y péptidos a partir de subproductos de macroalgas rojas hidrolizados con agua
subcrítica. Los resultados revelaron la presencia de péptidos con propiedades antioxidantes y
capacidad para modular el sistema inmunológico.
En otro estudio realizado por Trigueros, E., Alonso-Riaño, P., Ramos, C., Diop, C.I.K., Beltran, S.,
& Sanz, M.T., titulado "Kinetic study of the semi-continuous extraction/hydrolysis of the protein
and polysaccharide fraction of the industrial solid residue from red macroalgae by subcritical
water", se examinó la cinética de extracción/hidrólisis semicontinua de la fracción proteica y de
polisacáridos de residuos sólidos industriales de macroalgas rojas mediante agua subcrítica. Los
resultados indicaron la factibilidad de obtener hidrolizados de proteínas con potenciales
propiedades bioactivas a partir de estas fuentes vegetales.
Los hidrolizados de proteínas vegetales obtenidos mediante el uso de agua subcrítica han
demostrado una variedad de propiedades funcionales que los hacen atractivos para su
aplicación en la industria alimentaria y nutracéutica. Uno de los aspectos destacados es su
actividad antioxidante, la cual ha sido evaluada en varios estudios. La actividad antioxidante de
los péptidos bioactivos presentes en los hidrolizados de proteínas vegetales es de gran interés
debido a su capacidad para neutralizar los radicales libres y proteger al organismo del daño
oxidativo.
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El proceso de hidrólisis con agua subcrítica aplicado a fuentes vegetales implica el tratamiento
de la materia prima con agua a altas temperaturas y presiones moderadas, generalmente en un
rango de 100-300°C y 10-25 MPa. Estas condiciones subcríticas permiten la ruptura de los
enlaces peptídicos presentes en las proteínas, liberando péptidos bioactivos y aminoácidos.
Los hidrolizados de proteínas vegetales obtenidos mediante el uso de agua subcrítica presentan
una amplia gama de propiedades y aplicaciones. Una de las propiedades más estudiadas es su
capacidad antioxidante. Los péptidos bioactivos presentes en estos hidrolizados han
demostrado actividad antioxidante al inhibir la formación de radicales libres y proteger las
células del estrés oxidativo. Esta actividad antioxidante puede ser aprovechada en la
formulación de productos alimentarios y suplementos nutricionales destinados a mejorar la
salud y prevenir enfermedades relacionadas con el estrés oxidativo.
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En cuanto a las aplicaciones, los hidrolizados de proteínas vegetales obtenidos mediante agua
subcrítica pueden utilizarse en diversas industrias. En la industria alimentaria, se pueden aplicar
como ingredientes funcionales en la formulación de productos como bebidas fortificadas,
alimentos enriquecidos con proteínas y suplementos nutricionales. También se pueden utilizar
en la elaboración de productos para dietas especiales, como alimentos para deportistas y
personas con necesidades dietéticas específicas.
b. Fuentes animales
➢ Proceso de hidrólisis con agua subcrítica:
El proceso de hidrólisis con agua subcrítica también puede aplicarse a fuentes animales para la
obtención de hidrolizados de proteínas. Al igual que en el caso de las fuentes vegetales, el
tratamiento de las proteínas animales con agua subcrítica a altas temperaturas y presiones
moderadas permite la ruptura de los enlaces peptídicos y la liberación de péptidos bioactivos y
aminoácidos.
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Los hidrolizados de proteínas animales obtenidos mediante el uso de agua subcrítica presentan
propiedades y aplicaciones específicas. Estos hidrolizados pueden contener péptidos con
actividad biológica, como péptidos antimicrobianos, péptidos reguladores del sistema
inmunológico y péptidos con efectos estimulantes sobre la síntesis de colágeno y elastina. Estas
propiedades pueden tener aplicaciones en la industria cosmética y de cuidado de la piel, donde
se buscan ingredientes naturales que promuevan la regeneración y elasticidad de los tejidos.
En la industria de alimentos para animales, los hidrolizados de proteínas animales pueden ser
utilizados como ingredientes en la elaboración de alimentos balanceados para mascotas y
animales de producción. Estos hidrolizados pueden aportar nutrientes de alta calidad y
promover una mejor digestibilidad de las proteínas.
Ilustración 4. Esquema general del aprovechamiento de residuos de pescado para obtención de hidrolizados
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Uno de los aspectos que se explorará en el futuro es la selección de fuentes de proteínas más
específicas y la optimización de los procesos de hidrólisis para obtener péptidos con perfiles
bioactivos más definidos. Esto implica investigar y comprender mejor las características de las
diferentes fuentes de proteínas, tanto vegetales como animales, y cómo influyen en la
composición y propiedades de los hidrolizados obtenidos.
Además, se espera que se realicen estudios más detallados sobre los mecanismos de formación
de péptidos bioactivos durante la hidrólisis con agua subcrítica. Esto permitirá identificar y
comprender mejor los péptidos específicos que contribuyen a las propiedades funcionales de
los hidrolizados, como su actividad antioxidante, antimicrobiana y antiinflamatoria.
Además, la combinación de la hidrólisis con agua subcrítica con otras técnicas de procesamiento,
como la fermentación o la extracción con solventes, puede abrir nuevas perspectivas en la
obtención de péptidos y aminoácidos con propiedades mejoradas. La integración de diferentes
etapas de procesamiento permitirá optimizar la extracción de compuestos bioactivos y obtener
productos más completos y eficientes desde el punto de vista nutricional y funcional.
En resumen, la hidrólisis de proteínas con agua subcrítica representa una técnica prometedora
para la obtención de péptidos bioactivos y aminoácidos con propiedades funcionales. El avance
en la comprensión de los mecanismos de hidrólisis, la selección de fuentes de proteínas
específicas y el uso de tecnologías analíticas avanzadas permitirán maximizar el potencial de
esta técnica en diversas industrias. Con el continuo desarrollo e investigación en este campo, se
espera que los hidrolizados de proteínas con agua subcrítica jueguen un papel importante en la
producción de alimentos y productos saludables en el futuro.
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La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, por sus siglas en inglés) es una técnica
analítica ampliamente utilizada en la caracterización de los hidrolizados de proteínas. Permite
separar y cuantificar los diferentes componentes presentes en el hidrolizado, como péptidos y
aminoácidos.
La espectrometría de masas (MS) es una técnica analítica poderosa que se utiliza para la
identificación y caracterización de los péptidos presentes en los hidrolizados de proteínas. Esta
técnica permite determinar la masa molecular de los péptidos y proporciona información sobre
su composición secuencial.
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En la MS, los péptidos se ionizan y se fragmentan en iones más pequeños, que se separan según
su relación masa/carga en un espectrómetro de masas. Los espectros resultantes proporcionan
información sobre la secuencia de aminoácidos de los péptidos presentes en el hidrolizado.
Además de la HPLC y la espectrometría de masas, existen otras técnicas analíticas que pueden
ser utilizadas en la caracterización de los hidrolizados de proteínas. Algunas de estas técnicas
incluyen:
- Electroforesis capilar: Esta técnica se utiliza para separar y cuantificar los componentes del
hidrolizado basándose en su carga y movilidad eléctrica.
- Espectroscopia de infrarrojo cercano (NIR): Esta técnica permite analizar la composición
química y las propiedades estructurales de los hidrolizados mediante la detección de la
absorción de la luz en la región del infrarrojo cercano.
- Espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN): La RMN es una técnica no
destructiva que proporciona información sobre la estructura y la composición de los
compuestos presentes en el hidrolizado.
- Análisis de aminoácidos: Este análisis permite determinar la composición de aminoácidos
presentes en el hidrolizado, lo cual es importante para evaluar su valor nutricional y su perfil
de aminoácidos.
Estos ensayos proporcionan información sobre la capacidad de los hidrolizados para neutralizar
los radicales libres y su potencial para actuar como agentes antioxidantes.
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• Solubilidad y estabilidad
Los hidrolizados de proteínas derivados de la hidrólisis con agua subcrítica han demostrado
tener aplicaciones prometedoras en diferentes industrias. A continuación, exploraremos
algunas de las áreas en las que se han utilizado y se están investigando activamente.
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• Industria alimentaria
Además, los hidrolizados de proteínas animales obtenidos con agua subcrítica han encontrado
aplicaciones en la elaboración de productos como caldos, sopas y salsas, donde aportan sabor,
aroma y propiedades organolépticas mejoradas.
Los hidrolizados de proteínas obtenidos mediante la hidrólisis con agua subcrítica también se
utilizan en el campo de la nutrición y los suplementos dietéticos. Debido a su perfil de péptidos
y aminoácidos, estos hidrolizados tienen un potencial nutricional y bioactivo que puede ser
beneficioso para la salud humana.
Se ha demostrado que los hidrolizados de proteínas obtenidos con agua subcrítica tienen
propiedades antioxidantes, antimicrobianas, antihipertensivas y antiinflamatorias. Estas
propiedades bioactivas los convierten en ingredientes ideales para suplementos dietéticos
destinados a mejorar la salud y el bienestar.
Otra área en la que los hidrolizados de proteínas obtenidos con agua subcrítica están ganando
interés es la industria cosmética y de cuidado personal. Estos hidrolizados pueden utilizarse en
la formulación de productos para el cuidado de la piel, el cabello y las uñas.
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Aunque los hidrolizados de proteínas obtenidos con agua subcrítica muestran un gran potencial
en diversas aplicaciones, todavía existen desafíos y áreas de investigación en desarrollo. A
continuación, discutiremos algunos de los retos y las perspectivas futuras en este campo.
Además, se están realizando estudios para comprender mejor los mecanismos de la hidrólisis
con agua subcrítica y cómo influyen los parámetros de proceso en la composición y las
propiedades de los hidrolizados resultantes. Esto permitirá un mejor control y diseño de los
hidrolizados en función de las aplicaciones específicas.
La optimización del proceso de hidrólisis con agua subcrítica es otro aspecto crucial para mejorar
la eficiencia y la calidad de los hidrolizados obtenidos. Se están explorando diferentes
estrategias, como el uso de enzimas específicas y la combinación de métodos de pretratamiento,
para maximizar la hidrólisis y obtener hidrolizados con perfiles peptídicos deseados.
Otra perspectiva futura interesante es la combinación de la hidrólisis con agua subcrítica con
otras técnicas o procesos para obtener hidrolizados con propiedades mejoradas o nuevos
perfiles bioactivos. Por ejemplo, la combinación de la hidrólisis con agua subcrítica y la
fermentación puede generar hidrolizados con características únicas y propiedades bioactivas
adicionales.
En conclusión, los hidrolizados de proteínas obtenidos mediante la hidrólisis con agua subcrítica
tienen un amplio potencial de aplicaciones en diversas industrias, incluyendo la alimentaria, la
nutrición, la cosmética y el cuidado personal. Estos hidrolizados presentan propiedades
funcionales y beneficios para la salud debido a su composición peptídica y aminoacídica
específica.
Sin embargo, todavía existen desafíos que deben abordarse, como la optimización del proceso
de hidrólisis, la mejora de la purificación de los hidrolizados y la exploración de nuevas
combinaciones de técnicas.
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VI. CONCLUSIONES:
En conclusión, el estudio de la hidrólisis de proteínas utilizando agua subcrítica ha demostrado
ser una técnica prometedora en la obtención de péptidos pequeños con propiedades
funcionales y beneficiosos para diversas aplicaciones en la industria alimentaria, la nutrición, la
cosmética y el cuidado personal. A lo largo de este trabajo, hemos explorado los fundamentos
teóricos de la hidrólisis de proteínas y el uso del agua subcrítica como agente hidrolítico, así
como las propiedades y aplicaciones de los hidrolizados de diferentes fuentes de proteínas.
Los hidrolizados de proteínas obtenidos con agua subcrítica pueden provenir de fuentes
vegetales y animales. En el caso de las fuentes vegetales, se han utilizado diferentes procesos
de hidrólisis con agua subcrítica para obtener hidrolizados de proteínas vegetales con perfiles
peptídicos específicos. Estos hidrolizados han demostrado propiedades funcionales, como
capacidad emulsionante y capacidad de retención de agua, lo que los hace útiles en la industria
alimentaria para mejorar la textura y la estabilidad de los productos. Además, se han investigado
las propiedades y las aplicaciones de estos hidrolizados en productos horneados, productos
cárnicos, bebidas y alimentos para deportistas.
Por otro lado, los hidrolizados de proteínas animales obtenidos con agua subcrítica también han
mostrado propiedades funcionales y beneficiosas. Estos hidrolizados pueden mejorar el sabor,
el aroma y las características organolépticas de productos como caldos, sopas y salsas. Su uso
en la industria alimentaria puede proporcionar productos finales de alta calidad y aceptación
por parte de los consumidores.
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Además, la cosmética y el cuidado personal son áreas en las que los hidrolizados de proteínas
están ganando relevancia. Estos compuestos pueden ser utilizados en formulaciones de
productos para el cuidado de la piel, el cabello y las uñas, proporcionando propiedades
hidratantes, regeneradoras y anti-envejecimiento.
En conclusión, la hidrólisis de proteínas con agua subcrítica ofrece una vía prometedora para
obtener hidrolizados de proteínas con propiedades funcionales y beneficiosas. Estos
hidrolizados tienen aplicaciones en diversas industrias y presentan perspectivas futuras
emocionantes. La combinación de una investigación continua, la optimización del proceso y la
exploración de nuevas tecnologías permitirán aprovechar todo el potencial de los hidrolizados
de proteínas obtenidos con agua subcrítica y llevarlos a la práctica en aplicaciones comerciales
y beneficios para la sociedad.
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iii. Recuperación de la fracción proteica con alta actividad antioxidante del residuo sólido
industrial de algas rojas después de la extracción de agar mediante tratamiento con agua
subcrítica.
Ester Trigueros, M. Teresa Sanz, Patricia Alonso-Riaño, Sagrario Beltrán, Cipriano Ramos,
Rodrigo Melgosa.
Fuente: Journal of Applied Phycology. Año: 2021.
iv. Hidrólisis de proteínas por agua subcrítica: una nueva perspectiva para obtener péptidos
bioactivos.
Carlos I. Rivas-Vela, Silvia L. Amaya-Llano, Eduardo Castaño-Tostado y Gustavo A. Castillo-
Herrera.
Fuente: Journal Molecules. Año: Octubre 2021.
v. Estudio de la ampliación de escala del agua subcrítica desde el laboratorio hasta el sistema
piloto para la valorización del bagazo de cerveza.
P. Alonso-Riaño, C. Ramos, E. Trigueros, S. Beltrán, M.T. Sanz.
Fuente: ElSevier. Año: Noviembre 2022.
vi. Agua subcrítica como medio hidrolítico para recuperar y fraccionar la fracción proteica y
los compuestos fenólicos del bagazo de la cerveza artesanal.
P. Alonso-Riaño, M.T. Sanz, O. Benito-Román, S. Beltrán, E. Trigueros.
Fuente: Food and Bioprocess Technology. Año: 2019.
viii. Producción de proteína para consumo animal mediante hidrólisis de plumas de pollo en
agua subcrítica. Estudio de planta piloto.
Víctor David Carabalí Ocoró.
Fuente: Universidad del Valle, Facultad de Ingeniería. Año: 2018.
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