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Direccin General de Educacin Superior Tecnolgica Instituto Tecnolgico de Mazatln DETERMINACION DE LA DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO AL QUINTO DIA EN MUESTRAS

DE AGUA SALOBRE. TESIS PROFESIONAL que para obtener el ttulo de INGENIERO BIOQUIMICO Presenta LUIS FELIPE TIRADO RAMOS

No. de Control: 061000045

Mazatln, Sin., Diciembre de 2012.

OFICIO DE IMPRESION

AGRADECIMIENTOS Durante el lapso de mi proyecto de tesis, estuvieron personas como mis padres que siempre estuvieron apoyndome tanto moral como econmicamente, son la principal fuerza que me impulso a concluir esta bella carrera de Ingeniera bioqumica. Reconocer a mi asesor de tesis y profesor Dr. Evaristo Mndez Gmez como uno de los mejores catedrticos que he tenido en mi escolaridad. No he sido el mejor alumno, en mi opinin a causa de mi falta de madurez. Ojala pudiera tener juventud y experiencia simultneamente para no equivocarme tanto. Personas como Dulce Mara Arias Lizrraga, por haberme brindado la mano con el desarrollo del anteproyecto y diseo experimental del proyecto. Gracias a todo el personal de LAQUIN MAZATLAN empezando por IBT. Cuauhtmoc Llnes que confi en m para desarrollar en esta empresa parte de mi investigacin de tesis, haciendo nfasis en la IBT. Adilene Huerta Lizrraga, IBQ. Ana Imelda Martnez Salcido y M.C Itzia Ruiz Nieto, por haber sido mis primeras maestras en el mbito laboral. Es necesario recalcar el hecho de realizar mis prcticas profesionales en el laboratorio LAQUIN y haber conformado parte de este grupo de trabajo, fue una experiencia muy satisfactoria.

RESUMEN Uno de los ensayos ms importantes para determinar la concentracin de materia orgnica en aguas residuales, consiste en la prueba denominada Demanda Bioqumica de Oxgeno. En el desarrollo de esta tcnica, existen diversos factores interferentes que pueden afectar los valores obtenidos, entre los ms importantes se encuentran el pH, temperatura, tiempo de incubacin, aclimatacin del inculo, salinidad, compuestos qumicos y la disponibilidad de oxgeno.Para resolver este tipo de efecto bactericida o bacteriosttico, los microorganismos que realizarn la biodegradacin, debern de ser previamente seleccionados y adaptados fisiolgicamente a los diferentes rangos de salinidad a los que se van a someter, as como a los diferentes tipos y cantidades de carga orgnica presente del agua a la que se va evaluar la DBO, de lo contrario la medicin, tambin resultar incorrecta. Con el objetivo de contribuir en la solucin de algunas de las limitantes de la tcnica DBO5aplicada a muestras de aguas salobres, en esta investigacin, se desarrollaron dos consorcios microbianos; uno halfilo-halotolerante y otro dulce-acucola, para evaluar y comparar la capacidad para degradar la materia orgnica generadas por algunas industrias que vierten sus aguas residuales con contenido salino como ocurre en; procesadoras de mariscos, empacadoras e industria de la harina de pescado. Los resultados sealan que es posible medir DBO con buena precisinen muestras de agua residual salobre y con alta carga orgnica, sise cuenta con el consorcio microbiano adecuado, siempre y cuando se trabaje en un rango no mayor a 6 g/L.

Palabras claves: DBO5, consorcio microbiano, agua salobre.

INDICE

INDICE ...................................................................................................................... i INDICE DE TABLAS ............................................................................................... iv INDICE DE FIGURAS .............................................................................................. v I. INTRODUCCION ................................................................................................. 1 II. ANTECEDENTES ............................................................................................... 3 III. JUSTIFICACION ................................................................................................ 8 IV. HIPTESIS........................................................................................................ 9 V. OBJETIVOS...................................................................................................... 10 5.1 Objetivo general ........................................................................................... 10 5.2 Objetivos particulares .................................................................................. 10 VI. FUNDAMENTO TERICO .............................................................................. 11 6.1 Principio del mtodo de medicin de DBO .................................................. 11 6.2 Limitaciones ................................................................................................. 11 6.3 Interferencias en la medicin de la DBO ...................................................... 11 6.3.1 -Inoculacin de muestras en la medicin de la DBO ............................. 11 6.3.2 Interferencias por alta carga orgnica y nitrificacin en la medicin de la DBO ................................................................................................................ 12 6.3.3 Presencia de cloro en la medicin de DBO ........................................... 13 6.4 Generalidades tcnicas y metodolgicas en la medicin del Oxgeno Disuelto (OD). .................................................................................................... 14 6.4.1 Mtodo Winkler o Yodomtrico para la medicin de OD ....................... 15 6.4.2 Interferencias en la medicin de OD por el mtodo Winkler .................. 15 6.4.3 Microorganismos capaces de degradar materia orgnica en condiciones salobres .......................................................................................................... 16
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VII. METODOLOGA ............................................................................................. 18 7.1 Preparacin, aclimatacin y desarrollo de la semilla Halfila-Halotolerante.18 7.2 Muestreo y ensayo de las capacidades de biodegradacin en salinidades de 2, 4 y 6 gL-1. ....................................................................................................... 19 7.3 Estudio de reproducibilidad. ......................................................................... 21 7.4 7.5 Mantenimiento del consorcio microbiano. ................................................ 21 Estudio estadstico ................................................................................... 23

VIII. RESULTADOS Y DISCUSIONES ................................................................. 24 8.1 Desarrollo del reactor Halfilo Halotolerante ............................................ 24 8.2 Medicin del ndice volumtrico de lodo activado del reactor HalfiloHalotolerante ..................................................................................................... 24 8.3 Anlisis estadstico. ..................................................................................... 31 8.4 Reproducibilidad .......................................................................................... 33 IX. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES. .................................................. 34 X. BIBLIOGRAFA ................................................................................................. 37 XI. ANEXOS .......................................................................................................... 41 Anexo 1. Valoracin de Tiosulfato de sodio de acuerdo con la NMX-AA-028SCFI-2001. ........................................................................................................ 41 Anexo 2. Frmula utilizada para el clculo de la DBO 5 cuando presenta inoculo NMX-AA-028-SCFI-2001. .................................................................................. 42 Anexo 3. Alimentacin del reactor Halfilo Halotolerante. .............................. 43 Anexo 4. Lectura de la DBO5 en muestra de agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 2 gL-1. ...................................................................................... 44 Anexo 5. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulceacucola a una salinidad de 2 gL-1. .................................................................... 45 Anexo 6. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 4 gL-1. ...................................................................................... 46
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Anexo 7. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulceacucola a una salinidad de 4 gL-1. .................................................................... 47 Anexo 8. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 6 gL-1. ...................................................................................... 48 Anexo 9. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulceacucola a una salinidad de 6 gL-1. .................................................................... 49

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INDICE DE TABLAS Tabla 1. Lecturas de DBO5 en muestras de agua salobre con ambos consorcios microbianos. .......................................................................................................... 27 Tabla 2. Comparacin de los tratamientos en la DBO5 por el mtodo estadstico Tukey. ................................................................................................................... 33

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INDICE DE FIGURAS Figura 1. Diagrama de desarrollo de semillas microbianas. .................................. 19 Figura 2. Diagrama matriz de procedimientos para la realizacin de la DBO5, para una salinidad de 2, 4, 6 gL-1. ................................................................................ 20 Figura 3. ndice volumtrico de lodo activado del reactor Halfilo-Halotolerante. . 25 Figura 4. Lecturas de DBO5 con diferentes consorcios microbianos a salinidades de 2, 4, 6 gL-1. ....................................................................................................... 29

Captulo I Introduccin

I. INTRODUCCION

Esencialmente, la Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO), es una medida de la cantidad de oxigeno que consumen los microorganismos para logar la estabilizacin de la materia orgnica biodegradable, bajo condiciones aerobias, en un periodo de 5 das y a 20 C (Romero, 1999). La determinacin de la demanda bioqumica de oxigeno, consiste en un examen emprico, en el cual se usan procedimientos estandarizados para determinar los requerimientos de oxgeno necesario para degradar la materia orgnica contenida en las aguas residuales, efluentes de los mismos y en las aguas contaminadas. Esta prueba tiene su ms amplia aplicacin en la medicin de las descargas de las aguas tratadas por las plantas de tratamiento con el propsito de determinar la eficiencia de remocin de la materia orgnica. Para esta prueba, se mide el oxigeno molecular utilizado por un consorcio bacteriano durante un periodo de incubacin especfico para una muestra de agua a medir, con el propsito de saber cunto oxgeno requiere para logar la degradacin de la materia orgnica (demanda carboncea) (Metcalf& Eddy, 2003). En aguas residuales domesticas, el valor de la DBO a los 5 das representa un promedio que oscila entre el 65 a 70% del valor total de materia orgnica oxidable. La DBO, como todo ensayo, requiere de cuidado especial para su realizacin, as como conocimiento de los cuidados de trabajo que deben cumplirse, con el fin de obtener valores representativos y confiables. El ensayo supone la medida de la cantidad de oxigeno consumido por los microorganismos para degradar la materia orgnica presente en una agua residual; por lo tanto es necesario garantizar que durante todo el periodo del ensayo exista en la botella de prueba suficiente oxigeno disuelto, disponible para ser utilizado por los microorganismos que van a hacer la degradacin (Romero, 1999).

Captulo I Introduccin

En la ingeniera ambiental, la determinacin de oxgeno disuelto (O.D.) es importante por ser el principal factor que determina la existencia de condiciones aerobias o anaerobias en el cuerpo de agua. La determinacin del O.D., sirve como base para cuantificar la DBO y con ello la presencia de oxigeno en los procesos de tratamiento, calcular las tasas necesarias para la aireacin en los procesos de tratamiento aerobio y el grado de contaminacin en los ros. El oxgeno disuelto se presenta en cantidades variables pero generalmente bajas en el agua; su contenido depende de la concentracin y estabilidad del material orgnico y es por ello, un factor importante en la autopurificacin de los ros. Los valores de O.D. en aguas contaminadas con materia orgnica son bajos y disminuye con el aumento de la temperatura. (Romero, 1999).

Captulo II Antecedentes

II. ANTECEDENTES Desde principios de los aos de 1900, se utilizaron varios mtodos para determinar el ndice de la respiracin de los microorganismos para evaluar la capacidad de una poblacin bacteriana para remover sustancias presentes en las aguas residuales (tratabilidad, o biodegradabilidad) y para determinar el efecto de las sustancias en las bacterias (inhibicin o toxicidad) (SIERP, 1928). La tentativa ms antigua para utilizar la medicin de la absorcin directa de la demanda del oxgeno en las aguas residuales fue hecha por Adney en 1890, quin desarroll un tipo de aparato manomtrico de presin constante en el cual observaba el ndice de absorcin del oxgeno por el agua contaminada. A una presin constante, la disminucin del volumen, debido a la absorcin del oxgeno fue observada por la variacin de altura en la columna del agua en un tubo graduado en forma de "u" que conectaba dos recipientes, uno llenado parcialmente con la muestra y el otro que contena un volumen igual de agua. El aparato entero fue colocado a una temperatura constante en un bao de agua y agitado peridicamente, para mantener un exceso de oxgeno disuelto en la muestra. Aunque Adney encontr que este mtodo era exacto, l concluy que no era prctico para aplicarse a un trabajo rutinario(Caldern, 2001). Rideal y Burgess (1909), citado en Caldern (2001), utilizaron el aparato propuesto por Adney, pero lo encontraron insatisfactorio debido a los escapes de oxgeno que se produca en el curso de la agitacin, por ello mejor sugirieron el mtodo de la dilucin, con la incubacin de las botellas cerradas con una medida determinada de oxgeno disuelto, la cual se cuantificaba, antes y despus de la incubacin por un mtodo modificado de Winkler, este mtodo, era ms exacto y fue precursor de la prueba estndar actual de la DBO5. SIERP, (1928)y otros revivieron y modificaron el aparato de aireacin directa de Adney "para reducir el dispendioso trabajo del mtodo de la dilucin y para producir lecturas rpidas, directas, frecuentes y repetitivas", sin embargo careca an de precisin.

Captulo II Antecedentes

En cuanto al efecto de la sal sobre las poblaciones microbianas involucradas en la biodegradacin,Dufour, (1982), realiz un estudio sobre la influencia de las condiciones de contaminacin sobre la biodegradacin de materia orgnica en una laguna tropical, ensayando adems el mtodo de la DBO con salinidades de 5, 10, 20, 35 gL-1, observando que la DBO de las aguas residuales, fue inhibida por la salinidad del agua en la muestra, encontrando una relacin lineal entre el aumento de salinidad y la inhibicin de la lectura de la DBO. En cuanto a los efectos de la salinidad en la cintica de la DBO5, Zakiet al, (2010), cuantificando los efectos de la salinidad sobre la constante ken el mtodo de desoxigenacin,que representa la velocidad de oxidacin biolgica, ensayando diferentes niveles de salinidad con cloruro de sodio (NaCl) de 5 hasta 25 gL-1, evaluando sus efectos en muestras de agua procedente de seis ros tropicales ligeramente contaminados ubicados en Malasia. En sus resultados observaron variaciones que oscilaron entre 0.10 - 0.25/da para el valor k de las muestras estudiadas, encontrando que los valores kdisminuan conforme la salinidad aumentaba, el valor de k con un nivel de salinidad de 0 gL -1 fue de 0.754/da y en la salinidad de 25 gL-1de 0.513/da. Concluyeron que esta disminucin de la DBO, est relacionada con el aumento de la salinidad, atribuyndolo directamente al efecto del cloro sobre la fisiologa celular microbiana utilizada como semilla en la DBO. Dhageet al, (2011), realizaron una validacin del mtodo para la determinacin de DBO para aguas residuales domsticas en ecosistemas marinos, quienes utilizaron una carga orgnica artificial a base de glucosa cido glutmico y agua residual domstica, para evaluar el impacto de la salinidad en la capacidad de biodegradacin de los desechos carbonceos a 20C durante 5 das y 27C durante 3 das. Sus resultados demostraron una tasa de degradacin baja de materia orgnica carboncea en aguas marinas, observaron tambin una relacin inversa en la tasa de degradacin y la salinidad ya que sus valores indicaban una tendencia decreciente en la degradacin al incrementar la salinidad.

Captulo II Antecedentes

Contreras Bustos et al, (2009), realizaron la investigacin acerca de la factibilidad de tratamiento de las aguas salobres, para ello desarrollaron el proyecto en tres fases: 1) desarrollo de lodo activado, utilizando como semilla sedimentos salobres del estero de Teacapn, Sinaloa (LAT), 2) adaptando este lodo a la

biodegradacin en diferentes salinidades durante un perodo de 1, 2 y 3 meses (LAT1). Otra porcin de volumen de lodo semilla, se activ al tipo de agua

residual salobre sin previa adaptacin a salinidad (LAT2), y 3) se evalu la capacidad de degradacin de la materia orgnica alcanzada por ambos lodos realizando bioensayos con <1, 1, 2,4 y 8 gL-1 de salinidad aplicada a muestras de una misma agua residual. En cada bioensayo se cuantific la DBO5-25 y se midi el ndice Volumtrico de Lodos, al inicio y al final de cada ensayo. Con los resultados compararon la capacidad de degradacin biolgica lograda por cada lodo y luego compararon los resultados de degradacin obtenidos por lodos convencionales sometidos a la misma carga y salinidades (testigo negativo), donde este ltimo fue utilizado sin adaptacin previa de salinidad y carga orgnica.Los resultados obtenidos por estos investigadores con los 12 lotes de bioensayos efectuados comparando los LAT2 contra lodos activados marinos(desarrollado con semilla a partir de sedimentos marinos contaminados con materia orgnica), que aplicando aireacin intensivapueden formar un lodo activado capaz de trabajar en medios salinosy en 6 niveles de salinidad, sealaron que al aplicar salinidad de 1gr de sal L -1 el IVL, se redujo el porcentaje de lodo activado en un 45.62% en el lodo LAT2, mientras que el lodo LAM se redujo en un 48.65%. Al aumentar la salinidad de 0 a 4 grL-1 la capacidad para formar lodo activo, se redujo hasta en un 15.53% para el lodo LAT2 y 15.65% para el lodo LAM, con salinidad de 8 grL-1 el lodo LAT2 disminuy en un 8.23%, mientras que el lodo LAM disminuyo hasta 9.01%, sin embargo al aumentar el tiempo de adaptacin de un mes a tres meses y resembrndolo cada mes a partir de una semilla procedente de sedimentos marinos, se logr rescatar la eficiencia hasta un

62.42% en la salinidad de 4, el doble de la capacidad sin aclimatacin.


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Captulo II Antecedentes

Hamoda, M.F.et al,(1995), afirmaron que el tratamiento de las aguas residuales salobres medianteel uso de lodos activados puede mejorarse aplicando seleccin progresiva para obtener microorganismos halfilos, para enseguida aplicando un perodo previo de aclimatacin a salinidad e incremento de carga orgnica, pudiendo alcanzar has una eficiencia en la remocin de la materia orgnica similar a la obtenida con lodos activados en agua dulce. Gharsallahet al, (2002) estudiaron el tratamiento de aguas residuales salinas originadas en la industria procesadora de productos marinos mediante un reactor aerobio de lecho fijo, ellos experimentalmente adaptaron una flora bacteriana al agua residual con incrementos graduales de sal (NaCl), de esta manera redujeron el efecto de la plasmlisis en las clulas bacterianas del lodo activado fijo del reactor, originario altas eficiencias de remocin orgnicas de 92.5 % en trminos de DQO y 95.4 % en la remocin orgnica en trminos de COT en el tratamiento con bajas tasas orgnicas de 250 mg DQO L-1 dia-1. Otro estudio realizado por Ozalpet al,(2003), reportaron que no existe una inhibicin significativa en la eficiencia de la remocin orgnica en el tratamiento anaerobio con el reactor de lecho de lodos de flujo ascendente (por sus siglas en ingles UASBR), en trminos de DQO y COT registrando 86 y 84% de remocin en el tratamiento de agua residual sinttica conteniendo 1.5 gL-1 de sal. Un estudio realizado por Kargisupra cit.(2002), concluyo que el enriquecimiento del lodo activado con bacterias halfilicas particularmente del genero

Halobacterhalobium en el tratamiento biolgico de agua residual sinttica es notablemente mejorado alcanzando eficiencias de remocin orgnicas de 85% en trminos de DQO comparado contra un ensayo testigo libre de esta bacteria halfilica, registrando un 58% de eficiencia en la remocin en trminos de DQO en una salinidad de 5 gL-1 NaCl.

Captulo II Antecedentes

Wang et al, (2005) disearon un sistema de tratamiento de agua residual domestica salina con lodo activado trabajado con salinidades de 0.1 gL-1 hasta 20 gL-1, observaron que las eficiencias en la remocin orgnicas en trminos de carbnico orgnico total no son deterioradas en salinidades menores a 0.5 gL 1

NaCl, sin embargo cuando el tratamiento se someti a un estrs salino mayor a 5

gL-1 la eficiencia de remocin orgnica se redujo a ms del 30% en trminos de carbono orgnico total.

Captulo III Justificacin

III. JUSTIFICACION La medicin de la DBO5,


20C

es un anlisis utilizado para determinar los

requerimientos de oxgeno necesario para degradar la materia orgnica en las aguas residuales, efluentes de los mismos y en las aguas contaminadas. En el proceso de realizacin de la medida de la DBO existen diversos factores que afectan los valores obtenidos, entre los cuales se encuentran el pH, las condiciones osmticas, temperatura, tiempo de incubacin, aclimatacin del inculo, salinidad, compuestos qumicos y disponibilidad de oxgeno. Entre estos, la presencia de cloro residual en algunos efluentes de desecho y efluentes industriales influye negativamente al ser utilizados para la determinacin de DBO debido al efecto bactericida del cloro o de sus productos y tambin porque el cloro introduce un error en la determinacin de oxgeno disuelto. Por lo tanto para el caso de pruebas de DBO realizadas en aguas que contengan altos niveles de cloro, por ejemplo aguas con alto contenido de cloruro de sodio (NaCl), es necesario el desarrollo de un consorcio microbiano capaz de trabajar a condiciones osmticas presente en la muestra a evaluar y medir o comparar contra un consorcio microbiano testigo. Para as establecer correcciones en la tcnica de medicin de la DBO para obtener una precisin en los resultados al analizar muestras de aguas salobres.

Captulo IV Hiptesis

IV. HIPTESIS

Es posible aplicar variaciones en la tcnica estndar utilizada para la medicin de la Demanda Bioqumica de oxgeno (DBO5, aguas salobres.
20C)

en el anlisis de muestras de

Captulo V Objetivos

V.OBJETIVOS 5.1 Objetivo general Establecer las variantes necesarias en la tcnica estndar para la determinacin de la Demanda Bioqumica de oxgeno (DBO 5, aplicarlo enmuestras de aguas salobres. 5.2 Objetivos particulares 1. Adaptar muestras de sedimentos contaminados con materia orgnica para obtener una semilla microbiana capaz de trabajar en aguas salobres. 2. Con los consorcios halfilos-halotolerantes desarrollados, ensayar las capacidades de biodegradacin en aguas salobres. 3. Realizar el estudio de reproducibilidad. 4. Definir las modificaciones necesarias para eliminar o disminuir las interferencias que ocurren en las muestras de agua salobre, al aplicar el mtodo estndar en la determinacin de la Demanda Bioqumica de oxgeno (DBO).
20C)

para

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Captulo VI Fundamento terico

VI. FUNDAMENTO TERICO 6.1 Principio del mtodo de medicin de DBO El mtodo consiste en colocar una alcuota de la muestra a evaluar en una botella especial que contiene una tapa hermtica y un volumen especfico, e incubar a una temperatura especifica durante 5 das. El oxgeno disuelto es medido antes y despus de la incubacin, y la DBO es el resultado de la diferencia entre el oxgeno disuelto inicial y final. Porque el oxgeno inicial es determinado inmediatamente despus de que se hace la dilucin, toda la absorcin de oxigeno, incluyendo la que ocurre durante los primeros 15 minutos es incluida en la medida de DBO (APHA, 1975). 6.2 Limitaciones Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO, entre ellos la relacin de la materia orgnica soluble a la materia orgnica suspendida, los slidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas (Chica et al, 2007). Segn Metcalf&Eddy(2003), entre las limitantes generales en la medicin de la DBO, se encuentran el periodo prolongado de tiempo requerido para la obtencin de resultados, el hecho de que slo se midan los productos orgnicos biodegradables y, por ltimo, que el ensayo no tenga validez estequiomtrica una vez que haya sido utilizada la materia orgnica soluble presente en la muestra. Posiblemente, la mayor limitacin la constituya el hecho de que el periodo de 5 das puede no corresponder con el momento en el que ya se haya consumido toda la materia orgnica soluble. 6.3 Interferencias en la medicin de la DBO 6.3.1 -Inoculacin de muestras en la medicin de la DBO Entre las complicaciones en la prueba de DBO se implica el no utilizar inculo en la muestra, cuando esto sucede se experimentan periodos de retardo antes de
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Captulo VI Fundamento terico

que la reaccin proceda normalmente. Por otro lado, las aguas que han sufrido una descomposicin anaerbica parcial o que contienen sustancias qumicas reductoras, pueden ejercer una demanda inmediata (algunas veces denominada demanda qumica) al principio del periodo de DBO (Fairet al, 1971). Una de las razones ms frecuentes para la obtencin de valores de DBO no confiables es la utilizacin de una cantidad insuficiente de microorganismos al inocular las muestras. En los efluentes industriales la presencia de materiales txicos interfiere con el crecimiento de la poblacin microbiana lo cual causa bajos valores de DBO por lo que para corregir este problema es necesaria la aclimatacin de microorganismos que se utilizarn de inculo a cada agua residual especfica, esto se logra por lo general con sedimento de agua residual domstica que contenga una alta variedad de microorganismos, agregando pequeas cantidades de agua residual industrial y bombeando aire a la mezcla. Este proceso se repite con un incremento gradual en la proporcin de agua residual industrial, hasta que se desarrolle el cultivo microbiano aclimatado para cada efluente industrial (Ramalho, 1977). 6.3.2 Interferencias por alta carga orgnica y nitrificacin en la medicin de la DBO Para la realizacin de la DBO en aguas con alta carga orgnica, se necesita sembrar la muestra con inculo, es decir con una mezcla de bacterias hetertrofas, y algunas quimiotrficas, particularmente nitrificantes, las cuales se encuentran en pequeas cantidades en las aguas residuales domsticas sin tratamiento. De tal manera que al presentar su tasa reproductiva a 20C, no llega a ser lo suficientemente grande para ejercer una apreciable demanda por oxgeno, hasta alrededor de los 8 a 10 das de haberse sembrado y concluido la prueba de DBO. Una vez que los organismos llegan a estabilizarse, oxidan el nitrgeno de la forma de amonio, a nitratos y nitritos que en forma combinada con el agua forman cidos que en cantidades pequeas introducen un error significativo en la DBO carboncea(Sawyer&McCarty, 1978). Por otra parte durante la hidrlisis de las protenas, se produce materia no carbonosa como el amoniaco, el cual es oxidado
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Captulo VI Fundamento terico

en nitrito y nitrato por bacterias autotrficas; el oxgeno asociado con la oxidacin del nitrgeno amoniacal, en el proceso biolgico de nitrificacin, constituye la llamada Demanda Bioqumica de Oxgeno Nitrogenada (DBON). Tambin es necesario considerar la oxidacin de nitrgeno inorgnico ya que puede agotar el oxgeno disuelto en los cuerpos de agua, por lo que no es deseable usar la medicin normal de la DBO para tales estimados, porque el nitrgeno amoniacal es agregado al agua de dilucin como un nutriente requerido, y su oxidacin puede llevar a conclusiones errneas sobre la cantidad estimada. Para esta interferencia es mejor realizar un anlisis en los desechos, contabilizando las diferentes formas de nitrgeno presentes y usando las relaciones estequiomtricas entre el oxgeno y nitrgeno (Sawyer&McCarty, 1978). 6.3.3 Presencia de cloro en la medicin de DBO Algunos efluentes domsticos y otros industriales, contienen cloro residual o productos de la accin del cloro que actan sobre las bacterias y la misma materia orgnica. Tales muestras de agua no se pueden utilizar directamente para la determinacin de DBO debido al efecto bactericida del cloro o de sus productos ya que el cloro introduce un error en la determinacin de oxgeno disuelto. Sin embargo, en el caso de otros efluentes que constan solamente de desechos industriales, el cloro puede combinarse con compuestos orgnicos presentes para producir sustancias que, aunque sin dar reaccin en el ensayo de almidn-yoduro, son inhibitorias de la oxidacin bioqumica o incluso bactericidas. La DBO, como se indica en estas circunstancias, es generalmente ms baja que la que cabra esperar por el contenido orgnico medida para otras pruebas (Bartram y Balance, 1996). En el caso de pruebas de DBO en muestras de agua estuarina, donde los niveles de salinidad debido principalmente al contenido de cloruro de sodio (NaCl), se ha aceptado que la medicin de la DBO, como parmetro de evaluacin de la contaminacin orgnica en esas aguas no es recomendable (Zakiet al, 2010), ya que se ha reportado en la literatura que la tasa de descomposicin de
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Captulo VI Fundamento terico

contaminantes orgnicos que son medidos como DBO, son registrados en menor cantidad que la real debido al efecto de la salinidad sobre las bacterias que hacen la biodegradacin. Este fenmeno ocurre debido a la disminucin de los procesos osmoregulatorios que a su vez afectan la capacidad de degradacin de compuestos orgnicos fuera y dentro de las clulas de los microorganismos (Dhageet al, 2011). 6.3.4 Presencia de algas en la medicin de DBO La presencia de algas en el agua residual analizada tambin afecta la prueba de DBO. Si la muestra es incubada en presencia de luz, se obtienen bajos valores de DBO debido a la produccin de oxigeno por la fotosntesis, el cual satisface parte de la demanda de oxigeno que requieren las bacterias para la degradacin de la materia orgnica contaminante. En cambio si la incubacin se realiza incubando las muestras en oscuridad, las algas sobreviven poco tiempo y mueren y las clulas algales contribuyen al incremento del contenido orgnico total de la muestra, con consecuencia en altos valores de la DBO (Ramalho, 1977). 6.4 Generalidades tcnicas y metodolgicas en la medicin del Oxgeno Disuelto (OD) El principio del mtodo de determinacin de la DBO requiere la medida de los niveles de oxgeno disuelto (OD), este parmetro es la prueba clave para conocer el estado de contaminacin en el agua y para el control de una planta de tratamiento de aguas en aguas naturales y aguas residuales (ITA, 2003). Este parmetro depende de actividades qumicas, fsicas y bioqumicas en el cuerpo de agua como por ejemplo de la solubilidad del gas, de la presin parcial del gas en la atmsfera, la temperatura y la concentracin de las impurezas en el agua (salinidad, slidos suspendidos, etc.) (Metcalf& Eddy, 2003). Se describen dos mtodos para el anlisis de OD: el de mtodo Winkler o yodomtrico y sus modificaciones y el mtodo electromtrico que utiliza electrodos de membrana. El mtodo yodomtrico es un procedimiento titulomtrico basado en la propiedad oxidante del OD, mientras que el mtodo del electrodo de
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Captulo VI Fundamento terico

membrana se basa en la tasa de difusin de oxgeno molecular a travs de una membrana. La eleccin del procedimiento depende de las interferencias presentes, la precisin deseada y, en algunos casos, la comodidad o conveniencia (APHA, 1975). 6.4.1 Mtodo Winkler o Yodomtrico para la medicin de OD La prueba yodomtrica es el mtodo ms exacto para el anlisis de OD, ste se basa en la adicin de solucin de manganeso divalente, seguido de lcali fuerte a la muestra en una botella con tapn de vidrio. El OD se oxida rpidamente en una cantidad equivalente del hidrxido de manganeso divalente disperso a hidrxidos precipitados de estados de valencia ms altos. En presencia de iones de yoduro en solucin cida, el manganeso oxidado vuelve al estado divalente, con la liberacin de yodo equivalente al original contenido de OD. Para entonces valorar el yodo con una solucin estndar de tiosulfato. El punto final de titulacin se puede detectar visualmente con la tcnica potenciomtrica, utilizando un indicador de almidn o electromtricamente. El yodo liberado tambin puede ser determinado directamente por espectrofotmetros de absorcin simple, en este mtodo se puede utilizar como una rutina base para proporcionar estimaciones muy precisas de OD en el rango de microgramos por litro, en las que no interfieren partculas como el color y las interferencias qumicas (APHA, 1975). 6.4.2 Interferencias en la medicin de OD por el mtodo Winkler En la determinacin de OD por el mtodo Winkler o Yodomtrico hay varios materiales que pueden causar interferencias, como los iones de sales, materia orgnica, cantidad excesiva de material orgnico suspendido, sulfuros, dixido de azufre, cloro residual, cromo, cianuro y ciertos reactivos oxidantes o reductores (Metcalf& Eddy, 2003). Entre estas interferencias, el ion nitrito es una de las ms frecuentes que se encuentran en la determinacin de oxgeno disuelto. Este caso ocurre en efluentes de las plantas de tratamiento de desechos que emplean procesos biolgicos, en aguas de ros y en muestras incubadas de DBO. Este ion no oxida al Mn 2+ pero
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oxida a I- a I2 bajo condiciones cidas. Por otra parte es particularmente desagradable porque en su forma reducida N2O2, es oxidado por el oxgeno, el cual entra a la muestra durante el procedimiento de titulacin y es convertido a NO-2 otra vez, estableciendo una reaccin cclica que puede llevar errneamente a altos resultados (Sawyer&McCarty, 1978). Cuando se presenta una interferencia por nitritos, es imposible obtener un punto final permanente; tan pronto como en color azul del indicador de almidn se visualiza, los nitritos formados por la reaccin, reaccionan con I - para formar I2 y el color azul del almidn vuelve a aparecer. Esta interferencia puede ser fcilmente sobrellevada por el uso de azida de sodio (NaN3), pero es ms conveniente la azida en un reactivo lcali-KI y cuando en acido sulfrico es agregado se destruyen las reacciones donde se convierte a NO-2 (Sawyer&McCarty, 1978). Por otra parte la interferencia causada por sustancias reductoras como nitritos e hierro frrico (hasta varios cientos de miligramos por litro), como en el agua cida de minas. Esto se puede superar mediante la adicin de 1 ml de fluoruro de potasio (KF) y azida, siempre que la valoracin final se realiza inmediatamente despus de la acidificacin (APHA, 1975). 6.4.3 Microorganismos capaces de degradar materia orgnica en

condiciones salobres La sal comn (NaCl), en elevadas concentraciones, es considerada como un inhibidor del crecimiento microbiano, por lo que ha sido ampliamente utilizada para la conservacin de los alimentos, curtido de pieles, etc. Sin embargo, existen gran cantidad de microrganismos, llamados halfilos, que son capaces de vivir en presencia de altas concentraciones de sal es decir en ambientes hipersalinos(Oren, 2002). El trmino halfilo viene del vocablo griego donde halo es sal y filo es amante es decir significa amante de la sal. Sin embargo no todos los microrganismos halfilos tienen el mismo requerimiento de sal. Por lo que tienen que agruparse en
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funcin del rango de sales que necesita para obtener un crecimiento optimo. El criterio no est universalmente unificado pero por trmino medio se consideran dos tipos de halfilos propiamente dichos(DasSarma&Arora 2002). -Halfilos moderados, cuando presentan un crecimiento ptimo en medios que contienen ente el 5 y 20 gL-1 de NaCl. -Halfilos extremos, si crecen ptimamente en medios que presentan una concentracin entre el 20-30 gL-1de NaCl.

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Captulo VII Metodologa

VII. METODOLOGA 7.1Preparacin, Halotolerante. Para la etapa de desarrollo de un consorcio microbiano halfilo-Halotolerante se tomaron 3 litros de muestra del lodo activado del sedimento producido en la descarga de la industria procesadora de la harina de pescado Maz-Industrial, que se encuentra en el estero La sirena ubicado en Mazatln, Sinaloa, Mxico. Posteriormente se procedi a conservarlos a temperatura constante de 4 C en un recipiente de cristal. En seguida se habilitaron dos recipientes de cristal rectangulares de 30 litros de capacidad, lavados con jabn y cloro para su desinfeccin. Se enjuagaron primero con agua potable y luego con agua destilada varias veces hasta eliminar el cloro residual presente. Al primer recipiente se le denomino reactor H-H, a este recipiente se le coloco el lodo recolectado del estero el cual contiene microrganismos halfilos-Halotolerante. Al inocular los tres litros de lodo (contaminados con exceso de materia orgnica) en 17 litros de agua limpia. Se inyecto aireacin por medio de cuatro bombas de aire marca Elite modelo 799 conectadas a cuatro piedras rectangulares con dimensiones de 15 cm x 2 cm, arrojando una burbuja fina, estas piedras fueron distribuidas a medidas equitativas en el largo y ancho de la base de la pecera, procurando no dejar zonas muertas. El alimento que se suministro a los lodos activados de los reactores procedi de muestras tomadas diariamente del efluente de la etapa del tratamiento primario de la planta de tratamiento de Maz Industrial S. A. de C. V. que se caracteriza por altos niveles de salinidad en sus descargas (Figura 1). Se alimentaron de forma gradual midiendo el ndice volumtrico de lodos (IVL), esto para tener un control en el crecimiento del lodo, y as saber si se cuenta con la relacin 80/20, establecida por Metcalf& Eddy (2003). aclimatacin y desarrollo de la semilla Halfila-

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Para realizar los anlisis de DBO5, con consorcios microbianos de diferente procedencia, se adapto la misma cantidad de alimento 500 ml de agua cruda de la industria procesadora de la harina del pescado Maz-Industrial, as como un tiempo de retencin hidrulico de 48 hrs para ambos reactores.

Figura 1. Diagrama de desarrollo de semillas microbianas.

7.2 Muestreo y ensayo de las capacidades de biodegradacin en salinidades de 2, 4 y 6 gL-1. Para llevar a cabo el anlisis de la DBO5 en agua salobre. Se recolect en un envase de Polipropileno con capacidad de 3.78 L, agua cruda de la planta de tratamiento de la industria Maz-Industrial. El agua recolectada se llevo a las instalaciones del Instituto Tecnolgico de Mazatln al rea de laboratorio de especialidades opcin ambiental donde se le dio un pre- tratamiento a la muestra para separar la grasa. Se verti agua cruda en una probeta de 1000 mL, en la cual se suministro aireacin provocando que la grasa se fuera a la parte superior del liquido, por la tcnica de sifoneo se tomo volumen de la parte baja. Posteriormente
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Captulo VII Metodologa

se coloco el agua desgrasada en una hielera para su almacenamiento, se refrigero la muestra con cubos de hielo. Igualmente en la misma hielera se almacenaron volmenes de lodo activado extrados de ambos reactores previamente identificados. Tales muestras se trasladaron al laboratorio de LAQUIN

MAZATLAN, el espacio a ocupar fue el rea de fisicoqumico, lugar donde se llevo a cabo la evaluacin de la DBO5. As mismo recalcar que la DBO5, se corri bajo la NMX-AA-028-SCOFI-2001. Haciendo variaciones en el mtodo en la forma de preparar el agua dilucin y el empleo de dos diferentes consorcios, se agreg Sal de Mar al agua dilucin la cual se puso a airear en 14 Litros de agua reactivo, as mismo se peso aproximadamente en la balanza analtica 28 gr de sal de mar, paso a disolverse en agua reactivo con ayuda de un agitador magntico, esperar a no ver soluto para despus aadirse al agua aireada para obtener una salinidad de 2gL-1. Se repiti el mismo procedimiento para la salinidad de 4 y 6 gL-1 modificando el peso para obtener la concentracin salina correspondiente (Figura2).

Figura 2. Diagrama matriz de procedimientos para la realizacin de la DBO5, para una salinidad de 2, 4, 6 gL-1.

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Captulo VII Metodologa

7.3 Estudio de reproducibilidad. Para la confiabilidad de los resultados en las lecturas de DBO 5 en muestras de aguas salobres, se realiz un estudio de reproducibilidad, en el cual participaron tres analistas del laboratorio LAQUIN MAZATLAN, analizando la misma muestra de agua residual salobre proveniente de la planta de tratamiento de Maz-Industrial. Adicionando que se conto similitud en los instrumentos de medicin e instalaciones. Se puso a airear 8 litros de agua reactivo en un recipiente de plstico graduado libre de materia orgnica o cualquier sustancia que pudiera haber causado errores en la medicin. Se pesaron aproximadamente 16 gramos de sal de mar en la balanza analtica y se disolvi en 500 mililitros de agua reactivo para ser vertido en el agua dilucin aireada. Con lo dicho anteriormente se obtuvo una salinidad en el agua dilucin de 2 gL-1. Se midi pH a la muestra de agua residual, debiendo estar en un rango de 6.5 7.5 de no ser as ajustar con diluciones de hidrxido de sodio y acido sulfrico. Hacer la debida dilucin a la muestra, para este anlisis se opt por diluir 10 mL de muestra en 500 mL de agua reactivo en un matraz de aforacin. Se tomaron 2 mL de esta dilucin y un mililitro de semilla H-H para la botella Winkler se llenaron las botellas con el agua dilucin. Para esto se mete un blanco en la corrida, as como un control de semilla. 7.4 Mantenimiento del consorcio microbiano. Tomando como referencia las condiciones generales de operacin de los reactores biolgicos de lodos activados para Mxico (CONAGUA; 2001) y para Estados Unidos (Metcalf& Eddy; 2003). Se alimentaron las bacterias cada 48 horas, se retir la aireacin por un tiempo hasta observar cmo se forma el flock y este mismo tiende a sedimentar, para pasar a tomar un litro del sobrenadante, para as evitar llevarse lo menos posible de lodo activado. Agregar 1 litro de Agua residual.

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Se verific el volumen de lodos Activados 150-250 mL y lodos muertos (20-40 mL: en caso de presentarse retirar de 40 400 mL de sedimento negro). Se midi el contenido de la purga con probeta, el volumen que fue purgado se sustituy con agua limpia. Cuidados: 1) Los reactores permanecieron con su respectiva tapa, teniendo cuatro aberturas en las esquinas que permitan la salida de las mangueras del sistema de bombeo, esto para evitar que bacterias se pudieran escapar en forma de bioaerosoles, as como evitar que se presenten similitud de microorganismos en el otro reactor. 2) El reactor baj del nivel de los 20 L esto debido a la evaporacin, se verti agua limpia hasta alcanzar de nuevo el volumen inicial. 3) El agua cruda que presenta la empresa Maz-Industrial, en el proceso de produccin de la harina de pescado tiende generar demasiadas grasas y aceites. Estos al momento de incorporar como alimento al reactor, tienen un efecto negativo en la eficiencia, ya que las bacterias no soportan la gran cantidad de grasa ni fue prioritario del trabajo presente adaptar a las

bacterias a degradar grasa. Mencionando lo anterior se opt por someter el agua cruda a un pre-tratamiento a base de aireacin la grasa tiende a flotar, de esta manera se recolect el agua del fondo por la tcnica de sifoneo.

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Captulo VII Metodologa

7.5 Estudio estadstico Con los resultados obtenidos en las lecturas de la DBO5con las salinidades de 2, 4 y 6 g/L-1 con ambas semillas, se analizo si los datos eran normales as como homocedsticos, Esto para conocer qu tipo de prueba realizar ya sea una herramienta estadstica paramtrica o no paramtrica. Se aplic la prueba de ANOVA de un factor, para tres variables o ms, si se presento diferencias significativas, se efecta la prueba de Tukey para identificar que datos causan esta diferencia estadstica, prueba realizada con un alfa 0.05. La prueba paramtrica T-student se empleo para precisar diferencias significativas en comparacin de dos variables con un nivel de confianza de 0.05.

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Captulo VIII Resultados y discusiones

VIII. RESULTADOS Y DISCUSIONES 8.1 Desarrollo del reactor Halfilo Halotolerante El agua que se utilizo como suministro de alimentacin para ambos reactores fue el agua cruda vertida en el efluente de la empresa procesadora de la harina del pescadoMaz-industrial. Cabe mencionar que una de las caractersticas de estas aguas residuales producidas por esta industria, contiene una elevada cantidad de materia orgnica que usualmente llega hasta los 39,000 mg/L (Mndez, 2009). Espreciso definir el volumen de alimentacin as como el mtodo a seguir para los recambios.Para esto se opto por alimentar el reactor con un litro de agua residual proveniente de la industria procesadora de la harina del pescadoMaz-Industrial, as como dar un tiempo de retencin hidrulico (THR) de 48 hrs.Lo descrito anteriormente estBasado en la literatura Metcalf& Eddy (2003). 8.2 Medicin del ndice volumtrico de lodo activado del reactor HalfiloHalotolerante El desarrollo de los lodos activados, se implement mediante una metodologa de constantes recambios de agua residual cruda, en un periodo de tratamiento de 48 horas con aireacin intensiva y registrando el volumen generado de lodos. El lodo activado fue medido en una probeta con capacidad de un litro, en un intervalo de tiempo de sedimentacin que fue de 1, 3, 5 y 15 minutos. El volumen del lodo activado tendi a aumentar, por lo que se podra suponer que el consorcio bacteriano desarrollado pas por las tres fases de crecimiento exponencial, estacionaria y de muerte microbiana de acuerdo al modelo tpico reportado por Metcalf& Eddy (2003). (Figura 3).

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Figura 3. ndice volumtrico de lodo activado del reactor Halfilo-Halotolerante.

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Se procedi a medir salinidad en la muestra a correr bajo la tcnica NMX-AA-073SCFI-2001 Determinacin de cloruros totales en aguas naturales, residuales y residuales tratadas. Para ello a la muestra de agua residual salobre proveniente de la industria del procesado de la harina de pescado Maz- industrial, se le determin cloruros, encontrando que present una clorinidad de 2.49 gL-1que equivale a 4.52 gL-1 de salinidad. La salinidad aplicada a la semilla H-H fue monitoreada constantemente mediante el uso del refractmetro, tcnica de fcil manejo, lo nico que hay que tener precaucin es en ser cuidadoso que la muestra no tenga partculas solidas que pudieran dar un resultado errneo al momento de leer por efecto de la difraccin de los slidos, para ello se centrifug y filtr la muestra antes de leer. Arrojando de este modo una salinidad de 2 gL-1. Efectuando la corrida analtica de la DBO5, con una concentracin salina de 2 gL-1, empleando como muestra el agua residual de la industria del procesado de la harina de pescado Maz- industrial y utilizando como inoculo 1 mL de semilla H-H, el resultado fue 14165.65mgL-1. Por otra parte se realizo el anlisis de la DBO 5, con la misma muestra de la empresa Maz-industrial, haciendo una variacin en el uso del inoculo con caractersticas diferentes a un lodo activado H-H, como es el caso del consorcio microbiano dulce- acucola. Para ello la medicin resulto ser de 12438.46 mgL-1 de DBO5. Al elevar la salinidad a 4 gL-1, la lectura de la DBO5 en agua residual salobre con semilla H-H fue de 12343.29 mg/l y empleando un consorcio microbiano dulce acucola fue de 10930.60 mg/L. Las lecturas de laDBO5con inoculo H-H e inoculo convencional presentan similitud, esto se atribuye que la salinidad de 4 g/L-1, representa una fase intermedia donde se encuentranbacterias tanto halfilas como halotolerantes.

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Al aumentar la salinidad a 6 gL-1. La lectura de la DBO5 en agua residual salobre con una semilla H-H fue de 11747.26mg/l y empleando la semilla dulce acucola fue de 7582.38 mg/l. La DBO5 de la semilla H-H se conserva dentro dela misma tendencia, la variacin es mnima respecto a la medicin efectuada con 4 gL-1, viceversa a lo que ocurre en la DBO5 con semilla dulce-acucola en la que se observ una cada notoria en su capacidad de degradacin, debido a que las bacterias no estn adaptadas a una presin osmtica producida por la salinidad de 6 gL-1, ocurriendo entre ambas lecturas una diferencia estadsticamente significativa (P < 0.05), (Tabla 1). Tabla 1. Lecturas de DBO5 en muestras de agua salobre con ambos consorcios microbianos.
DBO5 (mg/L) Salinidades Promedio Semilla Halfila- Halotolerante. D.E. Promedio Semilla Dulce-acucola D.E. 1955.94 1727.48 954.16 1938.49 12438.46 2083.11 10930.60 1540.73 7582.38 2 g/L-1 14165.65 4 g/L-1 12343.29 6 g/L-1 11747.26

Al evaluar las tendencias de los resultados de medicin de la DBO 5 al realizarse con un lodo (H-H) contra los resultados obtenidos en las misma salinidad pero empleando un lodo dulce acucola convencional proveniente de la planta tratadora del Cid se observo que el lodo dulce-acucola convencional tiene deficiencia para degradar materia orgnica en condiciones de salinidad, ya que tiene un decremento en las lecturas de la DBO5., siendo de esta forma que en la salinidad de 6 gL-1 se encuentra una diferencia estadsticamente significativa (P<0,050), respecto a todas las dems lecturas de ambos consorcios. Cabe sealar que la descarga a tratar de una industria como lo es Maz-industrial, no se compara a una descarga domestica dulceacucola que recibe para un proceso de tratamiento la planta del Cid, para esto se igual la alimentacin y se dio el mismo tiempo de
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Captulo VIII Resultados y discusiones

retencin hidrulico de 48 hrs. Basndose en los resultados de la medicin de DBO5 en muestras de aguas salobres, se puede apreciar el grado de adaptacin de las bacterias en una semilla Halfilo-Halotolerante con respecto a un consorcio microbiano dulceacucola registrando una mayor cantidad de DBO5(Fairet al, 1971). En los resultados de la DBO5 con una semilla Halfilo- halotolerante, la pendiente negativa de la recta nos representa una inclinacin hacia la izquierda, con una interseccin en la ordenada al origen en 15,170. Si se desea saber el ngulo de la pendiente se obtiene con inv. Tan (-1209.2) = ngulo dando como resultado un ngulo 89.95 grados. Lo anterior indica que la DBO 5 ha ido a la baja conforme el aumento de la salinidad. Por otra parte, se observ en los resultados de la DBO 5 cuando se aplic una semilla dulce-acucola, que la pendiente de la recta fue negativa, observndose una inclinacin hacia la izquierda con una interseccin en la ordenada al origen de 15, 173. Para saber el ngulo de la pendiente, esta se obtiene con la frmula inv. Tan (-2428) = ngulo dando como resultado un ngulo 89.98 grados. Lo anterior indica que la DBO5 ha ido a la baja conforme el aumento de la salinidad. (Figura 4).

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Salinidad g/L-1

Figura 4. Lecturas de DBO5 con diferentes consorcios microbianos a salinidades de 2, 4, 6 gL-1.

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Se ha reportado en la literatura que la tasa de descomposicin de contaminantes orgnicos, que son medidos como DBO en aguas salobres, son registrados en menor cantidad que la real debido al efecto de la salinidad sobre las bacterias que hacen la biodegradacin. Esto se puede remediar mediante el desarrollo de lodos activados especficos adaptados a las condiciones salinas que presente el influente, ya que est demostrado que los iones de Na + y Cl-, son los principales inhibidores del desarrollo microbiano presentes en los lodos activados (Hamoda y Al-Attar, 1995; Kargi,2002). En la presente investigacin se encontraron resultados similares a los registrados por Dufour, (1982),Zakiet al, (2010) y Dhageet al, (2011) que identificaron un decremento en la DBO al incrementar la salinidad. Un lodo dulce-acucola no presenta una buena eficiencia en la degradacin de la materia orgnica en una salinidad de 6 g/L-1. Lo que se demuestra en esta investigacin es que al utilizar bacterias halfilas-halotolerantes tienen mayor aceptacin a los niveles de salinidad y por lo tanto son capaces de degradar la materia orgnica. Confrontado los trabajos precedentes con los resultados descritos en la presente investigacin, se puede confirmar que el cloruro de sodio fue el factor que inhibi el crecimiento bacteriano y con ello la deficiente lectura de la DBO. As mismo se pudieron establecer limitantes de salinidad para aplicar la medicin de este parmetro en muestras de agua salobre, los cuales se ensayaron en la presente investigacin, en la que se encontraron como lmites de eficiencia el rango mximo de lectura con 2 gL-1 para la aplicacin de semilla dulceacucola convencional y como mximo de 4 gL-1para ser confiable la medicin al emplear la semilla Halfila-Halotolerante. Con los resultados obtenidos se comprueba la hiptesis de que es posible desarrollar un consorcio microbiano a partir de una seleccin y adaptacin de microorganismos extrados de sedimentos contaminados con carga orgnica, que contengan bacterias halfilas y halotolerantes, capaces de lograr la degradacin de la materia orgnica presente en aguas residuales salobres en eficiencias de hasta del 95% al emplear como mximo salinidad 4 gL-1.
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Captulo VIII Resultados y discusiones

8.3 Anlisis estadstico.

Se aplic un anlisis estadstico a los resultados obtenidos, evaluando la normalidad y aplicando una prueba de igualdad de varianzas a los datos de las lecturas de la DBO5 en las tres diluciones correspondientes a cada salinidad, as como la comparacin de los resultados obtenidos con un lodo H-H respecto a los obtenidos con un lodo activado dulce-acucola en las salinidades ensayadas de 2, 4, 6 gL-1, los resultados de las lecturas de las tres diluciones efectuadas con un lodo H-H a una salinidad de 2gL-1 pasaron la prueba de normalidad e igualdad de varianza y no presentaron diferencia significativa (P = 0,401) entre los resultados, la prueba se efectu empleando un = 0.05. Las lecturas en las tres diluciones efectuadas con un lodo H-H a una salinidad de 4gL-1 mostraron que las diferencias en los valores medios entre los grupos de tratamiento, no son suficientes para excluir la posibilidad de que la diferencia se deba a la variabilidad del muestreo aleatorio ya que no hay una diferencia estadstica significativa (P = 0,272) con un = 0.05. Las mediciones en las tres diluciones efectuadas con el lodo H-H a una salinidad de 6gL-1, se encontr una diferencia significativa de (P <0,001), optndose por descartar los valores de la dilucin tres, ya que fueron los que ocasionaban esta alteracin, esto se corrobor con la Prueba de Comparacin Mltiple para parejas de datos, Prueba de Tukey, (Tukey, 1953). Los resultados de DBO5, obtenidos con las salinidades de 2, 4 y 6 g/L-1 empleando semilla Halfilo-Halotolerante, se sometieron al anlisis estadstico paramtrico y de Varianza, observndose una diferencia estadsticamente significativa (P = <0,001), con un = 0.05. Al pasar la prueba de normalidad (P > 0,200)y de equivalencia de varianza (P = 0,343), se le practic la prueba de Tukey para conocer cul es el dato que causa la diferencia estadstica, los resultados sealaron que la medicin a 6 g/L-1 con el empleo de la semilla H-H, fue estadsticamente diferente a los resultados obtenidos en las salinidades de 2 y 4 g/L-1.
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Captulo VIII Resultados y discusiones

El anlisis estadstico de los datos obtenidos en las tres diluciones de siembra para la lectura de la DBO5 empleando lodo dulce-acucola convencional en una salinidad de 2 g/L-1aprobaron el anlisis de normalidad (P = 0,149) e igualdad de varianzas homocedasticidad(P = 0,296), adems se observ que no hubo una diferencia estadsticamente significativa (P = 0,332), con = 0.05, entre los tres resultados. El anlisis de los datos obtenidos de las tres diluciones de la DBO5 al emplear un lodo dulce-acucola aplicando salinidad de 4 g/L-1, no sealan una diferencia estadsticamente significativa (P = 0,806), con un = 0.05. El anlisis de los datos obtenidos del ensayo con las tres diluciones de la DBO5 empleando un lodo dulce-acucola con una salinidad de 6 g/L -1, se observa que si existi una diferencia estadsticamente significativa (P = 0,003), con un = 0.05. Al aplicar el anlisis de normalidad (P > 0,200) e igualdad de varianza (P = 1,000) mediante el mtodo paramtrico Tukey, para resalta cual fue el factor que provoc esta diferencia estadstica se encontr que correspondi al dato de la dilucin 3. Al comparar los resultados de las mediciones de la DBO5obtenidas entre el lodo H-H y el dulce-acucola en la salinidad de 2 g/L-1; no se observ una diferencia significativa (P< 0.05), tampoco con la salinidad de 4 g/L-1(P = 0,150). En cambio la DBO5 del lodo dulce-acucola fue significativamente menor que la obtenida con el halfilo- halotolerante en la salinidad de 6 g/L-1 (P<0,050) Los datos generados por las mediciones de ambos consorcios microbianos en las tres diluciones diferentes con salinidad de 2,4 y 6 g/L -1, se les practic el anlisis de normalidad (P > 0,200) e igualdad de varianza (P = 0,751), sealando que se presentaron diferencias estadsticas (P = <0,001). Sabiendo que los datos son normales y homocedsticos; se realizo la prueba paramtrica de Tukey para detallar que datos son diferentes y cuales presentan semejanza estadstica. (Tabla 2).

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Captulo VIII Resultados y discusiones

Tabla 2. Comparacin de los tratamientos en la DBO5 por el mtodo estadstico Tukey. TRATAMIENTOS DBO5 (mg/L) H-H2 Promedio D.E. Mnimos Mximos H-H4 H-H6 D2 D4 D6

14165.65 12343.29b 11747.26b 12438.46b 10930.60 7582.38 c c c c b 1938.49 11844.53 17920.70 2083.11 8328.97 14907.58 1540.73 9884.39 13838.23 1955.94 10606.88 15929.30 1727.48 8934.79 954.16 6413.30

13427.74 8390.20

8.4 Reproducibilidad Para validar que los resultados en las lecturas de DBO5 en muestras de agua salobre, se llevo a cabo un estudio de reproducibilidad, en el cual participaron tres analistas del rea de fsico- qumico pertenecientes al laboratorio de LAQUIN MAZATLN. Sometiendo al anlisis de DBO5 la misma muestra de agua residual salobre proveniente de la industria procesadora de la harina de pescado MazIndustrial. Es necesario aadir que la presente corrida analtica se llevo a cabo bajo la similitud de los instrumentos de medicin e instalaciones. Por parte del analista Pedro Antonio lvarez arroja una DBO5 fue de 12666 mg/L, la analista Karla Guadalupe Aguilar tiene una lectura de 13435 mg/L y el analista Luis Felipe Tirado una DBO5 12179.49 mg/L. A lo que se obtiene una media aritmtica de 12760.16 mg/L, una desviacin estndar 633.03, un coeficiente de variacin 4.96% o dicho de otra forma tiene el 95.04% de posibilidad de que los estn correctos.

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Captulo IX Conclusiones y recomendaciones

IX. CONCLUSIONESY RECOMENDACIONES. Es posible medir DBO5 en muestras de agua salobre en un rango de 2, 4,6 gL-1, si se emplean lodos activados desarrollados previamente para trabajar en estos rangos de salinidad. Las salinidades empleadas en este trabajo se establecieron en base a los trabajos precedentes a esta investigacin, rangos que fueron verificados dos veces y que confirman lo establecido por otros autores en el sentido de que el rango mximo de medicin para semilla dulce acucola se encuentra en 2gL -1 y el mximo para la semilla Halfila-Halotolerante, se encuentra en el rango de los 8 gL -1, pero en este ltimo rango de salinidad, la eficiencia de la medicin de la DBO, se redujo hasta 82%. Para evitar lecturas errneas de la DBO5en las muestras de agua salobre, es necesario seleccionar y adaptar previamente un consorcio microbiano que se emplee para la lectura de la muestra a evaluar, en el rango de salinidad, y concentracin de materia orgnica que se estima, as como emplear agua de dilucin con la salinidad correspondiente al inoculo (consorcio) desarrollado para evitar al mximo el efecto de estrs fisiolgico por cambios en la salinidad. El lodo activado Halfilo-Halotolerante con la que se desarroll en esta investigacin para lograr leer DBO5, en muestras de agua salobre, as como en muestras de agua residual cruda proveniente de la industria procesadora de la harina del pescado Maz-Industrial, tuvieron un mejor desempeo en la capacidad de lectura, debido a que trabajaron en la degradacin de la materia orgnica los dos grupos de bacterias inoculadas y adaptadas; 1) Dulce acucolas halotolerantes y Halfilas, vindose reflejado en las eficiencias de lectura obtenidas. El lodo dulce acucola convencional, al contener bacterias; Hipsmticas y Halotolerantes, en las salinidades de 2 y 4 gL -1, registraron valores similares en degradacin comparadas con las logradas por los lodos H-H, igualando las capacidades de biodegradacin.

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Captulo IX Conclusiones y recomendaciones

En la salinidad a 6 g/L-1, el lodo dulce-acucola registr deficiencia para degradar la materia orgnica contenida en la muestra analizada, contrastando con las eficiencias logradas por el lodo H-H. Existiendo en el caso de la medicin de la DBO5con una salinidad de 6 g/L-1 una diferencia significativa (P<0.05) con respecto a todas las otras mediciones, ya que con un lodo activado convencional se pudo degradar la materia orgnica hasta un mximo de 76.5% en la salinidad de 2 gL-1, y en esa misma salinidad se logr la reduccin de la materia orgnica en un 93% empleando el lodo activado Halfilo- Halotolerante, segn RamrezAlvarado. En la presente investigacin se compar la capacidad de degradacin de la materia orgnica biodegradable de dos consorcios microbianos con caractersticas osmticas diferentes; Lodo Activado Dulce Acucola Vs Lodo Activado HalfiloHalotolerante. Los resultados tabulados y graficados sealan una tendencia a la baja en la lectura de la DBO5, conforme aumenta la salinidad, sin embargo el lmite aceptable para el LAC se encuentra en los 2 g/L-1 y para el LHH el lmite de eficiencia se encuentra alrededor de 6 g/L-1. Con la informacin obtenida, se calculo la constante k para ambos consorcios o semillas por el mtodo de Thomas, resultando una ecuacin de la recta: y = -1209.2x + 15170 para el lodo activado H-H, indicndonos una pendiente negativa, es decir que la lectura de la DBO5 va en decremento y tiene un punto de interseccin en el eje Y en 15170 cuando la salinidad es cero, la constante k fue de -13.96 dias-1. Para el lodo activado dulce-acucola la ecuacin de la recta fuey = -2428x + 15173, indicndonos una pendiente negativa, es decir la DBO5 va en decremento y tiene un punto de interseccin en el eje de las y en 15173 cuando la salinidad es cero, que grficamente nos muestra un decremento comparativamente mayor en la capacidad que la obtenida con la semilla H-H. Al aumentar la salinidad, la contante k para este lodo dulceacucola, fue de -11.07 dias-1.

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Captulo IX Conclusiones y recomendaciones

Comparando los resultados de esta investigacin, con trabajos similares realizados por otros autores se ratifica que la disminucin significativa ente la capacidad de lectura del mtodo para la DBO, est relacionada con el aumento de la salinidad en las muestras de agua de los ros analizados, atribuyndolo al cloro y su efecto de desnaturalizacin de la fisiologa celular microbiana. Tambin reportaron que los valores k disminuan conforme la salinidad aumentaba. El valor de k con un nivel de salinidad de 0 gL-1 fue de 0.754/da y para la salinidad de 25 gL-1el valor de k fue de 0.513/da. Con estos resultados se concluyeque es posible realizar aplicar semilla halfilaHalotolerante en la medicin de la Demanda Bioqumica de oxgeno (DBO5, 20C) para el anlisis especfico de muestras de aguas salobres con alto contenido orgnico, siempre y cuando, se seleccione y adapte previamente al consorcio microbiano que actuar como semilla, siempre y cuando la salinidad no sea mayor a de 6 gL-1.

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Captulo X Bibliografa

X. BIBLIOGRAFA American Public Health Association (APHA), American Water Works Association (AWWA) and Water Environment Federation (WEF).(1975). Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater.19th edition.APHA, AWWA & WPCF. Seccin. 4-0, 5-2.

CALDERON, Felipe, PAVLOVA, Margarita, (2001). Determinacin de la demanda bioqumica DBO5. Mtodo Respirometro. Bogot, Enero 2001; 1 Rev. Chica, O., Galvis, N., Madrid, J. (2007). Validacin de mtodos analticos (DQO, hierro, H2O2, COT) en aguas. Programa de Ingeniera Ambiental. Medellin, Espaa. p. 54

Contreras-Bustos R, Mndez-Gmez, E., Ramrez-Alvarado, Jos A., RivasMontao, A.M. 2009. Aplicacin de un sistema de tratamiento de aguas negras salobres para comunidades costeras con disponibilidad limitada de agua dulce. Informe final de Investigacin, Fondo Mixto Conacyt-Gobierno del Estado de Sinaloa, Clave Sin-C2006-C01-42089. 1-61 pp.

Bartram, J. & Balance, R. (1996). Water quality monitoring: A practical guide to the design and implementation of freshwater quality studies and monitoring programmes. United Nations Environment Programme and the World Health Organization.

CONAGUA.2001. Manual de operacin de plantas de tratamiento de lodos activados. Secretaria del Medio Ambiente y Recursos Naturales, Mxico, D.F., 200 pp.

DasSarma S., Aurora P. 2002. Halophiles. Encyclopedia of Life Sciences 8:458466. London: Nature Publishing Group.

37

Captulo X Bibliografa

Dhage, S., Dalvi, A. A., Prabhu, D. 2011. Reaction kinetics and validity of BOD test for domestic wastewater released in marine ecosystems. Environ Monit Assess. Springer Science.

Dufour P. 1982. Influence des conditions de milieu sur la biodgradation des matires organiques dans une lagune tropicale. Ocanologique Acta, 5 (3), p. 355-363.

Fair, G., Geyer, J., Okun D. (1971). Ingeniera sanitaria de aguas residuales: purificacin de aguas, tratamiento y remocin de aguas residuales.Volumen 2. Mxico: Limusa. p. 495

Gharsallah, N., Khannous, L., Souissi, N. y Nasri, M., 2002. Biological treatment of saline wastewater from marine-products processing factories by a fixed-bed reactor. Chem.Tech.andBiotechnol. 77, 865-870.

Hamoda, M. F: y Al-Attarr, I. M. S., 1995. Effects of high sodium chloride concentrations on activated slugde treatment, Wat.Sci.Tech., 31, 61-72.

Kargi, F., 2002.Enhanced biological treatment of saline wastewater by using halophilic bacteria, Biotech, L., 24, 1569- 1572.

Instrumentation Testing Association (ITA). (2003). Online Dissolved Oxygen Analyzers for Wastewater Treatment Applications Performance Evaluation Report. USA: ITA. p. 1-1

Mndez, I. 2009. Diseo e implementacin de mejoras al proceso de tratamiento aplicado a las aguas residuales provenientes de la produccin de harina de pescado. Tesis de maestra, Instituto Tecnolgico de Mazatln, Mxico. 77 pp.

38

Captulo X Bibliografa

Metcalf& Eddy, Inc. (2003). Wastewater Engineering (Treatment Disposal Reuse).4ta Edicin, McGraw-Hill Book Company. NMX-AA-028-SCFI-2001. Determinacin de la demanda bioqumica de oxgeno en aguas naturales, residuales (DBO5) y residuales tratadas-mtodo de prueba, D.O.F, Mxico.

Oren A. 2002. Halophilic microorganisms and their environments. Kluwer Academic Publishers. Dordrecht/Boston/London.

Ozalp, G., Gomec, C.Y., Ozturk, I., Gonuldinc, S. y Altinbas M., 2003. Effect of high salinity on anaerobic treatment of low streghteffluents.Wat.Sci. Tech. 48, 2007-2012.

Ramalho, R. S. (1977). Introduction to wastewater treatment processes. Quebec, Canada: AcademicPress. p. 37

Ramrez-Alvarado, J. A. (2009). Degradacin de la materia orgnica contenida en aguas residuales domesticas salobres, utilizando lodo activado adaptado a salinidades de 8, 6, 4 y 2 gL-1 medida en trminos de DBO profesional. Instituto tecnolgico de Mazatln, Sinaloa. 60 pp.
24h-20C.

Tesis

Romero, J. A. (1999). Calidad del agua. ALFAOMEGA GRUPO EDITOR, S.A. de C.V., segunda edicin, p.123

Sawyer, C. &McCarty, P. (1978). Chemistry for enviromental engineering.3ra edicin. New York: McGraw-Hill. p. 405, 420

SIERP F. V. (1928)A new method for determining BOD.Ind. Eng. Chem. 20, 247.

39

Captulo X Bibliografa

Strickland,

J.

&Parsons,

T.

(1972).A

Practical

Handbook

of

Seawater

Analysis.Fisheries Research Board of Canada. Ottawa, Canada. 310 p

Tukey, J. W. (1953). The problem of multiple comparasions.Unpublished manuscript, Princeton University.

Wang,J.L.han, X.M., Feng, Y.C. y Qian, Y., 2005. Effect of salinity variations on the performance of activated sludge system. Biomedical and Environmental Sciences. 18, 5-8

Zaki, Z., Maketab, M., Mohd, R. (2010). Effects of induced salinity on BOD5 reaction kinetics of River water samples. TheMalasyanJournal of AnalyticalSciences. Vol. (14). 24-31

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Capitulo XI Anexos

XI. ANEXOS Anexo 1. Valoracin de Tiosulfato de sodio de acuerdo con la NMX-AA-028SCFI-2001. Resultado de la valoracin del Tiosulfato de sodio 0.025 M. Se pesa aproximadamente 1 gr de yoduro de potasio en la balanza analtica, se disuelve en 70 mL de Agua reactivo y se le aaden 20 ml de la dilucin de dicromato de potasio (0,01 N) y 10 mL de la dilucin de acido Sulfrico (1+9). Se titula con la disolucin de Tiosulfato de sodio 0.025 M. Hasta obtener un color amarillo plido. Posteriormente se le aaden unas gotas de almidn, se contina con la titulacin hasta obtener la primera desaparicin del color azul fuerte. Matraz 1 2 3 Clculos: Molaridad del Na2SO4: [(mL K2Cr2O7) N (K2CR2O7) / mL de Tiosulfato de sodio. Molaridad del Na2SO4: [(20) (0.01) / 8.25) = 0.02424 . Gasto (mL) 8.25 8.20 8.15 Molaridad 0.02424 0.02439 0.02454 Promedio 0.02439

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Capitulo XI Anexos

Anexo 2. Frmula utilizada para el clculo de la DBO5 cuando presenta inoculoNMX-AA-028-SCFI-2001. DBO5 (mg/L) = [(ODi mg/L - OD5 mg/ L) - C1 (B1 - B2 ) (Vt )] C2 (Vm) Donde: B1 es el OD del inculo antes de la incubacin, en mg/L; B2 es el OD del inculo despus de la incubacin, en mg/L; C1 es el volumen de inculo en la muestra; C2 es el volumen de inculo en el inculo control; Vt es el volumen total del frasco Winkler, y Vm es el volumen de muestra sembrada

El clculo anterior se puede realizar y visualizar mas sencillamente as (formula de los mtodos estndar): DBO5 (mg/L) = (D1 D2) (B1-B2) f P Donde: D1= OD inicial de la muestra diluida, mg/L D2= OD final de la muestra diluida, mg/L B1= OD inicial del control de siembra, mg/L B2= OD inicial de control de siembra mg/L f= relacin de siembra en la muestra a siembra en el control de siembra. P= fraccin volumtrica decimal usada.

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Capitulo XI Anexos

Anexo 3. Alimentacin del reactor Halfilo Halotolerante. Fecha Cantidad de alimento mL 20/03/2012 23/03/2012 26/03/2012 30/03/2012 09/04/2012 11/04/2012 13/04/2012 16/04/2012 18/04/2012 20/04/2012 23/04/2012 25/04/2012 1000 2000 3000 2000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 27/04/2012 30/04/2012 02/05/2012 04/05/2012 07/05/2012 09/05/2012 11/05/2012 14/05/2012 16/05/2012 18/05/2012 21/05/2012 23/05/2012 Fecha Cantidad de alimento mL 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 25/05/2012 27/05/2012 29/05/2012 02/06/2012 04/06/2012 06/06/2012 09/06/2012 11//06/2012 13/06/2012 16/06/2012 18/06/2012 20/06/2012 Fecha Cantidad de alimento mL 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 1000 500 500 500 23/06/2012 25/06/2012 27/06/2012 30/06/2012 02/07/2012 04/07/2012 06/07/2012 09/07/2012 11/07/2012 13/07/2012 16/07/2012 18/07/2012 Fecha Cantidad de alimento mL 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500

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Capitulo XI Anexos

Anexo 4. Lectura de la DBO5 en muestra de agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 2 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H semilla H-H semilla H-H semilla H-H ODI (mg/L) 8.11 8.30 8.20 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 ODF (mg/L) 7.41 8.01 8.11 5.04 4.35 4.94 5.63 5.73 5.54 6.52 5.04 6.23 7.51 7.41 7.41 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 B2 0 0 0 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.51 7.41 7.41 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.69 0.03 0.10 11844.53 15304.10 12338.75 13660.28 12899.93 14420.62 13427.74 35892.51 17920.70 180.39 210.69 210.69

Nota: el valor de DBO5 de 35892.51 se descarto ya que es diferente al resto de las lecturas.

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Capitulo XI Anexos

Anexo 5. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulce-acucola a una salinidad de 2 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce semilla dulce semilla dulce semilla dulce ODI (mg/L) 8.11 8.30 7.91 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 ODF (mg/L) 7.91 8.11 6.92 4.05 4.25 4.05 4.35 5.04 4.45 6.23 5.63 5.63 7.02 6.42 6.42 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 8.11 B2 0 0 0 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 7.02 6.42 6.42 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.198 0.198 0.99 11837.00 10848.27 11837.00 15929.23 10606.92 15169.23 2921.21 11906.06 11906.06 328.88 510.70 510.70

Nota: el valor de DBO5 de 2921.21 se descarto ya que es diferente al resto de las lecturas.

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Capitulo XI Anexos

Anexo 6. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 4 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H semilla H-H semilla H-H semilla H-H ODI (mg/L) 8.30 8.40 8.40 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 ODF (mg/L) 8.11 8.20 7.41 5.14 4.74 4.84 5.44 5.93 6.23 6.33 6.42 6.42 7.41 7.31 7.02 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 B2 0 0 0 7.31 7.31 7.31 7.31 7.31 7.31 7.31 7.31 7.31 7.41 7.31 7.02 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.1977 0.1977 0.9884 10850.5 12827 12333 14411.54 10610 8329.23 14907.58 13410.61 13410.61 240.64 270.94 358.82

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Capitulo XI Anexos

Anexo 7. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulce-acucola a una salinidad de 4 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce semilla dulce semilla dulce semilla dulce ODI (mg/L) 8.20 8.30 8.20 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 ODF (mg/L) 8.01 8.30 7.51 5.14 5.44 5.44 5.73 5.24 6.23 6.62 6.52 6.82 7.12 7.71 7.41 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 8.30 B2 0 0 0 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.41 7.12 7.71 7.41 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.1977 0 0.6919 11350.5 9867.5 9867.5 12900 16701.54 9098.46 11930.30 13427.27 8934.85 358.48 179.70 270.61

Nota: el valor de DBO5 de 16701.54 se descarto ya que es diferente al resto de las lecturas.

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Capitulo XI Anexos

Anexo 8. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla H-H a una salinidad de 6 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H AR. con semilla H-H semilla H-H semilla H-H semilla H-H ODI (mg/L) 7.81 7.71 7.71 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 ODF (mg/L) 7.31 7.61 7.51 3.95 3.85 4.35 5.24 5.14 5.34 5.44 5.44 5.54 6.62 6.62 6.72 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 7.61 B2 0 0 0 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.62 6.72 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.4943 0.0988 0.1977 13344 13838 11367 10644.62 11405.38 9943.08 18069.70 18069.70 16554.55 299.55 299.55 270.03

Nota: Se descartaron los valores de la dilucin 3 ya que es diferente estadsticamente (P<0.05) al resto de las lecturas.

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Capitulo XI Anexos

Anexo 9. Lectura de la DBO5 en muestra de Agua salobre, con semilla dulce-acucola a una salinidad de 6 gL-1. Muestra Blanco Blanco Blanco AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce AR. c/semilla dulce semilla dulce semilla dulce semilla dulce ODI (mg/L) 7.91 7.61 8.01 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 ODF (mg/L) 7.71 7.51 7.81 5.14 5.14 4.74 5.44 5.34 5.34 6.62 6.52 6.42 6.42 6.42 6.72 C1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 C2 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0 0 0 B1 0 0 0 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 7.81 B2 0 0 0 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.42 6.72 6.72 6.72 6.42 6.42 6.72 Fraccin volumtrica 1 1 1 0.0002 0.0002 0.0002 0.00013 0.00013 0.00013 0.000066 0.000066 0.000066 0.0033 0.0033 0.0033 DBO5 (mg/L) 0.1977 0.0989 0.1976 6413.5 6413.5 8390 7585.38 8346.15 8346.15 1475.55 2973.20 4470.85 420.06 420.06 478.42

Nota: Se descartaron los valores de la dilucin 3 ya que es diferente estadsticamente (P<0.05) al resto de las lecturas.

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