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Bioquímica (Grado de Biología). Facultad de Ciencias, UCO.

PROBLEMAS DE PROPIEDADES ÁCIDO-BASE


DE AMINOÁCIDOS Y POLIPÉPTIDOS

1.- Calcúlese el pH de una disolución 0,05M de: a) clorhidrato de glicina; b)


glicina en forma isoeléctrica, y c) glicinato sódico. Solución: a) pH=1,89; b)
pH=5,97; c) pH 11,15. Ka 1157 10-3
= .

Kac= 2 5 10- .

, ,

2.- Calcúlese el pH de una disolución de aspartato monosódico 0,2 M. Datos:


pKas: 2,09; 3,86; 9,82. Solución: pH=6,84.

3.- Calcúlese el porcentaje de las distintas formas moleculares de la glicina


(catiónica, zwitteriónica y aniónica) al pH fisiológico del plasma sanguíneo (7,4);
pK1 = 2,34 y pK2 = 9,6. Solución: [Gly0] = 99,4%; [Gly+] = 0,00086%; [Gly-] =
0,629%.

4.- Descríbase la preparación de 1 litro de tampón histidina 0,2 M pH 6,5, a


partir de diclorhidrato de histidina (PM=228) y una solución de KOH 1 M. Datos:
pKas: 1,82; 6,0; 9,17. Solución: Disolver en 352 ml de KOH 1M 45,6 g de
diclorhidrato de histidina y añadir agua destilada hasta 1 litro.

5.- Calcúlese el volumen de disolución de KOH 0,4M necesario para llevar 0,5 l de
una disolución de clorhidrato de histidina 0,1 M, pH 2,2 a pH 9,3. Datos: pKas:
1,82; 6,0; 9,17. Solución: 235 ml de KOH 0,4M.

6.- Calcúlese el punto isoeléctrico de los siguientes aminoácidos. a) serina (pKas:


2,21; 9,15), b) glutámico (pKas: 2,19; 4,25; 9,67), c) lisina (pKas: 2,18; 8,95;
10,53). d) Indicar el pH más conveniente para separarlos por electroforesis.
Solución: a) pI=5,68. b) pI=3,22. c) pI=9,74. d) a pH= 5,7.

7.- A partir de una mezcla de Asp, Arg y Leu, indíquese: a) el pH más conveniente
para separarlos por electroforesis; b) hacia qué polo emigrarían estos
aminoácidos a dicho pH. pKas: Asp, 2,09; 3,86; 9,82, Arg, 2,17; 9,04; 12,42, Leu,
2,36; 9,60. Solución: a) pH 6, b) Asp: ánodo, Arg: cátodo, Leu: no se movería.

8.- ¿A qué pH se separarán más eficazmente por electroforesis una mezcla de γ-


globulina pI 6,6, mioglobina pI 7,0 y hemoglobina pI 6,8? Solución: pH 6,8.

9.- ¿Cuál es la carga neta a pH 7,0 del péptido Phe-Lys-His-Leu-Lys-Thr-Glu-


Ala-Glu-Met-Lys-Ala-Ser-Glu-Asp? ¿Cómo se desplazará este péptido en una
electroforesis? (pK-COOH = 3,1; pKGlu = 3,9; pKAsp = 3,9; pKHis = 6,3; pK-NH3+ = 8,0;
pKLys = 10,5). Solución: carga neta = - 1; migrará hacia el polo positivo (ánodo).
Bioquímica (Grado de Biología). Facultad de Ciencias, UCO.

10.- Se tiene el siguiente polipéptido: Gly-Arg-Gly-His-Asp-Asp-Arg-Leu-Asp-


Arg-Asp-Asp-Ala. a) Calcular el pI; b) ¿hacia qué polo se movería el polipétido en
una electroforesis a pH 8,0?; pKas: α-COOH, 3,1; R-COOH, 3,9; R-HisH+, 6,3; α-
NH3 +, 8,0; R-ArgH+, 12,1. Solución: a) pI=4,5 b) ánodo.

11.- Se tiene una mezcla de los siguientes péptidos:


a) His-Gly-Ala-Glu
b) Ser-Gly-Leu-Trp
c) Val-Glu-Asp-Ala
d) Gly-Lys-Val-Ser
Si se hace pasar dicha mezcla por una columna rellena con una resina de cambio
aniónico, indíquese en qué orden saldrían los péptidos de la columna al lavarla con
un tampón cuyo pH cambia continuamente desde 10 hasta 2. pKas: α-COOH, 3,1;
R-COOH, 3,9; R-HisH+, 6,3; α-NH3 +, 8,0; R-LysH+, 10,0. Solución: d,b,a,c.

12.- Determinar el pI del péptido Asp-Arg-Arg-Gly-Asp-Arg-Val-Arg-Leu, y su


carga y movilidad electroforética a pH 7. Solución: pI= 10,7. A pH 7 el péptido
tiene carga +2 y migra hacia el cátodo (polo -).

13.- Una proteína de 130 residuos de aa y 14,5 KDa de masa molecular contiene
19 Glu, 9 Asp, 10 His, 14 Arg y 6 Lys. Calcular: a) el punto isoeléctrico de la
proteína; b) la carga total a pH 6,5 y a pH 8; c) ¿hacia que polo se desplazaría en
una electroforesis a pH 7,2?; d) si por degradación proteolítica de dicha proteína
se obtiene un péptido de 88 residuos de aa y 9,4 KDa, con la misma composición
de aa Glu, Asp, His, Lys y Arga, ¿Cuál es el pI de dicho péptido?; e) ¿Se
desplazaría el péptido de 9,4 KDa hacia el mismo polo que la proteína de 14,5 KDa
en una electroforesis a pH 7,2? ¿Se podrían separar ambos polipéptidos en dicha
electroforesis?
pKas: α-COOH = 3,1; R-Asp = 4,4; R-Glu = 4,4; R-His = 6,5; α-NH3+ = 8,0; R-Lys =
10,5 y R-Arg = 11,5. Solución: a) pI= 5,9; b) carga a pH 6,5 = -3, a pH 8 = -8,5; c)
se desplaza hacia el ánodo (polo +); d) pI= 5,9 (el mismo); e) la carga es la misma
y migra hacia el ánodo; f) No en una electroforesis que separe por carga, pero Sí
en una por tamaños.

14.- Una proteína de 104 residuos de aminoácidos contiene 2 Asp, 6 Glu, 1 His,
5 Lys y 6 Arg. Calcular: a) pI, b) La carga total exacta de la proteína a pH 7 y su
movilidad electroforética a dicho pH. (pK-COOH = 3,1; pKR-Asp = 3,9; pKR-Glu = 3,9;
pKR-His = 6,5; pK-NH3+ = 8,0; pKR-Lys = 10,5; pKR-Arg = 11,5). Solución: a) pI= 10,32;
b) carga neta + 3,24 y migra hacia el polo – (cátodo).

suy bly" Gly Na+
de
acido
debil

pH=
un

a) Disolución 0 05 M
:

NHy"-C-lOOH I E
H

C
by -Kn :

(ACH .

C -

[++]

& by-coon Gly -100 + H -


ka =
16 1001 -
.

/HIH =p
Itly -
COOH

3
10" pH -logH
:

=4157 .
10 ;
11 + = 13 , 02 . -> = =

(pH acido)

6) Glicina en
forma isoelectrica

I
Calculamos el
PF- pkn ,
= -

lo kn , = pEpH pkn pknn =


,
+

= 5197

1pkan=- by Ka, Al

a Glicivato Tódico
:
He Cly-NH
Ki
Cly -NHa OH -in

d
+ +

1 I
k =

IGU .

0185 10H
=Y
no
-

=3198 . 15" :
10HR
085-18hti -
I
1H 1 10Hy 15."
- kn #11115
+ =
-
10H1
=
.

= +141 1 .

& + 1-pon =
pH

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