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RESUMEN

El presente informe presenta como principal objetivo la inmovilización de


células de Saccharomyces sp. en soporte de gel de agarosa mediante la
técnica de atrapamiento.
La inmovilización mediante atrapamiento es el resultado de la retención de las
enzimas dentro de la matriz sólida porosa del sustrato en sus cavidades
interiores, utilizando gel de agarosa.
Para el procedimiento se reactivó la cepa de Saccharomyces sp. Sembrándola
en una placa de agar PDA + cloranfenicol. Seguida de una suspensión celular
con solución salina fisiológica estéril para ser sembrada en este medio de
cultivo.
Posteriormente se realizó la cosecha de células y obtención del inoculo,
utilizando la cámara de Neubauer para el recuento celular, resultando 2x10 8
cel/ml.
Para la inmovilización se toma aproximadamente 5 ml de agar agar que
contienen las células y se deja caer gota a gota en aceite vegetal frio, dando
paso a la formación de perlas.
Finalmente para evaluar la producción de alcohol se utilizaron células
inmovilizadas y células libres dentro de frascos contenidos con mosto de uva.
Se midieron los grados Brix, siendo inicialmente 28.8°. Después de un lapso de
7 dias se evaluaron nuevamente, resultando en un consumo de azúcar de
12.8° y un nivel de alcohol de 7.5% en celulas libre, y un consumo de azúcar de
15.8° y un nivel de alcohol de 9.3% en celulas inmovilizadas.Obteniendo así
mayor producción de nivel alcohol por celulas inmovilizadas de Saccharomyces
sp. que en celulas libres.
Palabras clave: Saccharomyces sp., Inmovilización de celulas, Producción de
alcohol, grados brix.
ABSTRACT
The main objective of the present report is the immobilization of
Saccharomyces sp. cells on agarose gel support by means of the entrapment
technique.
Immobilization by entrapment is the result of the retention of the enzymes within
the porous solid matrix of the substrate in its interior cavities, using agarose gel.
For the procedure, the Saccharomyces sp. strain was reactivated by seeding it
on a PDA + chloramphenicol agar plate. This was followed by a cell suspension
with sterile physiological saline solution to be seeded in this culture medium.
Subsequently, the cells were harvested and the inoculum was obtained, using
the Neubauer chamber for cell counting, resulting in 2x10 8 cells/ml.
For immobilization, approximately 5 ml of agar agar containing the cells were
taken and dropped drop by drop in cold vegetable oil, giving way to the
formation of beads.
Finally, to evaluate alcohol production, immobilized cells and free cells were
used inside flasks contained with grape must. The Brix degrees were
measured, being initially 28.8°. After 7 days, they were evaluated again,
resulting in a sugar consumption of 12.8° and an alcohol level of 7.5% in free
cells, and a sugar consumption of 15.8° and an alcohol level of 9.3% in
immobilized cells, thus obtaining a higher alcohol production level by
immobilized Saccharomyces sp. cells than in free cells.
Key words: Saccharomyces sp., cell immobilization, alcohol production, brix.
RECOMENDACIONES

 Mantener constantemente en condiciones asépticas los


materiales de laboratorio para obtener una mayor precisión en
los resultados.

 Realizar los cálculos minuciosamente para evitar alguna


respuesta errónea que pueda interferir con los resultados
finales.

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