Tema:  

Práctica: determinación de vibrios en la hepatopáncreas del camarón.

Integrantes: Carla Armijos, Madelyn Esmeraldas, Josseline Pineda, Karla Salinas 
Fecha: 11/06/2023
Asignatura: Microbiología 
Docente: Ing. Jessenia Chacón 
Objetivos:
 Familiarizarse con las técnicas correctas de siembra para aislar las bacterias
presentes en la muestra biológica usando Agar selectivo (TCBS). 
 Extracción correcta de la hepatopáncreas del camarón de manera estéril.
 Identificación preliminar de las colonias que se formen en la caja Petri mediante
características morfológicas como: forma y color. 
Materiales:
 Agar TCBS
 Cajas Petri 
 Mechero
 Camarones vivos  
 Alcohol 
 Algodón 
 Gramera
 Tubo de ensayo 
 Gradilla 
 Guantes 
 Mascarilla 
 Pinzas 
 Tijeras de disección 
 Mortero 
 Asa de vidrio (Drigalski) 
 Papel aluminio
 NaCl

 
Procedimiento:
1. Primeramente, realizamos la limpieza del área que vamos a utilizar, esta área
donde vamos a trabajar se esteriliza con alcohol y agua destilada.
2. Luego de la limpieza procedemos a realizar el cálculo respectivo para proceder
utilizar el agar TCBS.
8 cajas Petri x 15= 120 ml                120 ml x 10 gr= 1200/1000= 1.2 NaCl
120 ml  x 88gr= 10560/ 1000= 10.56gr TCBS
3. Procedemos a pesar 1.2 gramos de NaCl y después pesamos 10.56 gr de TCBS 
4. Con los resultados obtenidos se prepara el Agar siempre con el mechero
encendido y se deja solidificar. 
5. Realizamos torundas para poder esterilizar al camarón antes del procedimiento
respectivo. 
6. Después seleccionamos el camarón al cual se le extraerá la hepatopáncreas,
mediante el cálculo respectivo se dice que se necesitará 1 g de hepatopáncreas.
Para esto se usaron 3 camarones 
7. A continuación, con la ayuda del mortero procedemos a moler la hepatopáncreas
del camarón hasta obtener una buena homogeneización.
8. Luego vertemos toda la mezcla a un tubo de ensayo para que esa sea nuestra
muestra, luego procedemos a sacar más diluciones de la muestra madre.
9. Después sacamos 1ml de la muestra para mezclar en el agar y homogeneizar con
la ayuda del asa de vidrio realizando los respectivos movimientos delicados.  
10. Rotulamos las 2 cajas Petri 
11. Procedemos a colocar las cajas Petri en la incubadora.
12. Como último paso procedemos a esperar los resultados de nuestra caja Petri.
13. Hacemos la respectiva limpieza del área que utilizamos dejando esterilizando los
materiales que utilizamos, ya sea con alcohol, agua destilada y vitamina c.
14. Mediante una explicación proporcionada por la docente conocimos como se
realiza el conteo de colonias, pero en nuestro caso no fue posible aplicarla ya
que, nuestras colonias estaban mal distribuidas en el Agar y por ende crecieron
muy juntas resulto una muestra incontable.
Conclusión
En conclusión, gracias a este trabajo práctico logramos visualizar y entender cómo se
forman las colonias de bacterias en un Agar TCBS, además de conocer la técnica que se
usa para la extracción completa del Hepatopáncreas de un camarón (Muestreo en
fresco).
Se lograron visualizar 2 colores de colonias dentro del Agar que se preparó. Colonias
amarillas: que pueden ser indicadoras de Vibrios Cholerae y Vibrios Parahaemolyticus
y colonias verdes: pueden ser asociadas con colonias de Vibrios Vulnificus.
Pero a pesar de ello para una identificación precisa de las especies de Vibrios es
necesario pruebas adicionales y técnicas de laboratorio, por qué la sola aparición de las
colonias en un medio de cultivo no es suficiente para una identificación definitiva de los
mismos. 
Recomendaciones
 Realizar una correcta siembra en el medio de cultivo es decir una buena
distribución de la solución para que las colonias crezcan adecuadamente y sean
contables.  
 Llevar una técnica aséptica muy rigurosa durante todo el proceso para que no
exista una contaminación de las muestras.  
 Asegurarse de que la incubación y las condiciones ambientales sean las
adecuadas para el crecimiento de los Vibrios. 
Anexos   
                      
                    
 
                                                    
       
                                                          
                                                                   

      
Firma