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PROYECTO DE TESIS
Para optar al título de Licenciatura en Ciencias Biológicas con mención en Microbiología y
Parasitología
AUTOR
Angel Saúl Serrano Angulo
ASESOR
Mario Alcarraz Curi
Lima, Perú
2023
I. Planteamiento del problema
El café (Coffea arabica), como grano es una semilla la cual viene del arbusto del cafeto,
perteneciente a la familia de las rubiáceas. Este crece en regiones cálidas y tropicales y su
cultivo se ha extendido en épocas relativamente recientes. Tiene como lugar de origen
Etiopía, en África Oriental, específicamente de la región llamada “Kaffa”, de donde deriva su
nombre. (Natividad, 2019)
A nivel de Perú hay un cultivo de 425 mil hectáreas. El sector cafetalero peruano es
caracterizado por pequeños productores que cultivan pequeñas áreas entre 1-5 hectáreas, y
producción promedio anual de 600-700 kilogramos por hectárea . Así, el café en el Perú
representa la primera economía en los productos de exportación tradicional, para el año
2020 fue de 648.5 millones de dólares americanos ; sin embargo, el Perú solo representa
entre el 2% y 3% del mercado mundial de exportaciones (Díaz, 2021)
Según el Plan Nacional de Acción del Café Peruano 2019-2030, aprobado en diciembre de
2019 por el MINAGRI, el principal problema es el bajo nivel de competitividad y
sostenibilidad social y ambiental de la cadena de valor del café. Y las causas directas se
relacionan con los bajos niveles de productividad y manejo técnico, el bajo nivel y la
inconsistencia en la calidad del café, el limitado acceso y uso de servicios financieros, el
también limitado posicionamiento del café peruano en el mercado nacional e internacional,
las inadecuadas condiciones logísticas y la débil gobernanza e institucionalidad de la
cadena. Es decir, ya se tiene un diagnóstico claro de los problemas y sus determinantes,
por lo que se esperaría que este año se brinde un mayor impulso al sector. (El Peruano,
2019)
El fruto del café por lo general consiste en una capa externa de la piel, llamado exocarpio en
la que hay una capa de pasta, seguido de mucílago (mesocarpio) firmemente adherida a la
capa rígida llamada pergamino (endocarpio). El pergamino protege dos semillas rodeadas
por una membrana fina conocida como piel de plata (Evangelista, Pedroso, Silva, Marques y
Freitas, 2015; Ramos, Sanz y Oliveros, 2010).
Si bien la calidad del café es un rasgo altamente complejo, su definición depende de varios
factores, incluyendo las condiciones edafoclimáticas, tratamientos post-cosecha (incluido el
proceso fermentativo) y genética. Por ello de esta industria cafetalera el puntaje que se le
da al café en general se denomina “puntuación de taza” o simplemente ”taza”, utilizado
como una forma de de calificar y clasificar la calidad del café, considerando cualidades
tales como el aroma, sabor, acidez, cuerpo y balance. Dentro de esta calificación (de 0 a
100), los que obtienen un puntaje mayor a 80 se consideran de mayor calidad y con sabores
más distintivos.(Leroy et al., 2006, citado en Duicela 2018).
La calidad en taza de café se mide a través de los atributos sensoriales que sobresalen en
la preparación de la infusión de la bebida, la cual está dada por factores de genotipo, tipo de
suelo, condiciones agroecológicas, variedad, prácticas agronómicas, de cosecha,
postcosecha y de torrefacción. La calidad de una bebida de café está ligada fuertemente a
las reacciones químicas que se presentan en el proceso de tostión y al tipo de beneficio
(conjunto de operaciones que se llevan a cabo y que dan como resultado el café pergamino
seco) realizado post-cosecha. El beneficio seco, semi-seco y húmedo son los métodos de
mayor aplicación para el procesamiento de café. (Ramos y Criollo, 2017)
El beneficio húmedo de café se realiza con el fin de retirar el mucílago que cubre los granos
del café y dicha labor influye en la calidad del café (evaluación sensorial). En este proceso
se da una fermentación natural, en estudios previos han encontrado enzimas como las
pectinasas, pectasas y bacterias pectinolíticas que se encuentran en los frutos de café, tales
como Erwinia herbicola y Klebsiella pneumoniae. Además, Enterobacter spp., E.
agglomerans, E. aerogenes, Erwinia sp., E. coli, Klebsiella ozaenae, Proteus sp., Serrata
fonticola, Citrobacter freundii anaerobias facultativas productoras de fermentaciones mixtas
(Puerta, 2012).
II. Justificación
Haile (2019) señala que las cantidades de azúcares disponibles (como glucosa y fructosa) y
aminoácidos libres presentes en el grano, junto con el nivel de actividad microbiana y grado
de fermentación, son determinantes en la formación de concentraciones. Estas
concentraciones a su vez desempeñan un papel crucial en la generación de compuestos de
Maillard y sustancias volátiles durante la etapa de tostado. Además, el autor destaca la
importancia de elegir microorganismos adecuados que impacten positivamente en el perfil
de sabor y aroma del café durante la fermentación. Por lo tanto, es esencial ejercer un
control preciso sobre el proceso de fermentación para garantizar este efecto positivo en las
características sensoriales del café final.
IV. Hipótesis
En las fermentaciones espontáneas del café es posible aislar y seleccionar
microorganismos que mejoran la taza/calidad del café
V. Objetivos
5.1 Objetivo General
- Aislar y caracterizar microorganismos de interés organoléptico, fermentadores del
mucílago del café, provenientes de la empresa cafetalera Monreal SAC, ubicada en
la localidad de Villa Rica.
5.2 Objetivos específicos
- Aislar bacterias y caracterizar morfológica, fisiológica y microscópicamente
bacterias ácido lácticas (Lactobacillus plantarum) y bacterias (Leuconostoc
mesenteroides) encargados de la fermentación del mucílago del café
- Aislar bacterias y caracterizar morfológica, fisiológica y microscópicamente
levaduras (Saccharomyces cerevisiae, Pichia fermentas y Pichia guilliermondii)
encargados de la fermentación del mucílago del café
- Obtener un cepario de los microorganismos aislados para investigaciones futuras.
VI. Materiales y métodos
6.1 Material biológico
Se utilizaron los frutos de café provenientes de fincas de la empresa cafetalera
Monreal SAC, ubicada en Villa Rica
6.2 Procesamiento de la muestra
6.2.1 Fermentación.
Una vez recepcionada la muestra se dispone a someterlas a un proceso de
fermentación a fin de generar un aumento en la biomasa, para ello se dispone en un
recipiente cerrado y estéril la muestra hasta una altura de 11 cm, tomando tiempos de
fermentación de 18, 24 y 30 horas, teniendo en cuenta parámetros como la temperatura,
humedad y sólidos solubles.
Una vez culminado el tiempo de fermentación, se procede a homogeneizar la
muestra y obtener el extracto para las pruebas de aislamiento.
6.2.2 Aislamiento de microorganismos
6.2.2.1 Aislamiento de bacterias ácido lácticas
Para el aislamiento de bacterias ácido lácticas tales como Lactobacillus plantarum,
se realiza en agar MRS. Posteriormente, se procede a realizar diluciones seriadas con
solución salina estéril (0.85%) hasta 10-6 en 6 tubos de ensayo previamente llenados con
9ml de SSE. Se añade 1 ml del fermento de café al primer tubo y se prosiguió con las
diluciones. Para sembrar se usó la técnica de diseminación, en donde usando la pipeta se
tomó 1 ml del tubo con la dilución 10-6 y se colocó en la placa de Petri, posteriormente, se
usó el asa Digralsky y mediante un movimiento circular se esparció la muestra. Luego,
mediante el uso de Parafilm se selló la placa y se la etiquetó. Finalmente, se incubó la
muestra de 24 a 48 horas a 37°C
Actividad Meses
S O N D E F M A M J J A
Revisión bibliográfica x x x x
Aislamiento x x
Purificación x x
Caracterización x x x
Pruebas bioquímicas x x x
Elaboración del escrito x x x x x x
VIII. Presupuesto
Bienes 0
Material de Laboratorio 500
Material de Limpieza 100
Material de procesamiento automático de datos 2200
Medicinas 10
Material químico 600
Impresos 50
Materias primas 0
Materiales de impresión 500
Material de escritorio 100
Equipos de comunicación 500
Equipos de laboratorio 10000
Mobiliario en general 500
Equipos de cómputo 1800
Equipos de oficina 100
Equipo electrodoméstico 700
Enseres 30
Servicios 100
Movilidad local 30
Viáticos y alojamiento 300
Pasaje 150
Encuadernación, anillados y empastados 100
Fotocopias y transparencias 20
Otros 0
TOTAL 18390
1. Avallone, S., Guyot, B., Brillouet, JM. et al. Microbiological and Biochemical Study of
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