INSTITUTO TECNOLÓGICO DE TUXTLA GUTIÉRREZ

INGENIERÍA BIOQUIMICA

Operaciones Unitarias I

BIOSEPARACIONES

B6A

Presenta:
MAZA RUIZ JUAN ANTONIO No. Control 20270443

Asesor:
Dr. JAVIER RAMÍREZ DÍAZ

Tuxtla Gutiérrez, Chiapas, México, a 2 de junio del 2023.

 BIOSEPARACIONES
El cultivo de células con el objeto de obtener productos útiles es una actividad que
ha realizado el hombre prácticamente durante toda su historia. Recientemente este
tipo de bioprocesos se enmarcan en lo que ahora se conoce como Biotecnología.
Ésta ha evolucionado a partir de los conocimientos generados en diversas
disciplinas, tanto del área de las ciencias básicas como de las ingenierías. Hoy, la
biotecnología puede ser definida como la aplicación de la ciencia y la tecnología en
organismos vivos, así como a sus partes, productos y modelos, para modificar
materiales vivos o no vivos para la producción de conocimiento, bienes y servicios.
Las operaciones que comprenden los bioprocesos reactivos a escala comercial (Fig.
1), se han dividido tradicionalmente en operaciones previas (procesos “upstream”)
y operaciones posteriores o bioseparaciones (procesos “downstream”).

Figura 1. Operaciones de un bioproceso. a) Operaciones previas y b) Operaciones

posteriores o bioseparaciones.

Los procesos de bioseparación involucran la recuperación, concentración,

purificación y acabado de los productos provenientes del biorreactor. Comprenden
todos los tratamientos que requiere el caldo de cultivo para la obtención del producto
en las condiciones de pureza, y actividades deseadas.
 OPERACIONES DE BIOSEPARACIÓN
Las operaciones de bioseparación se basan en las diferencias que existen entre las
propiedades fisicoquímicas de los componentes presentes en el caldo de cultivo. El
objetivo del diseño de un proceso de bioseparación es explotar esta diferencia en
las propiedades en la forma más económica. Generalmente existe una propiedad
específica que es la base primaria para la separación. Los métodos de
bioseparación usados con más frecuencia, así como la propiedad en la que se
basan, se muestran en la Tabla 1.
Las bioseparaciones también son muy empleadas en los bioprocesos extractivos,
donde el producto de interés se obtiene directamente de sus fuentes naturales como
la obtención de proteínas del plasma sanguíneo, enzimas de tejidos animales y
taninos de plantas. Otro campo de aplicación de las bioseparaciones es en los
bioprocesos enzimáticos para el procesamiento de los productos obtenidos, como
en la obtención de jarabes fructosados. La aplicación de las bioseparaciones es muy
amplia, pero los principios en que están basadas son utilizados de manera similar
en los diferentes bioprocesos.
Las bioseparaciones generalmente comprenden varias operaciones que se agrupan
de acuerdo con un esquema típico en operaciones de: recuperación (remoción de
sólidos y ruptura celular), concentración, purificación y acabado (RIPP de sus siglas
en inglés). Esta estrategia involucra el uso de operaciones de baja resolución en la
recuperación y concentración (filtración, extracción) y operaciones de alta
resolución para la purificación y el acabado (cromatografía, cristalización,
electroforesis).
Tabla 1. Operaciones de bioseparación y su propiedad básica.
 TIPOS DE BIOPROCESOS Y BIOPRODUCTOS
Actualmente se pueden distinguir de manera general tres generaciones de
bioprocesos, en relación con el tipo de bioseparaciones que éstos involucran (Tabla
2). La primera generación comprende el conjunto de bioprocesos desarrollados
mediante cultivos de organismos no recombinantes, cuyos productos se obtienen
en forma activa tanto si son intracelulares o si son secretados al medio de cultivo.
En esta generación se encuentran los bioprocesos de la biotecnología tradicional
como los de la producción de etanol, enzimas, ácido cítrico y antibióticos. Los
productos de estos bioprocesos se presentan en concentraciones altas al inicio de
la etapa de separación y no requieren de una extremada pureza para su venta. Los
descubrimientos asociados con la biología molecular y la ingeniería genética
logrados en las últimas décadas, han ampliado las capacidades biotecnológicas del
hombre. En esta etapa podemos situar una segunda generación de productos de la
biotecnología como la insulina humana, la hormona de crecimiento y el alfa
interferón, entre otros. Estos son producidos intracelularmente utilizando células
recombinantes de Escherichia coli. Se caracterizan por encontrarse en bajas
concentraciones dentro de la célula, son de elevado peso molecular, tienen
propiedades similares a los contaminantes y requieren un alto grado de pureza.
Además, generalmente al producirse en la célula no poseen actividad biológica por
tratarse de cadenas peptídicas sin la conformación o estructura apropiada; lo que
se traduce en la necesidad de aplicarles tratamientos fisicoquímicos adicionales
para lograr obtener el producto en su estado activo. Los desarrollos recientes en
investigaciones terapéuticas tales como el uso de DNA plasmídico (pDNA) en
terapia génica y vacunas han fomentado el desarrollo de bioprocesos novedosos
para la producción de pDNA a gran escala utilizando también E. coli como célula
hospedera. La tercera generación de la biotecnología, la podemos caracterizar por
bioprocesos mediante los cuales se obtienen productos extracelulares en células
recombinantes, la mayoría de las cuales son eucarióticas. En estos sistemas se ha
observado la capacidad no sólo de producir exógenamente el producto deseado,
sino que éste se obtiene en forma activa

.
 Tabla 2. Características de los Bioprocesos y los Bioproductos.

COMPORTAMIENTO DEL BIOPROCESO Y CALIDAD DEL PRODUCTO

Las especificaciones son los estándares técnicos, regulatorios y legales que el
producto debe cubrir de acuerdo con su uso. Los aspectos de rendimiento, pureza
y actividad del producto son básicos para determinar la viabilidad de un bioproceso,
debido a que, para lograr el grado de purificación requerido en los productos
biotecnológicos, generalmente el bioproceso debe realizarse en varios pasos.
Rendimiento
Las operaciones de bioseparación para un proceso deben seleccionarse
cuidadosamente con el fin de que el costo sea mínimo. Es decir, si el rendimiento
por paso es bajo y se requieren varios pasos, puede tenerse un bioproceso no viable
económicamente debido a su aún más bajo rendimiento global. El rendimiento está
dado por:
𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑜𝑏𝑡𝑒𝑛𝑖𝑑𝑜
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 =
𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑎𝑙𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜
Para un bioproceso de n pasos, con un rendimiento por paso RP %, se puede
establecer que el rendimiento global RG % está dado por:
𝑅𝐺 % = (𝑅𝑃)𝑛 × 100
Pureza
La pureza necesaria y actividad generalmente están definidos por agencias
reguladoras como la FDA de acuerdo con el uso que se le va a dar al producto. En
el caso de productos para uso parental en humanos la pureza requerida es mayor
al 99.5 % generalmente. La pureza está dada por:
 𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜
𝑃𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎 =
𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙
Actividad específica
Una medida de la pureza de un producto es la actividad específica que está dada
por:
𝑢𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑏𝑖𝑜𝑙ó𝑔𝑖𝑐𝑎
𝐴𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑐í𝑓𝑖𝑐𝑎 =
𝑚𝑎𝑠𝑎

IMPORTANCIA ECONÓMICA DE LAS BIOSEPARACIONES

La obtención de productos a partir de materiales biológicos generalmente requiere
operaciones de bioseparación apropiadas que son costosas y pueden ser el factor
limitante en el desarrollo del bioproceso. Esto es debido principalmente a la baja
concentración de producto en los caldos que entran al proceso de bioseparación y
a la alta pureza requerida por la mayoría de los productos finales. Frecuentemente,
la parte correspondiente a las bioseparaciones puede representar hasta un 60 %
del costo total de producción sin considerar las materias primas. Debido a lo
anterior, existe una relación inversa entre el precio de venta de un producto
biotecnológico y la concentración de éste en el caldo del biorreactor (Figura 2). Es
obvio que no sólo la concentración del producto en el fermentador determina el
precio, también deben ser consideradas la escala, la productividad y el rendimiento
global de la recuperación. Puede decirse entonces que el éxito comercial de un
proceso biotecnológico depende en gran medida de la adecuada selección del
esquema de bioseparación, particularmente conforme el margen de utilidad (precio-
costo) disminuye.

Figura 2. Relación entre la concentración inicial del producto en el caldo y el precio final
de venta del producto.
 DESARROLLO DEL BIOPROCESO
El diseño del bioproceso comprende todo el trabajo conceptual necesario que debe
realizarse antes de la construcción o modificación de una planta de proceso. Este
trabajo debe ser completo y cuidadoso, de tal manera que permita desarrollar y
evaluar varios esquemas de operación con el propósito de aproximarse al diseño
óptimo, bajo las restricciones presupuestales establecidas. El diseño del bioproceso
se realiza utilizando metodologías ingenieriles básicas como la síntesis y el análisis
del proceso. La síntesis del proceso es la selección del esquema del proceso o
diagrama de flujo que permita producir el producto de interés a un costo y calidad
aceptables. El análisis del proceso consiste en evaluar y comparar diferentes
esquemas obtenidos mediante la síntesis.
Tabla 3. Conceptos para la integración de un paquete biotecnológico.

A continuación se muestra un ejemplo de un proceso de bioseparación en la

producción de insulina (Figura 3):
Figura 3. Diagrama de flujo de un proceso para la producción de insulina
recombinante humana (biosintética).
 METODOLOGÍA
1. Lapizco-Encinas, B. H. (2008). Aplicaciones de microfluídica en
bioseparaciones. Revista Mexicana de Ingeniería Química, 7(3), 205-214.
2. Tejeda Mansir, A., Montesinos Cisneros, R. M. & Guzmán Zamudio, R.
(2011). Bioseparaciones (2ª ed.). PEARSON EDUCATION.